检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2003年第6期7卷 922-923,T003页

作者：刘阳张燕中许志成刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程重点实验室上海市200011 上海第二医科大学附属仁济医院血管外科上海市200000

目的:构建组织的方法和环境是组织工程研究所涉及的另一重要环节,对于能否最终形成新生组织以及新生组织质量的好坏起着关键作用。探讨运用组织工程技术构建血管中膜组织的方法。方法:将体外培养、扩增的犬平滑肌细胞接种于片状聚羟基乙... 详细信息

目的:构建组织的方法和环境是组织工程研究所涉及的另一重要环节,对于能否最终形成新生组织以及新生组织质量的好坏起着关键作用。探讨运用组织工程技术构建血管中膜组织的方法。方法:将体外培养、扩增的犬平滑肌细胞接种于片状聚羟基乙酸(PGA)材料上,形成细胞-材料复合物,将该复合物包绕于硅胶管使成管状结构后移植于裸鼠皮下,第2,6,11周后行大体及组织学检测。结果:裸鼠皮下形成的组织工程化血管中膜组织学结构在不同的时间点具有不同的特征。结论:运用组织工程技术可形成具有与天然血管中膜组织学结构相似的血管。

关键词：组织工程技术构建血管壁实验研究生物医学工程

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不同类型人软骨细胞体外生物学特性比较

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中华实验外科杂志 2003年第6期20卷 497-498页

作者：张艳柴岗崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究重点实验室上海组织工程研究开发中心 200011

目的　通过研究人耳软骨和肋软骨两种不同类型软骨细胞体外分离、增殖、老化规律 ,为选择合适的组织工程种子细胞提供依据。方法　取小耳畸形残耳软骨和肋软骨 ,体外分别用0 .0 5 %和 0 .15 %Ⅱ型胶原酶消化 16h分离 ,台盼蓝染色计活细... 详细信息

目的　通过研究人耳软骨和肋软骨两种不同类型软骨细胞体外分离、增殖、老化规律 ,为选择合适的组织工程种子细胞提供依据。方法　取小耳畸形残耳软骨和肋软骨 ,体外分别用0 .0 5 %和 0 .15 %Ⅱ型胶原酶消化 16h分离 ,台盼蓝染色计活细胞数 ,得原代细胞获得率。体外单层培养 6代 ,观察形态学改变 ,群体倍增时间 (PDT ) ,免疫细胞化学染色及逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测Ⅱ型胶原和Aggrecan评定软骨细胞老化规律。结果　人残耳软骨组织平均细胞获得率为 ( 1.5 4± 0 .14 )× 10 6/ g ,肋软骨平均获得率为 ( 0 .46± 0 .0 9)× 10 6/ g ,两类软骨细胞P1的PDT最短 ,前 3代增殖力较强 ,P3 以后PDT明显延长 ,P6代细胞不再增殖。免疫细胞化学及RT PCR均证实耳软骨细胞 3代内、肋软骨细胞 4代内软骨细胞表型稳定。结论　第 2代的耳软骨细胞与第 3代肋软骨细胞可作为人体内组织工程化软骨构建的种子细胞。

关键词：软骨细胞体外生物学特性组织工程种子细胞

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重组端粒酶pEGFP-hTRT质粒的构建

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中国修复重建外科杂志 2003年第3期17卷 230-232页

作者：周海文周曾同杨雯君刘德莉李卿胡洪亮刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科口腔研究所上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科上海200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程重点实验室上海200011

目的　构建具有绿色荧光蛋白报道 (GFP)基因的端粒酶真核质粒载体 ,为转染细胞、延长细胞寿命提供基础。　方法　酶切含人端粒酶逆转录酶 (h TRT)基因的 p GRN14 5质粒获取 h TRT片段 ,插入经酶切及磷酸化处理的 GFP载体 p EGFP- C1,形... 详细信息

目的　构建具有绿色荧光蛋白报道 (GFP)基因的端粒酶真核质粒载体 ,为转染细胞、延长细胞寿命提供基础。　方法　酶切含人端粒酶逆转录酶 (h TRT)基因的 p GRN14 5质粒获取 h TRT片段 ,插入经酶切及磷酸化处理的 GFP载体 p EGFP- C1,形成 8.1kb质粒 ,经 Hind 、Not 酶切电泳筛选、鉴定并测序。　结果　经酶切电泳分析得到3.4 kb及 4 .7kb大小的两片段 ;测序结果显示接头两端序列正确。　结论　重组端粒酶 p EGFP- h TRT质粒的成功构建 ,可用于细胞转染 ,对进一步研究组织工程种子细胞的衰老问题具有重要意义。

