检索结果-内蒙古大学图书馆

中国行为医学科学 2003年第5期12卷 500-500,519页

作者：唐庆娟陶凯忠胡淼淼徐胜徐建平崔瑞耀蒋春雷第二军医大学海军医学系航海医学教研室上海200433 青岛大学医学院病理生理学教研室山东青岛266021

目的　观察 72h睡眠剥夺大鼠的氧化应激状态。方法　参照Everson等的方法 ,将SD大鼠予以 72h剥夺睡眠处理后 ,断头取血 ,比色法测定血浆丙二醛 (MDA)和还原型谷胱甘肽 (GSH)的含量以及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、谷胱甘肽还原酶 (GSH... 详细信息

目的　观察 72h睡眠剥夺大鼠的氧化应激状态。方法　参照Everson等的方法 ,将SD大鼠予以 72h剥夺睡眠处理后 ,断头取血 ,比色法测定血浆丙二醛 (MDA)和还原型谷胱甘肽 (GSH)的含量以及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、谷胱甘肽还原酶 (GSH R)和超氧化物岐化酶 (SOD)的活性。结果　与对照组相比 ,睡眠剥夺大鼠血浆MDA的含量增高 ,GSH含量降低 ,GSH Px和GSH R活性降低 ,SOD活性有降低趋势。结论　 72h睡眠剥夺大鼠处于氧化应激状态 ,氧化应激可能是睡眠剥夺引起病理变化的机制之一。

关键词：睡眠剥夺氧化应激大鼠

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腺病毒介导的LacZ基因在B16小鼠黑色素瘤细胞中的表达

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安徽医科大学学报 2003年第2期38卷 105-107页

作者：朱洁平吴云李慧曹广文徐容郑红潘卫邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 上海复旦大学医学院上海200032 第二军医大学微生物教研室上海200433

目的　观察腺病毒介导的LacZ基因转移在B1 6细胞的转导效率。方法　腺病毒介导的LacZ基因转导B1 6细胞。结果　当MOI为 50～ 1 0 0 ,即可获得较高的转导效率 ,达 90 %± 1 %。结论　腺病毒介导的基因转移在B1 6细胞能获得较高的转... 详细信息

目的　观察腺病毒介导的LacZ基因转移在B1 6细胞的转导效率。方法　腺病毒介导的LacZ基因转导B1 6细胞。结果　当MOI为 50～ 1 0 0 ,即可获得较高的转导效率 ,达 90 %± 1 %。结论　腺病毒介导的基因转移在B1 6细胞能获得较高的转导效率和目的基因的有效表达。提示腺病毒载体作为一种高效的基因转移载体。

关键词：腺病毒介导 LacZ基因小鼠黑色素瘤 B16细胞基因治疗

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HCV、NS5A区部分基因克隆和序列分析

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疾病控制杂志 2003年第2期7卷 103-105页

作者：张寿国潘卫李慧邓松华仇小芳朱扬安徽医科大学病理生理学教研室安徽合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433 上海复旦大学医学院上海200032

目的　研究输血后肝炎病人的基因型 ,探讨 HCV抵抗 IFN疗效的作用机制。方法　以RT- PCR从慢性丙肝病人血清中扩增一段 4 86 bp的 c DNA片段作目的基因 ,插入 PQE30的多克隆位点 ,构建重组质粒 PQE30 - NS5 A- 1U 1D。结果　应用限制酶... 详细信息

目的　研究输血后肝炎病人的基因型 ,探讨 HCV抵抗 IFN疗效的作用机制。方法　以RT- PCR从慢性丙肝病人血清中扩增一段 4 86 bp的 c DNA片段作目的基因 ,插入 PQE30的多克隆位点 ,构建重组质粒 PQE30 - NS5 A- 1U 1D。结果　应用限制酶酶切和测序分析 ,证实 PQE30 -NS5 A- 1U1D中克隆基因是 HCVJ的 NS5 A部分序列 ,核苷酸和氨基酸序列同源性均在 90 %以上 ,包含有干扰素敏感决定区 (ISDR)。结论　血清学抗体检测 NS5 A片段对 HCV诊断有独特的应用价值。

关键词： C型肝炎样病毒属遗传学序列分析

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YFP-CD18融合蛋白在U937细胞株中的表达与鉴定

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生物技术 2003年第4期13卷 4-6页

作者：严鸣毛积芳钟纪根何健朱秋峰徐仁宝基础医学部病理生理学教研室基础医学部生物化学与分子生物学教研室长海医院急救科长征医院麻醉科第二军医大学上海200433

目的 :构建并表达Mac - 1的β链CD18与黄色荧光蛋白 (YFP)的融合蛋白YFP -CD18,为进一步直视研究Mac- 1在白细胞内的分布、走向及归宿提供物质条件。方法 :首先将CD18的全长cDNA与pEYFP -C1进行酶切 ,构建YFP与CD18的N末端连接的表达载... 详细信息

