检索结果-内蒙古大学图书馆

热带医学杂志 2023年第6期23卷 760-767,887页

作者：楚琰李园园马聪李晓艳张双双王钰璇郑春龙孙健勇西安思源学院医学院基础医学教研室陕西西安710038 空军军医大学第二附属医院胸腔外科陕西西安710038

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(NNT-AS1)在非小细胞肺癌(NSCLC)进展中的潜在机制。方法30例NSCLC组织和癌旁正常组织获自于2020年6-12月在空军军医大学第二附属医院接受手术切除的NSCLC患者,NSCLC细胞系H165... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(NNT-AS1)在非小细胞肺癌(NSCLC)进展中的潜在机制。方法30例NSCLC组织和癌旁正常组织获自于2020年6-12月在空军军医大学第二附属医院接受手术切除的NSCLC患者,NSCLC细胞系H1650、A549、H1299、H2170以及人肺上皮细胞BEAS-2B常规培养。将A549细胞分为siRNA阴性对照(si-con)组、靶向NNT-AS1的siRNA(si-NNT-AS1)组、miR-142-3p抑制物阴性对照(si-NNT-AS1+in-miR-con)组、miR-142-3p抑制物(si-NNT-AS1+in-miR-142-3p)组、锌指E结合蛋白1(ZEB1)阴性对照空载(si-NNT-AS1+vector)组和ZEB1过表达质粒(si-NNT-AS1+ZEB1)组。BALB/c雄性裸小鼠随机分为sh-NC组(n=5)和sh-NNT-AS1组(n=5),分别将转染sh-NC或sh-NNT-AS1慢病毒的A549细胞皮下注射到裸小鼠背部。35 d后切除肿瘤,测量肿瘤组织重量和体积。qRT-PCR检测NSCLC组织和细胞中NNT-AS1、miR-142-3p和ZEB1水平;双荧光素酶报告基因实验探究3个因子之间的作用关系。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞增殖,集落形成实验测定集落形成数量,Tranwell测定迁移和侵袭细胞数量,肿瘤异种移植实验检测体内肿瘤生长情况。结果与癌旁正常组织比较,NSCLC组织中NNT-AS1和ZEB1 mRNA上调[(3.28±0.26)vs.(1.05±0.04),(2.65±0.22)vs.(1.04±0.06)],miR-142-3p下调[(0.43±0.03)vs.(1.02±0.08)],差异均有统计学意义(P均<0.05)。与人肺上皮细胞BEAS-2B比较,NSCLC细胞系H1650、A549、H1299、H2170中NNT-AS1和ZEB1 mRNA上调,miR-142-3p下调,差异均有统计学意义(P均<0.05);且A549细胞中NNT-AS1、miR-142-3p和ZEB1 mRNA表达差异变化最大,因此选择A549细胞继续进行后续的探究。与miR-NC组比较,A549细胞中miR-142-3p转染后降低了NNT-AS1-WT或ZEB1-WT的荧光素酶活性,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与si-con组比较,si-NNT-AS1组A549细胞中NNT-AS1和ZEB1 mRNA、蛋白表达降低,miR-142-3p表达增高,差异均有统计学意义(P均<0.05);与si-NNT-AS1+in-miR-con组比较,si-NNT-AS1+in-miR-142-3p组A549细胞中ZEB1 mRNA和蛋白表达升高,miR-142-3p表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);与si-NNT-AS1+vector组比较,si-NNT-AS1+ZEB1组A549细胞中ZEB1 mRNA和蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与si-con组比较,si-NNT-AS1组A549细胞活力[(0.42±0.04)vs.(0.84±0.07)]、集落形成数量[(54.23±5.64)个vs.(117.36±11.24)个]、迁移和侵袭细胞数量[(72.16±6.54)个vs.(164.23±12.34)个和(65.23±5.27)个vs.(123.18±10.21)个]均下调,细胞凋亡率[(21.69±2.54)%vs.(7.54±0.72)%]上调,差异均有统计学意义(P均<0.05);与si-NNT-AS1+in-miR-con组比较,si-NNT-AS1+in-miR-142-3p组A549细胞活力、集落形成数量、迁移和侵袭细胞数量均上调,细胞凋亡率下调,差异均有统计学意义(P均<0.05);与si-NNT-AS1+vector组比较,si-NNT-AS1+ZEB1组A549细胞活力、集落形成数量、迁移和侵袭细胞数量均上调,细胞凋亡率下调,差异均有统计学意义(P均<0.05)。体内实验表明,与sh-NC组比较,sh-NNT-AS1组肿瘤组织中NNT-AS1和ZEB1 mRNA表达降低,miR-142-3p表达增高,肿瘤体积、重量以及增殖细胞核抗原(Ki67)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论沉默NNT-AS1抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,可能与miR-142-3p/ZEB1轴有关。

