检索结果-内蒙古大学图书馆

中国危重病急救医学 2006年第8期18卷 470-473,F0006页

作者：孙瑜黄静霞王轶群钟纪根卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学附属长海医院麻醉科上海200433

目的探讨不同剂量猪肺表面活性物质（PPS）混悬液对油酸致大鼠急性肺损伤（ALI）的治疗作用及量-效关系。方法56只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、油酸模型组和5个不同剂量PPS治疗组。静脉注入油酸诱发大鼠ALI，30min后治疗组和模... 详细信息

目的探讨不同剂量猪肺表面活性物质（PPS）混悬液对油酸致大鼠急性肺损伤（ALI）的治疗作用及量-效关系。方法56只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、油酸模型组和5个不同剂量PPS治疗组。静脉注入油酸诱发大鼠ALI，30min后治疗组和模型组经气管分别滴入50、80、100、150和200mg／kg PPS和等量生理盐水。实验过程中计数大鼠呼吸频率，测定动脉血气。4h后处死，计算大鼠存活率，观察肺组织形态学改变，并检测肺系数、支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白含量和血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度。结果与模型组比较，PPS50mg／kg组有减慢呼吸频率、短时间内提高动脉血氧分压（PaO2）的作用，但是并不能明显改善肺损伤；PPS80～200mg／kg组除改善呼吸功能外，大鼠肺毛细血管通透性、肺出血、肺水肿、血浆TNF-α浓度以及大鼠死亡率也均明显降低（P均〈0．05）。显示高剂量PPS（150～200mg／kg）在减轻炎症反应和肺损伤方面具有更好的效果。结论单独应用PPS能明显改善早期油酸型ALI大鼠的呼吸功能，≥80mg／kg的PPS有明显减轻肺损伤的作用，而各剂量之间无量-效关系。

关键词：油酸肺损伤急性肺表面活性物质量-效关系

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Rho GTP酶参与肿瘤调控的下游效应蛋白

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生命的化学 2006年第3期26卷 252-254页

作者：陈玉霞刁飞第二军医大学病理生理学教研室上海200433

小G蛋白Rho家族是一类能结合GTP的蛋白质,在哺乳动物细胞的信号转导系统中发挥着“分子开关”样的重要作用。Rho蛋白通过其下游效应蛋白介导发挥多种生物学效应,包括调控细胞骨架重组、黏附和运动等。近年来,Rho蛋白在肿瘤细胞的增殖、... 详细信息

小G蛋白Rho家族是一类能结合GTP的蛋白质,在哺乳动物细胞的信号转导系统中发挥着“分子开关”样的重要作用。Rho蛋白通过其下游效应蛋白介导发挥多种生物学效应,包括调控细胞骨架重组、黏附和运动等。近年来,Rho蛋白在肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡和转移的调控中的作用渐受重视。该文就介导RhoGTP酶调控肿瘤发生发展的几个下游蛋白作一介绍。

关键词： Rho GTP酶肿瘤效应蛋白

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糖皮质激素抑制人前列腺癌PC-3细胞系增殖的可能机制

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第二军医大学学报 2006年第8期27卷 885-887页

作者：王燕陈玉霞刁飞卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的:观察地塞米松对前列腺癌PC-3细胞中转录因子NF-κB及其下游靶基因cyclinD1的调节作用,探讨其抑制PC-3细胞增殖的可能机制。方法:MTT法检测地塞米松对PC-3细胞增殖的影响;转染和报告基因的方法比较多种肿瘤细胞中NF-κB的基础转录... 详细信息

目的:观察地塞米松对前列腺癌PC-3细胞中转录因子NF-κB及其下游靶基因cyclinD1的调节作用,探讨其抑制PC-3细胞增殖的可能机制。方法:MTT法检测地塞米松对PC-3细胞增殖的影响;转染和报告基因的方法比较多种肿瘤细胞中NF-κB的基础转录活性并检测地塞米松对PC-3细胞NF-κB转录活性的调节;Western印迹法检测地塞米松对PC-3细胞cyclinD1蛋白表达的影响。结果:地塞米松抑制PC-3细胞的增殖;PC-3细胞中NF-κB处于组成型激活状态,地塞米松抑制PC-3细胞中转录因子NF-κB的转录活性;地塞米松下调PC-3细胞中cyclinD1蛋白的表达。结论:地塞米松抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,这可能与其抑制转录因子NF-κB的转录活性及其下游的靶基因cyclinD1的蛋白表达有关。

