检索结果-内蒙古大学图书馆

基因-病毒治疗系统CNHK300-murine endostatin治疗肝癌的实验研究

中华医学杂志 2004年第11期84卷 943-948页

作者：李根丛聂明明杨甲梅苏长青孙立臣钱炎珍 Jonathan Sham 方国恩吴孟超钱其军第二军医大学附属东方肝胆外科医院病毒和基因治疗实验室上海200438 第二军医大学附属长海医院普外科第二军医大学附属东方肝胆外科医院肝胆外科上海200438 香港大学临床肿瘤系

目的　探讨一种新的基因病毒治疗系统CNHK30 0 murineendostatin(简称CNHK30 0 mE)对肝癌的治疗作用。方法　利用基因重组技术构建一种用人端粒酶逆转录酶 (hTERT)启动子控制腺病毒E1A基因表达并携带内皮抑素基因的基因病毒治疗系... 详细信息

目的　探讨一种新的基因病毒治疗系统CNHK30 0 murineendostatin(简称CNHK30 0 mE)对肝癌的治疗作用。方法　利用基因重组技术构建一种用人端粒酶逆转录酶 (hTERT)启动子控制腺病毒E1A基因表达并携带内皮抑素基因的基因病毒治疗系统 ;通过 5 0 %组织培养感染剂量 (TCID5 0 )方法和细胞活性检测法四氮唑盐比色试验 (MTT法 )观察CNHK30 0 mE在 2种肝癌细胞株 (HepGII及Hep3B)及 1株正常的成纤维细胞株 (MRC 5 )中的病毒增殖能力和对细胞的杀灭能力 ;通过肝癌SMMC772 1细胞裸鼠皮下移植瘤模型观察该病毒对肝癌生长和对肿瘤血管生成的抑制作用 ;利用Western印迹法和酶联免疫吸附实验 (ELISA)法检测内皮抑素基因在体内和体外的表达。结果分别感染肝癌细胞株和正常细胞株 96h后病毒的增殖倍数相差 32 96倍 ,其达到半数杀伤量 (ED50 )时的感染复数 (MOI)值相差 2 5倍 ,差异有显著意义 ,且两者均明显优于ONYX 0 15 ;CNHK30 0 mE能明显抑制肝癌皮下移植瘤内血管的生成 ,对肿瘤生长的抑制作用与携带同一治疗基因的非增殖型腺病毒和不携带治疗基因的增殖型腺病毒ONYX 0 15相比均增强 (P均 <0 0 1) ;其所介导的内皮抑素基因在体内和体外的表达量均与携带该基因的非增殖型腺病毒载体相比均增高 (P <0 0

关键词：基因-病毒治疗系统 CNHK300-murine endostatin 肝癌端粒酶逆转录酶 hTERT 内皮抑素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达人内啡肽的腺病毒腺相关杂合病毒的构建及体外表达分析

引用

微生物学报 2005年第6期45卷 856-859页

作者：徐学武俞卫锋崔贞福王星华李泉吴飞翔董刚姜梨华第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科上海200438 第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室上海200438

应用分子生物学方法将人β_内啡肽融合基因序列克隆入腺病毒穿梭质粒pDC312_AAVEE,后者与骨架质粒共转染HEK293细胞,包装得到含转基因腺病毒腺相关杂合病毒AdAAV_EE。用PCR方法对杂合病毒进行鉴定,TCID50法测定病毒滴度。杂合病毒感染... 详细信息

应用分子生物学方法将人β_内啡肽融合基因序列克隆入腺病毒穿梭质粒pDC312_AAVEE,后者与骨架质粒共转染HEK293细胞,包装得到含转基因腺病毒腺相关杂合病毒AdAAV_EE。用PCR方法对杂合病毒进行鉴定,TCID50法测定病毒滴度。杂合病毒感染体外培养细胞观察转基因表达,ELISA法测定培养液中表达产物浓度。PCR法证实转基因正确插入了杂合病毒基因组内,且没有野生型病毒污染,病毒滴度为1.29×1010PFUmL。结果表明转基因从第1天到第14天的表达水平呈上升趋势,第14天达到3141pgmL。

关键词： β-内啡肽腺病毒腺相关病毒杂合病毒构建表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肝动脉化疗栓塞术联合自体DC-CIK细胞治疗BCLC C期肝癌的随机对照研究

引用

介入放射学杂志 2015年第5期24卷 434-438页

作者：刘丽钟嘉明陈晓霞丁宁钱其军曲增强第二军医大学附属东方肝胆外科医院放射介入二科上海200438 第二军医大学附属东方肝胆外科医院基因与病毒治疗实验室上海200438