关键词：长链非编码RNA烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1 miR-142-3p 肺癌细胞细胞行为

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结核分枝杆菌抗原融合蛋白Ag85B-ESAT6和Rv2031c-Rv2626c重组腺病毒的构建及鉴定

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中国人兽共患病学报 2022年第3期38卷 191-195页

作者：王丽梅姜泓康健靳芊芊陕西省西安市空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室西安710032 传染病诊疗中心空军医科大学附属第二医院西安710038

目的构建表达结核分枝杆菌多阶段抗原融合蛋白Ag85B-ESAT6(AE)和Rv2031c-Rv2626c(R2)的重组腺病毒,为其用于结核病新型疫苗的研究奠定基础。方法体外合成人延长因子1α(EF1α)启动子DNA序列,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,... 详细信息

目的构建表达结核分枝杆菌多阶段抗原融合蛋白Ag85B-ESAT6(AE)和Rv2031c-Rv2626c(R2)的重组腺病毒,为其用于结核病新型疫苗的研究奠定基础。方法体外合成人延长因子1α(EF1α)启动子DNA序列,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建含有CMV、EF1α双启动子的腺病毒穿梭载体。PCR扩增课题组前期构建的AE、R2融合蛋白基因,并依次亚克隆至上述腺病毒穿梭载体的CMV和EF1启动子下游,阳性重组穿梭质粒命名为pAd-AE-R2。将pAd-AE-R2与骨架质粒共转染HEK293细胞,包装获得重组腺病毒,命名为Ad-AE-R2。RT-PCR法和间接免疫荧光法(IFA)对重组腺病毒表达的AE、R2融合蛋白的基因和蛋白表达水平进行鉴定。结果Ad-AE-R2瞬时转染的HEK293细胞中可转录表达AE、R2融合蛋白基因。IFA法采用Ag85B、ESAT-6、Rv2626c和Rv2031c 4种抗原的单克隆抗体可分别检测到Ad-AE-R2感染的巨噬细胞中具有特异性的绿色荧光,表明Ad-AE-R2能够在宿主细胞内表达AE、R2融合蛋白。结论成功构建并包装获得表达结核分枝杆菌多阶段抗原融合蛋白AE、R2的重组腺病毒,为其用于结核病新型疫苗研究奠定基础。

关键词：结核分枝杆菌多阶段抗原 Ag85B ESAT-6 Rv2031c Rv2626c 重组腺病毒

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敲低膀胱癌细胞热休克蛋白60(HSP60)通过上调乳酸脱氢酶A(LDHA)表达抑制人NKL细胞杀伤

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第12期37卷 1098-1105页

作者：杨帆刘静姚田军吴丹周幸春张波空军军医大学第二附属医院唐都医院泌尿外科陕西西安710038 空军军医大学基础医学院病理与病理生理学教研室陕西西安710032

目的探索热休克蛋白60(HSP60)蛋白表达变化影响膀胱癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞免疫监视的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测HSP60在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达,统计学分析HSP60在膀胱癌及癌旁组织的表达差异及HSP60表达水平... 详细信息

目的探索热休克蛋白60(HSP60)蛋白表达变化影响膀胱癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞免疫监视的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测HSP60在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达,统计学分析HSP60在膀胱癌及癌旁组织的表达差异及HSP60表达水平与膀胱癌患者预后的相关性。利用腺病毒载体构建HSP60稳定干涉及过表达的膀胱癌细胞系并与NKL细胞共培养,ELISA及LDH释放实验检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。Western blot法检测膀胱癌细胞乳酸脱氢酶A(LDHA)表达,试剂盒检测乳酸分泌。在HSP60稳定干涉及过表达的膀胱癌细胞系,利用小干涉RNA(siRNA)敲低或利用质粒过表达膀胱癌细胞中的LDHA,检测对NKL细胞杀伤能力的影响。利用线粒体活性氧探针MitoSOX检测线粒体活性氧(ROS)水平,Western blot法检测膀胱癌细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白表达,利用靶向线粒体抗氧化剂MitoEMPO及siRNA降低HSP60稳定干涉膀胱癌细胞中线粒体ROS及HIF-1α水平,探索HSP60表达降低促进LDHA表达的具体机制。结果膀胱癌组织HSP60蛋白的表达水平较癌旁组织显著降低,且HSP60表达越低的膀胱癌患者其预后越差;敲低HSP60蛋白表达可显著上调膀胱癌细胞LDHA的表达及乳酸的分泌,反之,过表达HSP60可显著抑制膀胱癌细胞LDHA的表达及乳酸的分泌;siRNA LDHA可显著增强HSP60敲低导致NKL细胞的杀伤抑制,同时过表达LDHA可显著抑制HSP60过表达导致NKL杀伤增强。此外,敲低膀胱癌细胞HSP60表达可通过激活ROS/HIF-1α通路促进LDHA的表达。结论敲低膀胱癌细胞HSP60表达通过激活ROS/HIF-1α通路促进LDHA的表达,抑制NK细胞的杀伤作用。

