检索结果-内蒙古大学图书馆

野生型和突变型小鼠动力蛋白激活蛋白1真核表达载体的构建及其在小鼠足细胞中的表达

第二军医大学学报 2012年第7期33卷 780-784页

作者：王春花李林傅鹏李金花原爱红孙向华蒋晓峰余晨同济大学附属同济医院肾内科上海200065 第二军医大学长征医院肾内科上海200003 江西省九江市中医医院肾六科九江332000 同济大学附属同济医院中心实验室上海200065

目的构建野生型和突变型小鼠动力蛋白激活蛋白1(dynactin-1)真核表达载体,并观察其在小鼠足细胞中表达。方法以总RNA反转录合成的cDNA为模板,通过PCR扩增得到小鼠dynactin-1的全长cDNA,将该片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)-FLAG和pEG... 详细信息

目的构建野生型和突变型小鼠动力蛋白激活蛋白1(dynactin-1)真核表达载体,并观察其在小鼠足细胞中表达。方法以总RNA反转录合成的cDNA为模板,通过PCR扩增得到小鼠dynactin-1的全长cDNA,将该片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)-FLAG和pEGFP-N1;利用部位特异性突变插入方法构建突变型表达载体,经酶切和测序鉴定;各载体转染小鼠足细胞MPC5后,用蛋白质印迹分析法和免疫荧光显微镜法检测dynactin-1蛋白表达。结果 PCR扩增得到大小为3.8kb的小鼠dynactin-1片段,连接到载体后,酶切鉴定电泳结果分别显示pcDNA3.1(+)-FLAG(5.4kb)、pEGFP-N1(4.7kb)以及小鼠dynactin-1(3.8kb)片段,测序分析结果显示克隆的野生型和突变型小鼠dynactin-1序列与数据库序列相同;蛋白质印迹分析法检测到重组dynactin-1的蛋白条带;免疫荧光显微镜观察到dynactin-1主要表达在小鼠足细胞的细胞质。结论成功构建了野生型和突变型小鼠dynactin-1真核表达载体,并在足细胞中表达,为进一步开展细胞生物学研究奠定了实验基础。

关键词：动力蛋白激活蛋白1 真核表达载体足细胞

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白念珠菌新型耐药基因IPF14744敲除质粒的构建

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中国真菌学杂志 2012年第4期7卷 199-202页

作者：谭宏月李平胡婵朱红梅顾军温海上海长征医院皮肤病与真菌病研究所全军真菌病重点实验室第二军医大学长征医院皮肤科上海200003 第二军医大学附属长海医院皮肤科上海200433

目的构建用于白念珠菌IPF 14744基因敲除的载体质粒。方法分别扩增白念珠菌IPF 14744基因ORF两侧上下游的片段,通过酶切与连接反应,将上下游片段分别插入到p5921质粒的hisG-URA 3-hisG盒两端,从而形成IPF 14744敲除载体质粒pUC-14744-UR... 详细信息

目的构建用于白念珠菌IPF 14744基因敲除的载体质粒。方法分别扩增白念珠菌IPF 14744基因ORF两侧上下游的片段,通过酶切与连接反应,将上下游片段分别插入到p5921质粒的hisG-URA 3-hisG盒两端,从而形成IPF 14744敲除载体质粒pUC-14744-URA 3。结果成功获得IPF 14744基因敲除载体质粒。结论所获得的质粒pUC-14744-URA 3可用于白念珠菌IPF 14744基因的敲除。

关键词：白念珠菌 IPF14744基因质粒

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儿童和青少年垂体瘤的临床诊治分析

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临床肿瘤学杂志 2012年第11期17卷 1028-1032页

作者：韩冲潘源陈高明丁学华刘志民第二军医大学长征医院内分泌科上海200003 解放军第401医院神经外科 266000 解放军92330部队医院B超室 266102 第二军医大学长征医院神经外科 200003

目的探讨儿童和青少年垂体瘤患者的临床资料和诊治特点。方法回顾性分析1989年至2010年收治的74例儿童和青少年垂体腺瘤患者的病历资料。结果 74例患者中46例(62.2%)发病于青春后期,平均发病年龄17.7岁;男女比例1∶1.85;肿瘤直径0.4～6.... 详细信息

目的探讨儿童和青少年垂体瘤患者的临床资料和诊治特点。方法回顾性分析1989年至2010年收治的74例儿童和青少年垂体腺瘤患者的病历资料。结果 74例患者中46例(62.2%)发病于青春后期,平均发病年龄17.7岁;男女比例1∶1.85;肿瘤直径0.4～6.0cm;海绵窦侵袭性肿瘤24例(2.4%);泌乳素瘤、无功能腺瘤、促肾上腺皮质激素腺瘤及生长激素腺瘤分别为43例(58.1%)、16例(21.6%)、10例(13.5%)和5例(6.8%)。24例海绵窦侵袭肿瘤患者中,男性14例,女性10例;43例泌乳素瘤患者男性9例,女性34例。74例患者最常见的临床表现为内分泌症状和视力障碍。所有患者均经手术治疗,术前仅9例患者曾接受多巴胺激动剂治疗,术后部分患者行多巴胺受体激动剂治疗和放疗,49例获随访,6例患者复发后再次手术治疗。32例视力障碍患者中有29例术后恢复正常或改善。结论儿童和青少年垂体瘤患者好发于青春后期,各类型肿瘤中男女发病比例不同。在儿童和青少年垂体瘤患者中需普及多巴胺受体激动剂治疗,多巴胺受体激动剂、手术及必要时予以放疗可使患者达到良好的治疗效果。

