检索结果-内蒙古大学图书馆

海军军医大学学报 2025年第2期46卷 155-167页

作者：焦莉娟何妙侠海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院病理科上海200433

随着分子病理与高通量测序技术的广泛应用,人们对淋巴造血组织肿瘤基因组特征的认识越来越深入。基因检测技术及其带来的新进展对推动淋巴瘤诊疗具有重要意义。本文介绍了用于淋巴瘤病理诊断与研究的新技术,包括全基因组测序、循环肿瘤... 详细信息

随着分子病理与高通量测序技术的广泛应用,人们对淋巴造血组织肿瘤基因组特征的认识越来越深入。基因检测技术及其带来的新进展对推动淋巴瘤诊疗具有重要意义。本文介绍了用于淋巴瘤病理诊断与研究的新技术,包括全基因组测序、循环肿瘤DNA分析、单细胞分析和表观遗传学研究等;并以新版WHO淋巴造血组织肿瘤分类为基础,阐述了常见淋巴瘤的基因特征、预后分层与治疗的最新进展,以指导淋巴瘤的病理诊断与临床治疗。

关键词：基因检测淋巴瘤辅助诊断治疗

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NRAS基因突变结直肠癌临床病理和分子遗传特征分析

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海军军医大学学报 2025年第05期 609-620页

作者：蒋英杰刘言孙波何宗杰丁丹白辰光海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院病理科海军军医大学(第二军医大学)基础医学院

目的分析神经母细胞瘤大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(NRAS)基因突变结直肠癌(CRC)患者的临床病理特征与其肿瘤组织中Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)、磷脂酰肌醇4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、v-raf鼠科肉瘤病毒癌基因同源... 详细信息

目的分析神经母细胞瘤大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(NRAS)基因突变结直肠癌(CRC)患者的临床病理特征与其肿瘤组织中Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)、磷脂酰肌醇4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、v-raf鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1(BRAF)基因突变状态及错配修复(MMR)蛋白、人表皮生长因子受体2(HER-2)蛋白表达的关系。方法回顾性分析546例NRAS基因突变CRC患者的临床病理资料。采用基因突变联合检测试剂盒(荧光PCR法)检测NRAS、KRAS、PIK3CA、BRAF基因的突变状态，采用免疫组织化学染色EnVision法检测MMR、HER-2蛋白的表达情况，并分析它们与患者临床病理特征的关系。结果　NRAS基因突变CRC患者中，NRAS基因单一位点突变者占98.35%(537/546)，NRAS基因双位点突变者占1.65%(9/546)，NRAS和KRAS基因同时突变者占1.47%(8/546)，未检出PIK3CA、BRAF基因突变的患者。NRAS基因突变类型包括Q61R(或Q61K、Q61L、Q61H)突变(266/546，48.72%)、G12D(或G12S)突变(154/546，28.21%)、G13R(或G12C、G12V、G12A、G13V)突变(134/546，24.54%)和A146T突变(1/546，0.18%)。其中，G13R(或G12C、G12V、G12A、G13V)突变更容易发生在原发于直肠的CRC患者(P=0.035)；与该位点未突变患者相比，突变患者虽然肿瘤最大径更大(P=0.029)，但患者术后无进展生存期更长(P=0.028)。在NRAS基因突变的患者中，HER-2阳性与神经周围浸润相关(P=0.003)，MMR蛋白表达缺陷的患者平均年龄更小(P=0.041)且与NRAS双位点突变相关(P=0.018)。结论　NRAS基因突变CRC可能具有独特的临床病理表现与分子表型，为后续CRC的个体化治疗和预后评估提供了潜在依据。

关键词：结直肠肿瘤 NRAS基因突变临床病理特征错配修复蛋白人表皮生长因子受体2

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乙型肝炎病毒X基因经p53依赖性与非依赖性途径对p21^(WAF1)表达的影响

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癌症 2004年第7期23卷 749-755页

作者：林静朱明华曲建慧李芳梅倪灿荣第二军医大学长海医院病理科

背景与目的研究表明,在不同情况下乙型肝炎病毒X基因(HBx)对p21WAF1的表达具有不同的影响,但作用机制仍不清楚。本研究的目的是探讨HBx对p53下游基因p21WAF1的影响。方法通过正、反义野生型p53(wtp53)与HBx单转染及共转染人肝癌细胞株SM... 详细信息

