检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2003年第2期24卷 188-191页

作者：严鸣毛积芳钟纪根何建朱秋峰娄淑杰徐仁宝第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433 基础医学部生物化学与分子生物学教研室长海医院急救科长征医院麻醉科基础医学部神经生物学教研室

目的 :构建并表达巨噬细胞分化抗原 1(Mac- 1)的 α链 CD11b与蓝色荧光蛋白 (BFP)的融合蛋白 CD11b- BFP,为进一步直视研究 Mac- 1在白细胞内的分布、走向及归宿提供物质条件。方法 :首先将 CD11b的全长 c DNA进行酶切并获得 2个片段 ,... 详细信息

目的 :构建并表达巨噬细胞分化抗原 1(Mac- 1)的 α链 CD11b与蓝色荧光蛋白 (BFP)的融合蛋白 CD11b- BFP,为进一步直视研究 Mac- 1在白细胞内的分布、走向及归宿提供物质条件。方法 :首先将 CD11b的全长 c DNA进行酶切并获得 2个片段 ,将其中含有终止密码的片段作为模板 ,通过设计引物进行 PCR,获得不含有终止密码的该片段 ,然后与另一片段进行连接 ,形成不含有终止密码的 Mac- 1全长 c DNA,将其插入到表达载体 p EBFP- N1中 ,构建完成 CD11b- BFP融合基因 ,最后将其转染至 U937细胞株中 ,通过荧光显微镜观察与流式细胞术检测 Mac- 1的表达及其黏附活性来进行鉴定。结果 :经酶切鉴定 ,p CD11b- BFP构建完全正确 ,转染 U937细胞株后 ,可见 CD11b- BFP融合蛋白发出的蓝色荧光。结论 :构建完成 CD11b-BFP融合基因并在

关键词：巨噬细胞分化抗原1 蓝色荧光蛋白融合蛋白

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肌肉游离移植后烟碱型乙酰胆碱受体ε和γ亚单位表达的变化及意义

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中华显微外科杂志 2005年第2期28卷 156-158页

作者：张盈帆江华林子豪蔡在龙吴包金上海市第二军医大学附属长征医院整形外科 200003 上海市第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的在基因水平上定量的观察肌肉游离移植后冲经肌肉接头烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)ε和γ亚单位基因表达的动态变化情况,探讨移植后肌肉功能减退与nAChRγ和ε亚单位基因变化之间的可能关系。方法以正常Wistar大鼠股薄肌为对照,利用荧... 详细信息

目的在基因水平上定量的观察肌肉游离移植后冲经肌肉接头烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)ε和γ亚单位基因表达的动态变化情况,探讨移植后肌肉功能减退与nAChRγ和ε亚单位基因变化之间的可能关系。方法以正常Wistar大鼠股薄肌为对照,利用荧光定量RT-PCR的方法分别检测肌肉移植术后不同时间肌肉样本内ε和γ亚单位mRNA的表达。结果肌肉移植后ε和γ亚单位mRNA表达的拷贝数均是先增高后减少。ε亚单位mRNA表达的拷贝数存术后第3周降到最低后又逐渐增高,但到术后晚期仍低于对照组的水平,差异有统计学意义(P<0.05),而γ亚单位mRNA的拷贝数自术后第2周后开始减少,到术后30周时未完全消失,仍保持低水平的表达。结论终板区亚单位基因的表达变化可能与肌肉游离移植后nAChR的数量减少及功能降低有关系。

关键词：烟碱型乙酰胆碱受体移植后亚单位表达游离 Wistar大鼠 mRNA表达 nAChR 神经肌肉接头亚单位基因拷贝数变化情况基因表达基因水平基因变化功能减退不同时间移植术后荧光定量完全消失表达变化股薄肌 PCR 对照组

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SMO保存液对犬肾低温保存期间皮质细胞凋亡的影响

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第二军医大学学报 2006年第10期27卷 1059-1062页

