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中华医学杂志 2005年第12期85卷 825-830页

作者：刘晓红林静曹晓哲郑建明陈颖朱明华第二军医大学长海医院病理科上海200433 福建医科大学基础医学院组胚教研室

目的探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)羧基端缺失了40个氨基酸的突变体(HBx3′-40)和野生型HBx对Huh7和SMMC-7721肝癌细胞的生物学行为的影响.方法脂质体和磷酸钙法介导pcDNA3HBx3′-40和pcDNA3HBx重组体转染HBV(-)的人肝癌细胞Huh7和***基因PCR... 详细信息

目的探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)羧基端缺失了40个氨基酸的突变体(HBx3′-40)和野生型HBx对Huh7和SMMC-7721肝癌细胞的生物学行为的影响.方法脂质体和磷酸钙法介导pcDNA3HBx3′-40和pcDNA3HBx重组体转染HBV(-)的人肝癌细胞Huh7和***基因PCR及Western印迹方法检测质粒DNA片断插入和HBx蛋白质的表达.借助生长曲线、平板克隆形成、细胞周期、凋亡和裸鼠成瘤实验以及氯霉素乙酰转移酶(CAT)-ELISA法对转染细胞的生物学活性进行检测.结果 pcDNA3HBx3′-40组细胞生长速度明显快于pcDNA3HBx和pcDNA3组;pcDNA3HBx3′-40组克隆形成率明显高于pcDNA3HBx和pcDNA3组(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示pcDNA3HBx3′-40表达能加速Huh7细胞由G0/G1期→S期的进程;但细胞凋亡检测显示无血清诱导的SMMC-7721细胞HBx3′-40组能部分取消HBx的促凋亡效应,并且该组几乎丧失了HBx的反式激活作用;裸鼠成瘤实验显示,pcDNA3HBx3′-40组成瘤体积明显大于pcDNA3HBx组和pcDNA3组,瘤体重量间差异具有统计学意义(P<0.05).表明HBx3′-40对肝癌细胞的生长具有明显促增殖作用.结论 HBx碳端缺失了40个氨基酸的突变体转染细胞对比野生型HBx显示促增殖能力明显增强,推测HBx通过缺失突变修饰其生物学功能,取消了野生型HBx的反式激活功能和抗增殖效应.另一方面,HBx 114～154个氨基酸位点的缺失可能导致p53无法发挥其抑癌作用.

关键词：乙型肝炎病毒 X蛋白羧基端氨基酸肝癌细胞生物学行为

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小鼠单纯肝切除后再生肝组织内大小核分裂相和卵圆细胞的观察

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 251-256页

作者：余宏宇李文林谢东甫张朵肖承志孙志勇何金孙静苏娟李建秀朱明华 Joseph T Lau 胡以平第二军医大学长征医院病理科第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室西藏军区总医院神经烧伤科第二军医大学长海医院病理科 The Department of Molecular and Cellular Biology Roswell Park Cancer InstituteElm and Carlton StreetsBuffaloNY 14263USA

目的:探究C57小鼠单纯2/3肝切除后肝组织内与再生和肝干细胞有关的病理形态学变化及其意义。方法:在4个对照组(正常组、假手术组、倒千里光碱组和倒千里光碱2/3肝切除组)的参照下,观察实验组C57小鼠单纯2/3肝切除后不同时间肝脏病理形... 详细信息

