检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2020年第5期41卷 513-519页

作者：袁媛张冠宇孙平新章越凡李铁军李文林安徽中医药大学研究生院药学系合肥230012 海军军医大学(第二军医大学)药学院药理学教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院细胞生物学教研室上海200433

目的采用成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术构建叉头框G1(FOXG1)基因敲除的人胚胎干细胞系,研究FOXG1基因在人胚胎干细胞早期神经诱导过程中的作用。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,通过转染2个... 详细信息

目的采用成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术构建叉头框G1(FOXG1)基因敲除的人胚胎干细胞系,研究FOXG1基因在人胚胎干细胞早期神经诱导过程中的作用。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,通过转染2个向导RNA(gRNA)诱导人胚胎干细胞FOXG1基因的大片段敲除,经单克隆筛选、测序分析和蛋白质印迹分析验证获得FOXG1基因敲除的人胚胎干细胞;通过细胞免疫荧光染色、qRT-PCR检测FOXG1基因敲除前后细胞在早期神经诱导过程中关键标志物配对框基因6(PAX6)、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)和正小齿同源物2(OTX2)的表达。结果利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功获得FOXG1基因大片段缺失的人胚胎干细胞,细胞免疫荧光染色、qRT-PCR结果均显示人胚胎干细胞早期神经诱导过程中的关键标志物PAX6、SOX2和OTX2的表达并未受FOXG1缺失的影响。结论通过2个gRNA共转染可以快捷地诱导人胚胎干细胞FOXG1基因的大片段敲除。FOXG1基因缺失并不影响人胚胎干细胞的早期神经诱导。

关键词： CRISPR/Cas9基因编辑叉头框蛋白G1 基因敲除人胚胎干细胞

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苦味酸类成分蛇麻酮和葎草酮对大鼠成骨细胞和破骨细胞的干预作用

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第二军医大学学报 2019年第1期40卷 25-30页

作者：夏天爽林柳悦蒋益萍张巧艳秦路平辛海量海军军医大学(第二军医大学)药学院生药学教研室上海200433

目的研究苦味酸类成分蛇麻酮和葎草酮对大鼠成骨细胞及破骨细胞活性的干预作用。方法以新生24 h的Wistar大鼠所分离的成骨细胞和破骨细胞为研究对象,设置对照组,蛇麻酮处理低(10-15mol/L)、中(10-14 mol/L)、高(10-13 mol/L)剂量组,以... 详细信息

目的研究苦味酸类成分蛇麻酮和葎草酮对大鼠成骨细胞及破骨细胞活性的干预作用。方法以新生24 h的Wistar大鼠所分离的成骨细胞和破骨细胞为研究对象,设置对照组,蛇麻酮处理低(10-15mol/L)、中(10-14 mol/L)、高(10-13 mol/L)剂量组,以及葎草酮处理低(10-15 mol/L)、中(10-14 mol/L)、高(10-13 mol/L)剂量组。药物处理后,分别用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)活性检测以及茜素红染色法评价蛇麻酮和葎草酮对成骨细胞增殖、分化及骨矿化水平的影响。采用破骨细胞计数以及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性检测评价蛇麻酮和葎草酮对破骨细胞活性的影响。采用试剂盒法检测骨钙素(OCN)水平,采用蛋白质印迹法检测骨形成相关蛋白骨桥蛋白(OPN)、骨涎蛋白(BSP)、骨形成蛋白(BMP-2)以及骨吸收相关蛋白组织蛋白酶K(CK)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,评价蛇麻酮和葎草酮在骨代谢调控方面的作用。结果在大鼠成骨细胞水平上,与对照组相比,蛇麻酮在10-15、10-14 mol/L浓度下可促进成骨细胞增殖(P<0.05),在10-14、10-13 mol/L浓度下可提高ALP活性以及骨矿化水平(P<0.05,P<0.01),在10-13 mol/L浓度下可促进OCN的表达(P<0.01),在10-14、10-13 mol/L浓度下可提高骨形成相关蛋白BSP和BMP-2的表达(P<0.05);葎草酮在10-15～10-13 mol/L浓度下可促进成骨细胞增殖、提高ALP活性以及骨矿化水平(P<0.01)、提高骨形成相关蛋白OCN、OPN的表达(P<0.05,P<0.01),在10-14、10-13 mol/L浓度下可促进BSP和BMP-2的表达(P<0.05)。在大鼠破骨细胞水平上,与对照组相比,蛇麻酮和葎草酮在10-15～10-13mol/L浓度下均可降低破骨细胞数目(P<0.01),抑制CK的表达(P<0.05,P<0.01);葎草酮在10-15～10-13 mol/L浓度下可抑制MMP-9的表达(P<0.05,P<0.01)。结论本研究在细胞水平上初步明确了蛇麻酮和葎草酮可通过促进成骨细胞骨形成、抑制破骨细胞骨吸收来防治骨丢失,为骨质疏松药物的开发提供了新资源。

