检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2001年第z1期22卷 89-90页

作者：李玉光赵立军李强曹广文杨淑英陈秋莉潘卫戚中田刘忠令山东省济宁医学院附属医院呼吸内科济宁272129 第二军医大学长海医院呼吸内科第二军医大学长海医院呼吸内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院呼吸内科

　　将毒素基因导入肿瘤细胞内是肿瘤基因治疗一个较有前景的手段[1].白喉毒素(diphtheria toxin,DT)是由白喉杆菌分泌的一种单链多肽毒素,大多数哺乳类细胞均存在这种毒素的受体,其A片段(DTA)毒力特别强,它能催化不可逆转的ADP核糖酰基... 详细信息

　　将毒素基因导入肿瘤细胞内是肿瘤基因治疗一个较有前景的手段[1].白喉毒素(diphtheria toxin,DT)是由白喉杆菌分泌的一种单链多肽毒素,大多数哺乳类细胞均存在这种毒素的受体,其A片段(DTA)毒力特别强,它能催化不可逆转的ADP核糖酰基化,使肽链延长因子Ⅱ失活,从而抑制宿主细胞蛋白合成[2].Gossen等[3]提出了可调控型高表达系统(Tet系统),这为毒素基因治疗肿瘤开辟了新途径.Tet系统可分为 Tet-On和Tet-Off系统,前者的基因表达是在四环素加入后激活,而后者则是在四环素浓度逐渐降低的情况下激活.我们构建携带四环素系统调控的DTA基因的逆转录病毒载体,为进一步探讨肺癌的基因治疗奠定基础.……

关键词：白喉毒素四环素系统肺癌逆转录病毒载体

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四环素调控系统对白喉毒素-血管内皮细胞生长因子融合基因表达的影响

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外科理论与实践 2001年第3期6卷 174-175页

作者：柯重伟潘欣闻兆章曹贵松潘卫曹广文戚中田第二军医大学长海医院普外科 200433 第二军医大学长海医院微生物学教研室 200433

目的：研究四环素调控系统对ＤＴ３９０－ＶＥＧＦ１６５融合基因在人胃癌细胞中表达的影响。方法：构建四环素调控的ＤＴ３９０－ＶＥＧＦ１６５融合基因真核表达载体，用脂质体介导转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，在四环素有或无的情况... 详细信息

目的：研究四环素调控系统对ＤＴ３９０－ＶＥＧＦ１６５融合基因在人胃癌细胞中表达的影响。方法：构建四环素调控的ＤＴ３９０－ＶＥＧＦ１６５融合基因真核表达载体，用脂质体介导转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，在四环素有或无的情况下检测胃癌细胞的存活率。结果：４μｇ构建物转染５×１０５个胃癌细胞／孔（２４孔板）９６ｈ后发现，无四环素时转毒素融合基因的细胞的存活率为２０％；四环素存在时转毒素融合基因的细胞的存活率为６６％；转染细胞在四环素有或无的情况下经白喉抗毒素－ＦＩＴＣ免疫荧光抗体染色均呈现黄绿色荧光，表明融合基因在细胞中得到了表达，且四环素调控系统存在基础量的漏表达。结论：四环素调控系统基本上可以控制毒素基因在人胃癌细胞中的表达。

关键词： DT390-VEGF165融合基因四环素调控系统胃肿瘤基因治疗

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血液透析患者中TT病毒感染的检测及序列分析

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第二军医大学学报 2001年第4期22卷 331-333页

作者：倪武任浩缪晓辉戚中田叶朝阳第二军医大学长征医院感染病科上海200003 基础医学部微生物学教研室 3. 长征医院肾内科长征医院肾内科

目的 :研究血液透析患者中 TT病毒 (TTV)的感染状况及其致病性。方法 :针对病毒基因保守区设计引物 ,采用套式 PCR方法对 6 9例血液透析患者血清标本进行 TTV DNA检测及序列分析 ,并同时检测患者血清丙氨酸转氨酶 (AL T)及丙型肝炎病... 详细信息

