检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2008年第2期29卷 156-161页

作者：蓝晓红徐添颖缪朝玉第二军医大学药学院药理学教研室上海200433

目的:制备一种尼古丁给药和撤药大鼠模型,通过三项相关指标评价该模型的特征与应用研究价值.方法:10～11周龄的雄性SD大鼠随机分为生理盐水组、尼古丁给药组和尼古丁撤药组3组.生理盐水组给生理盐水6周;尼古丁给药组给尼古丁(3 mg·... 详细信息

目的:制备一种尼古丁给药和撤药大鼠模型,通过三项相关指标评价该模型的特征与应用研究价值.方法:10～11周龄的雄性SD大鼠随机分为生理盐水组、尼古丁给药组和尼古丁撤药组3组.生理盐水组给生理盐水6周;尼古丁给药组给尼古丁(3 mg·kg-1·d-1)6周;尼古丁撤药组先给尼古丁(3 mg·kg-1·d-1)3周,随后改为给生理盐水3周.各组给药途径均为皮下注射,每日1次,给药容积为0.5 ml/kg,同时记录体质量、饮食量和饮水量的变化.造模后通过体质量、血清生化指标、各部位脂肪称量来评价该模型.结果:尼古丁给药后体质量下降;血清三酰甘油、胰岛素水平降低;皮下脂肪、内脏脂肪和主动脉周围脂肪质量减少;撤药后上述指标回升.结论:该模型可用于研究尼古丁的多种药理作用,以及吸烟、戒烟对机体的影响.

关键词：尼古丁吸烟吸烟戒断动物模型脂肪类体质量主动脉

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红花cDNA-AFLP反应体系的优化研究

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中草药 2008年第8期39卷 1242-1246页

作者：冯娜郭美丽张汉明第二军医大学药学院生药学教研室上海200433

目的为构建红花的遗传连锁图谱和功能基因的研究,探讨影响红花cDNA扩增片段长度多态性(cDNA amplified fragment length polymorphism,cDNA-AFLP)的各种因素,建立并优化红花cDNA-AFLP反应体系。方法以红花新鲜花瓣为材料,针对其内含物... 详细信息

目的为构建红花的遗传连锁图谱和功能基因的研究,探讨影响红花cDNA扩增片段长度多态性(cDNA amplified fragment length polymorphism,cDNA-AFLP)的各种因素,建立并优化红花cDNA-AFLP反应体系。方法以红花新鲜花瓣为材料,针对其内含物特殊性对Trizol法加以改进提取RNA,采用无RNase H活性的鼠源反转录酶(M-MLV RTase)结合置换合成法反转录双链cDNA;两步法酶切与连接,优化酶切时间;连接产物和预扩产物分别设置不同稀释倍数扩增并对选扩反应体系略微调整后,用6%的聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳分离,银染检测。结果改进Trizol法得到的红花总RNA样品较为完整,纯度较高,可直接用于双链的合成;经无RNase H活性反转录酶结合置换合成法得到高质量的cDNA模板。建立优化后的红花cDNA-AFLP体系为:250ng cDNA 37℃6 h经限制性内切酶MseI和EcoRI完全酶切,16℃连接12 h;连接产物最佳稀释倍数为10倍;预扩产物稀释为150倍;PAGE电泳得到清晰、稳定、分辨率较高的多态性条带。结论本研究建立的反应体系适用于红花功能基因的cDNA-AFLP研究。

关键词：红花 cDNA-AFLP 优化

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青葙SRAP体系的建立和优化

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中草药 2008年第2期39卷 263-266页

作者：郭庆华郭美丽薛芊冯娜张汉明第二军医大学药学院生药学教研室上海200433

目的探讨影响青葙SRAP(sequence-related amplified polymorphism)扩增的各种因素,建立并优化青葙SRAP反应体系,为分子水平鉴定青葙子及其伪品,探讨青葙不同种质间的亲缘关系奠定基础。方法用CTAB法提取青葙DAN,设计Taq酶浓度(0.02、0.0... 详细信息

目的探讨影响青葙SRAP(sequence-related amplified polymorphism)扩增的各种因素,建立并优化青葙SRAP反应体系,为分子水平鉴定青葙子及其伪品,探讨青葙不同种质间的亲缘关系奠定基础。方法用CTAB法提取青葙DAN,设计Taq酶浓度(0.02、0.04、0.06U/μL)、dNTP浓度(0.10、0.20、0.30mmol/L)、Primer浓度(0.15、0.30、0.45μmol/L)3水平3因素试验和Mg2+浓度(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mmol/L)8水平单因素试验。在25μL体系中加入模板DNA20ng,对体系进行优化,用琼脂糖进行检测。结果建立了适合青葙的SRAP体系,在25μL体系中,DNA为20ng,Taq酶浓度为0.04U/μL,dNTP浓度为0.30mmol/L,Primer浓度为0.30μmol/L,Mg2+浓度为2.5mmol/L,优化后的体系目标条带增多,且比较稳定,重现性好,得到了较好的扩增效果。结论本研究建立的反应体系适合青葙SRAP的研究。为从分子水平鉴定青葙子正品与伪品以及鉴定青葙不同种质资源奠定了基础。