目的:探究C57小鼠单纯2/3肝切除后肝组织内与再生和肝干细胞有关的病理形态学变化及其意义。方法:在4个对照组(正常组、假手术组、倒千里光碱组和倒千里光碱2/3肝切除组)的参照下,观察实验组C57小鼠单纯2/3肝切除后不同时间肝脏病理形态变化(核分裂相和卵圆细胞等)和CK19、AFP免疫组化检测情况。结果:单纯2/3肝切除后小鼠均出现不同程度的成熟肝细胞通过大核分裂相分裂增生、轻重不等的小胆管/终末胆管增生反应和个别例中有类似于倒千里光碱肝切除模型组的卵圆细胞增生;尤其还有大小核分裂相分布等一些文献未提及的形态学改变。结论:本研究提出肝流域假说的初步设想:肝内成体干细胞存在于小胆管/终末胆管附近,是肝主质细胞的重要源头;在其向中央静脉方向的流向上产生各级分化程度不同的子代(自卵圆细胞到小肝细胞、成熟肝细胞),沿肝板形成该流域干流;而经由血流到达肝脏的过客性干细胞可不同程度地在不同区段作为该流域的支流汇入干流并转分化为肝系细胞。

关键词：肝切除术肝再生干细胞肝大小核分裂相卵圆细胞

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细胞外信号调节激酶ERK_1/ERK_2对胰腺癌生长的影响

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哈尔滨医科大学学报 2005年第2期39卷 163-165页

作者：董春燕刘铁夫李兆申陈鹤吴红玉第二军医大学长海医院消化科上海200433 哈尔滨医科大学第一临床医学院消化科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学病理学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　研究胰腺癌患者组织中及细胞系Panc 1及Jf 30 5中的ERK1/ERK2 蛋白表达情况,以探讨其在胰腺癌发生、发展过程中的意义。方法　应用免疫组织化学技术检测临床胰腺癌患者组织中ERK1/ERK2 蛋白表达;Westernblot方法观察胰腺癌细胞系P... 详细信息

目的　研究胰腺癌患者组织中及细胞系Panc 1及Jf 30 5中的ERK1/ERK2 蛋白表达情况,以探讨其在胰腺癌发生、发展过程中的意义。方法　应用免疫组织化学技术检测临床胰腺癌患者组织中ERK1/ERK2 蛋白表达;Westernblot方法观察胰腺癌细胞系Panc 1及Jf 30 5中的ERK1/ERK2 蛋白表达。结果　胰腺癌患者组织ERK1和ERK2 蛋白均呈显著性高表达,阳性率分别为86 .7% (39/ 4 5 )和84 .4 4 % (38/ 4 5 ) ,而对照组织的阳性率分别为30 %(6 / 2 0 )和2 0 % (4/ 2 0 ) ,胰腺癌组织和对照组织阳性率有显著差异;胰腺癌细胞系Panc 1及Jf 30 5中均有ERK1/ERK2蛋白的高表达。结论　胰腺癌患者组织及细胞系中均有ERK1/ERK2 蛋白强表达,ERK1和ERK2 蛋白的过表达可能在人胰腺癌的发生、发展过程中起重要作用。

关键词：胰腺癌细胞外信号调节激酶免疫组化

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西司他丁钠+亚胺培南消除细胞培养中细菌污染的研究

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 114-115页

作者：江千里王健民江汕许育温丽敏周虹闵碧荷第二军医大学长海医院血液科上海200433 南京医科大学病理学教研室南京210029 第二军医大学长海医院实验诊断科

目的 :研究西司他丁钠 +亚胺培南 (泰能 )清除细胞培养中细菌污染的可行性。方法 :将 1 5批细胞培养中已发生细菌污染的细胞 ,用含泰能 1 0～ 1 0 0 μg/ ml的 PBS洗涤 3次 (PBS用量逐次递增 ) ,第 3次洗涤之前将细胞悬浮于含 1 0 0 μ... 详细信息

目的 :研究西司他丁钠 +亚胺培南 (泰能 )清除细胞培养中细菌污染的可行性。方法 :将 1 5批细胞培养中已发生细菌污染的细胞 ,用含泰能 1 0～ 1 0 0 μg/ ml的 PBS洗涤 3次 (PBS用量逐次递增 ) ,第 3次洗涤之前将细胞悬浮于含 1 0 0 μg/ m l泰能的完全培养液 1 .5 ml中 37℃孵育 30 min;然后细胞移入含 1 0 0 μg/ m l泰能的完全培养液中培养 ,更换含 1 0 0 μg/ ml泰能的完全培养液 1次 / d,共 3d。结果 :成功消除 1 4批细菌感染 ,另 1批加用万古霉素后亦获成功。结论 :泰能可以有效消除细胞培养中的细菌污染。