关键词：膀胱癌细胞热休克蛋白60(HSP60) 乳酸脱氢酶A(LDHA) 乳酸自然杀伤(NK)细胞

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海军基层军医全科住院医师规范化培训探讨

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海军医学杂志 2022年第1期43卷 20-22页

作者：曹熙张巧颜霏徐涛周翊解放军92196部队医院山东青岛266011 海军军医大学第二附属医院全科医学教研室海军军医大学第二附属医院医务处海军军医大学第二附属医院神经外科

海军全科住院医师规范化培训是处在起步阶段的新生事物,笔者结合基层岗位实际需求和自身全科规范化培训的体会,分析了全科规范化培训对于基层军医成长的重要作用,以及规范化培训中好的做法和存在问题,为军队全科住院医师规范化培训的顺... 详细信息

海军全科住院医师规范化培训是处在起步阶段的新生事物,笔者结合基层岗位实际需求和自身全科规范化培训的体会,分析了全科规范化培训对于基层军医成长的重要作用,以及规范化培训中好的做法和存在问题,为军队全科住院医师规范化培训的顺利实施提出了建议与思考。

关键词：海军基层军医全科医学住院医师规范化培训

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严重急性呼吸综合征冠状病毒2假病毒的制备及验证

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第二军医大学学报 2020年第4期41卷 359-364页

作者：彭浩然江亮亮何燕华肖爱军唐海琳戚中田赵平海军军医大学(第二军医大学)海军医学系生物医学防护教研室上海200433 上海捷瑞生物工程有限公司上海201615

目的建立严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)假病毒(SARS-CoV-2 pps)的制备方法。方法设计、合成序列优化的SARS-CoV-2刺突蛋白(S)基因,构建表达质粒,转染293T细胞,用免疫荧光检测S蛋白的表达;将该质粒与基于慢病毒基因骨架的含... 详细信息

目的建立严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)假病毒(SARS-CoV-2 pps)的制备方法。方法设计、合成序列优化的SARS-CoV-2刺突蛋白(S)基因,构建表达质粒,转染293T细胞,用免疫荧光检测S蛋白的表达;将该质粒与基于慢病毒基因骨架的含增强绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的假病毒包装质粒共转染293T细胞,收集细胞培养上清,感染Vero E6和Huh7细胞,观察细胞内EGFP的表达;将制备的SARS-CoV-2 pps感染Vero E6细胞,检测膜融合抑制剂氯喹和盐酸阿比朵尔、SARS-CoV-2 S1蛋白单克隆抗体及新型冠状病毒肺炎患者恢复期血清对假病毒感染性的影响。结果构建的SARS-CoV-2 S质粒转染的293T细胞可与S1蛋白单克隆抗体及新型冠状病毒肺炎患者恢复期血清反应。SARS-CoV-2 S质粒与HIV假病毒包装质粒共转染293T细胞的上清加入Vero E6细胞和Huh7细胞36 h和72 h后可分别观察到细胞内表达的EGFP,EGFP阳性的Huh7细胞数量明显多于Vero E6细胞。2种膜融合抑制剂、1株人源S1单克隆抗体及2份新型冠状病毒肺炎患者恢复期血清均可有效抑制SARS-CoV-2 pps对Vero E6细胞的感染(P均<0.01)。结论成功制备了SARS-CoV-2 pps,其可用于后续抗SARS-CoV-2药物筛选与疫苗评价。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 假病毒膜融合抑制剂中和抗体

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严重急性呼吸综合征冠状病毒2核衣壳蛋白原核表达、纯化及其抗血清制备

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第二军医大学学报 2020年第5期41卷 481-486页

作者：秦照玲彭浩然丁翠玲肖爱军戚中田赵平海军军医大学(第二军医大学)海军医学系生物医学防护教研室上海200433 上海捷瑞生物工程有限公司上海201615

目的表达并纯化重组的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳(N)蛋白,通过免疫小鼠制备SARS-CoV-2 N蛋白抗血清。方法将含有SARS-CoV-2 N基因的pET28a-N原核表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导蛋... 详细信息

