检索结果-内蒙古大学图书馆

生物科学信息 1988年第2期 36-37页

作者：王亚新上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室

上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室创建于1983年年底。它的研究目标是从分子水平阐明生命现象及剖析病理过程,为疾病的诊断及防治提供先进的手段与方法。因此这是属于医学分子生物学领域的一个新兴实验室。在上海市高教局及... 详细信息

<正> 上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室创建于1983年年底。它的研究目标是从分子水平阐明生命现象及剖析病理过程,为疾病的诊断及防治提供先进的手段与方法。因此这是属于医学分子生物学领域的一个新兴实验室。在上海市高教局及学校等上级部门的大力支持下,该室已发展成为国内医学院校系统中较先进的医学分子生物学实验室。

关键词：医学分子生物学医学院校生物学实验室实验室简介病理过程原发性胃癌抗原受体基因学术杂志移植瘤模型生长激素缺乏症

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重组牛痘病毒介导的微小基因表达产物OVA257～264在真核细胞中的抗原呈递效率

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第6期34卷 719-724页

作者：钱丽钱关祥上海第二医科大学生物化学教研室、分子生物学实验室上海200025 上海第二医科大学生物化学教研室、分子生物学实验室

应用含重组OVA微小基因及全长基因的牛痘病毒感染能够稳定表达Kb 分子的多种真核细胞 ,通过构象特异的单克隆抗体 2 5 .D 1.16 (anti OVA2 57～ 2 64/Kb)检测细胞表面复合物的形成情况 ,并借助四聚体技术检测了它们对抗原特异性T细胞的... 详细信息

应用含重组OVA微小基因及全长基因的牛痘病毒感染能够稳定表达Kb 分子的多种真核细胞 ,通过构象特异的单克隆抗体 2 5 .D 1.16 (anti OVA2 57～ 2 64/Kb)检测细胞表面复合物的形成情况 ,并借助四聚体技术检测了它们对抗原特异性T细胞的诱导能力。结果表明四聚体的构建是成功的 ,进一步用已被重组牛痘病毒感染的L92 9 Kb 细胞作为抗原呈递细胞以诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的产生 ,并对活化后特异性CTL进行检测 ,从胞外IFN γ的分泌情况看 ,诱导后的整个群体细胞发生了活化与增殖 ,H 2Kb OVA四聚体对特异性T细胞进行的结合分析与经典的细胞毒效应相一致。可见 ,重组牛痘病毒介导的微小基因产物OVA2 57～ 2 64不仅能为MHC I类分子的合成提供更有效的肽来源 ,且能更有效诱导特异性CTL的产生。

关键词：四聚体重组牛痘病毒微小基因 CTL 抗原肽

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NIH3T3细胞中PTPα基因高表达激活Src的早期细胞表型变化

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生物化学与生物物理学报 2002年第2期34卷 193-198页

作者：杨劲松郑新民陈诗书上海第二医科大学生化教研室、分子生物学实验室、人类基因治疗研究中心美国康奈尔大学上海第二医科大学生化教研室、分子生物学实验室、人类基因治疗研究中心上海200025 纽约14850

利用蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)基因转染NIH3T3细胞 ,研究PTPα诱导前后细胞生物学行为的变化 ,为肿瘤形成早期机制的研究提供细胞模型。用携带PTPα基因的四环素调控体系转染NIH3T3细胞并诱导 2 4h后 ,用RT PCR和蛋白质印迹法证实PT... 详细信息

利用蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)基因转染NIH3T3细胞 ,研究PTPα诱导前后细胞生物学行为的变化 ,为肿瘤形成早期机制的研究提供细胞模型。用携带PTPα基因的四环素调控体系转染NIH3T3细胞并诱导 2 4h后 ,用RT PCR和蛋白质印迹法证实PTPα在诱导细胞中的表达高于未诱导细胞 ,用RT PCR及蛋白质印迹法发现内源性Src的表达水平在诱导与未诱导细胞中没有变化 ,而Src激酶的活性在诱导细胞中增高 ,并且在诱导细胞中Src的酪氨酸磷酸化水平降低。再用透射式电子显微镜和流式细胞技术观察到诱导细胞的表型已发生变化 ,实验结果表明PTPα诱导 2 4h使细胞的表型开始发生转化 ,这种变化很可能与PTPα表达水平升高使SrcC末端的pTyr52 7去磷酸化而激活Src相关

关键词： PTPα Src 转化

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PTPα高表达致NIH3T3细胞恶变早期相关基因的筛选与鉴定

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生物化学与生物物理学报 2002年第5期34卷 601-607页