关键词：苦味酸成骨细胞破骨细胞蛇麻酮葎草酮

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分散液液微萃取技术及其在生物样品分析中的研究进展

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色谱 2020年第5期38卷 491-501页

作者：施艺玮张宁操雯洪战英第二军医大学药学院药物分析学教研室上海市药物(中药)代谢产物研究重点实验室上海200433

分散液液微萃取是一种新型微萃取技术,具有易操作、低成本、耗时短、环境友好、萃取效率高等优点。该文着眼于分散液液微萃取技术中萃取剂的性质及辅助分散方式,综述了常规分散液液微萃取、离子液体分散液液微萃取、超声辅助分散液液微... 详细信息

分散液液微萃取是一种新型微萃取技术,具有易操作、低成本、耗时短、环境友好、萃取效率高等优点。该文着眼于分散液液微萃取技术中萃取剂的性质及辅助分散方式,综述了常规分散液液微萃取、离子液体分散液液微萃取、超声辅助分散液液微萃取等多种萃取模式,并重点归纳总结了近5年分散液液微萃取技术在生物样品分析领域的应用进展。

关键词：分散液液微萃取萃取剂分散方式生物样品综述

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巴戟天环烯醚萜苷类成分的制备及其对破骨细胞骨吸收的抑制作用

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第二军医大学学报 2019年第2期40卷 149-156页

作者：沈燚何玉琼张奇刘梦琴辛海量张泉龙秦路平张巧艳海军军医大学(第二军医大学)药学院生药学教研室上海200433 福建中医药大学药学院福州350122 浙江中医药大学药学院生药学教研室杭州310053

目的研究巴戟天中环烯醚萜苷类成分(Morinda officinalis iridoid glycosides,MOIG)的制备方法及其对破骨细胞骨吸收的抑制作用。方法用高效液相色谱(HPLC)法测定MOIG中水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸的含量;通过对AB-8、ADS-17、D101、H... 详细信息

目的研究巴戟天中环烯醚萜苷类成分(Morinda officinalis iridoid glycosides,MOIG)的制备方法及其对破骨细胞骨吸收的抑制作用。方法用高效液相色谱(HPLC)法测定MOIG中水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸的含量;通过对AB-8、ADS-17、D101、HPD400、HPD600、HP20、S-8、SP850、XDA-1、XDA-6等型号大孔吸附树脂进行静态吸附-解吸附实验筛选大孔树脂型号,并优化大孔树脂富集MOIG的条件;以由小鼠骨髓单核细胞诱导的破骨细胞为模型评价MOIG对骨吸收的抑制作用。结果经过优选,XDA-1型大孔树脂对MOIG有较好的吸附和解吸附作用,优化的XDA-1型大孔树脂富集MOIG的条件为:上样液中MOIG的质量浓度为19.15 mg/mL,p H值为1.0,树脂柱的径高比为1︰7,上样流速为2.0 BV/h(1 BV=80 mL),上样体积为0.75 BV,树脂吸附时间为11 h,7 BV水洗脱以除去其他的成分,10%乙醇以3.0 BV/h流速洗脱MOIG。验证试验结果表明,所制备的MOIG中水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸的总含量可达54%以上。MOIG对由小鼠骨髓单核细胞诱导的破骨细胞增殖无显著影响,但能抑制破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶活性,抑制破骨细胞的骨吸收(P<0.05,P<0.01)。结论 XDA-1型大孔树脂可用于富集MOIG,得到的水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸总含量在54%以上;MOIG可抑制破骨细胞的骨吸收。

关键词：巴戟天环烯醚萜苷大孔树脂破骨细胞骨吸收

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五脏浊论

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时珍国医国药 2019年第2期30卷 513-514页

作者：辛海量徐武牧第二军医大学药学院生药学教研室上海200433

目的基于中医理论分析及此前提出的"肾浊"观点,提出了心浊、肝浊、脾浊、肺浊致病的观点,阐述了五脏浊的来源和病因病机,并列举西医病症进行说明。五脏浊观点的提出,拓展了中医病因病机的认识。

