检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2012年第2期33卷 145-149页

作者：解冰唐紫薇劳文光李建军王岩朱诗应陶清源戚中田赵平陈志辉第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433 中国人民解放军总政治部机关门诊部北京100120 第二军医大学长海医院感染科上海200433

目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细... 详细信息

目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细胞因子IFN-γ、IL-12,进一步将重组HBsAg分别联合这两种质粒免疫小鼠,检测小鼠的细胞和体液免疫应答。结果质粒pKO-CG6与载体pKO在体外均能有效激活健康人及HBV感染者PBMC增殖反应,并促进IFN-γ、IL-12的产生,其中pKO-CG6的免疫刺激活性强于载体pKO。小鼠体内试验表明,虽然载体pKO也具有免疫佐剂作用,但pKO-CG6更能显著增强HBsAg诱导的免疫应答,尤其是细胞免疫应答。结论含有多拷贝D型CpG ODN的质粒能有效激活HBV感染者的PBMC,并增强HBsAg在小鼠体内的免疫原性。

关键词：乙型肝炎病毒 CpG寡脱氧核苷酸质粒免疫佐剂

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

献血者HCV RNA实时荧光定量PCR方法的建立

引用

中国输血杂志 2012年第4期25卷 351-355页

作者：王文博许刚查占山孙博钱宝华任浩戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 长海医院血站

目的建立快速检测献血者中丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染的方法。方法利用体外转录制备的HCV RNA转录体进行病毒RNA抽提方法及抽提效率的比较;将RNA转录体与正常血清进行不同数目的混合,对最佳混合标本数进行了摸索;建立HCV... 详细信息

目的建立快速检测献血者中丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染的方法。方法利用体外转录制备的HCV RNA转录体进行病毒RNA抽提方法及抽提效率的比较;将RNA转录体与正常血清进行不同数目的混合,对最佳混合标本数进行了摸索;建立HCV荧光定量PCR方法(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR),并对献血者进行混合标本HCV核酸检测。结果确定了比较理想的病毒RNA抽提方法;用于HCV核酸检测的混合标本数为24例;建立的荧光定量PCR方法能最低检测出10个copies/ml;采取24例混合血标本方法,FQ-PCR检测HCV RNA,576例ELISA检测HCV阴性的献血者未检测出HCV RNA。结论初步建立了献血者HCV感染的混合标本荧光定量PCR检测方法。

关键词：荧光定量PCR 献血者 HCV 输血安全混合血液

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丙型肝炎病毒包膜蛋白E2中关键组氨酸位点突变体的构建与感染性

引用

中国生物制品学杂志 2012年第5期25卷 531-535页

作者：刘霜鞠鹤鹏戚中田边中启秦照玲解放军昆明总医院传染病中心昆明650032 第二军医大学微生物学教研室上海市生物防护重点实验室上海200433

目的构建组氨酸(Histidine)位点突变的丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)突变体,并检测其感染性。方法利用定点突变技术,分别将HCV包膜蛋白E2第490位和第621位的组氨酸突变为丙氨酸(Alanine),构建突变质粒H490A和H621A,采用T7体外转... 详细信息

目的构建组氨酸(Histidine)位点突变的丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)突变体,并检测其感染性。方法利用定点突变技术,分别将HCV包膜蛋白E2第490位和第621位的组氨酸突变为丙氨酸(Alanine),构建突变质粒H490A和H621A,采用T7体外转录法制备病毒RNA,通过电穿孔法导入Huh7.5.1细胞,免疫荧光法检测病毒蛋白的表达、电穿孔效率及细胞培养上清的感染性。结果 H490A和H621A突变型质粒经酶切及测序鉴定构建正确;体外转录获得的野生型与突变型病毒RNA均能在Huh7.5.1细胞中表达病毒蛋白,电穿孔效率高达90%以上;野生型病毒感染细胞培养上清中可检测到HCV阳性细胞,H490A病毒感染细胞培养上清中的阳性细胞数量比野生型明显减少,H621A病毒感染细胞培养上清中未检测到阳性细胞。结论成功构建了组氨酸位点突变的全长表达质粒H490A和H621A,两种突变体病毒的感染性均显著降低。

