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2004年SARS与禽流感国际学术研讨会

作者：赵平柯金山秦照玲于建国任浩戚中田第二军医大学微生物学教研室解放军88医院传染科

2002年末始发于在我国广东地区,随后在香港、越南和加拿大等国家和地区相继出现的严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)的病原体己被确认为是一种以前从未发现的新型冠状病毒,被称为SARS冠状病毒(SARS-CoV)。鉴... 详细信息

2002年末始发于在我国广东地区,随后在香港、越南和加拿大等国家和地区相继出现的严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)的病原体己被确认为是一种以前从未发现的新型冠状病毒,被称为SARS冠状病毒(SARS-CoV)。鉴于SARS-CoV的致病特点,可因战争或自然灾害等原因在极短时间内在局部地区迅速爆发,并向周边地区

关键词：冠状病毒抗体反应 DNA

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SARS-CoV核衣壳蛋白的抗原性鉴定和基因免疫研究

SARS-CoV核衣壳蛋白的抗原性鉴定和基因免疫研究

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2004年SARS与禽流感国际学术研讨会

作者：赵平柯金山秦照玲于建国戚中田第二军医大学微生物学教研室解放军88医院传染科

SARS冠状病毒(SARS-CoV)被确认为严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratorysyndrome,SARS)的病原体,是一种具有高度传染性和致病性的新型冠状病毒。冠状病毒是一类球形、有包膜的正链RNA病毒。病毒包膜内侧,是病毒核衣壳蛋白(N蛋白... 详细信息

SARS冠状病毒(SARS-CoV)被确认为严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratorysyndrome,SARS)的病原体,是一种具有高度传染性和致病性的新型冠状病毒。冠状病毒是一类球形、有包膜的正链RNA病毒。病毒包膜内侧,是病毒核衣壳蛋白(N蛋白)包绕全长约30 kb基因组RNA而形成的核衣壳。动物冠状病毒的研究发现,N蛋白具有较强的抗

关键词： SARS-CoV 核衣壳蛋白抗原性鉴定基因免疫小鼠血清

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IL-12对结构优化的HBV核心抗原DNA疫苗诱导免疫应答的影响

IL-12对结构优化的HBV核心抗原DNA疫苗诱导免疫应答的影响

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第14次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：赵平高军曹洁潘卫戚中田夏英第二军医大学微生物学教研室(上海) 上海市中医医院病毒室(上海)

目的:探讨IL-12对一种结构优化的HBV核心抗原(HbcAg)DNA疫苗免疫效果的影响.方法:将小鼠IL-12基因插入结构优化的DNA疫苗pST-HBc,构成pST-HBc/IL12,将pST-HBc/IL12转染COS7细胞,ELIA检测培养上清中的HBcAg和小鼠IL-2.分别将pST-HBc/IL12和pST-HBc肌肉注射接种BALB/c小鼠,检测小鼠的体液和细胞免疫应答,结果:ELISA检测到培养上清液中的HBcAg和小鼠IL-12,pST-HBc/IL12诱导的抗-HBc总IgG阳转率和抗体水平不及pST-HBc,但其诱导的脾细胞增殖反应和细胞素性T淋巴细胞就均强于pST-HBc.结论IL-12可进一步增强这种HBcAgDNA诱导的细胞免疫应答,对于开发治疗性乙肝疫苗具有潜在的应用应答.

关键词：乙型肝炎病毒乙肝核心抗原 DNA疫苗白细胞介素免疫应答

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人胚胎原始生殖细胞的定位与体外分离培养的初步研究

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解剖科学进展 2004年第B8期10卷 39-39页

作者：刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏蒋正戚中田冯根生第二军医大学基础部组织胚胎学教研室，上海200433 第二军医大学附属第一医院妇产科，上海200433 第二军医大学基础部微生物学教研室，上海200433 BurnhamInstitute SanDiegoCA92037USA

目的：对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异，探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法：取4～8周发育阶段的人胚胎，利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分... 详细信息

目的：对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异，探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法：取4～8周发育阶段的人胚胎，利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织培养，第一次传代后，用碱性磷酸酶标记。