关键词：西司他丁钠亚胺培南细胞培养细菌污染细胞生长

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天鹅型记忆接骨器与钢板内固定术后软组织界膜的生物相容性

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第四军医大学学报 2004年第15期25卷 1394-1396页

作者：傅青格张春才许硕贵高堂成宝建中陆月良万岷王冠军第二军医大学长海医院骨科上海200433 第二军医大学长海医院病理科上海200433 第二军医大学基础部细胞生物学教研室电镜室上海200433

目的 :通过局部组织大体观察、组织学病理及超微结构观察等方法 ,比较天鹅型记忆接骨器 (swan likememoryconnector,SMC)和不锈钢板内固定后对于软组织界膜的影响 ,初步评价SMC的生物相容性 .方法 :对临床既往骨折后经SMC或不锈钢板内... 详细信息

目的 :通过局部组织大体观察、组织学病理及超微结构观察等方法 ,比较天鹅型记忆接骨器 (swan likememoryconnector,SMC)和不锈钢板内固定后对于软组织界膜的影响 ,初步评价SMC的生物相容性 .方法 :对临床既往骨折后经SMC或不锈钢板内固定病例 1 3例经随访发现骨折取得骨性愈合后 ,于内固定取出术中取与金属密切接触的局部软组织进行大体标本观察、光镜和电子显微镜观察 .结果 :SMC组局部软组织结构致密规则 ,炎症反应较轻或无 ,微观结构观察见为规则致密的纤维结缔组织 ,成纤维细胞为主要细胞成分 ,细胞周围可见排列规则致密、纵横交错的胶原纤丝 ;钢板组软组织结构多数紊乱 ,局部组织发黑或发灰 ,微观结构观察胶原纤维增生 ,透明变性 ,结构紊乱 ,并有不同程度的炎性反应或异物反应 (异物巨细胞反应、纤维素样坏死 )存在 .结论 :SMC具有良好的生物相容性。

关键词：内固定镍钛形状记忆合金生物相容性

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HBV基因疫苗诱导正常及HBV转基因小鼠产生体液免疫应答

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 47-50页

作者：余宏宇陈新龙宋维余永伟张乐之胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 长海医院烧伤科长征医院贵宾诊疗科长海医院病理科长海医院实验诊断科基础医学部细胞生物学教研室

目的 :用乙型肝炎病毒 (HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及 HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答 ,以探讨其预防及治疗 HBV慢性感染的可行性。方法 :将 HBV S2 .S基因的真核表达载体 p CMV- S2 .S(PS)和相应的空载体 pc D-NA3.0... 详细信息

目的 :用乙型肝炎病毒 (HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及 HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答 ,以探讨其预防及治疗 HBV慢性感染的可行性。方法 :将 HBV S2 .S基因的真核表达载体 p CMV- S2 .S(PS)和相应的空载体 pc D-NA3.0分别免疫正常 C5 7BL/ 6小鼠及同一品系 HBV转基因小鼠 (n=5 )。每只小鼠肌内注射纯化质粒 1 0 0 μg。用 EL ISA方法检测小鼠血清抗 HBs和抗 pre S2效价及 HBV转基因小鼠血清 HBs Ag和 HBe Ag的水平。注射基因疫苗后第 8周 ,活检取转基因小鼠肝脏组织 ,制备石蜡切片并行 H- E染色 ,光镜下观察其病理改变。结果 :PS诱导正常及转基因小鼠产生了抗 HBs及抗pre S2 ,并且抗 pre S2的出现早于抗 HBs约 1～ 2周。PS免疫 8周后 ,转基因小鼠血清 HBs Ag和 HBe Ag为阴性。注射基因疫苗后第 8周病理检查转基因小鼠肝脏组织 ,肝细胞出现程度不同的广泛浊肿和水样变性 ,而相应的对照组无明显改变。免疫前后肝组织内单个核淋巴细胞数量无显著变化。结论 :研究表明 HBV中蛋白基因疫苗能够有效诱导 HBs Ag特异性的体液免疫应答 ,能够清除转基因小鼠血清中的 HBs Ag和 HBe Ag;初步的实验结果为研制治疗

