检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1996年第3期17卷 216-218页

作者：崔龙曹广文王元和屠岳孟荣贵高军仇小芳吴宗娣第二军医大学长海医院普通外科第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院普通外科

目的：为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达，以达到靶向基因治疗的目的，首先构建以ＣＥＡ基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。方法：将目的基因片段ＨＳＶ－ｔｋ定向克隆入ｐＵＣ１１８质粒载体中，以相应的内切酶取出合适... 详细信息

目的：为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达，以达到靶向基因治疗的目的，首先构建以ＣＥＡ基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。方法：将目的基因片段ＨＳＶ－ｔｋ定向克隆入ｐＵＣ１１８质粒载体中，以相应的内切酶取出合适的酶切片段后，与来自ｐＣＥＡ４２４／２ＣＡＴ质粒的ＣＥＡ５＇转录调控序列相连接，克隆入逆转录病毒载体中。结果：经鉴定及筛选，构建成重组逆转录病毒载体Ｇ１ＣＥＡｔｋＮａ。结论：Ｇ１ＣＥＡｔｋＮａ的成功构建，为进一步研究大肠癌组织特异性基因治疗奠定了基础。

关键词：单纯疱疹病毒大肠肿瘤逆转录病毒病毒载体

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携带HuIFN－β　cDNA的重组逆转录病毒载体的构建及在人肝癌细胞中的特异表达

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 301-305页

作者：曹广文杜平杨文国戚中田孔宪涛上海第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海第二军医大学长征医院实验诊断科

目的：研究逆转录病毒介导干扰素基因转移及在肝癌细胞中特异表达作用。方法：将人β干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＰＬ位点，分别构建了转录受ＳＶ４０启动子驱动的载体ＭＮＳＩＦＮＢ和转录受人甲胎蛋白增强... 详细信息

目的：研究逆转录病毒介导干扰素基因转移及在肝癌细胞中特异表达作用。方法：将人β干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＰＬ位点，分别构建了转录受ＳＶ４０启动子驱动的载体ＭＮＳＩＦＮＢ和转录受人甲胎蛋白增强子（ＡＦＰｅ）调控的载体ＭＮＡＩＦＮＢ。用脂质体转染法将载体分别转导ＰＡ３１７包装细胞，质粒转染率为每１０５ＰＡ３１７细胞（４～２５）×１０３ＣＦＵ／μｇ，病毒感染率（４．５～５００）×１０４ＣＦＵ／ｍｌ。重组病毒在４μｇ／ｍｌｐｏｌｙｂｒｅｎｅ存在条件下感染人肝癌、肾癌及黑色素瘤细胞。结果：ＮｅｏＲ克隆ＲＮＡ斑点杂交及ＩＦＮ活性分析证明，人ＡＦＰｅ可促进异源启动子启动ＨｕＩＦＮ－β基因在合成ＡＦＰ的人肝癌细胞中高效特异转录和表达。结论：ＡＦＰ＂持家基因＂顺式调控序列在合成ＡＦＰ的肝癌细胞中特异驱动ＩＦＮ－β基因表达，该研究为肝癌特异性免疫基因治疗提供了资料。

关键词： β干扰素逆转录病毒载体肝肿瘤基因治疗 cDNA

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IL－2和TNF特异性基因治疗后肝癌组织病理及免疫组化分析

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第二军医大学学报 1996年第6期17卷 509-512页

作者：曹广文余永伟沈茜杜平杨文国孔宪涛戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院病理诊断科第二军医大学长海医院实验诊断科第二军医大学长征医院临床免疫中心

目的：探讨ＴＮＦ和ＩＬ－２基因治疗后实验性肝癌瘤体内细胞水平的改变。方法：应用病理检查和免疫组化分析对ＩＬ－２和ＴＮＦ转基因治疗后的实验性肝癌病理改变及免疫细胞浸润进行分析。结果：发现受白蛋白增强子／启动子转录调控的... 详细信息

目的：探讨ＴＮＦ和ＩＬ－２基因治疗后实验性肝癌瘤体内细胞水平的改变。方法：应用病理检查和免疫组化分析对ＩＬ－２和ＴＮＦ转基因治疗后的实验性肝癌病理改变及免疫细胞浸润进行分析。结果：发现受白蛋白增强子／启动子转录调控的ＩＬ－２和ＴＮＦ基因在原位感染实验性肝癌可使肝癌逐渐缩小。ＴＮＦ基因可使肝癌组织内广泛出血坏死，Ｍａｃ－１＋炎细胞浸润为主；ＩＬ－２基因可使肝癌组织内大片坏死，Ｌｙｔ２＋炎细胞浸润，两组治疗后期均出现明显的纤维化。结论：ＩＬ－２或ＴＮＦ肝癌特异性原位基因治疗介导免疫抗肿瘤反应，但机理有所不同。

