检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2010年第1期31卷 1-6页

作者：温宗梅曹洁陈秋莉贾建安蒋少华潘卫第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433 同济大学医学院附属上海市肺科医院麻醉科上海200433

目的构建IgA亲和体随机组合文库并进行体外分子进化,研究IgA亲和体分子结构与功能的关系。方法基因合成两个IgA亲和体片段。3′端引入3个随机连接肽序列随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S,构建噬菌体展示随机组合分子文库。以人Ig... 详细信息

目的构建IgA亲和体随机组合文库并进行体外分子进化,研究IgA亲和体分子结构与功能的关系。方法基因合成两个IgA亲和体片段。3′端引入3个随机连接肽序列随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S,构建噬菌体展示随机组合分子文库。以人IgA为靶分子对该文库进行4轮亲和筛选。制备阳性筛选克隆的单克隆噬菌体,用ELISA鉴定IgA结合活性。结果成功构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合分子文库,库容量为3.4×107,滴度为1.6×1012TU/L,阳性克隆占79%以上,序列分析IgA亲和体随机连接,随机连接肽序列呈随机分布。在人IgA分子诱导的分子进化过程中,展示多个IgA亲和体串联体的噬菌体比例明显增加,获得3种新型IgA亲和体组合分子结构形式:IgA亲和体二联体、三联体和四联体。ELISA结合实验表明IgA亲和体三联体和四联体的IgA结合能力远大于单体和二联体。结论通过构建IgA亲和体噬菌体展示随机组合文库和体外分子进化的方法,获得多种新型组合分子,其中IgA亲和体三联体和四联体的IgA结合能力明显增加,提示通过有效的分子进化成功地获得了高亲和力的IgA结合分子。

关键词：肽库免疫球蛋白A亲和体串联重复序列亲和力分子进化

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应用蛋白质组学技术筛选乙型肝炎病毒X蛋白作用相关蛋白质

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中华传染病杂志 2010年第2期28卷 65-71页

作者：李卫华缪晓辉戚中田倪武赵克开朱诗应广州医学院第一附属医院感染科 510120 上海长征医院感染科第二军医大学微生物教研室

目的应用比较蛋白质组学方法寻找HBVX蛋白（HBx）作用相关蛋白，揭示HBx在肝细胞癌发生、发展中作用的分子机制。方法以转染HBx基因的人肝癌细胞株HepG2-Px和转染空白载体的人肝癌细胞株HepG2P。为研究对象，应用二维凝胶电泳技术分离2... 详细信息

目的应用比较蛋白质组学方法寻找HBVX蛋白（HBx）作用相关蛋白，揭示HBx在肝细胞癌发生、发展中作用的分子机制。方法以转染HBx基因的人肝癌细胞株HepG2-Px和转染空白载体的人肝癌细胞株HepG2P。为研究对象，应用二维凝胶电泳技术分离2种细胞的总蛋白质，图像分析识别差异表达的蛋白质点，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱及电喷雾电离串联质谱对差异表达的蛋白质点进行鉴定，蛋白质免疫印迹法验证部分差异表达的蛋白质在2株细胞中的表达水平。数据比较采用t检验。结果得到分辨率较高、重复性较好的2株细胞系的二维凝胶电泳图谱，质谱分析共鉴定32个HBx作用相关蛋白，包括25个在HepG2-Px中表达上凋的蛋白瓶，如热休克蛋白90AB1、Bcl-2相关抗原-2，细胞核磷酸化蛋白、细胞内氯离子通道-1、基质金属蛋白酶3和黑色素瘤相关抗原12等，7个表达下调的蛋白质，如Wnt5a等。蛋白质印迹验证了部分差异表达蛋白在2株细胞中的表达水平。结论筛选出的差异表达蛋白主要涉及宿主细胞的基因转录、信号转导、细胞生长和增殖、细胞周期、细胞凋亡、DNA修复和细胞代谢、免疫应答等过程。提示这些与HBx相互作用的蛋白质可能与肝细胞癌的发生、发展相关，为揭示HBx的作用机制提供了线索。

关键词：肝炎病毒乙型基因病毒癌肝细胞细胞系.肿瘤蛋白质组学电泳琼脂凝胶质谱分析法印迹法蛋白质

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ELISA方法检测肝癌血清标志物的应用

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中国生物制品学杂志 2010年第3期23卷 307-309页

作者：王文王锦红缪晓辉 Mark A Feitelson 戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 上海长征医院感染科上海200003 Department of Biology College of Science and TechnologyTemple University

目的对已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法进行扩大规模临床样本检测,进一步评价和优化该方法。方法利用本实验室建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法,对407份肝病患者血清和95份正常献血员血清进行检测,并对检测结果进行分析。结果324... 详细信息

