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第二军医大学学报 2017年第5期38卷 602-608页

作者：赵晓峰贺治青吴宗贵梁春第二军医大学长征医院心血管内科上海200003

目的模拟体内急性心肌梗死缺血缺氧微环境,探讨血清剥夺是否能激活心肌成纤维细胞向内皮细胞转分化。方法取新鲜分离的C57BL/6新生小鼠心脏组织,获取成纤维细胞进行培养,用白血病抑制因子(LIF)促进成纤维细胞自我更新、长程维持干性和... 详细信息

目的模拟体内急性心肌梗死缺血缺氧微环境,探讨血清剥夺是否能激活心肌成纤维细胞向内皮细胞转分化。方法取新鲜分离的C57BL/6新生小鼠心脏组织,获取成纤维细胞进行培养,用白血病抑制因子(LIF)促进成纤维细胞自我更新、长程维持干性和抑制其向终末分化。将第3代成纤维细胞分为:对照组[DMEM+10%胎牛血清(FBS)培养]、血清剥夺24 h组(不含FBS的DMEM培养24 h)、血清剥夺48 h组(不含FBS的DMEM培养48 h)、血清剥夺72 h组(不含FBS的DMEM培养72 h)。经过不同处理后,采用q PCR法检测各组细胞谱系特异性基因的表达变化,采用体外血管新生实验和Dil-Ac-LDL吞噬实验检测血清剥夺后成纤维细胞的功能学变化,采用ELISA法检测血清剥夺后成纤维细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的情况。结果血清剥夺不同时间组成纤维细胞形成血管分叉的数目与对照组相比均增加(P<0.05),但均未发现诱导细胞吞噬Dil-Ac-LDL的现象。与对照组比较,血清剥夺48 h组成纤维细胞中内皮特异性基因CD31和VE-herin的表达均升高(P<0.05);其中血清剥夺48 h组成纤维细胞中CD31的表达是对照组的13.7倍(P<0.05),血清剥夺72 h组是对照组的2倍(P<0.05)。ELISA检测结果显示,血清剥夺48h组成纤维细胞分泌的VEGF是对照组的7倍(P<0.05),血清剥夺72 h组是对照组的3.7倍(P<0.05)。结论血清剥夺可以激活心肌成纤维细胞向内皮细胞谱系的转分化。

关键词：成纤维细胞内皮细胞细胞转分化缺血性心脏病血管新生血清剥夺

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穿刺心尖圈套器固定法辅助经导管主动脉瓣置入术的实验研究

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中华心血管病杂志 2014年第10期42卷 873-877页

作者：陈翔朱玉峰谭洪文张志钢张本王飞宇储国俊沈雳马丽萍赵仙先秦永文葛均波复旦大学中山医院心血管内科上海200032 第二军医大学长海医院心血管内科第二军医大学长海医院心胸外科

目的探讨采用穿刺心尖圈套器固定法辅助完成经导管主动脉瓣置入术的可行性和有效性.方法选择健康实验山羊5只,开腹后分离和穿刺腹主动脉.经穿刺口送加硬导丝至左心室,沿加硬导丝经腹主动脉将带瓣膜支架和支架输送装置送至降主动脉.小... 详细信息

目的探讨采用穿刺心尖圈套器固定法辅助完成经导管主动脉瓣置入术的可行性和有效性.方法选择健康实验山羊5只,开腹后分离和穿刺腹主动脉.经穿刺口送加硬导丝至左心室,沿加硬导丝经腹主动脉将带瓣膜支架和支架输送装置送至降主动脉.小切口开胸暴露心尖,直视下穿刺心尖部,J形导丝经左心室-升主动脉送至降主动脉.沿J形导丝送入5F多功能导管和圈套器至降主动脉.操作圈套器,套住并固定支架输送装置头端.前送支架输送装置,将带瓣膜支架送至羊主动脉瓣原位.主动脉瓣上造影确定带瓣膜支架准确到位后,拉紧圈套器以固定支架输送鞘管的头端,防止球囊撑开支架时出现移位.随后撑开球囊,释放支架.术后观察实验效果.结果 5只实验山羊均完成经导管主动脉瓣置入术,术中主动脉瓣上造影显示实验羊的主动脉瓣瓣环直径为（23.8 ±2.6）mm,分别置入直径23 mm带瓣膜支架2枚,直径26 mm带瓣膜支架3枚,手术时间为（112.3±19.5）min,X线透视时间为（16.8±5.2）min,未出现支架移位等并发症.术后即刻人工主动脉瓣上造影和超声心动图检查均显示,带瓣膜支架置入位置理想,人工瓣膜无明显反流及瓣周漏.术后1个月,5只实验山羊均健康存活.结论穿刺心尖圈套器固定法辅助完成经导管主动脉瓣置入术可行,能有效防止支架移位,有助于提高非钙化狭窄性主动脉瓣疾病的手术成功率.

