检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2004年第1期20卷 43-48页

作者：沈毅珺潘卫徐容潘欣王罗春王征曹峰谭靖伟吴劲松吴芳刘彦君第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 上海复旦张江生物医药股份有限公司上海201203

构建重组人淋巴毒素 (rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究。应用含随机核苷酸序列的引物 ,通过OverlapPCR的方法分别对rhLT的 4 6、10 6和 130位氨基酸进行定点随机突变 ,获得各单点随机突变体库。通过基因... 详细信息

构建重组人淋巴毒素 (rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究。应用含随机核苷酸序列的引物 ,通过OverlapPCR的方法分别对rhLT的 4 6、10 6和 130位氨基酸进行定点随机突变 ,获得各单点随机突变体库。通过基因操作将这三个单点随机突变体库拼接并克隆于pMD_18T载体建立三点组合突变体文库 ,DNA测序鉴定突变位点的随机性和多样性 ,原核表达该变异体库 ,体外测定生物学活性。成功获得rhLT三点随机点突变组合文库 ,其转化克隆数达到 1 5× 10 5,是多样性理论值的 4 5倍。 5 0个样品的序列分析显示各个位点的核苷酸和氨基酸序列的突变都呈随机性分布。对原核表达的 30个样品进行生物学活性测定 ,结果 70 % (2 1个 )的样品无活性、2 3 3% (7个 )的样品活性低于rhLT、6 7% (2个 )的样品活性高于rhLT。成功构建了rhLT随机点突变组合文库 ,该库不仅在一级结构上具有良好的随机性和多样性 ,而且具有生物学活性的多样性 ,为应用噬菌体展示等高通量筛选策略对淋巴毒素进行体外分子进化和结构与功能的深入研究打下了基础。

关键词：淋巴毒素随机突变分子进化点突变组合文库

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糖皮质激素抵抗的可能分子机制

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国外医学（生理病理科学与临床分册） 2004年第3期24卷 245-247页

作者：聂蔚陈玉霞第二军医大学学员旅1队上海200433 第二军医大学病理生理学教研室上海200433

糖皮质激素是治疗过敏性疾病的常用药物 ,但许多疾病都存在糖皮质激素抵抗的现象。糖皮质激素抵抗的机制可能发生在受体前或受体水平 ,牵涉到免疫反应异常激活、激素代谢异常、受体基因突变或磷酸化异常、受体的变异体异常增多、受体与... 详细信息

糖皮质激素是治疗过敏性疾病的常用药物 ,但许多疾病都存在糖皮质激素抵抗的现象。糖皮质激素抵抗的机制可能发生在受体前或受体水平 ,牵涉到免疫反应异常激活、激素代谢异常、受体基因突变或磷酸化异常、受体的变异体异常增多、受体与其他蛋白如AP 1和STAT5等发生相互作用等环节。

关键词：糖皮质激素抵抗分子机制

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部分省市流行病学专家队伍专业水平的调查分析

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第二军医大学学报 2004年第3期25卷 261-264页

作者：刘世建张宏伟顾春英杨一风谭晓洁常文军张玉侠叶冬青邓松华曹广文第二军医大学卫生勤务学系流行病学教研室上海200433 卫生勤务学教研室安徽医科大学病理生理学教研室安徽医科大学流行病学教研室合肥230032

目的 :调查现场流行病学专家的专业水平情况 ,为建立全国性公共卫生突发事件应急体系提供科学依据。方法 :应用调查表收集部分省市流行病学专业人员的有关资料 ,包括科研学术情况、日常工作、参加现场流行病学培训和实践情况、对当前... 详细信息