关键词：儿童青少年垂体腺瘤诊断治疗

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灾害医疗救援仿真模拟训练研究

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解放军医院管理杂志 2012年第5期19卷 490-492页

作者：毛建亭彭飞高宏杰陈活良解放军第451医院医务处西安710054 第二军医大学长征医院消毒供应科上海200003 第四军医大学卫生勤务学教研室西安710032

灾害给人类带来了巨大的人员伤亡与财产损失,灾害医学救援是减少人员伤亡的重要手段。灾害医学救援仿真模拟训练是解决当前灾害医学救援训练难题的有效途径之一。

关键词：虚拟现实视景仿真灾难救援模拟训练

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细胞内病原体抗性基因1的原核表达

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中国生物制品学杂志 2012年第4期25卷 426-428,436页

作者：佘茜徐蕾何永林靳志栋张丹杨春重庆医科大学病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆市神经生物学重点实验室重庆400016 第二军医大学长征医院检验科上海200003

目的构建细胞内病原体抗性基因1(Intracellular pathogen resistance 1,Ipr1)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达。方法以pMD19-T simple-Ipr1质粒为模板,采用PCR法扩增Ipr1基因,克隆至表达载体pET-32a(+)中,构建重组原核表达质粒pE... 详细信息

目的构建细胞内病原体抗性基因1(Intracellular pathogen resistance 1,Ipr1)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达。方法以pMD19-T simple-Ipr1质粒为模板,采用PCR法扩增Ipr1基因,克隆至表达载体pET-32a(+)中,构建重组原核表达质粒pET-32a(+)-Ipr1,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定构建正确;表达的重组Ipr1蛋白相对分子质量约为70 000,以1.5 mmol/L IPTG诱导4 h,目的蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的16%,重组Ipr1蛋白可与His标签单克隆抗体特异性结合。结论成功构建了Ipr1基因重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了重组Ipr1蛋白,为进一步探讨Ipr1蛋白的功能及Ipr1重组BCG的构建奠定了基础。

关键词：结核病细胞内病原体抗性基因1 原核细胞基因表达

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侧脑室引流术在隐球菌性脑膜脑炎早期治疗中的应用

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中国真菌学杂志 2012年第4期7卷 219-222页

作者：都琳杨雅骊黄晨雷文知廖万清温海陈江汉上海长征医院皮肤病与真菌病研究所全军真菌病重点实验室第二军医大学长征医院皮肤科上海200003

目的观察侧脑室引流术在隐球菌性脑膜脑炎早期治疗中的临床效果,探讨其有效性与安全性。方法对近年来我科治疗的5例初发隐球菌性脑膜脑炎伴高颅压患者的临床资料进行回顾性分析。结果 5例患者经早期行侧脑室引流后临床症状迅速缓解,撤... 详细信息

目的观察侧脑室引流术在隐球菌性脑膜脑炎早期治疗中的临床效果,探讨其有效性与安全性。方法对近年来我科治疗的5例初发隐球菌性脑膜脑炎伴高颅压患者的临床资料进行回顾性分析。结果 5例患者经早期行侧脑室引流后临床症状迅速缓解,撤除引流管后症状无加重;5例患者中无一例发生感染等并发症。联合抗真菌治疗后早期真菌学指标好转,长期随访中,4例患者临床治愈,无复发,1例死亡。结论侧脑室引流是隐球菌性脑膜脑炎早期治疗中快速、安全缓解头痛症状及减少并发症的有效手段。

关键词：隐球菌性脑膜脑炎侧脑室引流治疗

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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术在病原真菌检验中的应用进展

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中国真菌学杂志 2012年第5期7卷 312-315页

作者：张超廖万清上海长征医院皮肤病与真菌病研究所全军真菌病重点实验室第二军医大学长征医院皮肤科上海200003

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术是一种可用于检测大分子物质的"软电离"质谱分析技术,近年来在致病性真菌研究中的作用日显突出,该文对近几年该技术在病原真菌研究中的应用进展作一综述。

关键词：基质辅助激光解析电离质谱真菌

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抗SSA、SSB抗体的荧光特点和临床意义

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临床军医杂志 2012年第5期40卷 1117-1120页