关键词：主动脉瓣支架可行性研究

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运动试验中心绞痛与无症状性心肌缺血病例的比较

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第二军医大学学报 1994年第4期15卷 365-367页

作者：范淑芳韩星海陈思聪第二军医大学长征医院心血管内科第二军医大学长海医院心血管内科

对８７例平板分级运动试验阳性病例，含心绞痛（ＡＰ）组和无症状（ＳＭＩ）组的各项指标进行比较。ＳＭＩ组的运动量和最大心率均大于ＡＰ组，其ＳＴ段下移导联数（ＮＳＴ）、前壁兼下壁导联呈ＳＴ段缺血型改变者均少于ＡＰ组（Ｐ＜０... 详细信息

对８７例平板分级运动试验阳性病例，含心绞痛（ＡＰ）组和无症状（ＳＭＩ）组的各项指标进行比较。ＳＭＩ组的运动量和最大心率均大于ＡＰ组，其ＳＴ段下移导联数（ＮＳＴ）、前壁兼下壁导联呈ＳＴ段缺血型改变者均少于ＡＰ组（Ｐ＜０．０１）。提示ＳＭＩ组病变较轻，ＡＰ组多支病变可能性较大；对从来无疼痛的运动试验阳性患者尚需长期观察。

关键词：运动试验心绞痛心肌缺血

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微创采血结合多色流式细胞术分析小鼠外周血记忆T细胞亚群

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第二军医大学学报 2014年第5期35卷 529-534页

作者：杨阳俞诚虹段磊贺治青丁茹伍锋代现良黄帅波梁春吴宗贵第二军医大学长征医院心血管内科上海200003

目的为实现序贯多时间连续采血监测小鼠外周血记忆T细胞亚群的变化情况，建立并优化微创采血结合多色流式细胞术分析的方法体系。方法经隐静脉进行微创采血，使用荧光补偿微球进行多色荧光补偿矩阵的建立，在BDCalibur双激光流式细胞仪... 详细信息

目的为实现序贯多时间连续采血监测小鼠外周血记忆T细胞亚群的变化情况，建立并优化微创采血结合多色流式细胞术分析的方法体系。方法经隐静脉进行微创采血，使用荧光补偿微球进行多色荧光补偿矩阵的建立，在BDCalibur双激光流式细胞仪上分析小鼠外周血记忆T细胞亚群（初始T细胞、中心记忆T细胞、效应记忆T细胞），评估采血体积、全血是否离心、抗体孵育浓度、红细胞裂解后是否洗涤等参数对多色流式分析结果的影响。随后采用优化的流式细胞分析方法动态评估C57和动脉粥样硬化（As）易发载脂蛋白E基因敲除（apoE-/-）小鼠在从常规饮食切换至高脂饮食过程中记忆T细胞的演变过程。结果（1）经小鼠隐静脉可实现10～50μL采血，该采血可无需对实验动物进行麻醉，能够实现多次重复采血，且10μL全血即可满足多色流式细胞术分析的需要，并减少抗体用量。（2）联合高速离心分离血细胞进一步缩小抗体孵育体积，则可进一步节省抗体的用量。（3）对抗体浓度的优化能在保证检测结果准确性和可重复性好的基础上进一步降低抗体用量和背景荧光的干扰。（4）红细胞裂解后加用洗涤可进一步降低背景荧光，但延长操作时间；也可裂解后直接上机检测。（5）使用上述流式细胞学分析方法揭示：apoE-/-小鼠在常规饮食基线水平其体内的效应记忆T细胞水平即高于对照C57小鼠（P〈0．05），给予高脂饮食3周后基本达到平台，而C57小鼠在高脂饮食2周即达到平台，表明apoE-/-小鼠在AS斑块进展早期即出现免疫调节紊乱。结论采用隐静脉采血结合优化流式细胞术抗体孵育流程可实现序贯连续采血，完成对小鼠体内记忆T细胞亚群的动态观察。