目的探讨肝动脉化疗栓塞(TACE)联合DC-CIK细胞治疗BCLC C期肝细胞癌的疗效。方法 60例BCLC C期HCC患者随机分为治疗组与对照组,治疗组患者采用TACE联合DC-CIK治疗,对照组患者只行TACE治疗,比较两组患者的免疫功能、半年和1年生存率。结... 详细信息

目的探讨肝动脉化疗栓塞(TACE)联合DC-CIK细胞治疗BCLC C期肝细胞癌的疗效。方法 60例BCLC C期HCC患者随机分为治疗组与对照组,治疗组患者采用TACE联合DC-CIK治疗,对照组患者只行TACE治疗,比较两组患者的免疫功能、半年和1年生存率。结果治疗组全血T细胞亚群CD3+CD8+明显升高,CD3+CD4+明显下降,较治疗前差异有统计学意义(P<0.05)。两组半年生存率分别为67.9%、48.1%(P<0.05),一年生存率分别为53.6%、29.6%(P<0.05)。结论 TACE联合DC-CIK细胞联合治疗比单纯TACE治疗效果更好,是BCLC C期肝细胞癌的一种有效的治疗方法。

关键词：肝细胞癌肝动脉化疗栓塞 DC-CIK 免疫功能 T淋巴细胞亚群

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新型的病毒-基因治疗系统CNHK500-hγ的构建

引用

中华实验外科杂志 2006年第1期23卷 57-59页

作者：孙立臣张柏和苏长青李根丛吴孟超钱其军第二军医大学东方肝胆外科医院胆道一科东方肝胆外科医院病毒和基因治疗实验室

目的研制出一种新的基因-病毒治疗系统。方法通过基因操作技术将主要晚期启动子(MLP)调控的人干扰素-γ基因插入腺病毒E1A基因受hTERT启动子调控、E1B基因受HRE启动子调控的增殖病毒载体质粒PXC70-HRE-TP的E1A上游,得到腺病毒质粒pSG50... 详细信息

目的研制出一种新的基因-病毒治疗系统。方法通过基因操作技术将主要晚期启动子(MLP)调控的人干扰素-γ基因插入腺病毒E1A基因受hTERT启动子调控、E1B基因受HRE启动子调控的增殖病毒载体质粒PXC70-HRE-TP的E1A上游,得到腺病毒质粒pSG500-hγ。通过pSG500-hγ与质粒pBHGE3在293细胞中同源重组得到重组病毒CNHK500-hγ。用TCID50方法测定病毒滴度。通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力。利用ELISA法检测人干扰素-γ抗癌基因的表达。结果CNHK500-hγ的病毒滴度为4×109pfu/ml,增殖实验结果证实CNHK500-hγ可以选择性地在端粒酶阳性的肝癌细胞中增殖,CNHK500-hγ所携带的人干扰素-γ基因在肝癌细胞株中的表达量(442μg/L)明显高于携带该基因的非增殖型腺病毒载体(120μg/L)Ad-hγ(P<0.005)。结论CNHK500-hγ是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统。

关键词：病毒-基因治疗系统 CNHK500-hγ 干扰素-γ 抗癌基因肝癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因-病毒治疗系统CNHK300-murine endostatin的构建及体外研究

引用

中华实验外科杂志 2006年第1期23卷 45-48页

作者：聂明明方国恩王星华苏长青崔贞福李林芳钱其军第二军医大学附属长海医院普外科上海200433 第二军医大学附属东方肝胆外科医院病毒和基因治疗实验室

目的构建一种新型的肿瘤基因-病毒治疗系统CNHK300-murine endostatin(CNHK300-mE),以肿瘤增殖病毒为载体,携带抗肿瘤新生血管生成的基因。方法利用基因重组技术将人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子插入腺病毒E1A基因上游,将小鼠内皮抑素... 详细信息

目的构建一种新型的肿瘤基因-病毒治疗系统CNHK300-murine endostatin(CNHK300-mE),以肿瘤增殖病毒为载体,携带抗肿瘤新生血管生成的基因。方法利用基因重组技术将人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子插入腺病毒E1A基因上游,将小鼠内皮抑素基因表达盒插入到腺病毒包装信号和hTERT启动子之间,通过病毒增殖试验、电镜技术、Western blot分析、酶联免疫吸附实验(ELISA)、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验,观察CNHK300-mE的复制情况、mE的表达情况及对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的抑制情况。结果成功构建了基因-病毒治疗系统CNHK300-mE,该系统为hTERT启动子调控腺病毒E1A基因表达并携带小鼠内皮抑素基因的重组腺病毒。该病毒可以在端粒酶阳性的胃癌细胞株SGC-7901和肝癌细胞株HepGII中大量增殖及复制,而在端粒酶阴性的正常纤维细胞中不增殖。电镜证实该重组病毒在胃癌细胞株SGC-7901中复制及增殖。ELISA检测表明SGC-7901感染CNHK300-mE后7d,小鼠内皮抑素的表达量为1000μg/L。CAM实验证实该病毒感染胃癌细胞后的培养液上清具有抗新生血管生成的生物活性。结论基因-病毒治疗系统CNHK300-mE能在端粒酶阳性的肿瘤细胞中特异性增殖复制,并大量表达具有抗新生血管生成生物活性的小鼠内皮抑素。

