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第三军医大学学报 2006年第15期28卷 1575-1577页

作者：谭新杰胡长林蔡文琴杨忠重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的初步探讨脑缺血后神经元前体细胞的发生机制。方法建立一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,应用神经元前体细胞的标志物DCX(Doub lecortin)检测缺血再灌注后不同时相点海马齿状回神经元前体细胞的增殖情况。结果再灌注后第7天梗死侧及非... 详细信息

目的初步探讨脑缺血后神经元前体细胞的发生机制。方法建立一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,应用神经元前体细胞的标志物DCX(Doub lecortin)检测缺血再灌注后不同时相点海马齿状回神经元前体细胞的增殖情况。结果再灌注后第7天梗死侧及非梗死侧齿状回DCX阳性细胞数达到最高峰,与相应假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同时各个时相点梗死侧与非梗死侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05);再灌注后第21天双侧齿状回DCX阳性细胞数基本恢复至正常水平。结论局灶性脑缺血可以诱导成年大鼠神经元前体细胞的发生,这对于脑缺血后的神经修复可能起关键性作用;其机制可能是缺血区域产生的一些神经发生调节因子弥散到神经发生区域所致。

关键词：大脑中动脉栓塞再灌注神经元前体细胞:齿状回

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胎鼠皮层神经干细胞的分离培养、分化及鉴定

胎鼠皮层神经干细胞的分离培养、分化及鉴定

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贵州省医学会神经外科学分会第七届学术交流会暨神经外科学新进展学习班

作者：谭新杰焦桂萍胡长林蔡文琴刘健杨华刘窗溪韩国强熊云彪贵州省人民医院干部医疗科重庆医科大学附属第二医院神经病学研究所第三军医大学神经生物学教研室、重庆市神经科学研究所贵阳医学院附属医院神经外科贵州省人民医院神经外科

目的建立胎鼠皮层神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)体外分离、培养、分化及鉴定的方法,探讨神经干细胞的基本生物学特性。方法取E10．5天胎鼠端脑皮层,吸管吹打机械分离制成单细胞悬液,采用无血清培养和胎牛血清诱导分化, 应用免疫... 详细信息

目的建立胎鼠皮层神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)体外分离、培养、分化及鉴定的方法,探讨神经干细胞的基本生物学特性。方法取E10．5天胎鼠端脑皮层,吸管吹打机械分离制成单细胞悬液,采用无血清培养和胎牛血清诱导分化, 应用免疫荧光技术鉴定神经干细胞及其分化的子代细胞。结果从胎鼠端脑皮层分离的细胞呈Nestin免疫阳性并能在体外传代培养;血清诱导分化后的细胞可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原MAP-2和GFAP,并且诱导分化成的神经元能表达突触的特异性标志Synatophysin。结论我们分离和培养的细胞能表达神经干细胞的特异性标志物Nestin,并且具有很强的增殖能力和多向分化潜能,属于中枢神经系统的神经干细胞。

关键词：神经干细胞分离培养分化鉴定

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急性脑梗死静脉溶栓后血流动力学和临床疗效的量化分析

急性脑梗死静脉溶栓后血流动力学和临床疗效的量化分析

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贵州省医学会神经外科学分会第七届学术交流会暨神经外科学新进展学习班

作者：谭新杰焦桂萍胡长林蔡文琴刘健杨华刘窗溪韩国强熊云彪贵州省人民医院干部医疗科贵州省人民医院干部医疗科重庆医科大学附属第二医院神经病学研究所第三军医大学神经生物学教研室、重庆市神经科学研究所贵阳医学院附属医院神经外科贵阳医学院附属医院神经外科贵州省人民医院神经外科贵州省人民医院神经外科贵州省人民医院神经外科

目的观察静脉溶栓前后脑血管血流动力学的变化,并对血流动力学和临床疗效的动态变化作一简要的量化分析。方法根据静脉溶栓患者入选标准,选择 31例发病时间<3小时的急性脑梗死患者行静脉溶栓,应用经颅多普勒超声仪观察溶栓治疗前后... 详细信息