关键词：丙型肝炎病毒病毒包膜蛋白质类组氨酸点突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗新型锌指蛋白ZBTB45单克隆抗体的制备与应用

引用

第二军医大学学报 2011年第12期32卷 1277-1281页

作者：王燕王科嘉李玲陈榕麻献华郭小芹张晔邹大进谢志芳章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学长海医院内分泌科上海200433 第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

目的制备新型锌指蛋白ZBTB45的单克隆抗体,建立该分子的体内外免疫学检测方法,为研究其生物学功能提供技术手段。方法制备小鼠ZBTB45的多表位抗原融合蛋白,免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA检测、多次有限稀释亚克隆建立分... 详细信息

目的制备新型锌指蛋白ZBTB45的单克隆抗体,建立该分子的体内外免疫学检测方法,为研究其生物学功能提供技术手段。方法制备小鼠ZBTB45的多表位抗原融合蛋白,免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA检测、多次有限稀释亚克隆建立分泌ZBTB45单克隆抗体的杂交瘤细胞株,从荷瘤小鼠的腹水中通过蛋白A柱纯化单克隆抗体,鉴定分析所制备抗体在免疫印迹、免疫沉淀和免疫组织化学中的应用效果。结果成功制备了6株抗ZBTB45的特异性单克隆抗体,其中3E5、2G4、4D2和1D4可成功用于免疫印迹和免疫沉淀分析,3E5、6D8和8E3可用于免疫组织化学检测内源性ZBTB45,具有较好的敏感性、特异性。结论首次成功制备了抗ZBTB45单克隆抗体,可应用于体外和体内的免疫学检测,为深入研究ZBTB45的生物学功能提供了技术支持。

关键词：锌指蛋白转录因子 ZBTB45 单克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

海芒果种子提取物nerifolin对人肝癌细胞系HepG2增殖和凋亡的影响

引用

中国肿瘤生物治疗杂志 2011年第1期18卷 51-54页

作者：陈若华蒲瑾戴焱焱黄才国楼国良第二军医大学长海医院特需诊疗科上海200433 第二军医大学基础部生物与分子生物学教研室上海200433

目的:观察来源于海芒果种子的皂苷类化合物nerifolin对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法:MTT法检测不同质量浓度nerifolin对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞术检测nerifolin对HepG2细胞周期和凋亡的影响。Caspas... 详细信息

目的:观察来源于海芒果种子的皂苷类化合物nerifolin对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法:MTT法检测不同质量浓度nerifolin对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞术检测nerifolin对HepG2细胞周期和凋亡的影响。Caspase试剂盒检测nerifolin对HepG2细胞caspase-3酶活化的影响。结果:Nerifolin可时间和剂量依赖性地抑制HepG2细胞增殖,作用24、48、72h的IC50分别为(2.34±0.08)、(0.13±0.01)、(0.06±0.01)μg/ml。随着nerifolin(0.1μg/ml)作用时间的延长,HepG2细胞S期百分比逐渐增多,而G0/G1期百分比逐渐减少(P<0.01),nerifolin阻滞HepG2细胞于S期。Nerifolin作用后,HepG2细胞早期凋亡率上升至22.65%,caspase-3活性比对照组明显升高(P<0.01)。结论:Neri-folin可通过S期阻滞抑制HepG2细胞的增殖,通过caspase-3依赖途径诱导HepG2细胞的凋亡。

关键词：肝癌HepG2 nerifolin 增殖凋亡细胞周期 caspase-3

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脂多糖对B细胞的活化作用及机制的初步研究

引用

第二军医大学学报 2011年第11期32卷 1231-1234页

作者：钱莉佟大可潘兴元田芳龚卫娟季明春扬州大学医学院病原生物学与免疫学教研室扬州225001 第二军医大学长海医院骨科上海200433

目的观察TLR4配体脂多糖(LPS)对B细胞功能影响及相关的信号转导通路。方法利用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B细胞,体外用LPS刺激后,CBA(cytometric bead array)法检测B细胞分泌的Ig(immunoglobulin)亚型;流式细胞术(flow cytometry,FCM... 详细信息