关键词：微创采血流式细胞术外周血记忆T细胞

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两种不同机制心动过速并存的射频消融治疗

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第二军医大学学报 1999年第6期20卷 397-399页

作者：曹江秦永文周炳炎胡坚强陈少萍曹爱芳毛红娟第二军医大学长海医院心血管内科

目的：观察两种不同机制心动过速并存的心内电生理特点和导管射频消融（ＲＦＣＡ）的疗效。方法：８例患者（男４例，女４例）经全面的心内电生理检查，确定存在两种不同机制的心动过速，常规消融一种心动过速后，重复电生理检查，诱发... 详细信息

目的：观察两种不同机制心动过速并存的心内电生理特点和导管射频消融（ＲＦＣＡ）的疗效。方法：８例患者（男４例，女４例）经全面的心内电生理检查，确定存在两种不同机制的心动过速，常规消融一种心动过速后，重复电生理检查，诱发第２种心动过速，再次消融治疗。结果：房室结折返性心动过速（ＡＶＮＲＴ）＋房室折返性心动过速（ＡＶＲＴ）３例，ＡＶＮＲＴ＋房内折返性心动过速（ＩＡＲＴ）３例，ＡＶＮＲＴ＋室性心动过速（ＶＴ）１例，ＡＶＲＴ＋ＩＡＲＴ１例。７例ＡＶＮＲＴ中有６例Ａ－Ｈ间期跳跃＞５０ｍｓ，消融后均消失。４例ＩＡＲＴ均起源于右心房。３例患者消融前已确定存在两种心动过速，另５例在一种心动过速消融成功后，重复电生理检查时发现还有另一种心动过速。１例ＶＴ＋ＡＶＮＲＴ有晕厥史，ＶＴ起源于右下室间隔近心尖处。除１例ＩＡＲＴ未消融，其余心动过速均成功消融，平均Ｘ线时间（２３±３）ｍｉｎ，无并发症，术后随访５～３１个月无复发。结论：尽管手术比较复杂，只要电生理检查全面详细，仍能正确诊断并存两种机制的心动过速，射频消融治疗安全有效。

关键词：心动过速心脏电生理射频消融术

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动脉粥样硬化兔主动脉内皮素A受体原位杂交研究

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第二军医大学学报 1999年第12期20卷 1038-1039页

作者：荆清张国元秦永文吴宗贵第二军医大学长海医院心血管内科上海200433 第二军医大学长征医院心血管内科

对动脉粥样硬化(AS)的发生机制研究是一个重要的前沿课题,尤其在内皮细胞损伤和内皮功能紊乱、脂质的异常代谢以及生长因子、细胞因子和血管活性因子的作用等方面目前又成为倍受关注的热点[1～3]。本实验通过建立兔AS模型,观察主动脉的... 详细信息

对动脉粥样硬化(AS)的发生机制研究是一个重要的前沿课题,尤其在内皮细胞损伤和内皮功能紊乱、脂质的异常代谢以及生长因子、细胞因子和血管活性因子的作用等方面目前又成为倍受关注的热点[1～3]。本实验通过建立兔AS模型,观察主动脉的内皮素受体A亚型(ETRA)表达改变,并初...