关键词：青葙 SRAP 反应体系

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L-正缬氨酸不对称合成研究

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第二军医大学学报 2008年第3期29卷 324-325页

作者：张俊胡宏岗孙青 赵庆杰俞世冲徐建明吴秋业第二军医大学药学院有机化学教研室上海200433

目的:合成光学纯的L-正缬氨酸。方法:以正丁醛、氰化钾为起始原料,(S)-(-)-α-甲基苄胺作为手性辅助剂通过选择性Strecker反应制备光学纯度的氨基腈,再通过水解及脱苄制得光学纯的L-正缬氨酸。结果:通过对不同溶剂系统的选择获得了最佳... 详细信息

目的:合成光学纯的L-正缬氨酸。方法:以正丁醛、氰化钾为起始原料,(S)-(-)-α-甲基苄胺作为手性辅助剂通过选择性Strecker反应制备光学纯度的氨基腈,再通过水解及脱苄制得光学纯的L-正缬氨酸。结果:通过对不同溶剂系统的选择获得了最佳反应溶剂系统,并采用两次重结晶操作得到了光学纯度较高的L-正缬氨酸。结论:该方法步骤短、选择性强、收率高(47.4%)。

关键词： L-正缬氨酸合成不对称

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胰腺癌新基因S100P与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒载体的构建

引用

第二军医大学学报 2008年第10期29卷 1230-1233页

作者：李刚金钢周旭宇胡先贵王军李铁军第二军医大学长海医院普通外科上海200433 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433

目的:构建胰腺癌新基因S100P与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增获得S100P的全外显子片段,使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿梭质粒共转染293T细胞... 详细信息

目的:构建胰腺癌新基因S100P与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增获得S100P的全外显子片段,使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿梭质粒共转染293T细胞,包装成功后收集上清,浓缩,鉴定。取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和宿主胰腺癌细胞,荧光显微镜观察293T细胞的荧光表达,RT-PCR鉴定胰腺癌细胞中S100P的表达水平。结果:电泳鉴定结果与目的基因表达条带完全吻合,克隆测序结果与NCBI收录的S100P基因序列完全一致。重组慢病毒质粒可高效转染293T细胞,荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光。共转染后293T细胞上清可高效感染293T细胞,感染后宿主细胞中S100P高表达。结论:成功构建了S100P与GFP融合基因慢病毒表达载体,为进一步研究S100P基因的相关功能提供了适合的稳定转染载体。

关键词： S100P基因慢病毒胰腺肿瘤绿色荧光蛋白

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药物分析(Ⅱ)

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分析试验室 2008年第9期27卷 100-122页

作者：柴逸峰朱臻宇李翔第二军医大学药学院上海市200433 第二军医大学药学院药物分析教研室

对国内药物分析在2005—2006年的主要进展进行评述。内容包括高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法、薄层色谱法、分光光度法和其它分析方法等。另外，对高效液相色谱法和气相色谱法的不同联用技术进行分别评述。共引用文献3294篇。

关键词：药物分析综述

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人胸腺素α原cDNA序列多态性分析

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第二军医大学学报 2008年第1期29卷 92-94页

作者：弓雪莲郭葆玉郭满盈吕岩第二军医大学药学院生化药学教研室上海200433

目的：通过对人胸腺素α原（prothymosin-α，ProTa）cDNA测序来分析人胸腺素a原的序列多态性。方法：应用RT—PCR技术从健康人外周血及健康新生儿脐带血中扩增胸腺素α原cDNA，纯化后与克隆载体pMDl8-T连接，进行克隆测序，并与标准序... 详细信息

目的：通过对人胸腺素α原（prothymosin-α，ProTa）cDNA测序来分析人胸腺素a原的序列多态性。方法：应用RT—PCR技术从健康人外周血及健康新生儿脐带血中扩增胸腺素α原cDNA，纯化后与克隆载体pMDl8-T连接，进行克隆测序，并与标准序列比对，分析其多态性。结果：序列分析结果表明，克隆的ProTa基因的核苷酸序列并不一致。与已报道的胸腺素Q原基因（NM-002823）进行比较，发现存在2种变异：I类变异包括107位单核苷酸突变（A→G）、110～121位和191～205位的核苷酸片段缺失；Ⅱ类变异为306位单核苷酸（G）缺失，多见于年龄60-80岁者。结论：本研究中Pro Tα cDNA序列存在2种变异，但并未影响其N-端前28个氨基酸。

关键词：胸腺素α原 cDNA 序列分析

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遥控测压技术的两个关键问题

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中华高血压杂志 2008年第6期16卷 523-528页

作者：周小明王培徐权毅缪朝玉第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433

目的讨论在自发性高血压大鼠(SHR)上遥控测压技术的应用.测定遥控测压探头在不同温度下零点漂移值和压力敏感度的变化情况,并确定SHR植入探头术后恢复时间.方法一年期间.测定了探头在25℃和37℃时零点漂移值和压力敏感度.SHR及其正常... 详细信息