背景与目的研究表明,在不同情况下乙型肝炎病毒X基因(HBx)对p21WAF1的表达具有不同的影响,但作用机制仍不清楚。本研究的目的是探讨HBx对p53下游基因p21WAF1的影响。方法通过正、反义野生型p53(wtp53)与HBx单转染及共转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,以及HBx转染不同内源性p53状态的肝癌细胞株,检测p21WAF1启动子荧光素酶基因表达,并用流式细胞仪观察细胞周期的变化,Westernblot法比较p53、p21WAF1表达水平的变化。结果正、反义wtp53与HBx单转染及共转染SMMC-7721细胞,HBx与正义wtp53共转染组(1.007±0.098)与单转染正义wtp53(0.490±0.012)相比,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显升高(P<0.05),其余各组HBx均可导致p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显减少(P<0.05)。Westernblot法表明HBx可导致p53的表达增加,但p53表达较低的SMMC-7721细胞转染HBx后p21WAF1蛋白的表达减弱,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达(0.053±0.010)也较对照组(0.094±0.013)明显减少(P<0.05),而p53表达较强的HepG2细胞转染HBx后p21WAF1蛋白的表达增强、p21WAF1启动子荧光素酶基因的表达(1.252±0.052)较对照组明显升高(0.767±0.031)(P<0.05)。细胞周期结果表明瞬时转染HBx的SMMC-7721和Hep3B细胞停滞在G0-G1期细胞数(42.31%、36.96%

关键词： p53基因乙型肝炎病毒X p21^WAF1肝细胞癌

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乙型肝炎病毒X和p53对肝癌细胞生长的影响

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中华病理学杂志 2003年第1期32卷 43-47页

作者：林静朱明华祝峙曲建慧李芳梅倪灿荣第二军医大学长海医院病理科

目的　探讨乙型肝炎病毒X(HBx)基因与p5 3在损伤情况下的相互作用及对肝癌细胞生长的影响及作用机制。方法　通过构建正义及反义野生型 (wt)p5 3 ,与HBx分别单转染或共转染含wtp5 3 ( + )、HBV( - )的人肝癌细胞株SMMU 772 1细胞 ,在吡... 详细信息

目的　探讨乙型肝炎病毒X(HBx)基因与p5 3在损伤情况下的相互作用及对肝癌细胞生长的影响及作用机制。方法　通过构建正义及反义野生型 (wt)p5 3 ,与HBx分别单转染或共转染含wtp5 3 ( + )、HBV( - )的人肝癌细胞株SMMU 772 1细胞 ,在吡柔比星的诱导下 ,用流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响 ,及HBx对细胞周期的影响 ,并通过检测含p5 3结合位点p2 1Waf1启动子荧光素酶活性来观察HBx是否通过p5 3影响p2 1Waf1的表达 ,以及绘制细胞生长曲线观察HBx对SMMU 772 1细胞生长的影响。结果　在吡柔比星的诱导下 ,HBx能够促进细胞凋亡 ,转染空载体组及pcDNA3HBx组细胞凋亡率分别为 5 3 2 %和 12 66%。但HBx对外源性p5 3诱导的细胞的凋亡具有抑制作用 ,转染空载体、正义pcDNA3wtp5 3及正义pcDNA3wtp5 3 +pcDNA3HBx组细胞凋亡率分别为 5 3 2 %、11 72 %、4 67%。同时处在G0 ～G1期瞬时表达及稳定转染HBx细胞数较对照组分别减少 4 79% ,10 2 5 %。而且HBx可抑制p2 1Waf1启动子荧光素酶的活性 (P <0 0 5 )及促进细胞生长。结论　细胞在DNA损伤因素的作用下 ,HBx可能通过抑制p5 3导致p2 1Waf1的表达降低 ,引起停滞在G0 ～G1期的细胞减少。

关键词：乙型肝炎病毒X p53基因肝癌癌细胞反式激活因子细胞周期蛋白细胞凋亡

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乙型肝炎病毒X蛋白羧基端缺失突变体转染细胞的基因表达谱和蛋白质组差异分析