关键词：心浊肾浊肝浊脾浊肺浊病因病机

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光敏型壳寡糖聚合物胶束的制备及其光响应性质考察

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中国医药工业杂志 2020年第10期51卷 1288-1295页

作者：张叶叶卢光照邹豪复旦大学附属中山医院药剂科上海200032 海军军医大学(第二军医大学)药学院药剂学教研室上海200433

采用化学合成法将连接光敏基团的十二烷基长链疏水段NMDB-ester连接至壳寡糖(COS)链上,合成了4种接枝率(40.3%、49.8%、58.1%、64.5%)的光敏型聚合物材料COS-NMDB。并且,基于该材料以透析法制备了载尼罗红(COS-NMDB-NR)胶束,初步筛选了... 详细信息

采用化学合成法将连接光敏基团的十二烷基长链疏水段NMDB-ester连接至壳寡糖(COS)链上,合成了4种接枝率(40.3%、49.8%、58.1%、64.5%)的光敏型聚合物材料COS-NMDB。并且,基于该材料以透析法制备了载尼罗红(COS-NMDB-NR)胶束,初步筛选了制备胶束的最佳溶剂及最适疏水段接枝率,同时研究了该胶束的光响应释药性质。结果表明,制备胶束的最佳溶剂为N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、最佳接枝率为49.8%(即合成产物COS-NMDB7.5)。所得胶束稳定性良好,其粒径、多分散系数和ζ电位分别为(55.0±2.3)nm、0.199±0.024和(29.0±1.3)mV。相比文献报道的光敏型壳寡糖材料COS-NB,COS-NMDB显示出更好的载药性能。紫外光响应性测试表明COS-NMDB胶束具有光响应释药行为;光照后,胶束解组装,其球状粒子形态坍塌,并释放出模型药物,可以作为光敏型药物载体进一步研究。

关键词：壳寡糖胶束光敏型聚合物制备载药性能光响应释药

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近红外光谱法快速测定甘草饮片中甘草酸和甘草苷的含量

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第二军医大学学报 2020年第8期41卷 921-925页

作者：高鸿彬刘浩夏厚浩宋洪杰海军军医大学(第二军医大学)长海医院药学部上海200433 广东食品药品职业学院药学院药物分析教研室广州510520 蚌埠医学院药学系蚌埠233030

目的利用近红外光谱法建立快速测定甘草饮片中甘草酸和甘草苷含量的模型。方法采用HPLC测定不同产地的甘草饮片中甘草酸和甘草苷的含量作为参考值,分别选取2200~2049、1750~1450、1151~1001 nm和1795~1475、1395~1293、1125~1030 nm波... 详细信息

目的利用近红外光谱法建立快速测定甘草饮片中甘草酸和甘草苷含量的模型。方法采用HPLC测定不同产地的甘草饮片中甘草酸和甘草苷的含量作为参考值,分别选取2200~2049、1750~1450、1151~1001 nm和1795~1475、1395~1293、1125~1030 nm波长范围的近红外光谱,利用偏最小二乘(PLS)回归分析结合交叉验证法,建立快速测定甘草饮片中甘草酸和甘草苷含量的模型。结果所建立的甘草酸和甘草苷含量校正模型的相关系数分别为0.980和0.919,交互验证均方差分别为0.184和0.144。结论近红外光谱法结合PLS法操作简便、快速、无损,适合大批甘草饮片中甘草酸和甘草苷的含量测定,为快速评价甘草饮片质量提供了一种新方法。

关键词：近红外光谱法甘草饮片甘草酸甘草苷快速测定

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淫羊藿苷对UMR-106成骨细胞和RAW264.7细胞诱导的破骨细胞蛋白质组学的影响

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中国药学杂志 2019年第4期54卷 268-273页

作者：沈燚祝峥张奇何玉琼吴岩斌张巧艳福建中医药大学药学院福州350122 中国医科大学沈阳110001 第二军医大学药学院生药学教研室上海200433

目的研究淫羊藿苷基于成骨细胞和破骨细胞蛋白质组学的抗骨质疏松作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞的增殖,ELISA法测定碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性,茜素红染色观察成骨细胞骨矿化结节的形成,以骨片上... 详细信息

