检索结果-内蒙古大学图书馆

携带HCV核心蛋白原核表达质粒与真核表达质粒的减毒伤寒沙门菌诱导小鼠免疫应答之比较

生物工程学报 2007年第5期23卷 862-866页

作者：陈志辉赵平吴淑梅曹洁张斌万谟彬柯金山戚中田第二军医大学长海医院感染科上海200433 第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白是丙肝疫苗的重要候选抗原,然而,该蛋白因具有免疫调控作用而影响免疫应答的诱导。构建了HCV核心蛋白的两种表达质粒,一种是体内激活型原核表达质粒pZW-C,另一种是真核表达质粒pCI-C。将该两种质粒转化减毒鼠... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白是丙肝疫苗的重要候选抗原,然而,该蛋白因具有免疫调控作用而影响免疫应答的诱导。构建了HCV核心蛋白的两种表达质粒,一种是体内激活型原核表达质粒pZW-C,另一种是真核表达质粒pCI-C。将该两种质粒转化减毒鼠伤寒沙门菌SL7207,得到重组菌SL7207/pZW-C和SL7207/pCI-C,分别将重组菌口服接种小鼠,检测小鼠的免疫应答,结果发现:①SL7207/pCI-C免疫鼠的CD3+CD4+T细胞持续降低,而SL7207/pZW-C免疫鼠的CD3+CD4+T细胞无明显改变;②SL7207/pCI-C免疫只诱导低水平抗HCV核心蛋白抗体,加强免疫对抗体阳转率及抗体水平无明显影响,而SL7207/pZW-C免疫组所有小鼠均产生较高水平的抗核心蛋白抗体。③SL7207/pCI-C免疫鼠脾细胞的体外增殖活性、细胞毒性T细胞活性以及加强免疫对细胞免疫应答的增强作用均明显不及SL7207/pZW-C免疫鼠。结果提示:携带真核表达质粒pCI-C的沙门菌因在小鼠细胞内表达天然形式(结构以及磷酸化修饰)的HCV核心蛋白,可能通过对T细胞的免疫抑制作用而弱化免疫应答。而以携带原核表达质粒pZW-C的沙门菌免疫可避免这一问题,并具有接种方便,成本低廉等优点,从而可望作为基于HCV核心蛋白为靶抗原的HCV疫苗的候选免疫方式。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白减毒伤寒沙门菌疫苗免疫应答

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^(153)钐-氯屈膦酸二钠在原位人骨肉瘤裸鼠模型中的疗效

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第二军医大学学报 2007年第10期28卷 1094-1097页

作者：罗旭耀沈茜苗积生陈舰徐建明纪方解放军第411医院骨科上海200081 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433 上海第一肺科医院免疫室上海200433 上海市普陀区人民医院骨科上海200060 第二军医大学药学院有机化学教研室上海200433 第二军医大学长海医院骨科上海200433

目的:观察153钐-氯屈膦酸二钠(153Sm-clodronate)在原位人骨肉瘤裸鼠动物模型中的疗效。方法:以人骨肉瘤细胞系HOS-8603接种SCID小鼠皮下,成瘤后经BALB/c裸鼠胫骨移植传代,再接种裸鼠胫骨建立原位人骨肉瘤裸鼠模型,测定153Sm-clodronat... 详细信息

目的:观察153钐-氯屈膦酸二钠(153Sm-clodronate)在原位人骨肉瘤裸鼠动物模型中的疗效。方法:以人骨肉瘤细胞系HOS-8603接种SCID小鼠皮下,成瘤后经BALB/c裸鼠胫骨移植传代,再接种裸鼠胫骨建立原位人骨肉瘤裸鼠模型,测定153Sm-clodronate的生物分布,并通过外观、瘤体质量、钼靶X线片、组织学观察和生存期与153Sm-EDTMP、clodronate对照进行疗效观察。结果:注射后24 h生物分布示瘤骨分布远高于其他组织,放射性计数比瘤骨/血=4 627.1:1,瘤骨/正常骨=10.8:1,正常骨/肝脏=8.4:11。53Sm-clodronate治疗组较对照组溶骨反应轻,生存期显著延长,但是瘤体质量没有明显差异。结论:153Sm-clodronate浓聚于瘤骨,在原位人骨肉瘤裸鼠模型中的疗效较好,有进一步实验研究和临床应用的前景。