目的 :构建并表达Mac - 1的β链CD18与黄色荧光蛋白 (YFP)的融合蛋白YFP -CD18,为进一步直视研究Mac- 1在白细胞内的分布、走向及归宿提供物质条件。方法 :首先将CD18的全长cDNA与pEYFP -C1进行酶切 ,构建YFP与CD18的N末端连接的表达载体 ,并将其转染至U937细胞株中进行表达。通过荧光显微镜观察转染成功后的U937细胞黄色荧光是否存在 ,以及流式细胞术检测确定PMA刺激后YFP -CD18活化后可否由胞浆内转位至膜上和测定PMA活化前后转染的U937细胞与其配基ICAM - 1粘附活性的变化等方面来进行鉴定。结果 :经酶切鉴定 ,pYFP -CD18构建正确 ,转染U937细胞株后 ,可见YFP -CD18融合蛋白发出的黄色荧光。结论 :构建完成YFP -CD18融合基因并可以在U937细胞株中进行表达。

关键词： YFP CD18 融合蛋白 U937细胞株表达黄色荧光蛋白

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72小时睡眠剥夺大鼠的氧化应激

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中华糖尿病杂志 2003年第5期 500,519-500,519页

目的观察72h睡眠剥夺大鼠的氧化应激状态.方法参照Everson等的方法,将SD大鼠予以72h剥夺睡眠处理后,断头取血,比色法测定血浆丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GSH-R)和超氧化物... 详细信息

目的观察72h睡眠剥夺大鼠的氧化应激状态.方法参照Everson等的方法,将SD大鼠予以72h剥夺睡眠处理后,断头取血,比色法测定血浆丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GSH-R)和超氧化物岐化酶(SOD)的活性.结果与对照组相比,睡眠剥夺大鼠血浆MDA的含量增高,GSH含量降低,GSH-Px和GSH-R活性降低,SOD活性有降低趋势.结论 72h睡眠剥夺大鼠处于氧化应激状态,氧化应激可能是睡眠剥夺引起病理变化的机制之一.

关键词：睡眠剥夺氧化应激大鼠

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前列腺癌与雄激素受体基因(CAG)n重复多态性的关系

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中华泌尿外科杂志 2002年第6期23卷 351-353页

作者：王钢陈光椿王晓慧夏冰张金山卢建第二军医大学病理生理学教研室上海200433

目的　探讨前列腺癌 (PC)与雄激素受体 (AR)基因 (CAG)n重复多态性的关系。　方法　应用DNA双链循环测序方法对 34例PC组织与癌旁正常组织、2例PC患者外周血白细胞内的AR基因 (CAG)n重复数进行测定。　结果　同一PC患者的癌组织与癌旁... 详细信息

目的　探讨前列腺癌 (PC)与雄激素受体 (AR)基因 (CAG)n重复多态性的关系。　方法　应用DNA双链循环测序方法对 34例PC组织与癌旁正常组织、2例PC患者外周血白细胞内的AR基因 (CAG)n重复数进行测定。　结果　同一PC患者的癌组织与癌旁正常组织 (CAG)n重复数相同 ;36例患者癌组织AR基因 (CAG)n呈重复多态性 ,平均 2 0 .0 6 ,显著低于正常组织 ,差别有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;不同分化程度的癌组织 (CAG)n重复数差别无显著性意义 (P >0 .0 5 )。　结论　AR基因 (CAG)n重复数改变的体细胞突变在PC癌细胞中罕见。

关键词：前列腺癌雄激素受体基因重复多态性前列腺肿瘤 (CAG)n基因体细胞突变 PC

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糖皮质激素受体β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响

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中国病理生理杂志 2002年第10期18卷 1187-1191页

作者：刘宇健宋亮年陈玉霞卢建第二军医大学病理生理学教研室上海200433

目的 :通过研究糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响 ,探讨糖皮质激素受体β存在的生物学意义。方法 :将糖皮质激素受体α的报告基因CAT和糖皮质激素受体 β共转染入人骨肉瘤细胞系HOS - 86 0 3,激素处理后 ,用ELIS... 详细信息

目的 :通过研究糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响 ,探讨糖皮质激素受体β存在的生物学意义。方法 :将糖皮质激素受体α的报告基因CAT和糖皮质激素受体 β共转染入人骨肉瘤细胞系HOS - 86 0 3,激素处理后 ,用ELISA方法检测CAT活性 ;用定量RT -PCR方法检测糖皮质激素受体 β的稳定过度表达对糖皮质激素诱导p2 1mRNA表达的影响。结果 :糖皮质激素受体 β抑制报告基因CAT的表达 ,随着糖皮质激素受体 β转染量的增加 ,抑制效果越明显 ;糖皮质激素受体β同样可以抑制糖皮质激素对糖皮质激素受体α内源性靶基因p2 1mRNA的诱导。结论 :糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α的转录激活功能有抑制作用 ,糖皮质激素受体 β可能是糖皮质激素受体α的内源性抑制因子。

关键词：肾上腺皮质激素类转染骨肉瘤糖皮质激素受体β 糖皮质激素受体α 激活功能影响

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地塞米松对人卵巢癌HO-8910细胞ERK和p38活性的快速作用