目的观察静脉溶栓前后脑血管血流动力学的变化,并对血流动力学和临床疗效的动态变化作一简要的量化分析。方法根据静脉溶栓患者入选标准,选择 31例发病时间<3小时的急性脑梗死患者行静脉溶栓,应用经颅多普勒超声仪观察溶栓治疗前后脑血流动力学的变化。在溶栓后24小时行美国国立卫生研究院卒中量表 (NIHSS)评分和3个月时行日常生活活动能力量表评分。结果有24例(77.42％) 患者在发病后6小时内血管再通,临床恢复良好;有2例(6．45％)患者在发病后6-24 小时内再通,其中只有一例临床恢复较好;有5例患者在发病后24h内血管未再通, 临床恢复较差。结论 TCD可以客观地观察和评价急性脑梗死患者溶栓治疗前后脑血流动力学的动态变化,并且早期的血管再通尤其是发病后6小时内的血管再通与患者神经功能的恢复有极其密切的关系。

关键词：急性脑梗死溶栓经颅多普勒

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缺氧诱导因子-1α基因在成年大鼠局灶性脑缺血中的治疗作用研究

缺氧诱导因子-1α基因在成年大鼠局灶性脑缺血中的治疗作用研究

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贵州省医学会神经外科学分会第七届学术交流会暨神经外科学新进展学习班

目的构建携带缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的重组腺病毒载体, 探索HIF-1α对大鼠局灶性脑缺血的治疗作用。方法应用腺病毒表达系统AdEasy System构建携带缺氧诱导因子-1α和绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒(Ad-HIF-1 α)并行PCR鉴定。... 详细信息

目的构建携带缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的重组腺病毒载体, 探索HIF-1α对大鼠局灶性脑缺血的治疗作用。方法应用腺病毒表达系统AdEasy System构建携带缺氧诱导因子-1α和绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒(Ad-HIF-1 α)并行PCR鉴定。建立大鼠线栓法大脑中动脉缺血再灌注模型,分为Ad-HIF-1α、腺病毒空载体(Ad)、生理盐水(NS)三组;将Ad-HIF-1α、Ad和NS注射到模型鼠缺血侧侧脑室,观察Ad-HIF-1α的分布和绿色荧光持续时间、三组大鼠神经功能缺失评分和2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色评价Ad-HIF-1α对脑缺血的治疗效果。结果在荧光显微镜下绿色荧光蛋白的表达逐渐向远离侧脑室的部位扩展, 在14天时荧光最强,随后逐渐减弱,至28天时荧光基本消失。Ad-HIF-1α治疗组 24 h大鼠神经功能缺失评分为2.4±0．5,与Ad组(2．6±0．5)和NS组(2．7±0．7) 比较差异无统计学意义(P>0．05);48及72 h Ad-HIF-1α治疗组神经功能缺失评分分别为1．6±0．7和0．9±0．6,与Ad组(分别为2．9±0．6和3．2±0．6)和NS 组(分别为3．0±0．7和3．2±0．8)比较差异均有统计学意义(P<0．05);72 h时脑组织TTC染色显示Ad-HIF-1α治疗组梗死体积为81．2 mm3±1．4 mm3,与Ad组 (173．9 mm3±1．3 mm3)和NS组(171．7 mm3±6．2 mm3)比较差异有统计学意义(P <0．05)。结论 Ad-HIF-1α对大鼠局灶性脑缺血具有一定的治疗作用,为HIF-1α基因的进一步研究和临床应用奠定了相关基础。

关键词：缺氧诱导因子-1α 腺病毒缺血再灌注 2,3,5-三苯基氯化四氮唑

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灵芝多糖肽对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用:与神经生长因子的比较

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中国临床康复 2005年第32期9卷 138-140页

作者：张骐阎志勇贾学江矫力南通市通济医院神经内科解放军第二军医大学神经科学研究所上海市200433 郑州大学医学院人体解剖教研室解放军第二军医大学神经科学研究所

目的:探讨灵芝的主要有效成分灵芝多糖肽对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用,并以神经生长因子作为阳性对照。方法:实验于2004-01/06在第二军医大学神经科学研究所进行。以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,将培养的PC12... 详细信息