关键词：人胚胎原始生殖细胞碱性磷酸酶体外分离组织化学法生殖系肠系膜胎生发育阶段初步研究

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用体内激活的启动子调控HCV核心抗原表达可增强重组鼠伤寒沙门氏菌的免疫原性

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第3期35卷 266-270页

作者：赵平柯屾王宏卫钱锋戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学病原生物学教研室第二军医大学微生物学教研室北京100853 解放军总医院基础医学研究所

为提高抗原表达质粒在重组伤寒沙门氏菌中的稳定性以增强重组伤寒沙门氏菌诱导的免疫应答 ,克隆鼠伤寒沙门氏菌pagC基因启动子 ,以其为转录调控元件构建HCV核心抗原表达质粒 ,转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌中。体外培养时 ,Mg2 +能够剂量依... 详细信息

为提高抗原表达质粒在重组伤寒沙门氏菌中的稳定性以增强重组伤寒沙门氏菌诱导的免疫应答 ,克隆鼠伤寒沙门氏菌pagC基因启动子 ,以其为转录调控元件构建HCV核心抗原表达质粒 ,转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌中。体外培养时 ,Mg2 +能够剂量依赖性抑制该重组菌表达HCV核心抗原。将该重组菌和组成性表达的重组菌分别口服接种BALB/c小鼠 ,观察质粒的稳定性和小鼠的免疫应答。结果表明 ,体内激活的pagC基因启动子能明显提高质粒在重组鼠伤寒沙门氏菌中的稳定性和增强重组菌诱导的体液和细胞免疫应答 ,这为发展高效免疫、成本低廉的口服丙肝疫苗提供了一个新思路

关键词：体内激活的启动子减毒鼠伤寒沙门氏菌丙型肝炎病毒免疫应答

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山东地区TTV部分基因克隆及测序

山东地区TTV部分基因克隆及测序

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2004年肝病实验室诊断与临床研究专题学术会议

作者：于建国商庆华任诰肖德明尹燕明白薇戚中田张光曙 271000 山东省泰安市解放军第八十八医院感染科肝病研究中心 200433 上海市第二军医大学微生物学教研室 271000 山东省泰安市泰安市中心医院感染科 271000 山东省泰安市泰山医学院附属医院感染科

为探讨山东地区非甲/庚肝炎和肝癌患者TTV感染状况和基因变异的情况,并阐明TTV在人类肝炎中的作用、地位及其传播途径.本研究对非甲/庚型肝炎和肝癌患者血清进行TTVDNA PCR检测,并对其中3例TTV阳性患者进行序列分析.

关键词：病毒性肝炎 TTV 基因克隆基因测序血清

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IL-12对结构优化的HBV核心抗原DNA疫苗诱导免疫应答的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第5期23卷 355-358页

作者：高军赵平柯金山戚中田第二军医大学微生物学教研室第二军医大学长征医院实验诊断科

目的　探讨IL 12对一种结构优化的HBV核心抗原 (HBcAg)DNA疫苗免疫效果的影响。方法　将小鼠IL 12基因插入结构优化的DNA疫苗pST HBc,构成pST HBc/IL12 ,将pST HBc/IL12转染COS7细胞 ,ELISA检测培养上清中的HBcAg和小鼠IL 12。分别将pST... 详细信息

目的　探讨IL 12对一种结构优化的HBV核心抗原 (HBcAg)DNA疫苗免疫效果的影响。方法　将小鼠IL 12基因插入结构优化的DNA疫苗pST HBc,构成pST HBc/IL12 ,将pST HBc/IL12转染COS7细胞 ,ELISA检测培养上清中的HBcAg和小鼠IL 12。分别将pST HBc/IL12和pST HBc肌肉注射接种BALB/c小鼠 ,检测小鼠的体液和细胞免疫应答。结果　ELISA检测到培养上清液中的HBcAg和小鼠IL 12 ,pST HBc/IL12诱导的抗 HBc总IgG阳转率和抗体水平不及pST HBc ,但其诱导的脾细胞增殖反应和细胞毒性T淋巴细胞反应均强于pST HBc。结论　IL 12可进一步增强这种HBcAgDNA疫苗诱导的细胞免疫应答。