作者：牛强朱有华于常虎罗明缪明永第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003 基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的：探讨自制上海多器官保存液（Shanghai multi-organ preservation solution,SMO液）对低温保存期间犬肾皮质细胞凋亡的影响,以探讨SMO液的作用机制.方法：犬肾分别以0～4℃的SMO液、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液（HC-A）或UW液（Universit... 详细信息

目的：探讨自制上海多器官保存液（Shanghai multi-organ preservation solution,SMO液）对低温保存期间犬肾皮质细胞凋亡的影响,以探讨SMO液的作用机制.方法：犬肾分别以0～4℃的SMO液、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液（HC-A）或UW液（University of Wisconsin solution）灌洗保存,在低温保存各时间点取肾皮质标本作形态学观察;采用TUNEL法检测皮质细胞凋亡发生情况;以硫代巴比妥酸法测定各保存液组肾皮质丙二醛（MDA）含量的改变,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性变化.结果：低温保存第1天光镜观察细胞水肿、胞质空泡化、肾小管坏死等改变,三组相似,但保存2 d后SMO组和UW组形态学改变明显轻于HC-A组.随低温保存时间延长,各保存液组肾皮质细胞凋亡的发生增加,而SMO组凋亡指数显著低于同时点HC-A液组（P＜0.05）.随着低温保存时间延长,各保存液组肾皮质MDA含量增加,保存1～3 d SMO液组MDA含量显著低于HC-A液组（P＜0.05）;低温保存中SMO液组、HC-A液组、UW液组肾皮质SOD酶活性无明显差异.结论：SMO液可以提高肾皮质保存效果,可能与其减少低温保存期间肾皮质细胞凋亡和抑制脂质过氧化损伤有关.

关键词：器官保存反应性氧族低温细胞凋亡

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血管内皮生长因子基因治疗兔下肢缺血的实验研究

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第二军医大学学报 2000年第5期21卷 447-449页

作者：顾洪陈少萍张电波王官将毛积芳第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长海医院心血管内科长征医院放射科

目的 :了解血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗兔下肢缺血模型后新生血管和侧支循环形成状况。方法 :构建h VEGF1 6 5 的真核表达载体 ,通过直接肌肉注射将 h VEGF1 6 5 基因转染缺血部位肌细胞 ,经颈总动脉插管行下肢血管造影。结果 :V... 详细信息

目的 :了解血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗兔下肢缺血模型后新生血管和侧支循环形成状况。方法 :构建h VEGF1 6 5 的真核表达载体 ,通过直接肌肉注射将 h VEGF1 6 5 基因转染缺血部位肌细胞 ,经颈总动脉插管行下肢血管造影。结果 :VEGF治疗组在质粒转染后 2和 4周动脉血管造影显示 ,新生血管数目和侧枝血管形成较对照组明显增加。结论 :肌细胞能够吸收裸露的 VEGF c DNA质粒并获得局部高效表达。

关键词：侧支循环血管内皮生长因子基因治疗下肢缺血

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βB2晶体蛋白基因敲除小鼠模型的建立

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第二军医大学学报 2006年第11期27卷 1246-1248页

作者：张军黄才国李闻捷 Wei Weng 汪佳祺第二军医大学长海医院中心实验室上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 美国inGenious Targeting Laboratory Inc．纽约11790—3350

目的:建立βB2晶体蛋白基因敲除小鼠模型。方法:采用美国iGTL实验室的技术构建打靶载体,建立基因敲除小鼠模型。采用PCR对小鼠基因型进行鉴定,Western印迹法对晶体蛋白的表达进行鉴定。结果:PCR成功检测出3种基因型;纯合子基因敲除的小... 详细信息

目的:建立βB2晶体蛋白基因敲除小鼠模型。方法:采用美国iGTL实验室的技术构建打靶载体,建立基因敲除小鼠模型。采用PCR对小鼠基因型进行鉴定,Western印迹法对晶体蛋白的表达进行鉴定。结果:PCR成功检测出3种基因型;纯合子基因敲除的小鼠未检测到βB2晶体蛋白的表达。结论:成功构建了βB2晶体蛋白基因敲除的小鼠模型。