目的:探讨灵芝的主要有效成分灵芝多糖肽对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用,并以神经生长因子作为阳性对照。方法:实验于2004-01/06在第二军医大学神经科学研究所进行。以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,将培养的PC12细胞随机分成4组:①正常对照组:PC12细胞在无血清的DMEM培养基中培养。②H2O2作用组:PC12细胞与终浓度为200μmol/L的H2O2作用4h。③灵芝多糖肽组:PC12细胞预先用终浓度为10mg/L的灵芝多糖肽预处理24h后,加入终浓度为200μmol/L的H2O2共同作用4h。④神经生长因子组:PC12细胞预先用终浓度为0.1mg/L的神经生长因子预处理24h后,加入终浓度为200μmol/L的H2O2共同作用4h。采用MTT法检测细胞的存活率以及Westernblotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3P20活性片段。结果:①细胞存活率:H2O2作用组显著低于正常对照组犤(38.6±7.1)%,(100±9.3)%,P<0.01犦;灵芝多糖肽组和神经生长因子组显著高于H2O2作用组犤(83.4±10.2)%,(75.9±7.4)%,P<0.01犦,但两组间比较无差异(P>0.05)。②半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3P20活性片段:Westernblotting检测结果提示灵芝多糖肽组和神经生长因子组较H2O2作用组明显减少。结论:适量灵芝多糖肽灵芝多糖肽能促进氧化应激损伤PC12细胞的存活,抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用,其效果与神经生长因子相似。

关键词：灵芝 PC12细胞半胱氨酸天冬迄酸蛋白酶

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灵芝多糖肽对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用

灵芝多糖肽对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用

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首届药用真菌产业发展暨学术研讨会

作者：张骐贾学江阎志勇肖林第二军医大学神经科学研究所第二军医大学神经科学研究所郑州大学医学院人体解剖教研室第二军医大学神经科学研究所

目的探讨灵芝多糖肽(GLPP)对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用。方法以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,采用MTT法检测细胞的存活率以及Western blotring检测Caspase-3 P20活性片段,分析GLPP对氧化应激时PC12细胞的保护... 详细信息

目的探讨灵芝多糖肽(GLPP)对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用。方法以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,采用MTT法检测细胞的存活率以及Western blotring检测Caspase-3 P20活性片段,分析GLPP对氧化应激时PC12细胞的保护作用及其机制。结果10μg/ml的GLPP处理组细胞存活率与200 μmol/I的H2O2作用组细胞存活率比较差异有极显著性(P<0.0 1);同时Western blotting检测结果提示GLPP处理组细胞Caspase-3 P20活性片段较H2O2作用组明显减少。结论GLPP能促进氧化应激损伤Pc12细胞的存活,对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用。

关键词：灵芝多糖肽氧化应激 PC12细胞 Caspase-3

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甾体激素对免疫细胞快速作用的非基因组机制

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生理科学进展 2004年第2期35卷 143-145页

作者：周建刘磊蒋春雷陈宜张第二军医大学航海医学教研室神经科学研究所上海200433

神经内分泌系统和免疫系统存在双向的联系 ,构成复杂的信息网络。甾体激素对免疫细胞的调节作用是上述网络中的重要一环。越来越多的证据表明 ,甾体激素对免疫细胞亦广泛存在着非基因组机制介导的快速作用。

关键词：甾体激素免疫细胞非基因组机制神经内分泌免疫调节免疫系统

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吸入性糖皮质激素对豚鼠速发性支气管哮喘反应的快速作用(英文)

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第二军医大学学报 2003年第3期24卷 291-294页

作者：周建康志敏谢强敏刘冲娄淑杰陈宜张蒋春雷第二军医大学海军医学系航海医学教研室上海200433 浙江大学医学院呼吸药物研究实验室杭州310031 第二军医大学神经科学研究所

目的 :研究吸入性糖皮质激素对豚鼠速发性支气管哮喘的快速作用。方法 :以卵白蛋白为抗原致敏豚鼠 ,抗原再次激发速发性支气管哮喘反应前 ,处理组雾化吸入糖皮质激素布地奈德 (3mg/ml混悬于羟甲基纤维素赋形剂 ) 5min ,对照组雾化吸入... 详细信息