作者：何铭珺杨再兴李畅王哲微杨洁叶伟民解放军第二军医大学长征医院实验诊断科全军医学免疫诊断中心全军临床免疫重点实验室上海200003

目的评价SSA、SSB抗体的荧光特点和临床意义,并探索在进行临床抗核抗体(ANA)筛查的过程中,鉴定这些抗体的必要性。方法对所有送检标本进行ANA和可提取性核抗原(ENA)检测,选择SSA、SSB阳性标本进行实验室和临床分析。结果在4 978个送检... 详细信息

目的评价SSA、SSB抗体的荧光特点和临床意义,并探索在进行临床抗核抗体(ANA)筛查的过程中,鉴定这些抗体的必要性。方法对所有送检标本进行ANA和可提取性核抗原(ENA)检测,选择SSA、SSB阳性标本进行实验室和临床分析。结果在4 978个送检样本中,259个样本抗SSA、SSB阳性,阳性样本分为SSA+SSB-、SSA-SSB+和SSA+SSB+三组。与SSA+SSB-组和SSA-SSB+组比较,SSA+SSB+组ANA阴性样本比例(0.5%)明显降低(P<0.01),而高滴度样本比例(53.5%)明显增高(P<0.01)。SSA和(或)SSB阳性样本除呈现颗粒型荧光外,还出现各种荧光核型。SSA+SSB+组颗粒型荧光的比例明显高于SSA+SSB-和SSA-SSB+(P<0.01)。与SSA+SSB-组相比,SSA+SSB+组患有干燥综合征(SS)的比例明显增高,患有其他疾病的比例明显降低。SSA-SSB+组共8例患者,所患疾病各不相同。结论临床上检测SSA、SSB抗体具有必要性,联合检测SSA和SSB抗体可以提高SS诊断特异性。

关键词：抗SSA抗体抗SSB抗体抗核抗体系统性红斑狼疮干燥综合征

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原发性渗出性淋巴瘤1例报告

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检验医学与临床 2012年第2期9卷 133-134,137页

作者：陈锟彭真萍黄涛上海市第一人民医院宝山分院检验科 200940 上海市第二军医大学长征医院血液科血液细胞室 200003

目的探讨原发性渗出性淋巴瘤(PEL)的临床、组织学特点。方法运用细胞形态学、免疫组化及流式细胞技术(FCM)方法研究1例经临床与病理确诊的PEL患者并结合文献进行讨论。结果该病的临床特点是有体腔积液如腹水、胸腔积液和心包积液,但没... 详细信息

目的探讨原发性渗出性淋巴瘤(PEL)的临床、组织学特点。方法运用细胞形态学、免疫组化及流式细胞技术(FCM)方法研究1例经临床与病理确诊的PEL患者并结合文献进行讨论。结果该病的临床特点是有体腔积液如腹水、胸腔积液和心包积液,但没有可检测到的肿块样病灶,浆膜渗出液中含高度恶性的淋巴细胞。此病多见于HIV感染的患者,也可发生于HIV血清学阴性的患者。结论进一步对本病的病理特征,临床特点加深了解,对提高本病的鉴别诊断、治疗大有裨益。

关键词：淋巴瘤原发性渗出性非霍奇金淋巴瘤

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正常成人振幅整合脑电图检测研究

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中国现代医学杂志 2011年第30期21卷 3802-3805,3810页

作者：邢鹏飞蒋珍珍吴维华赵忠新管军林兆奋周晖第二军医大学长征医院神经内科上海200003 第二军医大学长征医院脑电图室上海200003 第二军医大学长征医院急救科上海200003

目的观察安静清醒状态下正常成人脑电活动在振幅整合脑电图(aEEG)中的变化特点,初步建立参考值范围。方法经筛查后纳入成人志愿者60名,男性31名,女性29名,平均年龄(39.91±1.27)岁;在安静清醒状态下采用8通道中央导联的记录方式对... 详细信息

目的观察安静清醒状态下正常成人脑电活动在振幅整合脑电图(aEEG)中的变化特点,初步建立参考值范围。方法经筛查后纳入成人志愿者60名,男性31名,女性29名,平均年龄(39.91±1.27)岁;在安静清醒状态下采用8通道中央导联的记录方式对被检查者进行额叶、颞叶、顶叶、枕叶皮层脑电活动aEEG检测,每次监测时间30 min,各导联同步采集20例坐标数据进行定量分析。结果安静闭目清醒状态下,正常成人aEEG中额、颞、顶、枕四部位之间存在系统性差异,P<0.001;左右同名部位之间对比,P>0.05,差别无统计学意义;男女性别之间对比,P>0.05,差别无统计学意义;睁眼后,除额部记录导联外,颞、顶、枕部导联波形明显降低,比率分别为95%、93.3%和90%。安静闭目状态下两枕部相对频带功率谱以α频带功率为主,β、θ和δ频带功率比例均较低。结论正常成人aEEG不同部位之间的特点存在统计学差异,各部位参考值范围为aEEG在临床脑功能监护中的应用提供依据;相对频带功率观察可以迅速识别脑电活动变化,对aEEG判断有一定辅助作用。

关键词：振幅整合脑电图脑功能监护参考值范围

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