关键词：钐-153 氯屈膦酸二钠骨肉瘤移植模型,动物

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伴有高血压的糖尿病大鼠大血管病变SMC增殖早期基因表达谱的研究

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 36-40页

作者：叶勇张传森吴骋李西林吴淑梅张喜第二军医大学基础医学部人体解剖学教研室上海200433 卫生勤务学系卫生统计学教研室上海200433 解放军第85医院心内科上海200052 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的:建立糖尿病大血管病变平滑肌细胞(SMC)增殖早期基因表达谱。方法:以自发性高血压大鼠(SHR)为对照,以STZ诱导SHR构建伴有高血压的糖尿病大鼠模型为实验组,分别在1周、2周、4周时抽提胸主动脉中膜的总RNA,获得两组cDNA的探针,与含有4... 详细信息

目的:建立糖尿病大血管病变平滑肌细胞(SMC)增殖早期基因表达谱。方法:以自发性高血压大鼠(SHR)为对照,以STZ诱导SHR构建伴有高血压的糖尿病大鼠模型为实验组,分别在1周、2周、4周时抽提胸主动脉中膜的总RNA,获得两组cDNA的探针,与含有4 096条大鼠全长基因的cDNA表达谱芯片杂交,扫描芯片荧光信号图像,对差异表达基因数据进行生物信息学分析。结果:1周时有差异表达的基因321条,160条基因表达下降(ratio<0.5),161条基因表达上升(ratio>2)。2周、4周时上述数据分别为414、238、176和403、202、201。分级聚类分析归为8类,3期全部高表达已知基因13条,其中4条持续升高的基因(CD74、Irf1、GAP43、CD36)都与细胞增殖有关。CYP2E1基因的表达大幅上调(ratio 1 w=34.54;ratio2 w=24.82;ratio 4 w=33.57)。结论:糖尿病大血管病变SMC增殖是多基因综合改变的结果,细胞增殖相关基因高表达是主要病理基础,CYP2E1基因可能是糖尿病大血管病变SMC增殖较重要或关键的基因。

关键词：糖尿病高血压肌细胞平滑肌基因表达谱

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中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 25-27页

作者：尚雁君郭跃伟黄才国贾睿许强芝魏善建焦炳华张建荣第二军医大学基础医学部生物化学及分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所上海201203 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50... 详细信息

目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50μmol/ml)和0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶中,利用5 min超氧离子生成量来测定黄嘌呤氧化酶活性(NBT显色法)。再将20、40、60μg/ml renierol或100 U/ml阳性对照SOD加入25℃预热过的邻苯三酚,在波长420 nm处测定吸光值,观察renierol对自由基的直接清除作用。建立尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾造成小鼠高尿酸血症模型,并给高、中、低剂量renierol组小鼠口服10、203、0 ***-1renierol,别嘌呤醇组给药量为2 ***-1,用全自动生化分析仪测定实验鼠的血清尿酸值,观察renierol体内降尿酸作用。结果:Renierol体外是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂,其IC50为1.36μ***-1,在体内也有明显的降尿酸作用。结论:Renierol通过抑制黄嘌呤氧化酶来降血尿酸。

关键词： renierol 海绵海洋生物学黄嘌呤氧化酶高尿酸血症抑制作用

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丹参总酚酸抑制大鼠肾间质纤维化的初步观察

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第二军医大学学报 2006年第12期27卷 1295-1298页