关键词： β晶体蛋白小鼠基因敲除

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肝再生早期线粒体差异表达蛋白质组分析

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解放军医学杂志 2010年第11期35卷 1341-1344页

作者：孙青菊梁冰缪明永郭巍焦炳华山东青岛解放军401医院检验科 266071 上海第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 200433

目的探讨线粒体在肝再生早期的作用,寻找肝再生早期的标志蛋白。方法 30只SD大鼠随机均分为70%肝部分切除组(PH组)和假手术组(SH组),每组再分为3个小组,每组5只,手术24h后处死大鼠,取相同部位的肝组织进行检测。PH组和SH组配对,独立重... 详细信息

目的探讨线粒体在肝再生早期的作用,寻找肝再生早期的标志蛋白。方法 30只SD大鼠随机均分为70%肝部分切除组(PH组)和假手术组(SH组),每组再分为3个小组,每组5只,手术24h后处死大鼠,取相同部位的肝组织进行检测。PH组和SH组配对,独立重复实验3次;Nycodenz密度梯度离心分离线粒体,二维电泳(2-DE)分离线粒体蛋白质,采用PDQuest 7.4软件分析2-DE图谱;MALDI-TOF MS技术鉴定差异表达蛋白,采用Mascot方法进行数据检索,对部分差异蛋白进行Western blotting验证。结果共筛选出25个差异表达蛋白点(P<0.05);与SH组比较,PH组中有3个蛋白点上调,22个蛋白点下调。质谱技术成功鉴定出其中22个差异蛋白。生物信息学分析显示这些差异蛋白参与了多条代谢途径,如糖代谢、脂代谢、呼吸链和氧化磷酸化、生物转化以及信号转导等。结论肝再生早期,线粒体通过多条代谢途径对其进行调节;亚细胞蛋白质组学技术有利于寻找肝再生相关的标志蛋白,为肝再生的深入研究提供新的方向和思路。

关键词：蛋白质组学肝切除术肝再生线粒体肝

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肿瘤细胞蛋白质组的二维液相色谱分离

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第二军医大学学报 2004年第8期25卷 862-864页

作者：彭艳郑颖蒋平何玮侯彦强周聪郭春香倪健焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 上海富纯中南生物技术有限公司上海201203 第二军医大学长征医院实验诊断科上海200003

目的:建立一种利用二维液相色谱法分离肿瘤细胞全细胞裂解液的方法。方法:将肿瘤细胞裂解样品用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后先对二维色谱条件进行优化和重现性分析,再将一维收集的pH值8.5-4.0之间的组分分别进行二维反... 详细信息

目的:建立一种利用二维液相色谱法分离肿瘤细胞全细胞裂解液的方法。方法:将肿瘤细胞裂解样品用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后先对二维色谱条件进行优化和重现性分析,再将一维收集的pH值8.5-4.0之间的组分分别进行二维反相HPLC分离,利用ProteoVue软件将UV图转换成胶图。结果:一维色谱聚焦分离pH值8.5-4.0之间的组分共收集到16个,每个组分的二维UV图转换成pI／UV胶图。结论:二维液相色谱分离法是一种有效的分离肿瘤细胞裂解液的方法。

关键词：蛋白质组肿瘤细胞二维液相色谱分离

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SMO液对低温下肾皮质线粒体功能的保护作用

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第二军医大学学报 2006年第2期27卷 196-199页

作者：牛强朱有华缪明永杨军昌张纯第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003 基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长征医院药学部

目的：探讨自制上海多器官保存液（SMO液）对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用。方法：以HC-A液和UW液作对照，在犬肾低温保存各时间点，取皮质标本；通过电镜观察保存期间线粒体形态改变；差速离心法分离皮质线粒体，Clark氧电极法... 详细信息