关键词：端粒酶 pEGFP-hTRT质粒构建重组质粒绿色荧光蛋白

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爱茜蓝法检测组织工程化软骨及软骨细胞中蛋白聚糖的含量

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中华实验外科杂志 2003年第1期20卷 89-89页

作者：李卿刘伟夏万尧崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院上海市组织工程重点实验室 200011

我们应用爱莤蓝法对生物样品中蛋白聚糖进行定量测定，判断组织工程化软骨的生化构成是否正常。

关键词：爱茜蓝法组织工程化软骨软骨细胞蛋白聚糖含量检测生化构成

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应用组织工程技术构建角膜组织的研究新进展

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生物医学工程与临床 2003年第3期7卷 172-175页

作者：王爱丽曹谊林(审校) 刘伟(审校) 姚康德(审校) 上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011 天津大学材料科学与工程学院天津300072

组织工程化角膜的研究开展至今已取得长足的进步。在以往的体外单层组织构建的基础上 ,正逐渐向三维体系的多层结构深入 ,在功能和结构上越来越接近于正常的角膜组织。各种细胞共培养技术的改进和新型载体材料的应用也有力地推动其进一... 详细信息

组织工程化角膜的研究开展至今已取得长足的进步。在以往的体外单层组织构建的基础上 ,正逐渐向三维体系的多层结构深入 ,在功能和结构上越来越接近于正常的角膜组织。各种细胞共培养技术的改进和新型载体材料的应用也有力地推动其进一步完善。

关键词：组织工程角膜组织多层结构结构功能载体材料

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应用b-FGF刺激的软骨细胞构建自体组织工程化软骨的研究

应用b-FGF刺激的软骨细胞构建自体组织工程化软骨的研究

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中华医学会第七届全国整形外科学术会议

作者：丁小邦程宁新王原路陈兵曹谊林广州市第一人民医院整形外科上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海组织工程重点实验室

本文研究了软骨缺损常需自体软骨组织移植修复.然而,自体软骨组织供区有限,且易引起供区损伤,限制了手术的应用.近年来,组织工程的研究为软骨缺损的修复提供了新的方向.然而软骨细胞属于增生能力极弱的终末分化细胞,在体外培养过程中扩... 详细信息

本文研究了软骨缺损常需自体软骨组织移植修复.然而,自体软骨组织供区有限,且易引起供区损伤,限制了手术的应用.近年来,组织工程的研究为软骨缺损的修复提供了新的方向.然而软骨细胞属于增生能力极弱的终末分化细胞,在体外培养过程中扩增有限,且经过一段时间培养后,细胞极易老化,表型发生改变,丧失了成软骨细胞的能力,从而限制了软骨组织工程的临床应用.

关键词：软骨细胞构建自体组织软骨缺损移植修复

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自体组织工程化全层皮肤缺损修复实验研究

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中华外科杂志 2002年第1期40卷 24-26,T001页

作者：曹谊林蔡霞崔磊商庆新刘伟关文祥上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程研究重点实验室 210011

目的　为制成含表皮细胞与成纤维细胞的双层皮肤替代物 ,直接用于修复全层皮肤缺损。方法　选用长枫杂交仔猪 10只 ,酶消化法获取皮肤表皮细胞与成纤维细胞 ,将原代培养处于对数生长期的表皮细胞、成纤维细胞分别与 3 0 %氧化异丙烯F 1... 详细信息

