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2016中国器官移植大会暨第三届中国器官移植医师年会

作者：李培磊滕飞郭闻渊傅志仁第二军医大学附属长征医院器官移植/肝脏外科解放军器官移植研究所

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miR-29影响B细胞的功能及其在抗体介导的排斥反应中的作用和机制研究

miR-29影响B细胞的功能及其在抗体介导的排斥反应中的作用和机制...

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2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：张铭健郭猛郑楠薪展洋洋刘芳鲍蕾蕾丁国善曹雪涛王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所第二军医大学长征医院器官移植研究所

抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR),又称体液性排斥,主要由B细胞产生的供体特异性抗体(donor specific antibody,DSA)所引发。大量的证据表明,AMR是影响移植物长期存活的重要原因,但目前对于AMR的防治手段较少且效... 详细信息

抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR),又称体液性排斥,主要由B细胞产生的供体特异性抗体(donor specific antibody,DSA)所引发。大量的证据表明,AMR是影响移植物长期存活的重要原因,但目前对于AMR的防治手段较少且效果不佳。

关键词： miR-29 B细胞 AMR

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miR-199a/b-5p调控肝癌恶性生物学表型及其作用机制

miR-199a/b-5p调控肝癌恶性生物学表型及其作用机制

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2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：展洋洋郑楠薪腾飞郭文渊郭猛鲍蕾蕾丁国善王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所

研究背景：miRNAs在肝癌发生发展中具有重要的生物学功能，可以作为治疗和诊断潜在靶点。本研究中，通过分析TCGA数据库中肝细胞肝癌miRNA-Seq数据，发现miR-199a/b-5p在肝癌中显著的下调，而其生物学功能在肿瘤中尚未报道。

关键词： miR-199a b-5p ROCK1 增殖迁移肝细胞肝癌

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MBD2调控IL-8的产生在DSS诱导溃疡性肠炎中的作用机制

MBD2调控IL-8的产生在DSS诱导溃疡性肠炎中的作用机制

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2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：郭猛张铭健刘芳鲍蕾蕾展洋洋丁国善曹雪涛王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所

研究背景和目的：免疫细胞的甲基化调控成为关注的热点.前期实验中,利用CRISPR/Cas9敲除小鼠腹腔巨噬细胞中的甲基化相关结合蛋白2 (Methyl-CpG Binding Domain,MBD2)分子后,可显著降低LPS诱导的IL-8产生(0.127±0.011 v.s.1.086... 详细信息

研究背景和目的：免疫细胞的甲基化调控成为关注的热点.前期实验中,利用CRISPR/Cas9敲除小鼠腹腔巨噬细胞中的甲基化相关结合蛋白2 (Methyl-CpG Binding Domain,MBD2)分子后,可显著降低LPS诱导的IL-8产生(0.127±0.011 v.s.1.086±0.121),但其在炎症性疾病中的作用和机制不明确.

关键词： MBD2 免疫细胞肠炎

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MBD2调控IL-8的产生在DSS诱导溃疡性肠炎中的作用机制

MBD2调控IL-8的产生在DSS诱导溃疡性肠炎中的作用机制

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：郭猛张铭健刘芳鲍蕾蕾展洋洋丁国善曹雪涛王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所

研究背景和目的:免疫细胞的甲基化调控成为关注的热点。前期实验中,利用CRISPR/Cas9敲除小鼠腹腔巨噬细胞中的甲基化相关结合蛋白2(Methyl-CpG Binding Domain,MBD2)分子后,可显著降低LPS诱导的IL-8产生(0.127±0.011v.s.1.086±... 详细信息