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中华医学杂志 2005年第48期85卷 3425-3429页

作者：刘晓红陈颖王力赵海华朱明华第二军医大学长海医院病理科

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)羧基端40个氨基酸的缺失突变体(HBx3′-40)不同生物学效应的分子基础。方法采用Trizol法抽提HBx3′-40(实验组)和野生型HBx(wtHBx,对照组)转染的人肝癌Huh7细胞的总RNA,经标记后,与含21074个靶基因点的c... 详细信息

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)羧基端40个氨基酸的缺失突变体(HBx3′-40)不同生物学效应的分子基础。方法采用Trizol法抽提HBx3′-40(实验组)和野生型HBx(wtHBx,对照组)转染的人肝癌Huh7细胞的总RNA,经标记后,与含21074个靶基因点的cDNA芯片进行杂交,通过扫描杂交信号强弱获得差异表达基因;用固相梯度双向凝胶电泳分离实验组和对照组的细胞总蛋白质,银染显色,PDQuest2-D软件分析两组细胞蛋白质组的表达差异,借助质谱技术鉴定其中的差异蛋白质点。结果cDNA芯片检测结果显示,对比wtHBx组,HBx3′-40组存在165个基因(0.82%)的显著性改变,144和21个基因分别显示上调和下调。双向凝胶电泳结果显示,对比wtHBx组,HBx3′-40组存在(135±13)个蛋白差异点。基因表达谱和质谱分析结果显示,HBx3′-40组差异表达的基因和蛋白质主要涉及宿主细胞的基因转录、癌基因和抑癌基因、细胞连接、信号转导和代谢、免疫应答等过程。结论HBx缺失突变体对细胞基因和蛋白质的影响是广泛的,调节涉及肝组织特异性的代谢基因的变化。这些差异表达的基因和蛋白质在HBx突变致癌过程中是否发挥了重要的作用,需要进一步的研究证实。

关键词：肝细胞乙型肝炎病毒 cDNA微列阵双向凝胶电泳基因表达谱

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原癌基因c-kit在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义

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中华外科杂志 2002年第4期40卷 277-279页

作者：刘晓红马大烈吴丽莉白辰光胡宏杰第二军医大学长海医院病理科

目的　通过检测胃肠道间质瘤 (gastrointestinalstromaltumor ,GIST)中原癌基因c kit蛋白表达 ,探讨c kit在GIST中的诊断及预后意义。　方法　应用免疫组织化学技术EnVision微波二步法检测了 12 2例GIST(良性 5 4例 ,潜在恶性 13例 ,恶... 详细信息

目的　通过检测胃肠道间质瘤 (gastrointestinalstromaltumor ,GIST)中原癌基因c kit蛋白表达 ,探讨c kit在GIST中的诊断及预后意义。　方法　应用免疫组织化学技术EnVision微波二步法检测了 12 2例GIST(良性 5 4例 ,潜在恶性 13例 ,恶性 5 5例 )中的c kit蛋白的表达情况 ,并与平滑肌瘤、神经鞘瘤进行对照研究。不着色或仅细胞核着色者为阴性 ,凡肿瘤细胞浆内或 (和 )细胞膜上有棕黄色颗粒者为阳性。　结果　GIST中c kit的阳性表达率为 97% (118/ 12 2 ) ,阳性信号定位准确。其中 ,良性组、潜在恶性组及恶性组c kit的阳性率分别为 98% (5 3/ 5 4 )、93% (12 / 13)、96 % (5 3/ 5 5 )。与良性组相比 ,转移或复发病例c kit蛋白着色较淡 ,但 3组之间c kit的表达水平差异无显著意义 (χ2 =1 16 7,P >0 0 5 )。平滑肌瘤和神经鞘瘤c kit阴性表达。　结论　c kit作为一种胃肠道间质瘤特异而敏感的标记物 ,对GIST的诊断及鉴别诊断有重要的意义。

关键词：原癌基因蛋白质 c-kit类突变免疫组织化学胃肠道间质瘤

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胸腺瘤伴弥漫性泛细支气管炎一例报告并文献复习

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中华结核和呼吸杂志 2004年第9期27卷 608-610页