关键词：乙型肝炎病毒 DNA疫苗 HBV核心抗原白细胞介素-12

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Flt3配体增强HCV核心-包膜E2融合基因DNA疫苗诱导的细胞免疫应答

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生物工程学报 2003年第2期19卷 158-162页

作者：柯金山赵平曹洁于嘉屏戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学长征医院实验诊断科上海200003

建立一种可高效诱导细胞免疫应答 ,对丙型肝炎病毒 (HCV)感染可能起预防和治疗作用的DNA疫苗。将小鼠Flt3配体 (FL)信号肽和胞外段cDNA插入结构优化的HCV核心包膜E2融合抗原DNA疫苗pST CE2t,构建成pST CE2t FL。将pST CE2t FL转染COS7... 详细信息

建立一种可高效诱导细胞免疫应答 ,对丙型肝炎病毒 (HCV)感染可能起预防和治疗作用的DNA疫苗。将小鼠Flt3配体 (FL)信号肽和胞外段cDNA插入结构优化的HCV核心包膜E2融合抗原DNA疫苗pST CE2t,构建成pST CE2t FL。将pST CE2t FL转染COS7细胞 ,Westernblot和ELISA检测表明该重组质粒能表达HCV核心包膜E2融合抗原和可溶性小鼠FL。分别将pST CE2t、pST CE2t FL和空载体pCI neo肌肉注射接种BALB c小鼠 ,检测小鼠的体液和细胞免疫应答。结果表明两种DNA结构均能在小鼠体内诱生细胞和体液免疫应答 ,但pST CE2t诱导的体液免疫应答强于pST CE2t FL ,而后者诱导的细胞免疫应答明显强于前者。FL能明显增强HCV核心包膜E2融合抗原DNA疫苗诱导的细胞免疫应答 ,对于发展HCV预防和治疗性疫苗有潜在的应用价值。

关键词：丙型肝炎病毒 DNA疫苗 fms样酪氨酸激酶受体3配体细胞免疫应答

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HCV核心蛋白核酸疫苗转化的减毒鼠伤寒沙门菌在小鼠的免疫原性

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中国免疫学杂志 2003年第7期19卷 464-467页

作者：赵平柯金山曹洁戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学长征医院实验诊断科上海200003

目的 :观察以减毒鼠伤寒沙门菌为载体的丙型肝炎病毒 (HCV)口服型核酸疫苗在BALB C小鼠的免疫原性 ,探讨用该免疫方法预防丙型肝炎的可行性。方法 :将HCV核心蛋白真核表达质粒pcDNA3 1core(核酸疫苗 )转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,... 详细信息

目的 :观察以减毒鼠伤寒沙门菌为载体的丙型肝炎病毒 (HCV)口服型核酸疫苗在BALB C小鼠的免疫原性 ,探讨用该免疫方法预防丙型肝炎的可行性。方法 :将HCV核心蛋白真核表达质粒pcDNA3 1core(核酸疫苗 )转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,将重组沙门菌和pcDNA3.1core分别口服或肌注接种BALB C小鼠 ,检测小鼠的体液和细胞免疫应答及观察其安全性。结果 :口服重组沙门菌或肌注接种核酸疫苗均在小鼠诱导相似水平的抗HCV核心蛋白IgG ,但口服重组沙门菌诱导的细胞免疫应答明显强于肌注接种核酸疫苗 ,未见小鼠出现明显毒副反应。结论 :减毒沙门菌作为HCV核酸疫苗的载体能增强其诱导的细胞免疫应答 ,这为研制高效免疫、成本低廉、接种方便的HCV疫苗提供了一个新的可行途径。

关键词： HCV 核心蛋白核酸疫苗转化减毒鼠伤寒沙门菌小鼠免疫原性

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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 937-940页

作者：刘善荣王庆敏杨玲汤淑萍惠宁蒋正戚中田刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院妇产科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 详细信息

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因 Oct4 克隆基因克隆基因表达

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