关键词：肝肿瘤基因治疗肿瘤坏死因子白细胞介素2

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原发性肝癌78例血清HCV　RNA和抗HCV的观察

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 130-131页

作者：崔晓红宋艳斌潘卫印慨陈汉钱光相戚中田吴孟超第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院肝胆外科

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了７８例原发性肝癌（ＰＬＣ）患者血清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ、抗ＨＣＶ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫学标志物。结果，ＨＣＶＲＮＡ、抗ＨＣＶ和... 详细信息

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了７８例原发性肝癌（ＰＬＣ）患者血清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ、抗ＨＣＶ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫学标志物。结果，ＨＣＶＲＮＡ、抗ＨＣＶ和ＨＢｓＡｇ的检出率分别为２，６％（２／７８）、１１．５％（９／７８）和７４．４％（５８／７８）；抗ＨＣＶ在ＨＢｓＡｇ阳性组和ＨＢｓＡｇ阴性组中的检出率分别为３．５％（２／５８）和３５％（７／２０）。提示，在江浙地区，ＨＢＶ感染仍是ＰＬＣ发生的主要危险因素。

关键词：肝肿瘤丙型肝炎病毒血清聚合酶链反应 ELISA

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胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素2的诱生能力

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 149-151页

作者：李淑德许国铭郑杭民张洪富第二军医大学长海医院消化内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

应用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法，测定３０例胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生能力。结果表明，胃癌患者ＩＬ－２诱生能力显著低于正常对照（Ｐ＜０．０１）及胃慢性良性病者（Ｐ＜０．０１）；随肿瘤进展，ＩＬ－２... 详细信息

应用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法，测定３０例胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生能力。结果表明，胃癌患者ＩＬ－２诱生能力显著低于正常对照（Ｐ＜０．０１）及胃慢性良性病者（Ｐ＜０．０１）；随肿瘤进展，ＩＬ－２诱生能力逐渐降低（Ｐ＜０．０１）；肿瘤分化越差，ＩＬ－２诱生能力则越低（Ｐ＜０．０１）；血清可溶性ＩＬ－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）与ＩＬ－２诱生能力呈负相关（γ＝－０．７６３１，Ｐ＜０．０１）；去除肿瘤负荷，可降低血清ｓＩＬ－２Ｒ和升高ＩＬ－２诱生水平。

关键词：白细胞介素白细胞胃肿瘤单个核细胞

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人白细胞介素2、β干扰素基因逆转录病毒载体的构建和在人肾细胞癌及其TIL中的表达

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第二军医大学学报 1995年第3期16卷 206-211页

作者：曹广文侯建国李光辉杜平杨文国戚中田吴宗娣仇小芳廖国强夏广彬钱松溪郑家富马永江孔宪涛第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院泌尿外科第二军医大学长征医院实验诊断科

从ｐｃＤ－５．１质粒和ｐＳＰＧＮＨＩＦＮＢ１０质粒分别切下人白细胞介素２（ＨｕＩＬ－２）ｃＤＮＡ和人β干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）ｃＤＮＡ，分别克隆到ｐＮＭＳＭ逆转录病毒载体多克隆位点，经酶切鉴定确定正确插入方向。经ＰＡ... 详细信息

从ｐｃＤ－５．１质粒和ｐＳＰＧＮＨＩＦＮＢ１０质粒分别切下人白细胞介素２（ＨｕＩＬ－２）ｃＤＮＡ和人β干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）ｃＤＮＡ，分别克隆到ｐＮＭＳＭ逆转录病毒载体多克隆位点，经酶切鉴定确定正确插入方向。经ＰＡ３１７包装细胞包装成重组病毒，测转染效率。用ＮＩＨ／３Ｔ３细胞测重组病毒感染效率。在８μｇ／ｍｌ鱼精蛋白存在的条件下分别感染人新鲜肾透明细胞癌体外建株细胞以及人肾细胞癌肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）。经Ｇ４１８选择阳性克隆后测上清表达ＨｕＩＬ－２及ＨｕＩＦＮ－β活性。结果ＨｕＩＬ－２和ＨｕＩＦＮ分别在转ＨｕＩＬ－２基因和ＨｕＩＦＮ－β基因肾细胞癌细胞的表达量达２５０Ｕ／１０６细胞·ｄ－１和６４００Ｕ／１０６细胞·ｄ－１，在经目的基因转染ＴＩＬ细胞中的表达量分别比未经目的基因转染的ＴＩＬ高２～３倍和４～８倍。ＴＩＬ生长状况未有明显改变，抗肿瘤活性未见明显增强。

关键词：白细胞介素 β干扰素转基因肾肿瘤基因表达

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灵杆菌细胞壁成分CWF－Ⅰ的提取、纯化以及体外抗肿瘤作用

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第二军医大学学报 1995年第5期16卷 429-433页

作者：焦炳华赵虎周凯余伟明周丙荣许伟群王梁华第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院实验诊断科福建医学院微生物学教研室