关键词：动脉粥样硬化内皮素A受体原位杂交兔

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“大拇指”心电监测仪对消融术后心房颤动复发的监测研究

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第二军医大学学报 2021年第1期42卷 35-40页

作者：顾赛男秦爱红赵耀左文章曹江黄松群海军军医大学(第二军医大学)长海医院心血管内科上海200433

目的探讨“大拇指”心电监测仪对消融术后心房颤动复发的监测效果,以及人工智能算法在心房颤动诊断中的优势。方法前瞻性选择2019年3月至2019年8月我院收治的符合条件的185例行介入消融治疗的非瓣膜性心房颤动患者,利用随机数表法随机... 详细信息

目的探讨“大拇指”心电监测仪对消融术后心房颤动复发的监测效果,以及人工智能算法在心房颤动诊断中的优势。方法前瞻性选择2019年3月至2019年8月我院收治的符合条件的185例行介入消融治疗的非瓣膜性心房颤动患者,利用随机数表法随机分为两组:大拇指组(94例)和传统随访组(91例)。随访并比较两组患者的无心房颤动生存率,比较人工智能算法与传统心电算法诊断心房颤动的灵敏度和特异度。结果至随访截止日大拇指组和传统随访组分别随访98~263(157.0±38.4)d和91~268(158.8±54.7)d,log-rank检验显示两组无心房颤动生存率分别为79.8%(75/94)和92.3%(84/91)(P<0.05)。术后3个月后大拇指组改变治疗策略的患者比例高于传统随访组(P<0.05)。大拇指组94例患者共记录了18981份心电图,1520份(8.0%)由心电图医师诊断为心房颤动,人工智能算法诊断心房颤动的灵敏度和特异度分别为96.5%(1467/1520)和99.6%(17391/17461),均高于传统心电算法的灵敏度和特异度[分别为89.7%(1363/1520)和97.2%(16972/17461)],差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论“大拇指”心电监测仪在消融术后能更早地检出心房颤动复发,利于及时改变治疗策略。人工智能算法能提高心房颤动诊断的准确性,利用人工智能算法的“大拇指”心电监测仪用于心房颤动消融术后的随访结果可靠。

关键词：便携式设备人工智能便携式心电描记术导管消融术心房颤动

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替格瑞洛影响冠心病患者血浆腺苷浓度的研究进展

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第二军医大学学报 2019年第6期40卷 664-667页

作者：徐汝明马丽萍海军军医大学(第二军医大学)长海医院心血管内科

替格瑞洛是一种新型口服抗血小板药物,通过直接作用于二磷酸腺苷(ADP)受体P2Y12抑制ADP介导的血小板聚集,发挥抗血小板功能。除抑制血小板聚集外,替格瑞洛还表现出生物多效性,如增加冠状动脉血流、限制心肌梗死面积和诱发呼吸困难等。... 详细信息

替格瑞洛是一种新型口服抗血小板药物,通过直接作用于二磷酸腺苷(ADP)受体P2Y12抑制ADP介导的血小板聚集,发挥抗血小板功能。除抑制血小板聚集外,替格瑞洛还表现出生物多效性,如增加冠状动脉血流、限制心肌梗死面积和诱发呼吸困难等。研究认为替格瑞洛的生物多效性与腺苷密切相关,但目前有关替格瑞洛对血浆腺苷浓度影响的研究结果并不一致,可能与血浆腺苷浓度的不同测定方法(尤其是终止液配比)、不同测定时间点等有关。规范血浆腺苷浓度的测定方法以及动态监测服用替格瑞洛后血浆腺苷浓度的变化,有助于进一步明确替格瑞洛对血浆腺苷浓度的影响。

关键词：冠心病替格瑞洛腺苷血浆浓度

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2007-2018年住院ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死患者比例及院内死亡率变化趋势

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第二军医大学学报 2020年第10期41卷 1053-1061页

作者：陈卫省顾颖肖雨尘赵仙先马丽萍海军军医大学(第二军医大学)长海医院心血管内科上海200433

目的探讨住院ST段抬高型心肌梗死(STEMI)和非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者构成比及院内死亡率逐年变化趋势。方法回顾性分析2007年1月1日至2018年12月31日于海军军医大学(第二军医大学)长海医院心血管内科住院治疗且出院诊断为急性... 详细信息