利用已建立的蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)诱导表达模型筛选NIH3T3细胞中PTPα诱导表达前后的差别表达基因 ,有利于探索肿瘤早期形成的机制。诱导PTPα表达 2 4h ,用差异显示逆转录PCR获得 6 5条差异片段 ,利用生物信息学方法分析这些... 详细信息

利用已建立的蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)诱导表达模型筛选NIH3T3细胞中PTPα诱导表达前后的差别表达基因 ,有利于探索肿瘤早期形成的机制。诱导PTPα表达 2 4h ,用差异显示逆转录PCR获得 6 5条差异片段 ,利用生物信息学方法分析这些差异片段 ,发现其中含有 2 9种已知基因、1 2种已知EST、6种未知EST ;对已知基因进行功能查询和分析 ,发现它们分别与信号转导、细胞骨架及粘附、转录与翻译、能量代谢、凋亡及核糖体蛋白质相关 ,其中G蛋白基因、TCR基因、类Trx基因、小窝蛋白 1 (caveolin 1 )基因经RT PCR及Northern印迹实验证实了差异表达的真实性。结果表明 ,PTPα诱导表达 2 4h后多种基因发生了表达变化 ,涉及细胞生理多方面的功能 ,其中一些基因在癌变的早期起重要的作用 ,这为深入探讨肿瘤早期形成机制打下基础 ,也可为基因治疗候选靶点的选择提供依据

关键词：蛋白质酪氨酸磷酸酶α 差别表达肿瘤形成机制

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弓形虫的分子生物学研究

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中国人兽共患病杂志 1994年第1期10卷 50-51页

作者：夏爱娣上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室

弓形虫的分子生物学研究上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室夏爱娣综述陈诗书审校弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）是寄生于人和多种动物组织细胞内的原虫。人群弓形虫感染抗体阳性率英国２０－４０％，美国５０－... 详细信息

弓形虫的分子生物学研究上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室夏爱娣综述陈诗书审校弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）是寄生于人和多种动物组织细胞内的原虫。人群弓形虫感染抗体阳性率英国２０－４０％，美国５０－６０％，法国８０－９０％［２］，我...

关键词：弓形体分子生物学

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维甲酸对人胃癌细胞诱导分化的研究

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中华肿瘤杂志 1994年第1期16卷 15-17页

作者：孙月霞何震平程枫陈诗书上海第二医科大学生物化学教研室分子生物学实验室

人胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１经１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）处理后，将细胞接种裸鼠，观察其移植瘤生成率和瘤体重量比对照胃癌细胞显著降低和减小ｐ＜０．０１。透射电镜发现，胃癌细胞经ＲＡ作用后，其细胞形态发生改变，由椭圆形... 详细信息

人胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１经１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）处理后，将细胞接种裸鼠，观察其移植瘤生成率和瘤体重量比对照胃癌细胞显著降低和减小ｐ＜０．０１。透射电镜发现，胃癌细胞经ＲＡ作用后，其细胞形态发生改变，由椭圆形、核大、核周边缘凹陷切迹，转变为长圆形或近似梭形、核小、核周边缘光滑无切迹。流式细胞仪检测结果，ＲＡ处理的胃癌细胞，其细胞周期发生改变，停留在Ｇ１／０期细胞百分比率比对照胃癌细胞显著上升Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０１，而增殖期Ｓ和Ｇ２＋Ｍ期细胞百分比率比对照细胞显著下降Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０１。结果表明：ＲＡ可从细胞生物学、细胞周期动力学及细胞形态学水平逆转入胃癌细胞表型，使该细胞株有一定程度的诱导分化。

关键词：维甲酸胃肿瘤肿瘤细胞培养

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聚合酶链反应测定婴儿尿人巨细胞病毒DNA

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中华医学杂志 1990年第10期70卷 560-562页

作者：董枫陈诗书上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室 200025

在利用建立的聚合酶链反应（PCR）技术测定尿中人巨细胞病毒（HCMV）的方法中,自行设计并合成了两对HCMV的DNA引物。经实验证明,这两对引物是HCMV特异和保守的顺序,对正常人基因组DNA和其它疱疹病毒无交叉反应。本方法可测出少至1015g（... 详细信息

在利用建立的聚合酶链反应（PCR）技术测定尿中人巨细胞病毒（HCMV）的方法中,自行设计并合成了两对HCMV的DNA引物。经实验证明,这两对引物是HCMV特异和保守的顺序,对正常人基因组DNA和其它疱疹病毒无交叉反应。本方法可测出少至1015g（1 fg）的病毒DNA。对47例疑为HCMV感染患儿的检测结果和病毒分离法测定结果相比较,其中31例两者皆为阳性;12例皆为阴性,4例本方法狲定阳性,病毒分离法为阴性,但同时测定血清HCMV-1gM呈阳性反应,支持本方法的结果。以上结果表明,本方法的特异性和敏感性都不低于病毒分离法,并具有操作简便、反应周期短、对长期保存并已消失感染性的样品也有效等优点,适于临床推广。