目的表达并纯化重组的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳(N)蛋白,通过免疫小鼠制备SARS-CoV-2 N蛋白抗血清。方法将含有SARS-CoV-2 N基因的pET28a-N原核表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导蛋白表达,用Ni-NTA亲和层析柱纯化SARS-CoV-2 N重组蛋白;将SARS-CoV-2 N重组蛋白联合锰佐剂通过肌内和皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,获得抗血清;用蛋白质印迹分析检测SARS-CoV-2 N重组蛋白与SARS-CoV-2 N单克隆抗体及严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)N多克隆抗体的反应;用间接免疫荧光实验检测小鼠抗血清与真核表达质粒转染细胞中SARS-CoV-2 N重组蛋白的反应。结果成功诱导大肠杆菌表达出可溶性的SARS-CoV-2 N重组蛋白,相对分子质量约为55000,纯化出该重组蛋白;蛋白质印迹分析结果显示SARS-CoV-2 N重组蛋白能与SARS-CoV-2 N单克隆抗体及SARS-CoV N多克隆抗体结合;间接免疫荧光实验检测结果表明制备的小鼠抗血清能与哺乳动物细胞中表达的SARS-CoV-2 N重组蛋白结合。结论成功表达、纯化出SARS-CoV-2 N重组蛋白,并制备出该蛋白的小鼠抗血清,为后续建立SARS-CoV-2的快速诊断方法及开展SARS-CoV-2 N蛋白的功能研究奠定了基础。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 核衣壳蛋白原核表达免疫血清

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基于影像学评价手段确定经肝动脉化疗栓塞术联合仑伐替尼治疗不可切除肝细胞癌患者疗效评估最早时间节点

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临床军医杂志 2024年第11期52卷 1123-1128页

作者：祝叶静汪檬檬赵首捷汪博高源李惠晨刘雷杜锡林空军军医大学第二附属医院普通外科陕西西安710038 联勤保障部队临潼康复疗养中心药剂科陕西西安710600 空军军医大学西京消化病医院国家消化系统疾病临床医学研究中心消化系肿瘤整合防治全国重点实验室陕西西安710032 空军军医大学药学系生物制药学教研室空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032

目的探讨经肝动脉化疗栓塞术(TACE)联合仑伐替尼治疗不可切除的肝细胞癌(HCC)患者的影像学评价结果与生存预后的关系,寻找影像学疗效判断的最早时间节点。方法回顾性分析自2019年6月至2022年6月于空军军医大学西京消化病医院及空军军医... 详细信息

目的探讨经肝动脉化疗栓塞术(TACE)联合仑伐替尼治疗不可切除的肝细胞癌(HCC)患者的影像学评价结果与生存预后的关系,寻找影像学疗效判断的最早时间节点。方法回顾性分析自2019年6月至2022年6月于空军军医大学西京消化病医院及空军军医大学第二附属医院行TACE联合仑伐替尼治疗的186例不可切除的HCC患者的临床资料。使用Cox风险比例回归模型确定患者生存预后的影响因素。根据实体肿瘤反应评估标准(RECIST)和改良的实体肿瘤疗效评估标准(mRESICT)评估患者治疗效果。使用Kendall′s tau-b检验进行影像学评价结果的一致性分析。采用Kaplan-Meier方法绘制生存曲线,采用Log-rank检验进行组间生存分析。结果RECIST标准评价客观缓解率(ORR)为17.8%(33/186),mRECIST标准评价ORR为43.0%(80/186),Kendall′s tau-b相关系数为0.506(P<0.001)。RECIST标准和mRECIST标准的疾病控制率(DCR)均为71.0%(132/186),Kendall′s tau-b相关性系数为1.000(P<0.001)。多因素Cox回归分析结果显示,白蛋白、总胆红素、RECIST/mRECIST标准DCR是患者生存预后的独立影响因素(P<0.05)。按复查时间及RECIST/mRESICT标准评价指标疾病控制情况,将4周内复查的患者分为疾病控制1组(n=23)、疾病进展1组(n=5),将4~6周复查的患者分为疾病控制2组(n=47)、疾病进展2组(n=17),将6周及以上复查的患者分为疾病控制3组(n=62)、疾病进展3组(n=32)。疾病控制1组与疾病进展1组的生存曲线无显著差异(Log-rankχ^(2)=0.114,P=0.736)。疾病控制2组与疾病进展2组的生存曲线差异显著(Log-rankχ^(2)=12.076,P=0.001);疾病控制2组和疾病进展2组1年累积存活率分别为67.1%、34.3%。疾病控制3组与疾病进展3组的生存曲线差异显著(Log-rankχ^(2)=4.117,P=0.042);疾病控制3组和疾病进展3组1年累积存活率分别为73.5%、48.5%。结论RECIST与mRECIST影像学评价结果与TACE联合仑伐替尼治疗的不可切除HCC患者的生存预后密切相关,且经该联合治疗的HCC患者的影像学疗效评价的最早时间节点为4~6周。