目的 :研究血液透析患者中 TT病毒 (TTV)的感染状况及其致病性。方法 :针对病毒基因保守区设计引物 ,采用套式 PCR方法对 6 9例血液透析患者血清标本进行 TTV DNA检测及序列分析 ,并同时检测患者血清丙氨酸转氨酶 (AL T)及丙型肝炎病毒抗体 (抗 - HCV)。结果 :患者血清 TTV DNA总阳性率为 2 7.5 %。对其中 1例 PCR扩增产物测序 ,结果与其他TVV分离株如 GH1、TA2 78、TTVCHN1和 TTVCHN2的核苷酸序列同源性为 89%～ 10 0 % ,推测的氨基酸序列同源性为87%～ 10 0 %。抗 - HCV阳性与阴性患者的 TTV DNA阳性率无明显差异。所有患者均未见 AL T明显升高。结论 :血液透析患者存在较严重的 TTV感染 ,TTV感染与 HCV感染无明显相关性 ,未发现 TTV感染导致 AL T明显升高的证据。

关键词： TT病毒血液透析基因分析序列分析

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pcDNA3-EGFP基因转染骨髓间充质干细胞的实验研究

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徐州医学院学报 2001年第6期21卷 468-470页

作者：荆鑫赵剑祝云利潘欣周维江吴海山第二军医大学长征医院骨科上海200003 第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的　探讨外源性pcDNA3-EGFP基因转染修饰兔骨髓间充质干细胞的可行性。方法　用增荧光绿色蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)cDNA作为报告基因 ,采用重组真核表达载体系统 (pcDNA3-EGFP)以脂质体法转染原代骨髓间充质干细... 详细信息

目的　探讨外源性pcDNA3-EGFP基因转染修饰兔骨髓间充质干细胞的可行性。方法　用增荧光绿色蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)cDNA作为报告基因 ,采用重组真核表达载体系统 (pcDNA3-EGFP)以脂质体法转染原代骨髓间充质干细胞 ,观察转染结果、表达情况及对靶细胞活力的影响。结果　经荧光显微镜下观察证实 :成功地对骨髓间充质干细胞实现了基因转染 ,持续表达时间超过 8周 ;没有发现明显的细胞毒作用及对细胞活力的显著影响。结论　采用真核转染技术可以介导外源基因转染骨髓间充质干细胞 ,为今后采用基因增强组织工程方法治疗肌肉、骨骼系统疾病提供了实验基础。

关键词：基因转染骨髓间充质干细胞 pcDNA3-EGFP 动物实验肌肉组织缺损骨骼组织缺损修复基因治疗

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同个体中HCV高变区1序列变异的研究

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第5期17卷 489-489页

作者：方芳潘卫戚中田第二军医大学附属东方肝胆外科医院实验诊断科上海200438 第二军医大学基础部微生物学教研室上海200438

ＨＣＶ高变区１ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅｒｅｇｉｏｎｏｎｅＨＶＲ１基因变异可能与病毒逃避宿主免疫选择作用有关，是病毒在体内持续存在及ＨＣＶ感染易慢性化的重要原因之一１。近年来研究发现，ＨＶＲ１基因可能对ＨＣＶ的免疫预... 详细信息

ＨＣＶ高变区１ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅｒｅｇｉｏｎｏｎｅＨＶＲ１基因变异可能与病毒逃避宿主免疫选择作用有关，是病毒在体内持续存在及ＨＣＶ感染易慢性化的重要原因之一１。近年来研究发现，ＨＶＲ１基因可能对ＨＣＶ的免疫预防有重要作用２，３。为此，我们选择了长期、多次进行血液透析的ＨＣＶ感染者作为研究对象，动态观察了ＨＶＲ１的序列变异。以研究其变异极其规律有重要意义。１材料和方法研究对象：血透析患者的血清，由上海医科大学附属中山医院血液透析中心提供。引物设计、ＨＣＶＲＮＡ的提取、逆转录巢式ＰＣＲ、ＤＮＡ序列的测定及相关试剂、仪器参见文献４。２结果５例血透析患者ＨＣＶＨＶＲ１核苷酸及氨基酸序列的变异结

关键词：丙性肝炎病毒高变区1 序列变异

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山东地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

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肝脏 2001年第S1期6卷 108-109页

作者：于建国商庆华任浩肖德明尹燕明白薇戚中田张光曙泰安解放军第八八医院肝病研究中心 271000 第二军医大学微生物学教研室山东省泰安市中心医院感染科山东省泰山医学院附院感染科

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山东地区输血后丙型肝炎患者HGV感染状况及HGV部分核酸序列测定

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肝脏 2001年第S1期6卷 112-页

作者：于建国商庆华王路周秀梅韩纪举赵平潘伟杜庆苓戚中田济南军区肝病研究所泰安解放军第八八医院传染科271000 第二军医大学微生物学教研室

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腺病毒载体介导四环素调控的DT/VEGF体系的基因治疗

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世界华人消化杂志 2000年第10期8卷 1121-1126页