目的 :调查现场流行病学专家的专业水平情况 ,为建立全国性公共卫生突发事件应急体系提供科学依据。方法 :应用调查表收集部分省市流行病学专业人员的有关资料 ,包括科研学术情况、日常工作、参加现场流行病学培训和实践情况、对当前公共卫生体系的评价 4部分内容。结果 :共随机调查了中国现场流行病学培训项目 (CFETP)成员 1 3人和部分省市各级疾病预防和控制中心 (CDC)人员 (省级 1 6人 ,市级 4 4人 ,区级 33人 ) ,共计 1 0 6人。CFETP成员平均年龄 35 .9岁 ,省级、市级和区级 CDC人员的平均年龄分别为 4 5 .8岁、4 4岁和 5 0岁。男女比例省级 CDC为 1∶ 1 .1 4 ,市级 CDC为 1∶ 1 .2 ,区级 CDC为 1∶ 1 .0 6。CFETP成员、省级、市级和区级 CDC的高级职称比例依次为 6 1 .5 %、5 0 .0 %、2 7.9%和 1 5 .2 %。CFETP成员、省级、市级和区级 CDC的硕士学历比例分别为 2 3.1 %、1 8.8%、9.1 %和 0 ,本科学历比例依次为 76 .9%、6 2 .5 %、5 4 .5 %和2 1 .9% ,而大专以下学历所占的比例依次升高。 CFETP成员、省级、市级和区级 CDC参加现场流行病学培训的人员比例分别为 1 0 0 %、87.5 %、81 .8%、6 6 .7%。在主持设计和参加现场流行病学调查方面 ,CFETP显著高于市级和区级 CDC人员(P<0 .0 1 )。结论

关键词：流行病学专家队伍专业水平调查分析人力资源现场流行病学调查

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72h睡眠剥夺大鼠回肠溶菌酶与分泌成分的变化

引用

中国行为医学科学 2004年第5期13卷 491-493页

作者：陶凯忠唐庆娟刘昀康志敏蒋春雷第二军医大学海军医学系航海医学教研室上海200433 青岛大学医学院病理生理学教研室

目的观察睡眠剥夺大鼠回肠粘膜超微结构以及溶菌酶和分泌成分 (SC)的变化 ,探讨睡眠剥夺引起细菌移位的机制。方法 2 4只大鼠分为睡眠剥夺组、实验对照组和正常对照组 ,睡眠给予剥夺组72h睡眠剥夺处理。透射电镜观察回肠粘膜的超微结构 ... 详细信息

目的观察睡眠剥夺大鼠回肠粘膜超微结构以及溶菌酶和分泌成分 (SC)的变化 ,探讨睡眠剥夺引起细菌移位的机制。方法 2 4只大鼠分为睡眠剥夺组、实验对照组和正常对照组 ,睡眠给予剥夺组72h睡眠剥夺处理。透射电镜观察回肠粘膜的超微结构 ,免疫组织化学方法检测溶菌酶、SC阳性肠隐窝的数目。结果睡眠剥夺组回肠粘膜固有层的组织、毛细血管和毛细淋巴管内可见大量细菌。正常对照组、实验对照组和睡眠剥夺组的溶菌酶阳性肠隐窝数分别为 86.8± 16.3、78.8± 13 .0和 5 6.6± 9.4,SC阳性肠隐窝数分别为 89.3± 14 .9、71.7± 10 .7和 5 8.4± 14 .6,睡眠剥夺组均少于正常对照组和实验对照组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。SC特异性地分布于潘氏细胞 ,与文献报道不一致。结论sIgA与溶菌酶共存于潘氏细胞的分泌颗粒 ,并协同发挥免疫屏障功能。睡眠剥夺引起的细菌移位可能与潘氏细胞的变化有关。

关键词：睡眠剥夺潘氏细胞溶菌酶分泌成分细菌移位

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72h睡眠剥夺对大鼠循环免疫细胞的影响

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中国行为医学科学 2004年第6期13卷 619-621页

作者：陶凯忠唐庆娟徐伟刚郭明珠蒋春雷第二军医大学海军医学系航海医学教研室上海200433 青岛大学医学院病理生理学教研室

目的研究睡眠剥夺对循环免疫细胞的影响。方法 24只大鼠分为睡眠剥夺组、实验对照组和正常对照组,给予睡眠剥夺组 72h睡眠剥夺处理。检测血细胞的数量和比例以及循环T细胞亚群和脾淋巴细胞的细胞周期。结果与正常对照组比较,实验对照... 详细信息