研究背景和目的:免疫细胞的甲基化调控成为关注的热点。前期实验中,利用CRISPR/Cas9敲除小鼠腹腔巨噬细胞中的甲基化相关结合蛋白2(Methyl-CpG Binding Domain,MBD2)分子后,可显著降低LPS诱导的IL-8产生(0.127±0.011v.s.1.086±0.121),但其在炎症性疾病中的作用和机制不明确。本研究拟采用DSS诱导小鼠溃疡性肠炎损伤模型,阐明MBD2在DSS诱导小鼠溃疡性肠炎损伤中的作用机制。方法:采用3%DSS口服建立小鼠诱导性肠炎模型,观察并记录体重变化等指标,并以大便情况作为疾病活动度(DAI)评价;小鼠处死后进行结肠病灶病理组织显微镜检查评分(CMDI);利用FACS和免疫组化检测模型小鼠肠道粒细胞与单核/巨噬细胞浸润情况;qPCR检测肠道组织中细胞因子与趋化因子的表达情况;dispase消化法获取小鼠肠道上皮细胞,ChIP-Seq检测DSS处理前后MBD2所结合DNA片段的差异。结果:DSS诱导小鼠后,MBD2缺陷小鼠体重下降较对照组明显减弱;MBD2-/-小鼠DAI评分为1.35±0.50,对照组全部出现血便并伴随腹泻,DAI评分为3.00±1.00;小鼠处死后进行CMID评分,MBD2-/-为2.76±0.82,对照组为4.88±0.23;采用FACS和免疫组化检测模型小鼠肠道免疫细胞侵润情况,MBD2-/-小鼠中性粒细胞远低于对照组;qPCR检测肠道组织中细胞因子与趋化因子的表达情况,发现MBD2-/-小鼠肠道IL-8 mRNA水平远低于对照组(P<0.01),此外CXCL1和CXCL2的mRNA水平及TNF-α、IL-1β等细胞因子水平与对照组相比也明显下降;dispase消化法获取小鼠肠道上皮细胞,Ch IP-Seq检测DSS处理前后MBD2所结合DNA片段的差异,发现MBD2在IL-8上游非编码区域存在一段结合序列,推测这一序列可能是IL-8的顺式调控元件。进一步的调控IL-8的机制研究仍在进行中。结论:MBD2可调控免疫细胞IL-8的产生影响肠道炎症反应,在肠炎的形成中发挥重要作用。

关键词： MBD2 免疫细胞肠炎

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miR-199a/b-5p调控肝癌恶性生物学表型及其作用机制

miR-199a/b-5p调控肝癌恶性生物学表型及其作用机制

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：展洋洋郑楠薪腾飞郭文渊郭猛鲍蕾蕾丁国善王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所

研究背景:miRNAs在肝癌发生发展中具有重要的生物学功能,可以作为治疗和诊断潜在靶点。本研究中,通过分析TCGA数据库中肝细胞肝癌miRNA-Seq数据,发现miR-199a/b-5p在肝癌中显著的下调,而其生物学功能在肿瘤中尚未报道。方法:(1)利用TCG... 详细信息

研究背景:miRNAs在肝癌发生发展中具有重要的生物学功能,可以作为治疗和诊断潜在靶点。本研究中,通过分析TCGA数据库中肝细胞肝癌miRNA-Seq数据,发现miR-199a/b-5p在肝癌中显著的下调,而其生物学功能在肿瘤中尚未报道。方法:(1)利用TCGA临床随访数据,进行miR-199a/b-5p表达量与患者生存期间的COX回归分析;(2)采用qPCR在我器官移植中心40例肝癌样本和肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721中验证miR-199a/b-5p的表达模式;(3)肝癌细胞系中过表达miR-199a/b-5p,检测肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的变化;(4)预测的miR-199a/b-5p靶点并利用荧光报告系统进行验证;(5)在临床样本与肝癌细胞系中验证miR-199a/b-5p表达量与靶基因蛋白量的关联性;(6)建立miR-199a/b-5p高表达细胞株后裸鼠脾脏内注射,建立肝内转移模型,30天后检测肝内转移灶数目。结果:miR-199a/b-5p在肝癌组织和细胞系中显著(P<0.01);生存分析发现miR-199a/b-5p高表达提示预后良好(P<0.01);细胞系中过表达miR-199a/b-5p可显著抑制HepG2及SMMC-7721的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.01)。miRWalk预测miRNA靶点并结合双荧光报告结果,发现ROCK1为miR-199a/b-5p的靶点。临床样本与细胞系中的结果提示miR-199a/b-5p表达与ROCK1蛋白水平呈现负相关。miR-199a/b-5p过表达的SMMC-7721细胞脾内注射建立肝内转移模型,发现该miRNA过表达可显著抑制肝内转移灶的形成(P<0.01)。结论:miR-199a/b-5p可以通过负调控ROCK1表达抑制肝癌的生长与转移,miR-199a/b-5p可以作为治疗肝癌潜在靶点。

关键词： miR-199a/b-5p ROCK1 增殖迁移肝细胞肝癌

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miR-29影响B细胞的功能及其在抗体介导的排斥反应中的作用和机制研究

miR-29影响B细胞的功能及其在抗体介导的排斥反应中的作用和机制...