关键词：巨细胞病毒 DNA 尿液诊断

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RT-PCR检测人烧伤愈合中TGF-β_1的表达

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上海医学 2000年第4期23卷 222-224页

作者：梅文瀚赵涵芳章有章上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室 200025

目的　通过对烧伤愈合不同阶段人皮肤组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA表达变化的研究 ,阐明TGF β1对促进愈合的调节作用。方法　取人深Ⅱ度烧伤后 5d、7d、12d手术切除的烧伤区皮肤组织 ,采用RT PCR后电泳扫描求积方法 ,检测各时... 详细信息

目的　通过对烧伤愈合不同阶段人皮肤组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA表达变化的研究 ,阐明TGF β1对促进愈合的调节作用。方法　取人深Ⅱ度烧伤后 5d、7d、12d手术切除的烧伤区皮肤组织 ,采用RT PCR后电泳扫描求积方法 ,检测各时相烧伤皮肤组织TGFβ1mRNA表达量的变化。结果　人深Ⅱ度烧伤皮肤TGFβ1mRNA在伤后 7d出现表达高峰 ,5d与 12d也有表达增强。结论　TGFβ1对烧伤患者创伤愈合有促进作用。

关键词：转化生长因子β1 烧伤愈合 RT-PCR mRNA

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用多聚酶链反应诊断弓形虫病

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1992年第3期10卷 171-175页

作者：夏爱娣王克敏董泰忠张惠民吴兆平陈诗书杨惠珍徐克继钱宗立上海第二医科大学生化教研室上海第二医科大学分子生物学实验室上海第二医科大学寄生虫学教研室

根据本实验室筛选出的弓形虫(ZS_2株)特异DNA克隆片段的部分顺序分析的数据,设计并合成特异的寡核苷酸引物对,建立多聚酶链反应诊断弓形虫病的方法。不同来源的弓形虫株和7例畸形胎儿DNA经体外基因扩增,扩增产物经电泳检测,均出现特异... 详细信息

根据本实验室筛选出的弓形虫(ZS_2株)特异DNA克隆片段的部分顺序分析的数据,设计并合成特异的寡核苷酸引物对,建立多聚酶链反应诊断弓形虫病的方法。不同来源的弓形虫株和7例畸形胎儿DNA经体外基因扩增,扩增产物经电泳检测,均出现特异的扩增条带。对42例肝炎综合症的婴儿和33例不良生育史的孕妇的外周血白细胞DNA检测,分别为6例和4例阳性。50例正常人外周血白细胞DNA检测均为阴性。对扩增产物进行Southern印迹分析,以^(32)P标记克隆的弓形虫特异DNA片段为探针,能与阳性病例特异的扩增条带杂交,而不与阴性样品的扩增产物杂交。本法并与其它检测方法的结果相比较,具高度特异、敏感且快速的优点。

关键词：聚合酶链反应 DNA诊断弓形体病

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人转化生长因子基因重组克隆及高效表达

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上海医学 2000年第2期23卷 84-87页

作者：于丽莉赵涵芳刘军章有章上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室 200025

目的　克隆人转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因并且在大肠杆菌中表达。方法　从人的血小板中抽提总ＲＮＡ，经逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）得到全长ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ，将其克隆于表达质粒ｐＢＬＭＶＬ２中，构建了在ＰＬ ... 详细信息

目的　克隆人转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因并且在大肠杆菌中表达。方法　从人的血小板中抽提总ＲＮＡ，经逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）得到全长ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ，将其克隆于表达质粒ｐＢＬＭＶＬ２中，构建了在ＰＬ启动子控制的含有ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ重组子，转化到大肠杆菌ＲＲ１菌株中，进行温敏诱导表达。结果　表达产物经ＳＤＳＰＡＧＥ电泳染色后，显示其相对分子质量为１２．５ ×１０３，计算机灰度扫描分析，表达产物约占全菌蛋白的２０％左右，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证实，表达产物为ＴＧＦβ１，细胞实验显示其具有一定的生物活性。结论　在大肠杆菌中表达出具有活性的人ＴＧＦβ１。这为我们下一步研究其功能和临床应用打下了基础。

关键词： TGFβ1 基因工程基因表达克隆烧伤

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