关键词： HBV 基因疫苗转基因小鼠体液免疫免疫应答乙型肝炎病毒

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重组乙型肝炎病毒变异s基因疫苗诱导小鼠产生特异性体液免疫应答

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第5期19卷 447-449,453页

作者：葛军辉刘惠敏何金李玉莉余宏宇叶忠张乐之胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 第二军医大学长海医院实验诊断科第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

目的 :构建乙型肝炎病毒 (HBV)变异s基因真核表达载体 ,检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。方法 :利用限制性内切酶定位克隆构建s基因nt5 87G→A的真核表达载体pCMV S2 .S +14 5R(PR)。用其转染人肝癌细胞系HepG2后 ,用EIA、ELISA... 详细信息

目的 :构建乙型肝炎病毒 (HBV)变异s基因真核表达载体 ,检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。方法 :利用限制性内切酶定位克隆构建s基因nt5 87G→A的真核表达载体pCMV S2 .S +14 5R(PR)。用其转染人肝癌细胞系HepG2后 ,用EIA、ELISA及免疫细胞化学法 ,观察其抗原性。以重组变异型s基因真核表达载体 (PR)和载体pcDNA3.0分别免疫C5 7BL/6小鼠各 5只。每只小鼠各肌肉注射纯化质粒 10 0 μg。用ELISA法检测血清抗 HBs及抗 HBs2抗体的效价。结果 :体外实验证实 ,变异型HBsAg可与抗 HBs结合 ;PR免疫小鼠可诱导其产生抗 HBs抗体及抗 HBs2抗体 ,但抗 HBs2抗体的出现早于抗 HBs抗体约 1～ 2wk。结论 :HBV变异s基因(nt5 87G→A)的真核表达载体的表达产物具有良好的抗原性 ,能够诱导C5

关键词：乙型肝炎表面抗原变异基因疫苗体液免疫应答

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全反式维甲酸通过磷酸化JNK抑制视网膜母细胞瘤细胞生长

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中国肿瘤生物治疗杂志 2003年第1期10卷 48-50页

作者：闵红波王建文孙继虎步世忠余永伟解放军第455医院眼科上海200052 第二军医大学生理教研室上海200433 第二军医大学长海医院病理科上海200433

目的 :研究全反式维甲酸 (ATRA)抑制视网膜母细胞瘤 (Rb)细胞生长的作用及信号转导机制。方法 :应用3 H 胸腺嘧啶掺入分析法观察ATRA对细胞生长的抑制作用 ,用流式细胞仪分析ATRA对Y79细胞周期的影响 ,用Westernblot分析c jun氨基末端激... 详细信息

目的 :研究全反式维甲酸 (ATRA)抑制视网膜母细胞瘤 (Rb)细胞生长的作用及信号转导机制。方法 :应用3 H 胸腺嘧啶掺入分析法观察ATRA对细胞生长的抑制作用 ,用流式细胞仪分析ATRA对Y79细胞周期的影响 ,用Westernblot分析c jun氨基末端激酶 (JNK)的磷酸化。结果 :ATRA可明显地抑制Y79细胞的生长 ,10 -6mol·L-1ATRA处理 36h时 ,3 H 胸腺嘧啶掺入率下降达 4 0 % ,此条件下 ,Y79细胞被阻滞于G0 /G1期 ,并出现Sub G1峰 ;此生长抑制过程可被JNK的阻断剂Curcumin阻断 ;在此过程中 ,JNK被激活 ,磷酸化。结论 :ATRA可抑制Y79细胞生长 ,其过程是由磷酸化的JNK介导。提示。

