检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2003年第9期24卷 944-946页

作者：刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏蒋正戚中田冯根生第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 长海医院妇产科基础医学部微生物学教研室 Burham InstituteSanDiegoCA92037USA

目的:对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞(PGC)进行定位并比较其体外培养的差异.方法:取4～7周发育阶段的人胚胎,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶(AP)以对其定位.体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养,第1次传代后,用AP标记,... 详细信息

目的:对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞(PGC)进行定位并比较其体外培养的差异.方法:取4～7周发育阶段的人胚胎,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶(AP)以对其定位.体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养,第1次传代后,用AP标记,计数不同发育阶段AP阳性的PGC和体外培养的阳性克隆并进行比较.结果:在卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处有AP强阳性细胞,阳性信号位于胞质内.阳性细胞散在分布,在生殖嵴处聚集成团.不同发育阶段的胚胎组织培养均有阳性克隆出现.统计学分析结果表明,4～7周人胚胎内AP阳性的PGC数目及细胞内信号强度无明显差异(P>0.05);由胚胎组织培养获得的AP阳性克隆数也无显著差异.结论:人PGC位于卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处.4～7周发育阶段,胚胎内PGC数目和体外培养的克隆数无明显变化.

关键词：胚胎原始生殖细胞体外培养定位碱性磷酸酶

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HCV 1a/1b型嵌合体能在HepG2细胞内复制与表达

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中国病毒学 2003年第5期18卷 423-427页

作者：王宏卫赵平谢南张珉朱诗应戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 南昌市第九医院江西南昌330002

采用HCV 1a/1b嵌合体cDNA构建表达质粒转染HepG2细胞,以免疫组化和Western blotting检测HCV蛋白表达,RT-PCR检测HCV正、负链RNA,研究丙型肝炎病毒(HCV)1a和1b型嵌合体全长cDNA在HepG2细胞中的复制和表达。结果证明,转染细胞中检测到分... 详细信息

采用HCV 1a/1b嵌合体cDNA构建表达质粒转染HepG2细胞,以免疫组化和Western blotting检测HCV蛋白表达,RT-PCR检测HCV正、负链RNA,研究丙型肝炎病毒(HCV)1a和1b型嵌合体全长cDNA在HepG2细胞中的复制和表达。结果证明,转染细胞中检测到分子量约70kDa的HCVNS3蛋白,转染细胞连续传20代,仍能检测到HCV正、负链RNA。表明该HCV嵌合体可以在细胞中复制和表达,HCV 1b型的RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)可以起始含1a型非编码区的病毒复制。HCV 5′端非翻译区第11、12、13、34和35位核苷酸改变可不影响其与核糖体结合。3′非翻译区9400,9403和9407位核苷酸改变,9435位缺失“A”,9409,9410位及9495,9496,9497位分别插入“TT”和“AAT”可不影响RORp的生物活性。本研究对阐明HCV复制和翻译机制有重要意义。

关键词：丙型肝炎病毒嵌合体cDNA HepG2细胞 RNA聚合酶表达

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四种根管充填材料的密封性比较

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第二军医大学学报 2003年第4期24卷 434-436页

作者：尚永一曹志中周中华沙继宏武警内蒙古总队医院口腔科呼和浩特010031 第二军医大学长海医院口腔科基础医学部细胞生物学教研室

目的:评价4种根管充填材料的根管密封性能,分析其影响因素。方法:收集新鲜拔除的人完整前牙40颗,随机分成4组,每组10颗牙,分别用氧化锌丁香油糊剂、Vitapex糊剂、Cortisomol糊剂、AH—Plus糊剂加牙胶尖以侧压法进行根管充填。每组随机选... 详细信息

目的:评价4种根管充填材料的根管密封性能,分析其影响因素。方法:收集新鲜拔除的人完整前牙40颗,随机分成4组,每组10颗牙,分别用氧化锌丁香油糊剂、Vitapex糊剂、Cortisomol糊剂、AH—Plus糊剂加牙胶尖以侧压法进行根管充填。每组随机选5颗牙经染色后行微渗漏长度测量;男5颗牙行扫描电镜测量根管壁与根管糊剂间微缝隙宽度。结果:氧化锌丁香油糊剂组、Vitapex糊剂组、Cortisomol糊剂组及AH—Plus糊剂组微渗漏均值分别为(3.04±1.30)、(0.74±0.49)、(0.87±0.44)、(0.60±0.26)mm,微缝隙均值分别为(11.70±5.95)、(3.05±2.75)、(1.55±1.75)、(1.95±1.00)μm,氧化锌丁香油糊剂组微渗漏和微缝隙两项均值显著高于其他各组(P<0.05),其余各组间均值比较无统计学意义。结论:氧化锌丁香油糊剂作为根管糊剂逐渐被淘汰,急需我国自行研制新型根管充填材料。