目的：探讨自制上海多器官保存液（SMO液）对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用。方法：以HC-A液和UW液作对照，在犬肾低温保存各时间点，取皮质标本；通过电镜观察保存期间线粒体形态改变；差速离心法分离皮质线粒体，Clark氧电极法测定其活性，描记四态呼吸曲线，计算Ⅲ态、Ⅳ态耗氧速率、线粒体呼吸控制率（RCR）及磷氧比（P／O）。结果：低温保存期间，HC-A组肾皮质线粒体水肿、空泡样变明显重于SMO组和UW组，而后两者改变相似；随着低温保存时间延长，实验组和对照组肾皮质线粒体Ⅲ态呼吸耗氧速率、RCR和P／0均明显降低；保存1～3dHC-A组Ⅲ态呼吸耗氧速率显著低于SMO组（P〈0．05）；保存各时间点SMO组线粒体RCR和P／O显著高于HC-A组（P〈0．05），与UW组无明显差异。结论：SMO液对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用比HC-A液强，与UW液相似。

关键词：器官保存液低温保存缺氧肾皮质线粒体保护作用

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脊髓损伤后自主神经反射异常大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体的表达

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第二军医大学学报 2006年第2期27卷 156-159页

作者：石学银邹最李盈科徐振东周运恒于军刘刚第二军医大学长征医院麻醉科上海200003 复旦大学附属华山医院麻醉科上海200040 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:观察高位脊髓横切(spinal cord transection,SCT)慢性期自主神经反射异常(autonomic dysreflexia,AD)大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体(-αAR)各亚型mRNA表达量,探讨AD的可能机制。方法:暴露大鼠脊髓,横切T4节段,术后4周... 详细信息

目的:观察高位脊髓横切(spinal cord transection,SCT)慢性期自主神经反射异常(autonomic dysreflexia,AD)大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体(-αAR)各亚型mRNA表达量,探讨AD的可能机制。方法:暴露大鼠脊髓,横切T4节段,术后4周用自制导管刺激直肠,观察升压反应,挑选发生AD的大鼠(AD组,n=16),取其心脏和肠系膜前动脉及其分支,实时定量PCR测定α1A-,α1B-,α1D-,α2A-,α2B-,α2C-AR mRNA的表达量,与只暴露脊髓、不进行横切的大鼠(假手术组,n=16)进行比较。结果:与假手术组相比,AD组大鼠心脏α1A-AR mRNA(P<0.05)、α1B-AR mRNA(P<0.01)表达下调,而α1D-ARmRNA表达量未见明显改变;肠系膜前动脉α1A、-α1D、-α2B-AR mRNA(P<0.01)、α2C-AR mRNA(P<0.05)表达上调,而α1B-、α2A-AR mRNA表达量未见明显改变。结论:大鼠SCT慢性期AD的发生可能与心脏α1A-、α1B-AR,肠系膜前动脉α1A-、α1D-、α2B-、α2C-AR的异常表达有关。

关键词：脊髓损伤自主神经反射异常受体肾上腺素能α 心脏肠系膜动脉基因表达

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中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 25-27页

作者：尚雁君郭跃伟黄才国贾睿许强芝魏善建焦炳华张建荣第二军医大学基础医学部生物化学及分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所上海201203 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50... 详细信息

目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50μmol/ml)和0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶中,利用5 min超氧离子生成量来测定黄嘌呤氧化酶活性(NBT显色法)。再将20、40、60μg/ml renierol或100 U/ml阳性对照SOD加入25℃预热过的邻苯三酚,在波长420 nm处测定吸光值,观察renierol对自由基的直接清除作用。建立尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾造成小鼠高尿酸血症模型,并给高、中、低剂量renierol组小鼠口服10、203、0 ***-1renierol,别嘌呤醇组给药量为2 ***-1,用全自动生化分析仪测定实验鼠的血清尿酸值,观察renierol体内降尿酸作用。结果:Renierol体外是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂,其IC50为1.36μ***-1,在体内也有明显的降尿酸作用。结论:Renierol通过抑制黄嘌呤氧化酶来降血尿酸。

关键词： renierol 海绵海洋生物学黄嘌呤氧化酶高尿酸血症抑制作用

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