目的研究淫羊藿苷基于成骨细胞和破骨细胞蛋白质组学的抗骨质疏松作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞的增殖,ELISA法测定碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性,茜素红染色观察成骨细胞骨矿化结节的形成,以骨片上形成的骨吸收陷窝的数目和面积表征破骨细胞的骨吸收活性,以二维凝胶电泳观察成骨及破骨细胞蛋白质组的变化,应用TOF/MS/MS对差异表达的蛋白进行鉴定。结果淫羊藿苷显著增加成骨细胞的骨形成,抑制破骨细胞的骨吸收,上调或下调成骨和破骨细胞各9个蛋白的表达。结论淫羊藿苷通过参与能量代谢、氧化应激、嘌呤合成和细胞生长分化的等生物学过程调控骨代谢。

关键词：淫羊藿苷成骨细胞破骨细胞蛋白质组学差异蛋白

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近红外光谱分析技术用于硫酸羟氯喹原辅料混合均匀度在线定量监测

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第二军医大学学报 2019年第9期40卷 995-1000页

作者：李沙沙赵云丽陆峰于治国沈阳药科大学药学院药物分析学教研室沈阳110016 海军军医大学(第二军医大学)药学院药物分析学教研室上海200433

目的建立在线监测硫酸羟氯喹原辅料混合均匀度的定量分析模型,以准确、快速判断混合终点。方法制备硫酸羟氯喹标示百分含量为70%~130%的原辅料混合物。采集近红外光谱,对原始光谱进行标准正则变换、一阶导数和Norris平滑处理,建模波段为... 详细信息

目的建立在线监测硫酸羟氯喹原辅料混合均匀度的定量分析模型,以准确、快速判断混合终点。方法制备硫酸羟氯喹标示百分含量为70%~130%的原辅料混合物。采集近红外光谱,对原始光谱进行标准正则变换、一阶导数和Norris平滑处理,建模波段为8 372~9 045 cm^1、5 616~6 058 cm^1,运用偏最小二乘回归建立定量分析模型。运用建立的定量分析模型预测硫酸羟氯喹在原辅料混合过程中的标示百分含量,以高效液相色谱法(HPLC)作为参考方法对混合终点进行验证。结果建立模型所用主因子数为5;模型的校正误差均方根为0.96,校正集相关系数Rc为0.998;预测误差均方根为0.97,验证集相关系数Rp为0.998;交互验证的校正误差均方根为1.56,交互验证相关系数Rcv为0.995。近红外模型的预测结果与HPLC验证结果相符。结论所建近红外定量分析模型可以用于硫酸羟氯喹原辅料混合均匀度的在线定量分析,能够准确、快速判断混合终点。

关键词：近红外光谱分析技术硫酸羟氯喹混合均匀度定量分析模型在线监测高效液相色谱法

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小鼠心梗模型的建立与早期心电图评价

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药学实践杂志 2020年第2期38卷 115-119页

作者：胡文君王品郑斯莉汪东昇缪朝玉第二军医大学/海军军医大学药学院药理学教研室上海200433

目的构建并优化小鼠心肌梗死模型,联合使用冠脉结扎术后即刻和术后4 h的两次肢体导联心电图对心梗发生情况进行早期评价。方法 C57BL/6J雄性小鼠29只,异氟烷吸入麻醉后,经左侧第3/4肋间进入胸腔,结扎冠状动脉左前降支建立模型,施行术后... 详细信息

目的构建并优化小鼠心肌梗死模型,联合使用冠脉结扎术后即刻和术后4 h的两次肢体导联心电图对心梗发生情况进行早期评价。方法 C57BL/6J雄性小鼠29只,异氟烷吸入麻醉后,经左侧第3/4肋间进入胸腔,结扎冠状动脉左前降支建立模型,施行术后即刻和术后4 h肢体导联心电图评价心梗发生情况。术后24 h打开胸腔观察梗死情况,留取心脏标本进行TTC染色确定梗死区域并计算梗死面积。结果小鼠行冠状动脉结扎术,术中死亡率为6.8%(2/29),术后早期(<4 h)死亡率为10.3%(3/29),24 h存活率为82.8%(24/29);术后24 h TTC染色明确梗死发生,则心梗模型建立,造模成功率为79.3%(23/29),平均梗死区域大小(梗死心肌重量/全心室重量)为(28±6)%;成功建立模型的小鼠在术后4 h心电图可见明显ST-T改变,提示心梗已发生。结论成功建立小鼠心肌梗死模型,且联合使用术后即刻和术后4 h两次心电图可以作为小鼠心肌梗死模型快速无创的评价方法。

关键词：心肌梗死小鼠动物模型心电图评价 TTC染色

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