目的观察TLR4配体脂多糖(LPS)对B细胞功能影响及相关的信号转导通路。方法利用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B细胞,体外用LPS刺激后,CBA(cytometric bead array)法检测B细胞分泌的Ig(immunoglobulin)亚型;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测B细胞表型;CBA法检测培养上清中细胞因子IL-6、IL-10、IL-12p70、TNF浓度。利用ERK、JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导抑制剂检测B细胞内细胞因子分泌的信号转导通路。结果 LPS可以诱导B细胞产生IgG1-κ和IgM-κ抗体,上调B细胞表面CD40、CD80、CD86和MHCⅡ类分子的表达,促进IL-6、IL-10和TNF的高分泌。JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导通路调控B细胞IL-6、IL-10和TNF的分泌。结论 LPS可以通过诱导抗体产生、上调共刺激分子表达和促进细胞因子分泌等多方面调节B细胞功能。

关键词：脂多糖类 B淋巴细胞功能信号转导

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丙型肝炎病毒JFH1 NS5A基因对HC-J4病毒复制和感染性的影响

引用

中国生物制品学杂志 2011年第4期24卷 373-378页

作者：王永智王文博许刚曹明媚任浩戚中田第二军医大学微生物学教研室全军生物侦检与防护重点实验室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 解放军254医院心内科天津300142

目的探讨丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)2a FL-J6JFH NS5A基因置换对1b型HC-J4复制和感染性的影响,为建立HCV 1b细胞模型奠定基础。方法将JFH1 NS5A置换至HC-J4基因组内,构建嵌合全长基因组HC-J4/JFHNS-5A。体外制备野生型HC-J4... 详细信息

目的探讨丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)2a FL-J6JFH NS5A基因置换对1b型HC-J4复制和感染性的影响,为建立HCV 1b细胞模型奠定基础。方法将JFH1 NS5A置换至HC-J4基因组内,构建嵌合全长基因组HC-J4/JFHNS-5A。体外制备野生型HC-J4、嵌合体及FL-J6JFH的RNA转录体,脂质体介导转染Huh-7.5细胞,采用间接免疫荧光法(IFA)检测转染细胞内的蛋白表达,HCV负链RNA特异性RT-PCR法和荧光定量PCR方法(FQ-PCR)检测基因复制情况。转染后不同时间收集转染细胞上清,感染naive Huh-7.5细胞,观察其感染性。结果 IFA未观察到野生型HC-J4和嵌合体转染细胞内HCV蛋白的表达,但在转染后18 d内的各个时间点,均检测到HCV负链RNA,表明嵌合体和野生型HC-J4在转染细胞内呈低水平复制。转染后第9天和12天,FQ-PCR检测表明,嵌合体转染细胞内HCV RNA水平明显高于野生型转染的细胞(P<0.05)。不同时间点转染细胞上清感染naive Huh-7.5细胞后,IFA均未观察到表达HCV蛋白的阳性细胞。结论 JFH1 NS5A蛋白虽然在一定程度上可提高1b型HC-J4株在体外培养细胞中的复制能力,但还不足以产生能够检测到的感染性病毒颗粒。HCV 1b细胞模型的建立尚受其他因素的影响。

关键词：丙型肝炎病毒 2a基因型 1b基因型病毒复制感染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

噬菌体展示HIV-1 Tat38-61碱性区51和55位随机突变体文库的构建

引用

生物工程学报 2011年第5期27卷 755-763页

作者：葛宜兵杨旭芳杜哲明庞强曹洁陈秋莉王锦红张华群廖文婷祁培培刘超章萍萍邓松华潘卫安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海200433 武警江西总队医院外一科南昌330000

为了构建噬菌体展示Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库,进一步研究HIV-1 Tat38-61表位的分子进化筛选,采用含随机核苷酸序列的引物,通过Overlap PCR的方法获得51和55位氨基酸随机突变的全长Tat编码序列,再以此为模板PCR扩增出两端含有X... 详细信息