应用有机溶剂（氯仿－甲醇－石油醚，４∶１∶１，２０ｇ／１５０ｍｌ）萃取法从干燥的灵杆菌（粘质沙雷菌Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）或其粗制内毒素中提取得到了一种在体外具有显著抗肿瘤作用的非内毒素成分（Ｃｅｌｌｗ... 详细信息

应用有机溶剂（氯仿－甲醇－石油醚，４∶１∶１，２０ｇ／１５０ｍｌ）萃取法从干燥的灵杆菌（粘质沙雷菌Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）或其粗制内毒素中提取得到了一种在体外具有显著抗肿瘤作用的非内毒素成分（Ｃｅｌｌｗａｌｌｆｒａｃｔｉｏｎ－Ⅰ，ＣＷＦ－Ⅰ），该成分进一步经制备性硅胶Ｇ薄层层析分离可得到层析纯的单一ＣＷＦ－Ⅰ成分。应用该成分对肿瘤细胞的杀伤作用进行了光镜，以及扫描和透射电镜等形态学研究。

关键词：粘质沙雷菌细胞壁成分分离提纯抗肿瘤药

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肝细胞癌和癌旁肝组织中HCV　RNA正、负链的检测

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第二军医大学学报 1995年第5期16卷 401-404页

作者：崔晓红吴孟超张晓华潘卫印慨宋艳斌裴红伟陈汉戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院东方肝胆外科研究所

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝癌及癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的正、负链。结果显示：肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正、负链的检出率分别为５４．８％和３５．７％；ＨＣＶＲＮ... 详细信息

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝癌及癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的正、负链。结果显示：肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正、负链的检出率分别为５４．８％和３５．７％；ＨＣＶＲＮＡ的正链和负链在肝癌和癌旁肝组织中，同时阳性的患者分别占４５．２％和３１．０％；血清ＨＣＶＲＮＡ和抗ＨＣＶ阴性者肝组织中ＨＣＶＲＮＡ的检出率仍有５１．３％；肝组织ＨＣＶＲＮＡ与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的感染状态无显著相关。提示，ＨＣＶ感染可能是ＨＣＣ发生的另一病原学因素；血清ＨＣＶＲＮＡ和抗ＨＣＶ阴性时不能排除体内存在ＨＣＶ感染的可能性。

关键词：肝肿瘤丙型肝炎病毒逆转录聚合酶链反应

来源：评论

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原发性肝癌患者肝组织中HCV　RNA和HCV抗原的定位

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 123-126页

作者：崔晓红戚中田宋艳斌潘卫王一丛文铭张秀忠李淋郝连杰吴孟超第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院肝胆外科同济医科大学同济医院临床免疫室

分别用原位杂交（ＩＳＨ）和过氧化物酶与抗过氧化物酶复合物（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原（ＨＣＶＡｇ）以及乙型肝炎病毒的表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和核心... 详细信息

分别用原位杂交（ＩＳＨ）和过氧化物酶与抗过氧化物酶复合物（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原（ＨＣＶＡｇ）以及乙型肝炎病毒的表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和核心抗原（ＨＢｃＡｇ）。结果显示：ＨＣＶＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检出率分别为２６．０％，２８．８％，７５．３％和２６．。％；ＨＣＶ阳性的肝细胞多呈散在型分布，可见有水肿变性并伴周围炎细胞浸润，ＨＣＶ染色颗粒既可见于肝细胞浆也可见于细胞核；ＨＣＶ标志物（ＨＣＶＭ）的检出与ＨＢＶ的感染状况无显著相关。提示：ＨＣＶ可在ＨＣＣ患者的肝细胞浆和核中存在并表达，ＨＣＶ感染可能在我国ＨＣＣ的发生中起一定的病原学作用。

关键词：肝肿瘤丙型肝炎病毒原位杂交免疫酶技术 RNA

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改良酚－胍法提取大鼠肝组织总RNA

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 24-24页

作者：纪徐淮潘卫崔晓红戴晓晶李石第二军医大学长征医院消化内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

改良酚－胍法提取大鼠肝组织总ＲＮＡ纪徐淮，潘卫，崔晓红，戴晓晶，李石提取组织细胞中总ＲＮＡ是进行点印迹（Ｄｏｔｂｌｏｔ）、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹（Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ）杂交的必经步骤。常用的方法为胍－氯化铯离心法与... 详细信息

改良酚－胍法提取大鼠肝组织总ＲＮＡ纪徐淮，潘卫，崔晓红，戴晓晶，李石提取组织细胞中总ＲＮＡ是进行点印迹（Ｄｏｔｂｌｏｔ）、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹（Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ）杂交的必经步骤。常用的方法为胍－氯化铯离心法与盐酸胍－有机溶剂提取法，尽管这两种...

关键词：肝 RNA 酚-胍法提取

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