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：张铭健郭猛郑楠薪展洋洋刘芳鲍蕾蕾丁国善曹雪涛王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所

抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR),又称体液性排斥,主要由B细胞产生的供体特异性抗体(donor specific antibody,DSA)所引发。大量的证据表明,AMR是影响移植物长期存活的重要原因,但目前对于AMR的防治手段较少且效果不佳。在前期的研究中,我们通过构建mi R-29-sponge小鼠(GS29),

关键词： miR-29 B细胞 AMR

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整合素CD11b在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用及其机制

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中华器官移植杂志 2015年第3期36卷 141-146页

作者：汪笑宇朱有华赵闻雨曾力第二军医大学附属长征医院全军器官移植研究所上海200003

目的探讨整合素CDllb在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用及其可能的机制。方法使用CD11b缺陷（CD11b-／-组）的C57BL／6小鼠和正常C57BL／6小鼠（wT组），制作小鼠70％肝脏缺血再灌注损伤模型：维持小鼠体温为37℃，暴露肝叶后用无损伤... 详细信息

目的探讨整合素CDllb在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用及其可能的机制。方法使用CD11b缺陷（CD11b-／-组）的C57BL／6小鼠和正常C57BL／6小鼠（wT组），制作小鼠70％肝脏缺血再灌注损伤模型：维持小鼠体温为37℃，暴露肝叶后用无损伤显微血管夹阻断肝脏左叶和中叶血流60min，然后恢复肝脏左叶和中叶血流，最后缝合腹部切口；另设假手术组（CDllb叫一Sham组和wTSham组）作为对照。再灌注后1、3、6、12、24和48h取血液，检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平；肝组织样本行HE染色和凋亡检测；Trizol试剂盒一步法提取肝组织细胞总RNA，检测肿瘤坏死因子a（TNF-a）和白细胞介素10（IL-10）的表达情况；提取枯否细胞，检测还原性辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶活性及活性氧的生成情况。结果CDllb-／-组小鼠术后ALT、AST升高程度显著低于WT组小鼠（P〈O．05）。肝组织HE染色显示CD11b-/-组小鼠肝细胞坏死、充血和肿胀程度明显轻于wT组小鼠（P〈0．05）；CDlIb-／-组缺血再灌注后3h肝细胞凋亡比例为（22．8±5．8）％，低于WT组的（66．6±10．2）％，差异有统计学意义（P〈O．05）。CDllb-/-组小鼠TNF-α表达低于wT组小鼠，而IL-10表达却高于wT组小鼠（P〈O．05）。CD11b-/-组小鼠的NADPH氧化酶活性及活性氧产生均低于wT小鼠（P〈0．05）。结论整合素CDllb可以调控炎症因子（TNF-α）和抗炎症因子（IL-10）的释放，增强枯否细胞NADPH氧化酶的活性，继而影响活性氧的生成，最终加重肝脏缺血再灌注损伤。

关键词：缺血再灌注损伤抗原,CD11b 枯否细胞肝 tb鼠

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Tracing Donor-MHC Class II Reactive B cells in Mouse Cardiac Transplantation:Delayed CTLA-4Ig Treatment Prevents Memory Alloreactive B-cell Generation

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2016中国器官移植大会暨第三届中国器官移植医师年会

作者：杨璟辉傅志仁第二军医大学附属长征医院器官移植/肝脏外科解放军器官移植研究所

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再次肝移植38例经验

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中华普通外科杂志 2015年第7期30卷 532-534页

作者：金磊殷浩傅宏倪之嘉马钧郭闻渊施晓敏高小刚张玉静傅志仁丁国善第二军医大学附属长征医院解放军器官移植研究所上海200003 解放军第三○九医院康复科

目的总结再次肝移植的临床经验。方法回顾性分析1996年5月至2014年3月实施1246例同种异体原位肝移植中38例再次肝移植患者的诊治情况。结果再次肝移植患者38例，发生率为3．0％，其中2007年以前再次肝移植发生率为4．2％，2007年以后为2... 详细信息

目的总结再次肝移植的临床经验。方法回顾性分析1996年5月至2014年3月实施1246例同种异体原位肝移植中38例再次肝移植患者的诊治情况。结果再次肝移植患者38例，发生率为3．0％，其中2007年以前再次肝移植发生率为4．2％，2007年以后为2．1％，差异有统计学意义（χ2=4．519，P=0．034）。再次肝移植的原因主要是：胆道并发症（63．2％）、肝动脉血栓形成（10．5％）、原发病（肿瘤）复发（10．5％）。患者术后1、3、5年生存率分别为73．5％、59．8％和59．8％，根据首次肝移植和再次肝移植的间隔时间分组。30d内再移植组和30d后再移植组的术后累计生存率比较，差异无统计学意义（Log—Rank检验,χ2=0．125，P=0．724）。再移植的术后并发症主要是感染（44．7％）、急性排斥反应（26．3％）、胆道并发症（18．4％）、腹腔内出血（10．5％）、肝动脉栓塞（5．3％）和慢性排斥反应（5．3％）。围术期并发症主要是腹腔内出血和急性排斥反应。结论再次肝移植能有效挽救首次肝移植术后移植肝功能衰竭患者的生命。

关键词：肝移植存活率手术后并发症

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