关键词：全反式维甲酸视网膜母细胞瘤信号转导 Y79 生长抑制

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渐进性排尿困难 ,手术 ,猝死 (第 45例 )

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第二军医大学学报 2002年第7期23卷 798-800,F004页

作者：郑建明朱明华卢韶华许祖德第二军医大学长海医院病理科病理学教研室上海200433 复旦大学医学院病理学教研室

患者，男，65岁，渐进性排尿困难3年，加重2个月，以胶列腺增生症于1998年9月21日收住入院。入院进患者感排尿费力，尿线变细，射程变短，夜尿增多（4～5次／晚）。查体：T 37 ℃，P 80次/min，R 20次/min，BP 22／12kPa。一般情况好，... 详细信息

患者，男，65岁，渐进性排尿困难3年，加重2个月，以胶列腺增生症于1998年9月21日收住入院。入院进患者感排尿费力，尿线变细，射程变短，夜尿增多（4～5次／晚）。查体：T 37 ℃，P 80次/min，R 20次/min，BP 22／12kPa。一般情况好，心肺无异常，腹软、无压痛，肾区无扣击痛，膀胱区不充盈、无压痛，尿道口无红肿及溢脓，外生殖器无异常。前列腺肛检：大小为5 cm * 4.5 cm * 4.0 cm，质中等，表面光滑，无结节，中央沟消失。实验室检查：肝肾功能、乙肝表面抗原、核心抗原、e抗原及三大常规均未见异常。X线胸片：心、肺、膈均未见异常。腹部平片＋静脉盂造影：前列腺增大，双肾功能正常。心电图：窦性心动过速，ST段轻度压低，V1～V6 T波轻度压低。B超检查：前列腺增生。血PSA（前列腺特异抗原）20.9μg/L。既往史：有高血压病史6年，1992年曾行左腹股沟斜疝修补术。无会阴外伤及尿路感染史。患者婚育一男，体健。父母无故，死因不祥，否认有家族遗传病及传染病史。

关键词：排尿障碍前列腺切除术猝死尸体解剖病理讨论

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上腹部疼痛、猝死(第44例)

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 228-230,F004页

作者：郑建明许杰朱明华张志刚第二军医大学长海医院病理科上海200433 复旦大学医学院病理学教研室

患者，男性，42岁。因持续上腹部疼痛1小时余来院急诊。患者2000年8月22日22时无诱因突然出现上腹部胀痛，并呕吐两次、呕吐物为少量胃内容物。晚餐正常进食，饮少量啤酒。以往曾有类似发作史。既往有可疑高血压病史。胆囊已切除。入院... 详细信息

患者，男性，42岁。因持续上腹部疼痛1小时余来院急诊。患者2000年8月22日22时无诱因突然出现上腹部胀痛，并呕吐两次、呕吐物为少量胃内容物。晚餐正常进食，饮少量啤酒。以往曾有类似发作史。既往有可疑高血压病史。胆囊已切除。入院体检：急性痛苦面容，双肺（-），心率60次/min，律齐，S_1↓，各瓣膜未闻及杂音，腹略膨隆，腹软，剑突下压痛，无反跳痛。Bp 120/70 mmHg（1 mmHg = 0.133 kPa）。心电图：窦性心律，左室高电压，余正常。超声检查：肝、肾未见异常，胰腺回声不均匀。给予阿托品、奥曲肽（普得定）、山莨蓉碱（654-2）及5%葡萄糖溶液250 ml静滴，并化验血、淀粉酶和血生化，又给予平衡液、5%葡萄糖生理盐水各500 ml，维生素C、B_6静滴，哌替啶（杜冷丁）50 mg，肌注，留观并请外科会诊。

关键词：主动脉瘤动脉夹层瘤猝死尸体解剖病理上腹部疼痛

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