检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2001年第4期41卷 408-414页

作者：任浩董辉朱分禄缪晓辉王文戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院感染科

利用PCR方法从输血传播性病毒(transfusion transmitted virus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段.将PCR扩增片段克隆到pT-Adv载体中,筛选获得阳性克隆.DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列.利用DNA... 详细信息

利用PCR方法从输血传播性病毒(transfusion transmitted virus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段.将PCR扩增片段克隆到pT-Adv载体中,筛选获得阳性克隆.DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列.利用DNA片段中特有的限制性内切酶位点将TTV的DNA片段首尾相连,得到近全长的基因组克隆,命名为TTV021.对TTV021的核酸序列进行分析,TFV021长3 472 nt,存在2个阅读框架ORF1和ORF2,分别编码785和146个氨基酸.将TTV021与其它已知的TTV基因组全序列进行了同源性比较,并进行进化分析.结果表明,TTV021序列与TTV分离株CHN2、BDH1的遗传距离较近,而与其它分离株相对较远.

关键词：输血传播性病毒克隆同源性进化分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

四环素调控白喉毒素基因的重组逆转录病毒载体的构建

引用

第二军医大学学报 2001年第z1期22卷 89-90页

作者：李玉光赵立军李强曹广文杨淑英陈秋莉潘卫戚中田刘忠令山东省济宁医学院附属医院呼吸内科济宁272129 第二军医大学长海医院呼吸内科第二军医大学长海医院呼吸内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院呼吸内科

　　将毒素基因导入肿瘤细胞内是肿瘤基因治疗一个较有前景的手段[1].白喉毒素(diphtheria toxin,DT)是由白喉杆菌分泌的一种单链多肽毒素,大多数哺乳类细胞均存在这种毒素的受体,其A片段(DTA)毒力特别强,它能催化不可逆转的ADP核糖酰基... 详细信息

　　将毒素基因导入肿瘤细胞内是肿瘤基因治疗一个较有前景的手段[1].白喉毒素(diphtheria toxin,DT)是由白喉杆菌分泌的一种单链多肽毒素,大多数哺乳类细胞均存在这种毒素的受体,其A片段(DTA)毒力特别强,它能催化不可逆转的ADP核糖酰基化,使肽链延长因子Ⅱ失活,从而抑制宿主细胞蛋白合成[2].Gossen等[3]提出了可调控型高表达系统(Tet系统),这为毒素基因治疗肿瘤开辟了新途径.Tet系统可分为 Tet-On和Tet-Off系统,前者的基因表达是在四环素加入后激活,而后者则是在四环素浓度逐渐降低的情况下激活.我们构建携带四环素系统调控的DTA基因的逆转录病毒载体,为进一步探讨肺癌的基因治疗奠定基础.……

关键词：白喉毒素四环素系统肺癌逆转录病毒载体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

携带HSV－tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建

引用

第二军医大学学报 1996年第2期17卷 101-104页

作者：高军曹广文戚中田仇小芳吴宗娣杜平杨文国崔龙第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子使之成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧＫ－ｔｋ质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因（... 详细信息

构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子使之成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧＫ－ｔｋ质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因（ｐｇｋ）启动子调控的ＨＳＶ－ｔｋ片段，克隆到ｐＭＮＭ的ＰＬ位点上，构建成普通型ＰＭＮｐ－ｔｋ逆转录病毒载体；从ｐＧＥＭ．７Ｚ－ＡＦＰｅ质粒中游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列，克隆到ｐＭＮｐ－ｔｋ的ｐｇｋ启动子上游，构建成人肝癌特异型ｐＭＮＡＰ－ｔｋ逆转录病毒载体。结论：该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义。

关键词：肝肿瘤基因治疗逆转录病毒载体 HSV-tk

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

原发性肝癌78例血清HCV　RNA和抗HCV的观察

引用

第二军医大学学报 1995年第2期16卷 130-131页

作者：崔晓红宋艳斌潘卫印慨陈汉钱光相戚中田吴孟超第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院肝胆外科