目的研究睡眠剥夺对循环免疫细胞的影响。方法 24只大鼠分为睡眠剥夺组、实验对照组和正常对照组,给予睡眠剥夺组 72h睡眠剥夺处理。检测血细胞的数量和比例以及循环T细胞亚群和脾淋巴细胞的细胞周期。结果与正常对照组比较,实验对照组和睡眠剥夺组的白细胞 (12. 74×1012 /Lvs. 7. 94×1012 /Lvs. 7. 08×1012 /L)、淋巴细胞(9. 51×1012 /Lvs. 5. 61×1012 /Lvs. 5. 18×1012 /L)和中性粒细胞(2. 59×1012 /Lvs. 1. 84×1012 /Lvs. 1. 39×1012 /L)显著减少(P<0. 05或P<0. 01);睡眠剥夺组的单核细胞比例(3. 85% vs. 6. 54% )显著增高(P<0. 05);睡眠剥夺组与实验对照组之间无显著差异。各组T细胞亚群和脾淋巴细胞的细胞周期均无显著差异。结论 72h睡眠剥夺对循环免疫细胞、T细胞亚群以及脾淋巴细胞的增殖功能无显著影响。

关键词：睡眠剥夺免疫细胞 T细胞亚群脾淋巴细胞大鼠实验对照对照组结论比例目的

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新型噬菌体展示载体pCANTAB5S的构建

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安徽医科大学学报 2004年第2期39卷 83-86页

作者：徐容潘卫沈毅陈秋莉潘欣冯春芝戚中田刘彦君邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433 复旦张江生物医药股份公司上海200000

目的　进一步改造噬菌体展示载体 ,使之能更有效地展示各种外源随机多肽文库。方法　以 pCANTAB5X IFN α2b重组质粒为模板 ,在上游引物中引入XbaⅠ、SacⅠ酶切位点 ,在下游引物中引入SacⅠ、StuⅠ、SalⅠ酶切位点 ,将用该引物扩增的IFN... 详细信息

目的　进一步改造噬菌体展示载体 ,使之能更有效地展示各种外源随机多肽文库。方法　以 pCANTAB5X IFN α2b重组质粒为模板 ,在上游引物中引入XbaⅠ、SacⅠ酶切位点 ,在下游引物中引入SacⅠ、StuⅠ、SalⅠ酶切位点 ,将用该引物扩增的IFN α2b衔接片段PCR产物克隆到pMD18 T中 ,再将该片段用XbaⅠ和SalⅠ酶切并将之插入pCANTAB5L的XbaⅠ和SalⅠ位点中 ,经SacⅠ酶切 ,线性载体片段自连 ,构成新型噬菌体展示载体 pCANTAB5S。结果　限制酶切位点SacⅠ被引入到噬菌体展示载体 ,并校正了pCANTAB5L载体StuⅠ、SalⅠ等位点的读框。结论　成功构建了含读框正确的SacⅠ等多个克隆位点的新型噬菌体展示载体pCANTAB5S ,可用于各种外源随机多肽文库的有效展示。

关键词：噬菌体 pCANTAB5S 遗传学质粒遗传载体肽库

来源：评论

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腺病毒介导mIFN-β基因转染的小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性

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安徽医科大学学报 2004年第2期39卷 97-100页

作者：吴云徐容曹广文潘卫陈秋莉沈毅蔡春晓邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433 复旦张江生物医药股份公司上海200000

目的　研究腺病毒 (Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性。方法　用Ad为载体将mIFN β基因导入B16细胞 ,观察mIFN β基因转染的B16细胞的体外增殖能力及免疫原性的改变。结果　当MOI为 5 0～ 10 0 ,即可获得... 详细信息