作者：潘欣潘卫柯重伟张斌曹广文戚中田第二军医大学微生物学教研室第二军医大学长海医院普外科长海医院感染科上海市200433

目的研究重组腺病毒在四环素调控下传递 DT_(390)-VEGF_(165)及DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因治疗肝癌的可行性.方法构建4种四环素 tet-off 调控的 DT_(39)-VEGF_(165)或 DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因重组腺病毒载体,用脂质体介导包装出4种重组腺病毒,分别感染肝细胞癌 HepG2细胞,在没有四环素的情况下观察肝癌细胞的形态变化,用2种粗制重组腺病毒治疗荷肝癌裸鼠,用免疫组化鉴定融合基因的表达.结果在培养液中加入 3mg·L^(-1)的四环素可包装出携带毒素融合基因的重组腺病毒,用噬斑分析法测定重组腺病毒滴度均为1×10^(10)pfu·L^(-1);粗制重组腺病毒感染 HepG2细胞8h 后换以无四环素的正常培养液,发现72h 后 HepG2细胞发生病变,细胞死亡率达95%;感染细胞经白喉抗毒素-FITC 免疫荧光抗体染色均呈现黄绿色荧光;用粗制重组腺病毒AdCA13-tTA-TRE-DT_(390)-VEGF_(165)和 AdCA13-tTA-VEGF_(165)-DT_(390)-TRE 注射肝癌瘤体可观察到瘤体生长明显得到抑制,AFP 值显著下调,免疫组化结果显示融合基因在瘤体内得到了表达.结论重组腺病毒可以提高转基因效率.

关键词：腺病毒科肝肿瘤基因治疗

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微反应板酶联夹心杂交定量检测乙型肝炎病毒基因组

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中华传染病杂志 2000年第1期18卷 40-43页

作者：缪晓辉孔宪涛戚中田第二军医大学附属长征医院感染科上海200003 第二军医大学微生物学教研室

目的　建立一种在微量反应板上进行乙型肝炎病毒(HBV) 基因杂交定量分析的技术。方法　利用人工合成的多组寡核苷酸探针与乙型肝炎病毒全基因组在微量DNA 结合板上进行杂交反应,并利用自制的标记放大探针检测杂交信号,信号值以A 值标示... 详细信息

目的　建立一种在微量反应板上进行乙型肝炎病毒(HBV) 基因杂交定量分析的技术。方法　利用人工合成的多组寡核苷酸探针与乙型肝炎病毒全基因组在微量DNA 结合板上进行杂交反应,并利用自制的标记放大探针检测杂交信号,信号值以A 值标示,与标准曲线比较后,可求得待测标本中HBV 基因含量。结果　(1) 本方法可直接从血清标本中对HBV 定量,可定量范围为20pg～20ng/ml;(2) 不与人类基因组及其它病毒或细菌基因组非特异杂交;(3) 定量分析全程5 小时左右。结论　微反应板酶联夹心杂交定量技术灵敏度较高、特异性强、操作简便,可用于HBV

关键词：乙型肝炎 HBV 微反应板酶联夹心杂交

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三联脆组基因在胰腺癌及癌旁组织中mRNA表达的研究

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中华消化杂志 2000年第2期20卷 143-144页

作者：蔡清萍王梁华付志仁焦炳华徐冠南王元和张国治上海第二军医大学长征医院普外科 200003 上海第二军医大学基础部微生物学教研室 200003 上海第二军医大学长征医院消化科 200003

胰腺癌的发病率呈逐年上升的趋势.由于其较早转移特性、缺乏有效的早期诊断以及术后易复发性,胰腺癌患者术后5年生存率很低,预后较差[1].随着分子生物学的发展,胰腺癌的发生被认为是癌基因(如c-erB-3,K-ras等)激活及抑癌基因(如p53,p16... 详细信息

胰腺癌的发病率呈逐年上升的趋势.由于其较早转移特性、缺乏有效的早期诊断以及术后易复发性,胰腺癌患者术后5年生存率很低,预后较差[1].随着分子生物学的发展,胰腺癌的发生被认为是癌基因(如c-erB-3,K-ras等)激活及抑癌基因(如p53,p16等)失活的复杂过程.

关键词：胰腺癌癌旁组织 mRNA 三联脆组基因

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