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了７８例原发性肝癌（ＰＬＣ）患者血清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ、抗ＨＣＶ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫学标志物。结果，ＨＣＶＲＮＡ、抗ＨＣＶ和... 详细信息

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了７８例原发性肝癌（ＰＬＣ）患者血清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ、抗ＨＣＶ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫学标志物。结果，ＨＣＶＲＮＡ、抗ＨＣＶ和ＨＢｓＡｇ的检出率分别为２，６％（２／７８）、１１．５％（９／７８）和７４．４％（５８／７８）；抗ＨＣＶ在ＨＢｓＡｇ阳性组和ＨＢｓＡｇ阴性组中的检出率分别为３．５％（２／５８）和３５％（７／２０）。提示，在江浙地区，ＨＢＶ感染仍是ＰＬＣ发生的主要危险因素。

关键词：肝肿瘤丙型肝炎病毒血清聚合酶链反应 ELISA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人肾细胞癌细胞的原代培养及癌基因表达初步分析

引用

第二军医大学学报 1999年第5期20卷 280-282页

作者：张晓琴曹广文侯建国戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院泌尿外科

目的：研究人肾细胞癌（ＲＣＣ）原代细胞生物学特性及其癌基因的表达情况。方法：应用改良的原代肿瘤细胞分离法分离培养７例人ＲＣＣ原代细胞。应用染色体核型分析和免疫组化方法，分析原代细胞核型以及癌基因与抑癌基因的表达。结果... 详细信息

目的：研究人肾细胞癌（ＲＣＣ）原代细胞生物学特性及其癌基因的表达情况。方法：应用改良的原代肿瘤细胞分离法分离培养７例人ＲＣＣ原代细胞。应用染色体核型分析和免疫组化方法，分析原代细胞核型以及癌基因与抑癌基因的表达。结果：用本法培养的原代细胞比其他常规方法所得细胞既多且纯。所培养的人ＲＣＣ原代细胞的癌基因表达分析发现ｂｃｌ－２，ｃ－ｅｒｂＢ－２，ｃ－ｍｅｔ，表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）有轻度至中度表达，而ｐ５３没有表达。结论：人ＲＣＣ原代培养及其癌基因表达检测，为应用原代ＲＣＣ所开展ｅｘｖｉｖｏ的ＲＣＣ基因治疗打下了初步的基础。

关键词：肾肿瘤原代培养癌基因肾细胞癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大肠癌组织CEA基因启动子序列克隆及与正常组织相应序列的比较

引用

第二军医大学学报 1997年第4期18卷 301-305页

作者：曹广文杜平崔龙高军潘欣戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究人类不同组织细胞中癌胚抗原（ＣＥＡ）产生与其基因顺式作用序列改变的关系，评价该顺式作用序列在大肠癌组织特异性基因治疗中的应用价值。方法：采用套式ＰＣＲ方法分别从人新鲜大肠癌、相应癌旁粘膜组织、正常血细胞、正... 详细信息

目的：研究人类不同组织细胞中癌胚抗原（ＣＥＡ）产生与其基因顺式作用序列改变的关系，评价该顺式作用序列在大肠癌组织特异性基因治疗中的应用价值。方法：采用套式ＰＣＲ方法分别从人新鲜大肠癌、相应癌旁粘膜组织、正常血细胞、正常胎盘组织及建株癌基因组中扩增ＣＥＡ基因启动子核心序列，ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法确定扩增序列可靠性。用ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）和ＤＮＡ序列分析方法确定扩增序列突变情况。用Ｂａｎｄ－Ｓｈｉｆｔ分析法检验扩增序列的启动子功能。结果：不同组织细胞基因组中的ＣＥＡ基因转录起始位点上游－１３０ｂｐ～＋６９ｂｐ的ＣＥＡ基因启动子核心序列区段未发现明显序列差异。大肠癌组织中ＣＥＡ基因的转录与大肠癌基因组中ＣＥＡ基因启动子核心序列无明显的对应关系。从大肠癌组织和正常组织ＤＮＡ中扩增出来的ＣＥＡ启动子序列与ＣＥＡ阳性的ＬｏＶｏ大肠癌细胞核蛋白提取物的结合能力一致，但不能与ＣＥＡ阴性的ＲＣ９４０６人肾癌细胞结合。结论：ＣＥＡ基因在大肠癌细胞中的特异转录不是由于ＣＥＡ基因启动子序列的突变。来源于正常细胞或者大肠癌细胞基因组的ＣＥＡ基因启动子均适合大肠癌组织特异性基因治疗。