关键词：根管充填材料密封性比较微渗漏微缝隙氧化锌丁香油糊剂 Vitapex糊剂Cortisomol糊剂 AH—P1us糊剂

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乙型肝炎病毒表面—核心融合抗原和白细胞介素—12共表达DNA疫苗的免疫原性

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中华肝脏病杂志 2003年第7期11卷 443-443页

作者：柯金山赵平吴淑梅戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院实验诊断科

乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞免疫应答对急性HBV感染的恢复起关键作用,其中HBV表面抗原和核心抗原均是重要的靶抗原.曾构建HBV表面-核心融合抗原DNA疫苗,可有效诱导小鼠细胞和体液免疫应答,为进一步增强该DNA疫苗诱导细胞免疫应答,在该... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞免疫应答对急性HBV感染的恢复起关键作用,其中HBV表面抗原和核心抗原均是重要的靶抗原.曾构建HBV表面-核心融合抗原DNA疫苗,可有效诱导小鼠细胞和体液免疫应答,为进一步增强该DNA疫苗诱导细胞免疫应答,在该疫苗分子中增加了小鼠白细胞介素-12(IL-12)基因,观察IL-12对其免疫应答的影响.

关键词：乙型肝炎病毒 HBV 表面-核心融合抗原白细胞介素-12 DNA疫苗免疫原性基因表达

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用抗HCV多抗从随机15肽库中筛选抗原表位

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第1期19卷 65-67页

作者：柯屾朱继萍温新宇施明贺永怀沈倍奋赵平姚志建解放军总医院基础医学研究所北京100853 军事医学科学院基础医学研究所第二军医大学微生物学教研室北方基因中心

目的:分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法: 制备Protein A亲和层析柱,从丙肝患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体;并以此为筛选配基,对噬菌体表面展示的随机15肽库进行亲和筛选。结果:三轮筛选的投入产出比逐轮升高至3.3... 详细信息

目的:分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法: 制备Protein A亲和层析柱,从丙肝患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体;并以此为筛选配基,对噬菌体表面展示的随机15肽库进行亲和筛选。结果:三轮筛选的投入产出比逐轮升高至3.3×10-3,假阳性率逐轮降低至0.2％,提示具有良好的富集效果。对从第3轮挑选出的16个克隆进行结合试验,发现9个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清起反应。测序表明,8个克隆的外源肽含有核心序列WPWS。用阳性噬菌体克隆检测20例丙肝患者血清,有程度不等的阳性反应。结论:用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中,筛选到有一定功能的模拟表位。

关键词：噬菌体随机肽库抗原表位丙型肝炎病毒

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内皮抑素-血管内皮细胞抑制因子重组腺病毒对新生血管的抑制效应

内皮抑素-血管内皮细胞抑制因子重组腺病毒对新生血管的抑制效应

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第五次全国医学分子微生物学学术研讨会

作者：潘欣王泳张珉赵平潘卫戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学附属长海医院眼科上海200433

本文为了探讨两分子融合后的生物学功能,以重组腺病毒为载体介导融合基因在体内外表达。结果提示:重组腺病毒Ad-hENDO-VEGI151能够表达有生物学活性的融合蛋白,并发挥特异性的新生血管抑制作用。

关键词：内皮抑素重组腺病毒新生血管抑制效应

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大鼠实验性肺损伤肺组织中TNF-α和IL-8浓度的动态变化

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中国医师杂志 2003年第10期5卷 1334-1336页

作者：朱义用景炳文杨兴易娄永华解放军第101医院急诊科江苏无锡214044 第二军医大学附属长征医院急救科第二军医大学微生物教研室

目的　观察腹腔感染时肺组织中肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)和白介素 -8(IL -8)的变化 ,探讨其作用机制。方法　采用大鼠盲肠结扎并穿孔造成腹腔感染。分别在 0、2 4、48、72、96、12 0h处死一组大鼠 ,检测肺毛细血管通透性 ,取支气管肺... 详细信息

目的　观察腹腔感染时肺组织中肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)和白介素 -8(IL -8)的变化 ,探讨其作用机制。方法　采用大鼠盲肠结扎并穿孔造成腹腔感染。分别在 0、2 4、48、72、96、12 0h处死一组大鼠 ,检测肺毛细血管通透性 ,取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析 ,检测血浆、肺组织和BALF的TNF -α和IL -8的含量。结果　肺毛细血管通透性和BALF的中性粒细胞百分率逐渐增加 ,时间越长越明显。血浆、肺组织和BALF的TNF -α、IL -8逐渐增加 ,肺组织和BALF的TNF -α、IL -8分别显著相关 ,两者分别与血浆的TNF -α、IL -8无明显相关性。结论　TNF -α和IL -8在腹腔感染的早期阶段就参与了肺的炎症反应 ,检测BALF的TNF -α和IL