目的对已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法进行扩大规模临床样本检测,进一步评价和优化该方法。方法利用本实验室建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法,对407份肝病患者血清和95份正常献血员血清进行检测,并对检测结果进行分析。结果324份HBV感染后的肝癌、肝硬化及肝炎患者血清样本中,2种或2种以上指标阳性比例分别为77.6%、76.1%和52.5%,肝癌患者3种或3种以上指标阳性比例较肝硬化和肝炎患者分别高39.9%和310%;在正常献血员、药物性肝炎、酒精性肝炎及其他类型的癌症患者中,87.5%～100%的患者肝癌血清标志物分子≤1种;URG7是最早出现的抗体阳性标志物分子,URG11和S15a抗体则在进展后期或已发展为肝癌的患者血清中呈优势比例出现。结论5种肝癌血清标志物分子与肝癌发生的风险呈正相关,已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法可用于肝癌高危人群的筛选及小肝癌的早期诊断,作为目前AFP和MRI诊断方法的有益补充。

关键词：肝癌血清标志物 ELISA

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改良碘量法快速测定地震灾区饮水消毒中的有效氯含量

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中国卫生检验杂志 2010年第3期20卷 531-532,569页

作者：阮芳铭左晋桐沈志雷周利梅俞镔炯朱时应曹广文张迁常文军第二军医大学海军医学系军队卫生学教研室上海200433 空军青岛航空医学鉴定训练中心山东青岛266071 第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础部流行病学教研室上海200433 第二军医大学长海医院感染科上海200433

目的：研究与验证改良碘量法快速测定地震灾区饮水消毒中有效氯含量的效果。方法：取漂白粉精片、二氯异氰尿酸钠和三氯异氰尿酸消毒液各3个样品,每一样品的有效氯含量按本法各测定5次,以此进行精密度试验;另各取10份同一漂白粉精片和... 详细信息

目的：研究与验证改良碘量法快速测定地震灾区饮水消毒中有效氯含量的效果。方法：取漂白粉精片、二氯异氰尿酸钠和三氯异氰尿酸消毒液各3个样品,每一样品的有效氯含量按本法各测定5次,以此进行精密度试验;另各取10份同一漂白粉精片和二氯异氰尿酸钠消毒液,分别用本法和国标碘量法测定其有效氯含量,比较两种方法的测定结果。结果：精密度平行对照实验显示,测定3种不同含氯消毒剂有效氯含量（%）,其标准差（SD）和相对标准偏差（RSD）分别为：SD=±0.27～0.42,RSD=0.73%～1.12%（漂白粉精片）、SD=±0.35～0.57,RSD=0.86%～1.40%（二氯异氰尿酸钠）和SD=±0.42～0.65,RSD=0.80%～1.25%（三氯异氰尿酸）;本法与国标碘量法比较,两者测定结果的均值经t检验无显著性差异（P0.05）。结论：本法测定结果的精确度与国标碘量法基本一致,适用于平时及野外特殊条件下饮水消毒中有效氯含量的测定。

关键词：有效氯含量测定结果碘量法地震二氯异氰尿酸钠三氯异氰尿酸含氯消毒剂漂白粉饮水消毒两种方法

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肌肉游离移植后MAFbx的表达及与肌肉功能关系的观察

肌肉游离移植后MAFbx的表达及与肌肉功能关系的观察

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第七届中国医师协会美容与整形医师大会

作者：刘安堂于大志张盈帆陈欢任安经方超平蔡在龙江华第二军医大学长征医院整形外科第二军医大学生物化学与分子生物学教研室第二军医大学生理学教研室第二军医大学长海医院中心实验室

目的:观察肌肉移植后一种泛素连接酶MAFbxmRNA和蛋白表达的变化以及肌肉萎缩和肌肉功能的动态恢复情况,并探讨三者之间的关系。方法:建立大鼠股薄肌原位游离移植的模型,以自身为对照,应用实时定量PCR、蛋白质印迹分析、电生理等方法,观... 详细信息

目的:观察肌肉移植后一种泛素连接酶MAFbxmRNA和蛋白表达的变化以及肌肉萎缩和肌肉功能的动态恢复情况,并探讨三者之间的关系。方法:建立大鼠股薄肌原位游离移植的模型,以自身为对照,应用实时定量PCR、蛋白质印迹分析、电生理等方法,观察MAFbx表达、肌肉萎缩和肌肉功能,统计学分析三者之间相关性。结果:肌肉移植术后,肌纤维横截面积、肌肉湿重维持率、肌肉最大单收缩力和肌肉强直收缩力维持率均先降低后增加,术后晚期时仍低于对照组水平(P<0.05)。肌肉移植后MAFbxmRNA和蛋白在术后3周时达到最高后逐渐降低,最高达正常对照侧的7倍和2.5倍,术后晚期时仍持续低水平高表达,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肌肉移植后MAFbx的持续高表达,可能是肌肉萎缩引起肌肉功能降低的一个联系点。MAFbx将能作为骨骼肌萎缩早期的标记物,或者作为药物干预的潜在靶点用于治疗肌肉萎缩。