作者：尚雁君黄才国蒋山好朱大元魏善建焦炳华李锴男张建荣第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所上海201203 第四军医大学基础医学部病理学教研室西安710033 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组... 详细信息

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组和丹参总酚酸组分别灌胃ACEI[6mg/(kg·d)]和丹参总酚酸[20mg/(kg·d)],连续8d。术后第7天分别处死各组大鼠用免疫组织化学方法测定TGF-β1的表达情况。行H-E和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变。结果丹参总酚酸组和ACEI组TGF-β1的表达量与模型组(0.22±0.06)比较有明显的下降(P<0.05),结果分别是1.38±0.26和1.38±0.26。丹参总酚酸能显著减少UUO大鼠肾小管间质TGF-β1的表达,减轻胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理改变。结论丹参总酚酸对UUO所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用可能跟降低TGF-β1的表达有关。

关键词：丹参总酚酸肾间质纤维化转化生长因子β1

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能结合HCV E2蛋白的人CD81模拟肽的筛选与活性鉴定

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热带医学杂志 2006年第10期6卷 1055-1057,1067页

作者：廖小玲曹洁吴淑梅赵平高军戚中田第二军医大学微生物教研室军队医学微生物学重点实验室上海200433 第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

目的用CD81单克隆抗体筛选噬菌体随机展示十二肽库,以期得到可模拟人CD81功能位点、能抑制HCVE2与其受体—人CD81分子结合的小肽。方法用CD81单抗从噬菌体随机展示十二肽库中筛选人CD81模拟肽,用ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;以阳性噬菌体免... 详细信息

目的用CD81单克隆抗体筛选噬菌体随机展示十二肽库,以期得到可模拟人CD81功能位点、能抑制HCVE2与其受体—人CD81分子结合的小肽。方法用CD81单抗从噬菌体随机展示十二肽库中筛选人CD81模拟肽,用ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;以阳性噬菌体免疫BALB/c小鼠,分析小鼠免疫血清对阳性噬菌体与HCVE2结合的阻断作用;以HCVE2蛋白包被酶标板,检测阳性噬菌体对HCVE2与人CD81分子结合的抑制作用。结果对十二肽库进行3轮筛选后,经ELISA和DNA测序,鉴定出3个(C4,C13和C16)阳性克隆,与人CD81无同源序列。阳性噬菌体克隆C16免疫小鼠血清能阻断该克隆与HCVE2的结合。C16克隆能以剂量依赖的方式竞争性抑制HCVE2蛋白与人CD81的结合。结论用人CD81单抗从噬菌体随机展示肽库中筛选出的阳性噬菌体克隆所编码的小肽在功能上能模拟人CD81与HCVE2的结合活性,能竞争性抑制HCVE2与人CD81分子的结合,在抗HCV药物及疫苗研究中具有潜在应用价值。

关键词：丙型肝炎病毒噬菌体肽库 CD81分子模拟肽

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金雀异黄素对高糖培养下大鼠系膜细胞增殖及凋亡的影响

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第四军医大学学报 2005年第23期26卷 2162-2165页

作者：孙莉静袁伟杰张小瑛梅小斌郭志勇陈光椿张军第二军医大学长海医院肾内科第二军医大学病理生理学教研室上海200433 第二军医大学长海医院实验诊断科

目的:探讨金雀异黄素对体外高糖条件下大鼠系膜细胞(MC)增殖及凋亡的影响.方法:对照组:低糖DMEM培养液(不含金雀异黄素),实验组:高糖DMEM培养液(含0,1,5,10,30,50μmol/L金雀异黄素),各组分别培养12,24,36,48 h.氮蓝四唑盐(MTT)法检测M... 详细信息