目的　为制成含表皮细胞与成纤维细胞的双层皮肤替代物 ,直接用于修复全层皮肤缺损。方法　选用长枫杂交仔猪 10只 ,酶消化法获取皮肤表皮细胞与成纤维细胞 ,将原代培养处于对数生长期的表皮细胞、成纤维细胞分别与 3 0 %氧化异丙烯F 12 7混匀成细胞悬液后 ,种植聚羟基乙酸(polyglycolicacid ,PGA)形成细胞生物材料复合物 ,用于修复自体动物背部直径 4cm全层皮肤缺损 ,以单纯生物材料 (PGA +氧化异丙烯 )充填的创面作为对照组。修复术后 1,2 ,4 ,8周取材 ,通过组织学和基底膜特殊染色等方法对新生组织进行评价。结果　第 1周新生组织即出现表皮与真皮 2层结构 ,特殊染色观察到连续的基底膜。第 2周表皮与真皮均较前增厚。修复后第 8周组织工程化皮肤的形态结构均与正常皮肤相似。对照组则无皮肤形成 ,仅见大量肉芽组织。结论　应用组织工程技术 ,以PGA +氧化异丙烯为表皮细胞。

关键词：人工皮肤皮肤移植成纤维细胞动物实验

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碱性成纤维细胞因子对猪弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响

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中华实验外科杂志 2002年第6期19卷 573-574,I004页

作者：丁小邦夏万尧陈兵崔磊刘伟商庆新曹谊林第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011

目的　研究碱性成纤维细胞因子 (b FGF)对体外培养的弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响 ,探讨b FGF对软骨组织工程的意义。方法　细胞取自猪耳软骨 ,用含 1 0、2 5、50 μg/L3种浓度b FGF的培养液 ,体外培养至第 3代 ,从细胞形态、数... 详细信息

目的　研究碱性成纤维细胞因子 (b FGF)对体外培养的弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响 ,探讨b FGF对软骨组织工程的意义。方法　细胞取自猪耳软骨 ,用含 1 0、2 5、50 μg/L3种浓度b FGF的培养液 ,体外培养至第 3代 ,从细胞形态、数量和基质分泌等方面进行研究。结果　含b FGF组细胞贴壁呈类成纤维细胞样 ,撤去b FGF ,细胞形态可恢复正常 ;含b FGF各组在第 3代 ,细胞总数是无b FGF组的 60～ 70倍 (P <0 .0 1 ) ,但 3种不同浓度b FGF对细胞增殖差异无显著性 ;培养液氨基糖氨多糖 (GAG)含量测定各组差异无显著性 ;免疫组织化学和原位杂交示各组第 3代软骨细胞仍有Ⅱ型胶原表达。结论　应用b FGF能在 3周内从少量软骨组织获取大量软骨细胞 ,且未改变细胞表型和功能 ,对软骨组织工程有重要意义 ;在 1 0、2 5、50 μg/L 3种浓度中 ,1 0μg/L为b

关键词：碱性成纤维细胞因子猪弹性软骨细胞成软骨能力组织工程细胞增殖

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骨髓间质干细胞向软骨细胞表型定向诱导分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2002年第1期18卷 12-14页

作者：夏万尧商庆新崔磊徐蓉丁小邦曹谊林上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传... 详细信息

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传代后以高糖DMEM无血清特定培养液诱导 (含胰岛素 2mg L、转铁蛋白 3mg L、丙酮酸 10 0mg L、地塞米松 10 - 7mol L、TGF β110ng ml) ,在相差显微镜和电镜下进行观察 ,免疫组化检测Ⅱ型胶原分泌 ,原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达。结果　细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形转变 ,透视电镜观察见大量扩张粗面内质网、高尔基体、线粒体。诱导培养后第 7,14dⅡ型胶原免疫组化阳性 ,同时原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达呈阳性。结论　MSCs在特定培养液诱导下能向软骨细胞表型转化 ,并能分泌软骨特异性基质 ,有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源的应用前景。

关键词：组织工程骨髓间充质干细胞分化软骨细胞表型动物实验

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壳聚糖作为组织工程软骨支架的实验研究

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中华显微外科杂志 2002年第1期25卷 34-37页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春钟伟 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科复旦大学高分子科学系

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚... 详细信息

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚糖胶原上的黏附率及壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架对细胞的增殖、功能的影响。　结果　软骨细胞能够在壳聚糖、壳聚糖胶原支架上黏附、伸展、增殖和发挥正常功能 ,MTT测得细胞黏附率分别为 81 2 5 %和 87 5 0 % ,MTT测得软骨细胞在壳聚糖胶原支架中的增殖能力较强。　结论　壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架与软骨细胞具有较好的相容性 ,壳聚糖胶原复合多孔支架更适合作为软骨组织工程中的细胞培养支架。

关键词：组织工程软骨细胞壳聚糖支架细胞培养

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