目的　研究腺病毒 (Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体外生物学特性。方法　用Ad为载体将mIFN β基因导入B16细胞 ,观察mIFN β基因转染的B16细胞的体外增殖能力及免疫原性的改变。结果　当MOI为 5 0～ 10 0 ,即可获得较高的转染效率 ,达 90 %± 1% ,转染细胞能表达分泌mIFN β并具有生物学活性 ;AdmIFN β感染对B16细胞的增殖能力无影响 ,但能显著提高细胞表面MHC Ⅰ类抗原的表达。结论　Ad载体具有较高的转移效率 ,并能使其携带的mIFN β基因有效表达 ;AdmIFN β转染的B16细胞的免疫原性显著增强。提示利用Ad载体携带有效的目的基因来治疗肿瘤甚至开发瘤苗是可行的。

关键词：腺病毒 mIFN-β基因转染小鼠黑色素瘤体外生物学特性瘤细胞

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全睡眠剥夺对大鼠氧化应激水平的影响

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中国公共卫生 2004年第6期20卷 748-748页

作者：唐庆娟陶凯忠崔瑞耀韩延涛蒋春雷青岛大学医学院病理生理学教研室山东青岛266021 第二军医大学海军医学系航海医学教研室

睡眠是人和高等动物的基本生理需要,许多情况下如医疗、运输等常导致睡眠剥夺(sleep deprivation).睡眠剥夺可引起生物节律紊乱和内稳态平衡失调,使机体难以保持甚至丧失正常的活动能力.研究发现睡眠剥夺的病理变化以能量消耗增多导致... 详细信息

睡眠是人和高等动物的基本生理需要,许多情况下如医疗、运输等常导致睡眠剥夺(sleep deprivation).睡眠剥夺可引起生物节律紊乱和内稳态平衡失调,使机体难以保持甚至丧失正常的活动能力.研究发现睡眠剥夺的病理变化以能量消耗增多导致的营养不良较为突出[1].能量产生过程中伴有活性氧的形成,若超过机体的抗氧化能力,可引起氧化应激.

关键词：全睡眠剥夺大鼠氧化应激生物节律

来源：评论

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大鼠尾端延髓腹外侧区非NMDA受体参与压力反射传导(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第8期24卷 57-63+111-112页

作者：王伟忠袁文俊潘燕霞白洁廖茂瑶唐朝枢北京 100083 中国北京大学医学部生理与病理生理学系上海 200433 第二军医大学生理学教研室

目的:探讨大鼠尾端延髓腹外侧区(CVLM)非N-甲基-D-天门冬氨酸(non-NMDA)受体在介导压力反射中的作用。方法:在戊巴比妥钠和氨基甲酸乙酯麻醉、制动和人工呼吸的SD大鼠,观察CVLM内局部给予non-NMDA受体选择性阻断剂CNQX对刺激主动脉神经... 详细信息

目的:探讨大鼠尾端延髓腹外侧区(CVLM)非N-甲基-D-天门冬氨酸(non-NMDA)受体在介导压力反射中的作用。方法:在戊巴比妥钠和氨基甲酸乙酯麻醉、制动和人工呼吸的SD大鼠,观察CVLM内局部给予non-NMDA受体选择性阻断剂CNQX对刺激主动脉神经导致的减压反应和头端延髓腹外侧区(RVLM)神经元的压力敏感性的作用。结果:双侧CVLM微量注射CNQX(每侧200 pmol/100 nL)后明显(P<0.01)地增高基础血压(BP)和心率,而且显著(P<0.01)地减弱刺激主动脉神经导致的降压反应。单侧CVLM内给予CNQX(200 pmol/100 nL)明显(P<0.01)增高同侧RVLM压力敏感性神经元的基础放电频率,但显著(P<0.01)减弱刺激主动脉神经和升高血压导致的神经元活动的抑制效应和部分抑制神经元的心性节律。结论:大鼠尾端延髓腹外侧区non-NMDA受体在维持紧张性兴奋的心血管活动和传递压力感受器信息中具有重要的意义。

关键词：谷氨酸受体压力反射血压延髓

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转化生长因子β1信号通路在糖皮质激素抑制人卵巢癌细胞HO-8910增殖中的作用

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中国病理生理杂志 2003年第11期19卷 1542-1543页

作者：李宗斌夏冰卢建第二军医大学病理生理学教研室上海200433

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