关键词：地塞米松前列腺肿瘤细胞增殖

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利用载体介导的RNA干扰技术抑制人骨肉瘤细胞HOS-8603内维生素D_3受体的表达及功能

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第二军医大学学报 2006年第10期27卷 1076-1080页

作者：张晔朱晓燕刘宇健卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433 基础医学部生理学教研室

目的:构建由载体介导的抑制人维生素D3受体(VDR)表达的RNA干扰载体,并在人骨肉瘤细胞中初步研究其对VDR表达及功能的影响。方法:通过在线筛选设计了两段针对人VDR的RNAi序列,并与载体pSilencer-2.1-U6连接,获得了表达载体pSilencer-2.1-... 详细信息

目的:构建由载体介导的抑制人维生素D3受体(VDR)表达的RNA干扰载体,并在人骨肉瘤细胞中初步研究其对VDR表达及功能的影响。方法:通过在线筛选设计了两段针对人VDR的RNAi序列,并与载体pSilencer-2.1-U6连接,获得了表达载体pSilencer-2.1-U6-VDR1与pSilencer-2.1-U6-VDR2。利用脂质体转染法分别转入人骨肉瘤细胞系HOS-8603细胞中,通过Western印迹法检测其对内源性VDR蛋白表达、对1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]激活PKC作用的影响,利用细胞计数和MTT的方法检测其对1,25(OH)2D3抑制HOS-8603细胞增殖作用的影响。结果:在分别转染pSilencer-2.1-U6-VDR1/2的HOS-8603细胞中,与对照细胞比较,内源性VDR蛋白的表达、1,25(OH)2D3对细胞的增殖抑制作用以及1,25(OH)2D3快速诱导PKC磷酸化的作用均有显著降低。结论:构建的表达载体pSilencer 2.1-U6-VDR1与pSilencer 2.1-U6-VDR2均能在细胞水平显著抑制内源性VDR基因的表达,并能有效阻断一些由VDR介导的1,25(OH)2D3生物学作用,为进一步研究VDR与维生素D3的功能提供了一个有用工具。

关键词： RNA干扰骨肉瘤受体,维生素D3

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海水吸入致大鼠急性肺损伤模型的建立

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第二军医大学学报 2006年第6期27卷 676-678页

作者：黄静霞孙瑜傅辰春邓小明卢建第二军医大学长海医院麻醉科上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的：建立海水吸入肺损伤动物模型.方法：24只大鼠随机分为对照组9只和模型组15只.模型组大鼠屏气9～10 s后吸入海水,4 ml/kg,分2次进行;对照组大鼠不吸入海水.于海水吸入前、海水吸入后10、30、60、120、240 min观察动脉血气和呼吸频... 详细信息

目的：建立海水吸入肺损伤动物模型.方法：24只大鼠随机分为对照组9只和模型组15只.模型组大鼠屏气9～10 s后吸入海水,4 ml/kg,分2次进行;对照组大鼠不吸入海水.于海水吸入前、海水吸入后10、30、60、120、240 min观察动脉血气和呼吸频率的变化,并记录动物的生存时间.4 h后处死动物,观察肺系数、支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白（TP）含量和白细胞计数以及肺组织形态学的变化.结果：与对照组相比,模型组大鼠吸入海水后呼吸频率显著增加,动脉血氧分压（PaO2）显著降低（P＜0.05）,之后虽逐渐回升,但一直维持在较低的水平;肺系数和TP含量均显著升高（P＜0.05）;白细胞计数显著增加（P＜0.05）;肺组织形态学显示明显的肺水肿、肺泡萎陷和炎细胞浸润情况.结论：成功建立海水吸入肺损伤的动物模型.