关键词：基因-病毒治疗系统 CNHK300-murine endostatin 肿瘤基因血管生成端粒酶肿瘤细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同肿瘤细胞株CD133抗体的筛查

引用

第二军医大学学报 2010年第12期31卷 1366-1367页

作者：周育宏方国恩薛绪潮钱其军姜梨华第二军医大学长海医院普通外科上海200433 第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室上海200438

目的对42个常见的肿瘤细胞株进行筛选,明确细胞株中是否存在CD133+可能的肿瘤干细胞。方法取对数生长期的肿瘤细胞株,CD133抗体标记后用流式细胞仪检测,观察CD133+细胞的比例。结果 42个肿瘤细胞株中,肝癌细胞株SK-HEP-1、HepG2、Hep3B... 详细信息

目的对42个常见的肿瘤细胞株进行筛选,明确细胞株中是否存在CD133+可能的肿瘤干细胞。方法取对数生长期的肿瘤细胞株,CD133抗体标记后用流式细胞仪检测,观察CD133+细胞的比例。结果 42个肿瘤细胞株中,肝癌细胞株SK-HEP-1、HepG2、Hep3B、L2-2-15、PLC/PRF5,胰腺癌细胞株PANC-1、BXPC-1,结肠癌细胞株SW620、HT29,鼻咽癌细胞株CNE-2,共10个细胞株CD133+细胞数与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 42个肿瘤细胞株中检出10个细胞株存在CD133+可能的肿瘤干细胞亚群。

关键词：肿瘤细胞系 CD133 筛选肿瘤干细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤特异增殖腺病毒CNHK200-hEndo的构建及其抗裸鼠肺癌移植瘤疗效

引用

中国肿瘤生物治疗杂志 2008年第2期15卷 176-178页

作者：施军霞苏长青李林芳钱其军第二军医大学东方肝胆外科医院病毒与基因治疗实验室上海200438

目的:构建一种携带抗肿瘤血管生成基因Endostatin的新型肿瘤基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,观察其对人肺癌细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。方法:克隆人抗血管生成基因Endostatin,利用病毒重组技术将该基因插入肿瘤特异性增殖腺病毒CNHK20... 详细信息

目的:构建一种携带抗肿瘤血管生成基因Endostatin的新型肿瘤基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,观察其对人肺癌细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。方法:克隆人抗血管生成基因Endostatin,利用病毒重组技术将该基因插入肿瘤特异性增殖腺病毒CNHK200的基因组中,扩增并纯化CNHK200-hEndo病毒。建立裸鼠肺癌细胞移植瘤模型,观察CNHK200-hEndo抗肿瘤的效果,并与非增殖病毒Ad-hEndo对照。结果:成功构建一种新型的基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,其E1b55kDa蛋白表达缺失。CNHK200-hEndo能在肿瘤细胞内大量增殖并高效表达Endostatin蛋白,表达量明显高于非增殖病毒Ad-hEndo(P<0.05)。动物实验证实,CNHK200-hEndo对人类肺癌细胞的裸鼠移植瘤模型具有抑制肿瘤生长的疗效,与Ad-hEndo和空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:构建的基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo能在肺癌细胞中增殖复制,提高Endostatin蛋白的表达,明显抑制肺癌细胞移植瘤的生长。

关键词：腺病毒肺癌基因治疗内皮抑素基因血管生成

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

化疗对CD133＋结肠癌细胞的作用效果

引用

中华实验外科杂志 2011年第1期28卷 30-31页

作者：周育宏方国恩薛绪潮钱其军姜梨华第二军医大学附属长海医院普通外科上海200433 第二军医大学附属东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室

目的观察化疗前后结肠癌细胞株HT29、SW620中CD133^＋结肠癌细胞的数量变化，探讨化疗对CD133^＋结肠癌细胞的作用效果。方法取对数生长的结肠癌细胞株HT29、SW620，采用80mg／L5-氟尿嘧啶（***）和25mg／L奥沙利铂（Oxaliplatin）分别... 详细信息