目的:探讨金雀异黄素对体外高糖条件下大鼠系膜细胞(MC)增殖及凋亡的影响.方法:对照组:低糖DMEM培养液(不含金雀异黄素),实验组:高糖DMEM培养液(含0,1,5,10,30,50μmol/L金雀异黄素),各组分别培养12,24,36,48 h.氮蓝四唑盐(MTT)法检测MC的增殖情况,DNA琼脂糖电泳、末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法、流式细胞术3种方法检测细胞凋亡情况.结果:10,30,50μmol/L金雀异黄素作用24 h可明显诱导细胞凋亡(P<0.05),而0,1,5μmol/L作用不显著.随着金雀异黄素浓度的增加,凋亡比例增加;同一浓度的金雀异黄素随着作用时间的延长,凋亡比例亦增加.结论:一定浓度的金雀异黄素在体外高糖培养条件下,可抑制大鼠MC增殖,促进其凋亡,且与其浓度和作用时间有关.

关键词：金雀异黄素细胞增殖细胞凋亡大鼠高糖培养

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饮水补镁对动脉粥样硬化大鼠血脂及炎性因子的影响

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中国临床营养杂志 2005年第5期13卷 281-284页

作者：郑璇龚孝淑蔡东联季燕第二军医大学附属长征医院护理教研室上海200003 第二军医大学附属长海医院营养科第二军医大学附属长海医院实验诊断科

目的观察饮水补镁对大鼠血脂及炎性因子的影响,探讨镁对动脉粥样硬化预防的可能机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组和高镁组,喂养8周后采集制备血清及组织匀浆,测定炎症标志物肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6... 详细信息

目的观察饮水补镁对大鼠血脂及炎性因子的影响,探讨镁对动脉粥样硬化预防的可能机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组和高镁组,喂养8周后采集制备血清及组织匀浆,测定炎症标志物肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及血脂并进行病理评分。结果模型组大鼠心肌及主动脉IL-6、TNF-α显著高于高镁组和对照组(P＜0.05),血清TNF-α未测及,模型组血清IL-6显著高于其他2组(P＜0.01)；高镁组、模型组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均显著高于对照组(P＜0.05),但高镁组中三者均显著低于模型组(P＜0.05),同时高密度脂蛋白胆固醇／TC显著高于模型组(P＜0.05)；主动脉内膜斑块评分高镁组低于模型组(P＜0.05)。结论适当饮水补镁有助于调节机体炎性因子,预防动脉粥样硬化。

关键词：镁动脉粥样硬化肿瘤坏死因子α 白细胞介素-6

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饮食中镁对动脉粥样硬化预防作用的研究进展

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解放军护理杂志 2005年第10期22卷 42-44页

作者：郑璇龚孝淑季燕第二军医大学军队卫生教研室第二军医大学长征医院临床护理教研室第二军医大学长海医院实验诊断科上海200003

镁是人体必需的宏量元素,广泛参与了机体能量代谢和三大代谢。临床发现心脑血管动脉粥样硬化患者常有低镁倾向,研究认为对此类人群适当补镁有助于预防、延缓动脉粥样硬化的发生发展,笔者结合国内外资料,从流行病学调查、基础实验研究、... 详细信息

镁是人体必需的宏量元素,广泛参与了机体能量代谢和三大代谢。临床发现心脑血管动脉粥样硬化患者常有低镁倾向,研究认为对此类人群适当补镁有助于预防、延缓动脉粥样硬化的发生发展,笔者结合国内外资料,从流行病学调查、基础实验研究、镁的日常饮食补充三方面综述镁预防动脉粥样硬化的研究进展,为临床动脉粥样硬化患者膳食营养补充提供参考。

关键词：镁动脉粥样硬化饮食预防

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提高实验诊断学教学质量的几项措施

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2005年第1期7卷 53-55页

作者：李闻捷黄才国张军王学第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433 第二军医大学生物化学及分子生物学教研室

提高实验诊断学教学质量,要注意解决教师存在的困难,克服制约教学工作的难题;建立良好的激励机制,努力提高教师的积极性;创造条件,鼓励教师激情备课、激情授课.

关键词：实验诊断学教学方法教学质量医学教育

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