关键词：肌肉移植泛素蛋白连接酶肌肉湿重肌肉收缩能力

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丙型肝炎疫苗的研究进展与挑战

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国际生物制品学杂志 2010年第4期33卷 180-186页

作者：刘文宇(综述) 戚中田(综述) 第二军医大学附属长征医院学员队上海200003 第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

丙型肝炎病毒（hepatitis C vires,HCV）是具有高度基因变异性的RNA病毒,恢复期患者或黑猩猩再次暴露于不同型（株）病毒时可发生再感染.因此,研发HCV疫苗存在着巨大的挑战.HCV预防性疫苗黑猩猩体内研究证实,诱导并保持针对多个病毒表... 详细信息

丙型肝炎病毒（hepatitis C vires,HCV）是具有高度基因变异性的RNA病毒,恢复期患者或黑猩猩再次暴露于不同型（株）病毒时可发生再感染.因此,研发HCV疫苗存在着巨大的挑战.HCV预防性疫苗黑猩猩体内研究证实,诱导并保持针对多个病毒表位的辅助T细胞和细胞毒性T细胞（cytotoxic T-lymphocyte,CTL）的免疫应答,是清除病毒和防止慢性感染的必要环节.多特异性B细胞应答可快速诱导产生交叉中和抗体,这些抗体有助于细胞免疫应答.此文总结候选HCV疫苗在分子病毒学和抗病毒免疫应答中的研究进展,并就疫苗在黑猩猩和HCV感染者的体内试验研究进行综述.

关键词：丙型肝炎病毒抗体疫苗模型,动物

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PD-1及其配体在感染性疾病中的研究进展

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临床军医杂志 2010年第6期38卷 1071-1075页

作者：周莹娄景盛蔡在龙解放军第二军医大学生物化学与分子生物学教研室解放军第二军医大学长海医院上海200433 解放军第二军医大学临床实验中心上海200433 解放军第二军医大学麻醉科上海200433

PD-1是新近研究较热门的一个免疫细胞抑制性共刺激分子,是CD28家族成员之一,它的配体PD-L1和PD-L2是B7家族成员。PD-1:PD-L途径对于保护机体避免自身免疫损伤,维持免疫稳态有重要意义;其在免疫调节中起着关键性的作用,并在慢性病毒、细... 详细信息

PD-1是新近研究较热门的一个免疫细胞抑制性共刺激分子,是CD28家族成员之一,它的配体PD-L1和PD-L2是B7家族成员。PD-1:PD-L途径对于保护机体避免自身免疫损伤,维持免疫稳态有重要意义;其在免疫调节中起着关键性的作用,并在慢性病毒、细菌、原虫感染、脓毒症的发生发展过程中扮演重要角色,因此近年来受到广泛的关注。本文就此内容作一综述。

关键词： PD-1 配体感染性疾病抑制性共刺激分子家族成员原虫感染新近研究免疫细胞免疫稳态免疫损伤免疫调节发展过程 CD28家族脓毒症 PD-L2 PD-L1 细菌途径内容慢性

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Ad—IL-24诱导U87-MG人脑胶质瘤细胞凋亡的研究

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中华实验外科杂志 2010年第6期27卷 843-843页

作者：韩国胜刘建民盛伟华汪小华单云波杨吉成第二军医大学长海医院神经外科上海200433 苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，约占所有脑肿瘤的50％，目前多采用手术、放疗及化疗等常规疗法，但大部分患者预后不佳。我们利用已构建的腺病毒介导白细胞介素-24（IL-24）基因表达载体（Ad-IL-24），观察其对U87-MG人脑胶... 详细信息

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，约占所有脑肿瘤的50％，目前多采用手术、放疗及化疗等常规疗法，但大部分患者预后不佳。我们利用已构建的腺病毒介导白细胞介素-24（IL-24）基因表达载体（Ad-IL-24），观察其对U87-MG人脑胶质瘤细胞的生长抑制和凋亡作用，并探讨其分子机制。

关键词：人脑胶质瘤细胞瘤细胞凋亡 IL-24 Ad 中枢神经系统基因表达载体白细胞介素腺病毒介导

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肌肉游离移植后MAFbx表达及肌肉功能实验研究

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中国修复重建外科杂志 2009年第8期23卷 969-973页