为了构建噬菌体展示Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库,进一步研究HIV-1 Tat38-61表位的分子进化筛选,采用含随机核苷酸序列的引物,通过Overlap PCR的方法获得51和55位氨基酸随机突变的全长Tat编码序列,再以此为模板PCR扩增出两端含有Xba I识别序列的Tat38-61突变体片段HIV-1 Tat38-61(51N/55N),克隆至噬菌体展示载体pCANTAB5S上,转化大肠杆菌TG1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建噬菌体展示Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库。结果显示文库的库容量为5.0×106,滴度为2.65×1012 TU/mL,阳性克隆率为56.50%;序列分析显示文库中51、55位核苷酸与氨基酸均呈随机性分布,达到了对文库进行分子进化筛选的要求,为获得可用作疫苗候选物的新型Tat突变体奠定基础。

关键词： HIV-1 Tat 碱性区随机突变噬菌体展示

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同产地杉木枝叶中穗花杉双黄酮的含量测定

引用

药学服务与研究 2011年第2期11卷 149-150页

作者：张曼刘进鹏刘娟刘品辛海量张磊王玉亮上海交通大学农业与生物学院植物生物技术研究中心上海200240 佳木斯大学药学院生药学教研室佳木斯154007 成都中医药大学药学院药剂学教研室成都611137 第二军医大学长海医院中医科上海200433 第二军医大学药学院生药学教研室上海200433

杉木（Cunninghamia lanceolata）为杉科杉属植物,主要分布在长江流域、秦岭以南地区,为我国南方重要经济树种,具有栽培广泛、生长快、材质好、用途广、产量高等特点。其心材、叶、种子、果实、根等均可入药。其味辛,微温,归肺、脾、胃... 详细信息

杉木（Cunninghamia lanceolata）为杉科杉属植物,主要分布在长江流域、秦岭以南地区,为我国南方重要经济树种,具有栽培广泛、生长快、材质好、用途广、产量高等特点。其心材、叶、种子、果实、根等均可入药。其味辛,微温,归肺、脾、胃经,可辟恶,除秽,除温散毒,降逆气,活血止痛。主治脚气肿满,奔豚,霍乱,心腹胀痛,风湿毒疮,跌打肿痛,创伤出血,烧烫伤等。

关键词：双黄酮穗花杉含量测定色谱法,高效液相

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新型甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体

引用

中华微生物学和免疫学杂志 2010年第12期30卷 1114-1117页

作者：邵圣文周洪昌徐伯赢刘小青方静王岳陈志辉湖州师范学院医学院微生物学教研室 313000 第二军医大学微生物学教研室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、分子病毒与遗传工程国家重点实验室第二军医大学长海医院感染科上海200433

目的探讨新型甲型流感病毒（2009H1N1）血凝素（HA）DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体特性.方法构建2009H1N1或1918甲型流感病毒（1918H1N1）HA蛋白表达质粒2009HA和1918HA,采用25μg或200μg剂量2009HA质粒免疫小鼠,以2009HA或1918HA蛋... 详细信息

目的探讨新型甲型流感病毒（2009H1N1）血凝素（HA）DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体特性.方法构建2009H1N1或1918甲型流感病毒（1918H1N1）HA蛋白表达质粒2009HA和1918HA,采用25μg或200μg剂量2009HA质粒免疫小鼠,以2009HA或1918HA蛋白为包被抗原,测定小鼠血清中2009HA抗体总量或交叉反应抗体含量,分别用2009H1N1和1918H1N1两种假病毒（pp）测定抗体中和活性.结果 25 μg或200μg的2009HA质粒加强免疫小鼠后,4～16周内两组小鼠血清中2009HA总抗体水平以及对2009H1N1pp的中和抗体滴度相似（P〉0.05）,都含有与1918HA蛋白交叉反应抗体,对1918H1N1pp的交叉中和抗体滴度相似（P〉0.05）.结论小剂量2009HA质粒DNA疫苗能够诱导小鼠产生持久的高水平中和抗体,对于预防新现流感病毒具有潜在应用价值.

关键词：新型甲型流感病毒血凝素 DNA疫苗中和抗体假病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：