作者：张妲王昌惠李强郑建明余永伟第二军医大学长海医院呼吸科第二军医大学长海医院病理科

目的　提高对弥漫性泛细支气管炎 (DPB)的认识。方法　对 1例经胸腔镜肺活检病理确诊为DPB患者的临床资料进行分析 ,并结合文献复习。结果　DPB是一种慢性小气道疾病 ,以两肺弥漫性呼吸性细支气管的炎症为特征。DPB的病因及发病机制尚... 详细信息

目的　提高对弥漫性泛细支气管炎 (DPB)的认识。方法　对 1例经胸腔镜肺活检病理确诊为DPB患者的临床资料进行分析 ,并结合文献复习。结果　DPB是一种慢性小气道疾病 ,以两肺弥漫性呼吸性细支气管的炎症为特征。DPB的病因及发病机制尚不清楚 ,可能与遗传和免疫因素有关。临床表现为慢性咳嗽、咳痰、活动后气短 ,常合并铜绿假单胞菌感染。如不治疗 ,患者可发展为呼吸衰竭 ,预后不良。结论　遇到不明原因的双肺结节状阴影应想到DPB ,并争取做肺组织活检以明确诊断。

关键词：弥漫性泛细支气管炎治疗患者文献复习胸腺瘤炎症诊断 DPB 改善低剂量

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P53与乙型肝炎病毒增强子Ⅰ上游P53样应答元件结合序列关系研究

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癌症 2004年第5期23卷 502-507页

作者：曲建慧朱明华林静倪灿荣李芳梅祝峙于观贞第二军医大学长海医院病理科上海200433

背景与目的:在前期工作中,我们经计算机序列分析发现,在乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)基因组增强子Ⅰ上游1047～1059bp存在P53样应答元件结合序列5'-TGCC(G)TTGCCT-3',体外实验应用凝胶迁移方法(EMSA和EMSSA)发现这段序列... 详细信息

背景与目的:在前期工作中,我们经计算机序列分析发现,在乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)基因组增强子Ⅰ上游1047～1059bp存在P53样应答元件结合序列5'-TGCC(G)TTGCCT-3',体外实验应用凝胶迁移方法(EMSA和EMSSA)发现这段序列与P53蛋白能够进行特异性结合。本实验拟观察肝癌细胞中P53蛋白与HBV基因组P53样应答元件结合序列之间的关系。方法:报告基因质粒pX-CAT上游为X基因增强子和启动子序列,其中含有P53样应答元件结合序列5'-TGCGTTGCCT-3'。首先用PCR方法将pX-CAT质粒中5'-TGCGTTGCCT-3'进行点突变,成为5'-TGTATTGTAT-3',以破坏P53样应答元件结合序列。将pX-CAT和变异后的pX-CAT(mpX-CAT)分别单独或与pCMV-p53质粒共转染HepG2细胞,通过检测报告基因CAT的活化情况,观察P53蛋白与这段DNA序列的作用关系。将HBV基因P53样应答元件结合序列反向构建于真核表达质粒pZeoSV2中(αpZeoXP),转染HepG2.2.15细胞并稳定筛选,以封闭HBV基因上P53样结合位点,观察细胞中P53/P21蛋白表达的改变,以及细胞周期、细胞凋亡的变化。结果:HepG2细胞中,报告基因CAT活性在pCMV-p53与pX-CAT共转染组较pX-CAT单独转染组明显升高(1.353vs0.738,P<0.05),而mpX-CAT单独转染组CAT活性则明显降低(0.304),即使与pCMV-p53共转染CAT活性?

关键词： P53 乙型肝炎病毒增强子I上游 P53样应答元件序列关系

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应用组织芯片检测肝细胞癌组织中8种p53相关基因的表达

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癌症 2003年第7期22卷 680-685页

作者：朱明华倪灿荣祝峙李芳梅张顺民第二军医大学长海医院病理科上海200433

背景及目的:肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的发生是一个多步骤、多基因参与的过程。目前已知与HCC相关的癌基因和抑癌基因有十余种,其中p53基因家族的功能变化是HCC发生发展过程中的重要分子事件。本研究利用组织芯片高通量的... 详细信息