作者：刘安堂于大志张盈帆朱鴷陈欢任安经方超平蔡在龙江华第二军医大学长征医院整形外科上海200003 第二军医大学长征医院生物化学与分子生物学教研室上海200003 第二军医大学长征医院生理学教研室上海200003 第二军医大学长海医院中心实验室

目的观察肌肉游离移植后泛素连接酶(MAFbx)mRNA和蛋白表达的变化,以及肌肉萎缩和肌肉功能的动态恢复情况,并探讨三者之间的关系。方法雌性SPF级SD大鼠36只,体重(250±25)g。随机选取一侧行股薄肌原位游离移植手术,作为实验侧;另一... 详细信息

目的观察肌肉游离移植后泛素连接酶(MAFbx)mRNA和蛋白表达的变化,以及肌肉萎缩和肌肉功能的动态恢复情况,并探讨三者之间的关系。方法雌性SPF级SD大鼠36只,体重(250±25)g。随机选取一侧行股薄肌原位游离移植手术,作为实验侧;另一侧不行手术作为对照侧。术后观察大鼠一般情况,于术后1、2、4、10、15和30周,分别取6只大鼠测量实验侧和对照侧股薄肌肌肉收缩能力、肌湿重维持率,HE染色观察肌纤维横截面积,实时定量PCR检测MAFbx/Atrogin-1mRNA相对表达量,Western blot检测MAFbx蛋白表达。结果36只大鼠全部成活,切口愈合好,实验侧肢体功能无障碍。实验侧肌纤维横截面积、肌肉湿重维持率、肌肉最大单收缩力维持率和肌肉强直收缩力维持率均呈先降低(术后1～4周)后增加(术后4～30周)的趋势。MAFbxmRNA相对表达量术后2周最高,为对照侧7倍;术后15～30周逐渐下降,为对照侧1.1～1.5倍;各时间点实验侧与对照侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Westernblot检测结果显示术后1～15周,实验侧肌肉内MAFbx蛋白相对表达量与对照侧相比,差异均有统计学意义(P<0.05);术后30周差异无统计学意义(P>0.05)。肌湿重维持率、肌纤维横截面积恢复率分别与最大单收缩力维持率和最大强直收缩力维持率的相关系数为0.95、0.75和0.93、0.68(P<0.05)。MAFbxmRNA及蛋白相对表达量分别与肌肉湿重维持率、肌纤维横截面积恢复率、最大单收缩力维持率、最大强直收缩力维持率的相关系数为—0.62(P<0.05)、—0.45(P>0.05)、—0.72(P<0.05)、—0.78(P<0.05)和—0.95(P<0.05)、—0.82(P<0.05)、—0.89(P<0.05)、—0.54(P>0.05)。结论移植肌肉功能降低与肌肉萎缩密切相关。MAFbxmRNA和蛋白表达增高,尤其在获得神经支配后4～15周仍持续升高,可能是肌肉萎缩引起肌肉功能降低的一个联系点。

关键词：肌肉游离移植泛素蛋白连接酶肌肉萎缩肌肉收缩大鼠

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第二军医大学学报 2009年第4期30卷 416-419页

作者：雷鸣缪明永徐卫东第二军医大学长海医院骨科上海200433 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:探讨骨肉瘤乳腺癌特异基因1(breast carcinoma specific gene 1,BCSG1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lym-phoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关转录因子(Bcl-2-associated transcription factor,BTF)和雌激素受体(estrogen receptor,ER)基因表达水平及意义。方法:用实时荧光定量RT-PCR技术检测16例低(未)分化骨肉瘤标本及成骨细胞系hFOB 1.19细胞株BCSG1、BTF、Bcl-2、ERα、ERβmRNA的表达,分析各指标间的相关性。结果:骨肉瘤组织中BCSG1、Bcl-2、ERα、ERβ的表达明显高于成骨细胞系hFOB 1.19细胞株(P<0.01),BTF表达两组无统计学差异;骨肉瘤组织ERα/ERβ显著高于成骨细胞系hFOB 1.19细胞株(P<0.01);肿瘤瘤体大小、患者性别对BCSG1、Bcl-2、BTF、ERα、ERβ的表达未见显著影响;骨肉瘤组织中BCSG1与ERα(r=0.696,P<0.01)、ERβ与Bcl-2(r=0.875,P<0.01)、ERα/ERβ与Bcl-2基因表达水平(r=-0.649,P<0.01)分别存在线性关系。结论:骨肉瘤组织中可能存在BCSG1增强ERα基因转录激活的作用,ERβ可能影响Bcl-2的表达。

关键词：乳腺癌特异基因 Bcl-2 雌激素受体转录因子骨肉瘤

来源：评论

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