目的探讨住院ST段抬高型心肌梗死(STEMI)和非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者构成比及院内死亡率逐年变化趋势。方法回顾性分析2007年1月1日至2018年12月31日于海军军医大学(第二军医大学)长海医院心血管内科住院治疗且出院诊断为急性心肌梗死(AMI)的4868例患者资料,通过年度变化百分比(APC)法分析STEMI和NSTEMI患者构成比和院内死亡率的变化趋势。结果4868例AMI患者中STEMI患者3064例(62.9%),NSTEMI患者1804例(37.1%)。NSTEMI患者比例在12年内呈上升趋势(APC值为14.0%,P<0.01),由2007年的15.7%上升至2018年的45.2%;STEMI患者比例呈下降趋势(APC值为-5.5%,P<0.01),由2007年的84.3%下降至2018年的54.8%。2007-2018年,AMI患者院内死亡率呈下降趋势(APC值为-6.6%,P<0.05),由2007年的7.0%下降至2018年的4.3%;NSTEMI患者院内死亡率呈下降趋势(APC值为-11.9%,P<0.05),由2007年的13.9%下降至2018年的1.9%;而STEMI患者院内死亡率并无明显变化(APC值为-3.8%,P=0.225)。结论2007-2018年海军军医大学(第二军医大学)长海医院住院AMI患者中,NSTEMI患者比例呈上升趋势。NSTEMI患者院内死亡率在12年内呈下降趋势,而STEMI患者的院内死亡率并无明显下降。

关键词：心肌梗死 ST段抬高型心肌梗死非ST段抬高型心肌梗死构成比医院死亡率

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荧光素酶-微RNA-126海绵腺病毒的构建及应用

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第二军医大学学报 2020年第5期41卷 520-526页

作者：徐强涂丁元赵仙先海军军医大学(第二军医大学)长海医院心血管内科上海200433

目的建立荧光素酶-miRNA海绵腺病毒的构建方法,并验证该腺病毒的表达产物与miRNA的结合效率。方法化学合成能与miRNA-126部分互补配对的DNA片段;PCR扩增miRNA-126海绵片段,将其克隆至pMD-18T载体及psiCheck2质粒hRluc的3’端非编码区;将... 详细信息

目的建立荧光素酶-miRNA海绵腺病毒的构建方法,并验证该腺病毒的表达产物与miRNA的结合效率。方法化学合成能与miRNA-126部分互补配对的DNA片段;PCR扩增miRNA-126海绵片段,将其克隆至pMD-18T载体及psiCheck2质粒hRluc的3’端非编码区;将hRluc-miRNA-126海绵克隆至Ad-Track质粒,PmeⅠ酶切使Ad-Track-hRluc-miRNA-126 sponge质粒线性化,并转化BJ5183感受态细菌,与Ad-Easy质粒同源重组;重组质粒经PacⅠ酶切鉴定后,转染293细胞,7 d后收获腺病毒;用腺病毒感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),通过细胞划痕实验观察miRNA-126对细胞迁移能力的影响。结果MiRNA-126海绵与miRNA-126形成碱基互补配对关系;双荧光素酶实验结果表明miRNA-126能够直接作用于hRluc-miRNA-126海绵。将hRluc-miRNA-126海绵克隆至Ad-Track质粒使得同步检测细胞转染效率和miRNA抑制效率成为可能。通过Ad-Track与Ad-Easy同源重组,成功构建Ad-Easy-hRluc-miRNA-126 sponge质粒,酶切后可见4.5 kb片段。将其转染293细胞,7 d后获得荧光素酶-miRNA海绵腺病毒;miRNA-126过表达能够抑制腺病毒表达产物hRluc-miRNA-126海绵(P<0.01),感染miRNA-126海绵腺病毒可以抑制HUVEC的迁移能力(P<0.05)。结论成功建立了荧光素酶-miRNA海绵腺病毒,miRNA-126与该腺病毒的表达产物有较高的结合效率。

关键词：荧光素酶微RNA海绵腺病毒微RNA

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