关键词：大肠肿瘤癌胚抗原基因启动子基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素2的诱生能力

引用

第二军医大学学报 1995年第2期16卷 149-151页

作者：李淑德许国铭郑杭民张洪富第二军医大学长海医院消化内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

应用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法，测定３０例胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生能力。结果表明，胃癌患者ＩＬ－２诱生能力显著低于正常对照（Ｐ＜０．０１）及胃慢性良性病者（Ｐ＜０．０１）；随肿瘤进展，ＩＬ－２... 详细信息

应用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法，测定３０例胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生能力。结果表明，胃癌患者ＩＬ－２诱生能力显著低于正常对照（Ｐ＜０．０１）及胃慢性良性病者（Ｐ＜０．０１）；随肿瘤进展，ＩＬ－２诱生能力逐渐降低（Ｐ＜０．０１）；肿瘤分化越差，ＩＬ－２诱生能力则越低（Ｐ＜０．０１）；血清可溶性ＩＬ－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）与ＩＬ－２诱生能力呈负相关（γ＝－０．７６３１，Ｐ＜０．０１）；去除肿瘤负荷，可降低血清ｓＩＬ－２Ｒ和升高ＩＬ－２诱生水平。

关键词：白细胞介素白细胞胃肿瘤单个核细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

逆转录病毒介导的人肝癌特异性HSV－tk／ACV的体外抗肝癌作用

引用

第二军医大学学报 1996年第6期17卷 505-508页

作者：高军曹广文戚中田吴宗娣杜平仇小芳崔龙杨文国第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果：构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，... 详细信息

目的：建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果：构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法证明ＨＳＶ－ｔｋ基因在ＡＦＰ高分泌的ＨｅｐＧ２细胞中得到特异转录，以阿昔洛韦（ＡＣＶ）为前药攻击转基因的肝癌细胞显示对ＨｅｐＧ２有相对选择性杀伤作用。结论：该ＡＦＰｅ／ＨＳＶ－ｔｋ／前药转换疗法为肝癌特异性基因治疗提供了有价值的资料。

关键词：肝肿瘤胸苷激酶甲胎蛋白增强子基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

裸鼠体内组织特异性胞嘧啶脱氨酶抗人类肿瘤的基因治疗

引用

第二军医大学学报 1998年第4期19卷 319-322页

作者：曹广文崔龙高军戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病... 详细信息

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病毒产生细胞和５－ＦＣ治疗人肝癌裸鼠模型，并用ＰＣＲ法确定体内基因转移效果，骨髓涂片检查体内基因治疗对造血细胞的影响。结果：转ＣＤ基因对ＬｏＶｏ细胞的致瘤性无影响，全身给予５－ＦＣ治疗６０ｄ，转ＣＤ基因的大肠癌肿瘤明显缩小；ＣＥＡ启动子调控的ＣＤ（ＣＥＡ／ＣＤ）基因修饰的ＬｏＶｏ细胞形成的肿瘤在５－ＦＣ作用下消退。重组病毒在体内可以感染肿瘤、骨髓细胞，给予５－ＦＣ后取得了一定的抗肝细胞癌效果。ＣＥＡ／ＣＤ治疗组未发现明显的骨髓抑制，而ＬＴＲ调控ＣＤ的治疗组出现了明显的骨髓抑制。结论：组织特异性转录调控序列调控的ＣＤ基因体内基因治疗，较普通启动子调控的ＣＤ基因具有明显的安全性和有效性。

关键词：大肠肿瘤肝肿瘤胞嘧啶脱氨酶基因治疗裸鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

引用

第二军医大学学报 2003年第9期24卷 937-940页

作者：刘善荣王庆敏杨玲汤淑萍惠宁蒋正戚中田刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院妇产科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 详细信息

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因 Oct4 克隆基因克隆基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：