关键词：模型,动物海水肺损伤

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猪肺表面活性物质治疗肺灌洗诱发的兔急性呼吸窘迫综合征的实验研究

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中国急救医学 2006年第4期26卷 282-284页

作者：钟纪根沈甫明卢建解放军第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 解放军第二军医大学基础部药理学教研室上海200433

目的本实验观察了猪肺表面活性物质（PPS）混悬液对肺灌洗致免急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的治疗作用。方法将31只兔分为生理盐水对照组和高、中、低三个不同剂量PPS给药组，用生理盐水在体肺灌洗诱发兔ARDS后，经气管分别滴入生理盐水... 详细信息

目的本实验观察了猪肺表面活性物质（PPS）混悬液对肺灌洗致免急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的治疗作用。方法将31只兔分为生理盐水对照组和高、中、低三个不同剂量PPS给药组，用生理盐水在体肺灌洗诱发兔ARDS后，经气管分别滴入生理盐水或80mg／kg、120mg／kg、160mg／kg的PPS。于兔灌洗前、灌洗后和给药后不同时间抽取动脉血进行血气分析。实验过程中观察呼吸频率．动物的生存时间。共观测8h。实验结束后，处死动物取肺甲醛固定后行病理学检查。结果肺灌洗后兔的呼吸频率、血气指标和肺病理学的改变均符合ARDS表现，肺灌洗后生理盐水治疗组兔在1h内死亡率为11／12。而PPS气道给药三组除了低剂量组有2只兔的生存时间超过6h．但小于8h外，中高剂量组所有兔的存活时间均超过8h。三个PPS剂量组给药后15-30min兔的呼吸频率均明显减慢，动脉血PaO2显著提高．PaCO2和血pH分别在1h和6h降至正常。肺泡萎陷、肺出血和炎细胞浸润状况也明显改善。中、高剂量组在提高PaO2．延长动物生存率和改善肺病理变化方面比低剂量组效果更好。结论PPS对于兔肺灌洗型ARDS具有明显的治疗作用。

关键词：在体肺灌洗呼吸窘迫综合征肺表面活性物质兔

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糖皮质激素受体β的稳定过度表达对激素调节人骨肉瘤细胞增殖分化作用的影响

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第二军医大学学报 2006年第2期27卷 186-188页

作者：周筠朱晓燕陈玉霞卢建刘宇健同济大学附属同济医院内分泌科上海200065 第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

目的：研究糖皮质激素受体β（GRβ）的稳定过度表达对激素调节人骨肉瘤细胞增殖分化作用的影响，探讨糖皮质激素受体口的生物学意义。方法：将GRβ在人骨肉瘤细胞中稳定过度表达，用不同浓度（10^-10～10^-6mol／L）的地塞米松处理稳... 详细信息

目的：研究糖皮质激素受体β（GRβ）的稳定过度表达对激素调节人骨肉瘤细胞增殖分化作用的影响，探讨糖皮质激素受体口的生物学意义。方法：将GRβ在人骨肉瘤细胞中稳定过度表达，用不同浓度（10^-10～10^-6mol／L）的地塞米松处理稳定过度表达GRβ的细胞，用活细胞计数法和MTT法检测细胞的增殖，用标准酚比色法检测碱性磷酸酶（AKP）的活性。结杲与结论：在稳定过度表达GRβ的人骨肉瘤细胞中，糖皮质激素抑制细胞增殖和诱导细胞分化的作用均减弱；GRβ可能是GRα的内源性抑制因子。

关键词：受体糖皮质激素骨肉瘤细胞增殖细胞分化

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应用Tet-On基因表达系统实现Mac-1-FP在CHO细胞中的可调控性表达

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第二军医大学学报 2006年第10期27卷 1092-1097页

作者：杨生生杨志峰严鸣蔡在龙焦炳华毛积芳第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的:应用Tet-On基因表达系统构建可调控性真核表达质粒,实现Mac-1-FP在CHO细胞中的可调控性表达。方法:采用DNA重组技术构建真核表达质粒pTRE-Tight-CFP-CD11b和pTRE-Tight-YFP-CD18(CD11b和CD18是Mac-1的两个亚基),通过脂质体介导共转... 详细信息