关键词：肝细胞癌经肝动脉化疗栓塞术仑伐替尼影像学评价预后评估

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舰载机飞行员罹患颈椎病原因分析及中医指导下的自我防护对策

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职业与健康 2021年第20期37卷 2877-2880页

作者：袁影李伟红海军军医大学(第二军医大学)中医系针灸推拿学教研室上海200433

颈椎病是目前舰载机飞行员最易患的疾病之一。因其职业和环境的特殊性,颈椎病的发病率居高不下,颈椎问题已成为影响飞行员飞行质量和飞行事业的主要瓶颈,而本病一旦出现,很难彻底治愈,临床上以缓解疼痛、减轻症状为主要治疗手段,因此,... 详细信息

颈椎病是目前舰载机飞行员最易患的疾病之一。因其职业和环境的特殊性,颈椎病的发病率居高不下,颈椎问题已成为影响飞行员飞行质量和飞行事业的主要瓶颈,而本病一旦出现,很难彻底治愈,临床上以缓解疼痛、减轻症状为主要治疗手段,因此,对本病充分认识和自我预防很重要。我国中医学自始以来便十分重视"治未病",未病先防思想是中医的精髓,中医重视身心的协调自然对疾病预防的意义,并在此方面有很大的优势。我们将综述舰载机飞行员颈椎问题高发的原因及我国中医学在颈椎病预防中的指导意义。

关键词：舰载机飞行员颈椎病防护中医

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新药研发实例融入新药研究与评价教学的探讨

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现代职业教育 2022年第28期 145-147页

作者：任丽君赵寅严朗陈基快海军军医大学海军医学系卫生毒理学教研室海军军医大学第二附属医院〈上海长征医院〉脊柱外科

如何提高新药研究与评价课程的授课质量和教学成果，进一步推动教师事业的快速发展，成为目前亟待解决的问题。将新药研发实例融入新药研究与评价教学，可有效弥补传统教学的不足，对于新药研究与评价教学的发展有重要意义。科学践行实... 详细信息

如何提高新药研究与评价课程的授课质量和教学成果，进一步推动教师事业的快速发展，成为目前亟待解决的问题。将新药研发实例融入新药研究与评价教学，可有效弥补传统教学的不足，对于新药研究与评价教学的发展有重要意义。科学践行实例教学有助于推动教学进步的最大化，为培养新时代所需的高素质医药人才打下良好的基础。

关键词：新药研发实例新药研究与评价策略

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人工智能在研究生外科教学中的应用探索

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中国继续医学教育 2022年第1期14卷 152-155页

作者：蒋伟马海涛郑鸿杨桦邱远空军军医大学空军卫勤训练基地卫勤教研室陕西西安710032 陆军军医大学第二附属医院普通外科重庆400037 陆军军医大学第二附属医院普通胸外科重庆400037

在信息技术背景下,人工智能(artificial intelligence,AI)在医疗领域的应用越来越广,并纳入国家发展战略;为加快推动高素质临床医学人才培养模式变革,提高临床教学中外科研究生教学质量,人工智能、大数据等技术与教育科学、教学活动相... 详细信息

在信息技术背景下,人工智能(artificial intelligence,AI)在医疗领域的应用越来越广,并纳入国家发展战略;为加快推动高素质临床医学人才培养模式变革,提高临床教学中外科研究生教学质量,人工智能、大数据等技术与教育科学、教学活动相互融合。本文通过首先全面回顾人工智能在医学图像识别、辅助新药研发、辅助临床诊疗及医学教育方面的应用探索及优势;对当前研究生外科教学中在临床思维能力培养、训练期间考核机制及科研创新能力训练等方面进行了深入剖析,并指出了当前临床研究生教育中存在的矛盾与不足。最后,分析当前人工智能在外科研究生临床思维、实践操作、科研能力培养及考核评估中已有的运用模式,突出强调了人工智能在教学考核评估、临床实践应用、科研能力培养中的重要作用。人工智能技术在医学教学中的作用将会越来越突出,将为医学教育的发展提供广阔的机遇和空间。

关键词：人工智能大数据临床教学外科教学临床思维科研能力

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