目的观察化疗前后结肠癌细胞株HT29、SW620中CD133^＋结肠癌细胞的数量变化，探讨化疗对CD133^＋结肠癌细胞的作用效果。方法取对数生长的结肠癌细胞株HT29、SW620，采用80mg／L5-氟尿嘧啶（***）和25mg／L奥沙利铂（Oxaliplatin）分别作用8h，并设对照组，利用CD133抗体进行标记后再用流式细胞仪进行检测，观察化疗前后CD133^＋细胞的比例。结果流式细胞仪检测结肠癌细胞株HT29，80mg／L5-Fu处理8h组中CD133^＋肿瘤细胞为45．00％，与未处理组（32．80％）比较结果差异有统计学意义（P〈0．01）；25mg／L奥沙利铂处理8h组中CD133^＋肿瘤细胞为55．30％，与未处理组和80mg／L5-Fu处理8h组比较结果差异有统计学意义（P〈0．01）。流式细胞仪检测结肠癌细胞株SW620，80mg／L5-Fu处理8h组中CD133^＋肿瘤细胞为47．10％，与未处理组（33．90％）比较结果差异有统计学意义（P〈0．01）；25mg／L奥沙利铂处理8h组中CD133。肿瘤细胞为56．50％，与未处理组和80mg／L5-Fu处理8h组比较结果差异有统计学意义（P〈0．01）。结论CD133^＋结肠癌细胞能明显抵抗化疗。

关键词：结肠癌细胞化疗 CD133

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种新型的肿瘤生物治疗方案—肿瘤增殖病毒的治疗

引用

中国实用外科杂志 2001年第9期21卷 562-565页

作者：钱其军第二军医大学东方肝胆外科医院肿瘤病毒及基因治疗实验室上海200438

肿瘤的基因治疗(包括抑癌基因、自杀基因及免疫调节因子等)在动物体内中取得了明显疗效.目前,全世界已有275项肿瘤的基因治疗方案进入临床研究,但整体疗效令人失望[1,2].临床研究表明:肿瘤的基因治疗方案是非常安全的,但其抗肿瘤效应也... 详细信息

肿瘤的基因治疗(包括抑癌基因、自杀基因及免疫调节因子等)在动物体内中取得了明显疗效.目前,全世界已有275项肿瘤的基因治疗方案进入临床研究,但整体疗效令人失望[1,2].临床研究表明:肿瘤的基因治疗方案是非常安全的,但其抗肿瘤效应也非常低,甚至无任何治疗作用.尽管其原因是多方面的,但最主要原因是目前基因治疗载体系统在体内存在着转染率低、抗癌基因表达量低及不能靶向肿瘤细胞等缺点,从而不能将抗癌基因转染给足够多的肿瘤细胞,并使之高效表达,这严重阻碍着肿瘤基因治疗在临床中的疗效[1-3].

关键词：肿瘤生物治疗增殖病毒基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

引用

中华实验外科杂志 2004年第12期21卷 1452-1455页

作者：刘永靖徐志飞苏长青薛惠斌崔贞福李林芳钱炎珍钱其军第二军医大学长征医院胸心外科上海200003 第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室

目的　构建携带人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)基因的腺病毒载体 ,评价TRAIL对人肺癌、肝癌细胞的基因治疗功效。方法　构建携带人TRAIL基因的腺病毒Ad hTRAIL ,感染人肺癌细胞株H 460、A5 49,人肝癌细胞株Hep3B、HepGII以... 详细信息

目的　构建携带人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)基因的腺病毒载体 ,评价TRAIL对人肺癌、肝癌细胞的基因治疗功效。方法　构建携带人TRAIL基因的腺病毒Ad hTRAIL ,感染人肺癌细胞株H 460、A5 49,人肝癌细胞株Hep3B、HepGII以及人正常肝细胞株WRL 68,人正常成纤维细胞株MRC 5 ,通过酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测hTRAIL的表达 ,并进行四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测其杀伤肿瘤细胞的效能。结果　成功构建携带人TRAIL基因的增殖缺陷型腺病毒载体Ad hTRAIL ,感染H 460、A5 49、Hep3B、HepGII、WRL 68细胞 ,72h后上清中TRAIL表达量分别为 3 2 .75、2 4.5 3、3 4.0 2、3 2 .89、17.0 8μg/L。在MOI =1时 ,Ad hTRAIL即可引起肿瘤细胞明显凋亡 ,而在MOI =10 0时对正常细胞WRL 68、MRC 5也没有明显杀伤作用。结论　腺病毒载体携带人TRAIL基因在肿瘤基因治疗方面有非常广阔的应用前景。

关键词：携带腺病毒载体 TRAIL基因肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体体外抗肿瘤活性正常细胞感染表达量细胞构建

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：