目的讨论在自发性高血压大鼠(SHR)上遥控测压技术的应用.测定遥控测压探头在不同温度下零点漂移值和压力敏感度的变化情况,并确定SHR植入探头术后恢复时间.方法一年期间.测定了探头在25℃和37℃时零点漂移值和压力敏感度.SHR及其正常对照Wistar-Kyoto(WKY)大鼠在探头植入腹主动脉后第7天和第14天记录22:00血流动力学和活动度指标.结果在两个不同温度下,开始时,测压探头的零点漂移值之间差异无统计学意义(P0.05),而压力敏感度之间差异有统计学意义(P<0.05);一年后.测压探头的零点漂移值之间、压力敏感度之间差异有统计学意义(P<0.05).一年中,随着使用时间和次数增加,测压探头的零点漂移值向负值发展[(从(-8.0±1.3)mmHg到(-14.8±1.6)mmHg,P<0.05],压力敏感度变化不大[从(2.4±0.3)%到(1.8±0.2)%].WKY、SHR的活动度和昼夜活动度差值在第14天与第7天之间差异无统计学意义,但收缩压、舒张压和平均动脉压在第14天的测量值高于第7天(P<0.05);SHR的收缩压波动性、舒张压波动性、昼夜心率差值在第14天的测量值高于第7天(P<0.05),而WKY的这些指标在第14天与第7天之间差异无统计学意义(P0.05).结论为了获得准确可靠的SHR血压数据,需要对遥控测压探头进行定标,而且应该在接近生理温度的37℃下进行定标.SHR在术后第14天时恢复得更好,在此时测量血流动力学比较合适.

关键词：遥控测压探头定标血流动力学大鼠手术恢复

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苯磺酸氨氯地平片人体药物动力学和相对生物利用度研究

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第二军医大学学报 2008年第11期29卷 1407-1409页

作者：李珍计一平闻俊康新范国荣唐世新杨武云第二军医大学长海医院临床药理研究室上海200433 第二军医大学药学院药物分析学教研室上海200433

目的:研究苯磺酸氨氯地平片在健康人体内的药物动力学和相对生物利用度,并与市售苯磺酸氨氯地平片进行生物等效性评价。方法:20例男性健康受试者双周期随机交叉单剂量口服10mg苯磺酸氨氯地平片受试制剂和参比制剂,两次试验间隔为2周,采... 详细信息

目的:研究苯磺酸氨氯地平片在健康人体内的药物动力学和相对生物利用度,并与市售苯磺酸氨氯地平片进行生物等效性评价。方法:20例男性健康受试者双周期随机交叉单剂量口服10mg苯磺酸氨氯地平片受试制剂和参比制剂,两次试验间隔为2周,采用LC/MS/MS法测定血浆中氨氯地平浓度。结果:受试制剂与参比制剂的血药浓度时间曲线基本一致,主要药代动力学参数Cmax分别为(9.72±0.90)和(9.57±0.96)ng/ml;tmax分别为(6.0±0.8)和(6.4±1.0)h;t1/2分别为(31.35±6.49)和(31.77±5.07)h;MRT分别为(46.63±6.54)和(47.15±5.72)h;Cl/F分别为(38.30±4.11)和(37.97±4.95)L/h;AUC0-96分别为(323.54±31.01)和(325.76±34.49)***/ml。结论:统计分析结果表明两种制剂具有生物等效性,受试制剂的相对生物利用度为(99.86±13.48)%。

关键词： LC/MS/MS法苯磺酸氨氯地平生物利用度药代动力学

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盐酸格拉司琼胶囊健康人体药代动力学研究

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第二军医大学学报 2008年第11期29卷 1395-1397页

作者：李珍杨武云范国荣闻俊王法财唐世新计一平第二军医大学长海医院临床药理研究室上海200433 第二军医大学药学院药物分析学教研室上海200433

目的:建立测定人血浆中格拉司琼浓度的LC/MS/MS法,并应用于健康人体药代动力学研究。方法:12例健康受试者单剂量口服2mg盐酸格拉司琼胶囊,LC/MS/MS法测定血浆中格拉司琼浓度,采用非房室模型统计矩法计算药代动力学参数。结果:单剂量口服... 详细信息

目的:建立测定人血浆中格拉司琼浓度的LC/MS/MS法,并应用于健康人体药代动力学研究。方法:12例健康受试者单剂量口服2mg盐酸格拉司琼胶囊,LC/MS/MS法测定血浆中格拉司琼浓度,采用非房室模型统计矩法计算药代动力学参数。结果:单剂量口服2mg盐酸格拉司琼胶囊后,主要的药代动力学参数Cmax、tmax、t1/2、MRT、Cl/F、AUC0-24和AUC0-∞分别为(6.93±1.90)ng/ml,(1.35±0.29)h,(5.59±1.87)h,(8.05±1.84)h,(54.23±16.08)L/h,(36.61±8.87)ng·h·ml-1和(39.32±9.36)ng·h·ml-1。结论:本分析方法的准确度、灵敏度、专属性及定量线性范围等均符合生物样品的分析要求,适用于盐酸格拉司琼胶囊的人体药代动力学研究。

关键词：盐酸格拉司琼 LC/MS/MS法药代动力学

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