关键词：肺损伤肺毛细血管通透性中性粒细胞肿瘤坏死因子-α 白介素-8

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大鼠胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定

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第二军医大学学报 2003年第5期24卷 521-523页

作者：张旭静钱国正范柳王春安王桂清上海市脑血管病防治研究所上海200433 第二军医大学长海医院生物医学工程研究室上海200433 基础医学部生理学教研室

利用无血清培养和细胞克隆技术从孕鼠(14 d)胚胎中分离出神经干细胞,并进行传代培养,采用免疫细胞化学技术检测神经巢蛋白和成熟脑细胞特异性抗原神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillary... 详细信息

利用无血清培养和细胞克隆技术从孕鼠(14 d)胚胎中分离出神经干细胞,并进行传代培养,采用免疫细胞化学技术检测神经巢蛋白和成熟脑细胞特异性抗原神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillary acidic protein,GFAP)的表达,同时采用H-E染色法鉴定神经细胞类型。证实从大鼠胚胎大脑皮质分离出的细胞具有连续的克隆能力,并表达神经巢蛋白,分化的细胞表达神经元和神经胶质细胞的特异性抗原,为中枢神经系统的干细胞。

关键词：大鼠胚胎神经干细胞细胞培养细胞鉴定细胞分离

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大黄对大鼠腹腔感染致肺损伤的防治作用

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中国药师 2003年第4期6卷 198-200页

作者：束长辉朱义用景炳文娄永华解放军第101医院无锡214044 上海长征医院急诊科第二军医大学微生物教研室

目的 :探讨大黄对大鼠腹腔感染致肺损伤防治作用的机制。方法 :采用大鼠盲肠结扎并穿孔 (CLP)造成腹腔感染 ,每天在麻醉下经胃管灌注大黄 1次。分别在术后 0 ,2 4 ,48,72 ,96 ,1 2 0h检测肺毛细血管通透性、肺组织的内毒素和肿瘤坏死因... 详细信息

目的 :探讨大黄对大鼠腹腔感染致肺损伤防治作用的机制。方法 :采用大鼠盲肠结扎并穿孔 (CLP)造成腹腔感染 ,每天在麻醉下经胃管灌注大黄 1次。分别在术后 0 ,2 4 ,48,72 ,96 ,1 2 0h检测肺毛细血管通透性、肺组织的内毒素和肿瘤坏死因子 (TNF α) ,并取支气管肺泡灌洗液 (BALF)进行细胞学分析。结果 :肺毛细血管通透性、BALF的中性粒细胞百分率、肺组织的内毒素和TNF α逐渐增加 ,时间越长越明显 ,但药物组比感染组增加较慢、幅度较小。结论 :大黄可防止内毒素进入肺组织 ,抑制肺内中性粒细胞积聚 ,TNF α释放 ,减轻肺的炎性反应。

关键词：大黄肺损伤肺毛细血管通透性中性粒细胞内毒素肿瘤坏死因子

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来氟米特对TNF-α诱导HaCaT细胞内核因子-κB及其抑制蛋白的影响

来氟米特对TNF-α诱导HaCaT细胞内核因子-κB及其抑制蛋白的影响

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2003中国中西医结合皮肤性病学术会议

作者：郭志丽顾军朱海英曹云飞米庆胜肖飞第二军医大学长海医院皮肤科第二军医大学长海医院皮肤科第二军医大学细胞生物教研室第二军医大学东方肝胆医院麻醉科泰山医学院附院皮肤科美国凯欣公司上海代表处

目的:研究来氟米特对TNF诱导的HaCaT细胞内核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)及其抑制蛋白的影响。方法:采用携带依赖NF-κB报告基因Luciferase的6×κB-TK-Luc质粒转染细胞,检测TNF诱导及药物作用前后HaCaT细胞内报告基因Luc... 详细信息

目的:研究来氟米特对TNF诱导的HaCaT细胞内核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)及其抑制蛋白的影响。方法:采用携带依赖NF-κB报告基因Luciferase的6×κB-TK-Luc质粒转染细胞,检测TNF诱导及药物作用前后HaCaT细胞内报告基因Luc的表达;免疫印记方法测定LFM对TNF诱导下NF-κB抑制蛋白IκB-α的影响。结果:TNF诱导下,HaCaT细胞内报告基因Luc的表达量增加,加入来氟米特后则表达量受到抑制:TNF刺激可使IκB-α蛋白磷酸化降解,加入药物可阻断其降解过程。结论:来氟米特可阻断其抑制蛋白IκB-α的磷酸化降解,抑制TNF诱导的HaCaT细胞NF-κB的活化,从而抑制相关靶基因的表达。

关键词： LFM 角质形成细胞核因子κB

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