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中国病理生理杂志 2002年第11期18卷 1374-1376页

作者：夏冰卢建第二军医大学病理生理学教研室

目的 :观察人工合成糖皮质激素地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系HO - 891 0中丝裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)家族成员ERK1 /2和p38活性的影响。方法 :Westernblot测定ERK和p38活性。结果 :1 0 - 7mol/LDex在 5min内即可引起ERK1和ERK2活性... 详细信息

目的 :观察人工合成糖皮质激素地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系HO - 891 0中丝裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)家族成员ERK1 /2和p38活性的影响。方法 :Westernblot测定ERK和p38活性。结果 :1 0 - 7mol/LDex在 5min内即可引起ERK1和ERK2活性下降 ,30min作用最明显 ,分别比对照降低 41 %和 54 % (均P <0 .0 1 ) ;之后回升 ,4h后活性达对照水平 ;该作用具有激素浓度 (1 0 - 1 0 - 1 0 - 6 mol/L)依赖性。Dex还可在 5min内增加p38活性 ,1 5min作用最显著 ,比对照增加 84% (P <0 .0 1 ) ,1h后达对照水平。这些作用不能被糖皮质激素受体 (GR)拮抗剂RU486所阻断。结论 :Dex能够以GR非依赖性方式 ,快速抑制HO - 891 0细胞ERK1 /2活性和促进p38活性。

关键词：地塞米松卵巢癌 HO-8910细胞 ERK p38活性细胞增殖

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小鼠腹腔巨噬细胞基态游离钙离子浓度的不均一性及其和细胞反应性的关系

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中国病理生理杂志 2002年第10期18卷 1173-1178页

作者：朱晓燕韩建中娄淑杰严进徐仁宝第二军医大学病理生理学教研室第二军医大学神经生物学教研室上海200433

目的 :在单细胞水平上研究小鼠腹腔巨噬细胞 (PM)基态游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的不均一性及其和细胞反应性的关系。方法 :用荧光指示剂Fura - 2 /AM结合荧光显微镜成像系统检测单个PM基态的及用激动剂刺激细胞后的 [Ca2 + ]i;同时结... 详细信息

目的 :在单细胞水平上研究小鼠腹腔巨噬细胞 (PM)基态游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的不均一性及其和细胞反应性的关系。方法 :用荧光指示剂Fura - 2 /AM结合荧光显微镜成像系统检测单个PM基态的及用激动剂刺激细胞后的 [Ca2 + ]i;同时结合NBT染色法定量检测单个PM产超氧阴离子 (O 2 )水平。结果 :对 7只正常小鼠共392个PM基态 [Ca2 + ]i的研究表明小鼠PM的基态 [Ca2 + ]i呈正态分布 [(5 4± 2 4 )nmol/L ,n =392 ],但波动范围较大(从 10nmol/L到高于 10 0nmol/L) ,以 [Ca2 + ]i在 4 0 - 6 0nmol/L的细胞数量最多 (约占 5 0 % )。用PMA、fMLP刺激后PM [Ca2 + ]i升高 ,且受刺激后 [Ca2 + ]i升高的峰值和基态 [Ca2 + ]i之间呈正相关 (PMA刺激组 :r=0 5 2 ,P <0 0 1,n=5 8;fMLP刺激组 :r=0 5 9,P <0 0 1,n =4 4。此两组实验均以不同的小鼠重复 3次 ,其它两只小鼠的结果与上同。下面的表述方法同此 )。另外小鼠PM的基态 [Ca2 + ]i与其受PMA刺激后产生O 2 的量也呈显著正相关 (r=0 4 2 ,P<0 0 1,n =4 3,重复 4次 )。结论 :小鼠PM的基态 [Ca2 + ]i是不均一的 ,且基态 [Ca2 + ]i的高低和该细胞对致炎因子的反应性密切相关。

关键词：钙巨噬细胞超氧化物小鼠

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稳定表达糖皮质激素受体β的人骨肉瘤细胞系的建立

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 179-182页

作者：刘宇健陈玉霞宋亮年卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的 :建立稳定表达糖皮质激素受体β的细胞系。方法 :构建糖皮质激素受体β的真核表达载体 ,用L ipotransfectamine法转染人骨肉瘤细胞系 HOS- 86 0 3,经 G4 18筛选后得到稳定转染细胞株 ;用极限稀释法获取亚克隆细胞株 ;用定量 RT- ... 详细信息

目的 :建立稳定表达糖皮质激素受体β的细胞系。方法 :构建糖皮质激素受体β的真核表达载体 ,用L ipotransfectamine法转染人骨肉瘤细胞系 HOS- 86 0 3,经 G4 18筛选后得到稳定转染细胞株 ;用极限稀释法获取亚克隆细胞株 ;用定量 RT- PCR方法鉴定糖皮质激素受体β m RNA的表达。结果与结论 :建立了稳定表达糖皮质激素受体β的细胞株。

关键词：糖皮质激素β受体骨肉瘤基因转染聚合酶链反应

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