背景及目的:肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的发生是一个多步骤、多基因参与的过程。目前已知与HCC相关的癌基因和抑癌基因有十余种,其中p53基因家族的功能变化是HCC发生发展过程中的重要分子事件。本研究利用组织芯片高通量的优点,探讨肝细胞癌及癌旁肝组织中p53基因家族及相关基因中8种癌基因及抑癌基因的表达差异。方法:应用Instrumedics公司生产的组织芯片制作仪,取样针直径2mm,制作成3个肝细胞癌组织芯片蜡块,包括273例肝细胞癌组织、144例癌旁肝组织及10例非肝病死亡的尸检正常肝组织。应用免疫组织化学方法检测了p16INK4a、p21WAF1、p33ING1b、p53、p57KIP2、p73、mdm2和ATM8种基因在HCC及癌旁肝组织中的表达率,同时观察乙肝病毒(hapatitisBvirus,HBV)感染与这8种基因表达间的关系。结果:3个肝癌组织芯片分别含有136、143和148个位点。8种基因在HCC和癌旁肝组织中的阳性表达率分别为p16INK4a35.9%和9.0%、p21WAF141.8%和11.1%、p33ING1b43.65%和14.6%、p5346.2%和12.5%、p57KIP239.2%和16.7%、p739.5%和2.8%、mdm241.4%、9.0%和ATM6.6%和1.4%。在癌组织中上述基因的表达强于癌旁肝组织(P<0.05);不同分化程度的HCC组织中8种基因的阳性表达率差异均不显著(P>0.05);除了p16INK4a、p21WAF1、

关键词：组织芯片检测肝细胞癌 p53 基因的表达癌组织

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HBx蛋白羧基端缺失对肝癌细胞生物学行为的影响

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癌症 2005年第10期24卷 1213-1219页

作者：刘晓红朱明华曹晓哲郑建明陈颖第二军医大学长海医院病理科上海200433

背景与目的:肝癌组织内普遍存在着截短表达的HBx蛋白,这种蛋白可能与肝癌的发生有关,本研究探讨截短表达的HBx蛋白和野生型HBx对人肝癌细胞Huh7生物学行为的影响。方法:脂质体法介导HBx突变体和野生型HBx重组体转染HBV(-)的Huh7细胞。PC... 详细信息

背景与目的:肝癌组织内普遍存在着截短表达的HBx蛋白,这种蛋白可能与肝癌的发生有关,本研究探讨截短表达的HBx蛋白和野生型HBx对人肝癌细胞Huh7生物学行为的影响。方法:脂质体法介导HBx突变体和野生型HBx重组体转染HBV(-)的Huh7细胞。PCR方法扩增Neo基因检测质粒DNA片段插入。通过MTT、平板克隆形成实验、流式细胞仪和裸鼠成瘤实验检测稳定转染细胞的生物学活性。结果:HBx3′-20和HBx3′-40组细胞生长速度较HBx3′-30组明显增快(P<0.05);HBx3′-20组[(17.34±2.77)%]和HBx3′-40组[(18.36±2.61)%]克隆形成率明显较HBx3′-30组[(7.31±1.44)%]和pcDNA3组[(6.87±2.38)%]高(P<0.05)。细胞周期检测结果显示,对比于野生型HBx组,HBx3′-20组和HBx3′-40组蛋白的表达能加速Huh7细胞由G0/G1期到S期的进程[S期:(36.96±1.82)%vs.(46.20±3.23)%,(53.99±4.02)%,P<0.05],相反,HBx3′-10和HBx3′-30组则出现G1期阻滞,而HBx组与pcDNA3空载体组间[(38.60±1.15)%]在S期无明显变化。裸鼠成瘤实验显示,HBx3′-40组[(3.19±0.34)cm3]成瘤体积明显大于HBx3′-30组[(1.58±0.27)cm3]、HBx组[(1.75±0.15)cm3]和pcDNA3组[(1.67±0.12)cm3],各组瘤重存在显著性差异(P<0.01)。结论:对比野生型HBx组,HBx3′-20和HBx3′-40对Huh7细胞的生长具有明显促增殖作用,HBx3′-30组显示出抑制作用。HBx通过缺失突变修饰其生物学功能,在原发性肝癌发生、发展过程中起着重要作用。

关键词：肝肿瘤 Huh7细胞株 HBx 基因重组

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