目的 :研究吸入性糖皮质激素对豚鼠速发性支气管哮喘的快速作用。方法 :以卵白蛋白为抗原致敏豚鼠 ,抗原再次激发速发性支气管哮喘反应前 ,处理组雾化吸入糖皮质激素布地奈德 (3mg/ml混悬于羟甲基纤维素赋形剂 ) 5min ,对照组雾化吸入赋形剂和生理盐水。实时测量哮喘豚鼠肺功能参数 ,肺动态顺应性 (Cdyn)和肺阻力 (RL)的变化 ,作为反映哮喘严重程度的指标。结果 :基因组机制介导的糖皮质激素作用需要数小时才能起效 ,而抗原激发前雾化吸入糖皮质激素布地奈德在 10min内明显抑制了豚鼠支气管哮喘反应的Cdyn和RL变化 (P <0 .0 5 )。结论 :糖皮质激素布地奈德快速抑制豚鼠速发性哮喘 ,为研究糖皮质激素非基因组机制提供了直观的实验基础。

关键词：糖皮质激素非基因组哮喘肺功能

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大鼠脑外伤时嘌呤受体P2X4受体的表达

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解剖学杂志 2003年第3期26卷 203-208页

作者：向正华吕军蒋平焦炳华 Burnstock G 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 英国伦敦大学学院自主神经科学研究所

目的:观察大鼠脑外伤后嘌呤受体亚型P2X4的表达水平。方法:免疫组织化学和半定量RT-PCR。结果:脑外伤后P2X4受体表达水平迅速升高,并在损伤后较长的时间内维持高的表达水平;脑外伤早期,损伤区P2X4免疫反应阳性细胞主要是圆形细胞,中后... 详细信息

目的:观察大鼠脑外伤后嘌呤受体亚型P2X4的表达水平。方法:免疫组织化学和半定量RT-PCR。结果:脑外伤后P2X4受体表达水平迅速升高,并在损伤后较长的时间内维持高的表达水平;脑外伤早期,损伤区P2X4免疫反应阳性细胞主要是圆形细胞,中后期主要以具有突起的细胞为主。结论:脑外伤早期,损伤区P2X4受体免疫反应阳性细胞主要为小胶质细胞,中后期可能星形胶质细胞为多;由此推测P2X4参与脑外伤时大脑生理或病理生理功能的调节。

关键词：大鼠脑外伤嘌呤受体 P2X4 免疫组织化学细胞免疫反应 RT-PCR

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大鼠癫痫模型脑电信息的非线性分析

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生物医学工程学杂志 2003年第3期20卷 511-514页

作者：许敏光龙开平菅忠董秀珍杨继庆韩晟江文中国人民解放军第二炮兵总医院医学工程科北京100088 第四军医大学生物医学工程系物理教研室西安710033 第四军医大学生物医学工程系医学电子工程教研室西安710033 第四军医大学神经科学研究所西安710033 第四军医大学西京医院神经内科西安710033

为了探索应用非线性动力学理论进行癫痫疾病预报的新方法 ,采用非线性动力学指标 :近似熵和相关维对大鼠癫痫发作过程的整个脑电信号进行分析研究。结果显示癫痫发作时 ,脑电信号的近似熵和相关维明显低于发作前和发作后 ,这表明了癫痫... 详细信息

为了探索应用非线性动力学理论进行癫痫疾病预报的新方法 ,采用非线性动力学指标 :近似熵和相关维对大鼠癫痫发作过程的整个脑电信号进行分析研究。结果显示癫痫发作时 ,脑电信号的近似熵和相关维明显低于发作前和发作后 ,这表明了癫痫发作过程脑电信号复杂度的变化规律 ;而癫痫发作前又是一特殊的阶段 ,其脑电信号的复杂度已开始降低 ,但发作症状尚未出现。因此运用非线性动力学方法对癫痫发作至少在短期内可预报。

关键词：大鼠癫痫动物模型脑电信息非线性

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