目的:应用Tet-On基因表达系统构建可调控性真核表达质粒,实现Mac-1-FP在CHO细胞中的可调控性表达。方法:采用DNA重组技术构建真核表达质粒pTRE-Tight-CFP-CD11b和pTRE-Tight-YFP-CD18(CD11b和CD18是Mac-1的两个亚基),通过脂质体介导共转染CHO细胞,用荧光显微镜观察转染后阳性细胞;应用RT-PCR和荧光强度分析观察不同浓度(0、0.01、0.1、0.5、1、2μg/ml)强力霉素(Dox)对细胞内CD11b和CD18表达水平的影响;检测PMA(1μg/ml)刺激前后CHO-Mac-1-FP细胞与其配基ICAM-1黏附活性的变化。结果:酶切鉴定和测序证实,已成功构建真核表达质粒pTRE-Tight-CFP-CD11b和pTRE-Tight-YFP-CD18,在荧光显微镜下观察到转染成功的CHO细胞发出青色荧光和黄色荧光。通过荧光显微镜观察到随着培养液中Dox浓度的增加,CHO细胞内的荧光强度相应增强,同时CD11b和CD18在mRNA水平的表达也随Dox浓度的增加而增加。PMA刺激后,CHO-Mac-1-FP细胞与其配基ICAM-1黏附率增高(2 h和4 h时最高,此后逐渐下降)。结论:本研究成功实现了Mac-1-FP在CHO细胞中的可调控性表达并具有野生型Mac-1的黏附活性,为进一步开展单分子光谱(SMS)和荧光共振能量转移(FRET)技术研究活细胞内Mac-1分子的2个亚基的二聚化、群集、构象及与配基亲和力变化创造条件。

关键词： Mac-1 青色荧光蛋白黄色荧光蛋白融合蛋白可调控表达

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噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库的构建

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安徽医科大学学报 2006年第4期41卷 361-364页

作者：温宗梅潘卫张玉侠周波潘欣陈秋莉周霞贾建安蒋少华邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,研究IgA结合分子结构与功能的关系。方法基因合成IgA亲和体ZA1、ZA2片段。片段两端引入Kpn I酶切位点,3′端引入随机连接肽序列,Kpn I酶切,随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S的Kpn I克... 详细信息

目的构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,研究IgA结合分子结构与功能的关系。方法基因合成IgA亲和体ZA1、ZA2片段。片段两端引入Kpn I酶切位点,3′端引入随机连接肽序列,Kpn I酶切,随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S的Kpn I克隆位点上,转化大肠杆菌TGI,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示随机组合文库。结果基因合成IgA亲和体;构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,容量为3·4×107,滴度为1·6×1012TU/L;文库中含79%以上的阳性克隆;序列分析显示组合文库由ZA1、ZA2随机组合而成,连接方式符合随机连接的特点,各亲和体之间连接肽序列也呈随机分布。结论合成IgA亲和体,构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,该文库库容量、多样性和随机性可满足体外分子进化研究的要求。

关键词：细菌噬菌体/遗传学

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叉头框(Fox)转录因子家族的结构与功能

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生命科学 2006年第5期18卷 491-496页

作者：曹冬梅卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

叉头框(forkheadbox,Fox)蛋白家族是一类DNA结合区具有翼状螺旋结构的转录因子,目前已有17个亚族。Fox蛋白不仅能作为典型的转录因子通过招募共激活因子等调节基因转录,有些还能直接同凝聚染色质结合参与其重构,协同其他转录因子参与转... 详细信息

叉头框(forkheadbox,Fox)蛋白家族是一类DNA结合区具有翼状螺旋结构的转录因子,目前已有17个亚族。Fox蛋白不仅能作为典型的转录因子通过招募共激活因子等调节基因转录,有些还能直接同凝聚染色质结合参与其重构,协同其他转录因子参与转录调节。PI3K-Akt/PKB、TGFβ-Smad和MAPKinase等多条信号通路都可以影响Fox蛋白的磷酸化水平,从而调节其活性。Fox蛋白在胚胎发育、细胞周期调控、糖类和脂类代谢、生物老化和免疫调节等多种生物学过程中发挥作用。

关键词：转录因子叉头框分子结构转录激活功能

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