检索结果-内蒙古大学图书馆

空军航空医学 2025年第2期 149-155页

作者：南祎祺王越越袁青宏蔡思睿杨琨姜东伯空军军医大学基础医学院免疫学教研室空军军医大学基础医学院四大队十六队

炎症小体是一种在炎症反应中发挥重要作用的多蛋白复合体，其激活受到多种因素的调节和影响。小泛素相关修饰物（small ubiquitin-related modifier,SUMO）化是一种翻译后修饰（post-translational modifications,PTMs）的方法，在炎症... 详细信息

炎症小体是一种在炎症反应中发挥重要作用的多蛋白复合体，其激活受到多种因素的调节和影响。小泛素相关修饰物（small ubiquitin-related modifier,SUMO）化是一种翻译后修饰（post-translational modifications,PTMs）的方法，在炎症小体激活的调节过程中也发挥着重要作用。笔者通过对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor familypyrindomain-con-tainingprotein3,NLRP3)炎症小体的SUMO化修饰进行系统回顾，阐述多种SUMO修饰分子和SUMO化酶发挥激活NLRP3的生物学作用，总结SUMO化影响NLRP3炎症小体激活的规律，为调节炎症小体激活和治疗炎症小体相关疾病提供新思路。

关键词： SUMO化蛋白质加工,转译后 NLRP3炎症小体

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小鼠血小板/T细胞活化抗原1的表达分布与功能

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中华微生物学和免疫学杂志 1999年第3期19卷 232-235页

作者：李德敏金伯泉苏丽贾卫孙凯刘雪松张婷婷第四军医大学免疫学教研室

目的研究小鼠血小板／Ｔ细胞活化抗原１（ＰＴＡ１）在小鼠组织及各种细胞系的表达分布与诱导，及其在杀伤性Ｔ细胞和ＬＡＫ细胞诱导中的作用。方法应用流式细胞仪技术分析ＰＴＡ１在小鼠组织及细胞系中的表达及诱导；用同种异体抗原诱... 详细信息

目的研究小鼠血小板／Ｔ细胞活化抗原１（ＰＴＡ１）在小鼠组织及各种细胞系的表达分布与诱导，及其在杀伤性Ｔ细胞和ＬＡＫ细胞诱导中的作用。方法应用流式细胞仪技术分析ＰＴＡ１在小鼠组织及细胞系中的表达及诱导；用同种异体抗原诱导杀伤性Ｔ细胞，用ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞，分别研究ＰＴＡ１特异性单克隆抗体对其分化的影响。结果小鼠ＰＴＡ１主要在Ｔ细胞系呈诱导性表达，参与杀伤性Ｔ细胞的分化，但不参与ＬＡＫ细胞的诱导。结论小鼠ＰＴＡ１与人ＰＴＡ１有相似的分布特点与功能。

关键词：血小板杀伤性T细胞细胞毒小鼠 PTA1

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一种新的gp130结合分子的序列分析和真核表达

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中华微生物学和免疫学杂志 1998年第2期18卷 106-110页

作者：金伯泉刘飞第四军医大学免疫学教研室

目的对以ＧＳＴ－ｇｐ１３０融合蛋白为探针，筛选人胎盘ｃＤＮＡ文库而得到的一个分子（ＧＡＭ，ｇｐ１３０ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅ）ｃＤＮＡ序列进行测定并做真核表达。方法进行噬菌体制备及克隆测序，并做同源性检索... 详细信息

目的对以ＧＳＴ－ｇｐ１３０融合蛋白为探针，筛选人胎盘ｃＤＮＡ文库而得到的一个分子（ＧＡＭ，ｇｐ１３０ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅ）ｃＤＮＡ序列进行测定并做真核表达。方法进行噬菌体制备及克隆测序，并做同源性检索和构型、亲水性分析，ＣＯＳ细胞转染和３５Ｓ－蛋氨酸标记。结果所得ＧＡＭ分子与另一已克隆成功但功能还不清楚的称为ｈＡＥＳ－１的分子同源性达９７．７％。此外，ＧＡＭｃＤＮＡ还与果蝇ｅｎｈａｎｃｅｒｏｆｓｐｌｉｔ基因相关的分子有较高同源性。ＧＡＭ分子具有一个５８８个核苷酸的开放读框，编码１９６个氨基酸。将ＧＡＭ分子ｃＤＮＡ转染ＣＯＳ细胞后，细胞裂解液电泳可见一分子量约为２４×１０３的表达带，与预期的分子量相符合。结论ＧＡＭ分子与ｈＡＥＳ－１分子在开放读框内仅相差一个氨基酸（且不排除测序的个别错误），其分子量也与已报道的ｈＡＥＳ－１分子量相同，故认为两者很可能是同一分子。

关键词： gp130 信息传导序列分析 DNA

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用生物传感器测定重组人肿瘤坏死因子-α单克隆抗体的亲和力及抗原识别表位

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中华微生物学和免疫学杂志 2000年第3期20卷 240-243页

作者：刘雪松金伯泉朱勇第四军医大学免疫学教研室

目的　测定重组人肿瘤坏死因子 α(TNF α)单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数。方法　借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果　 10株TNF α单抗的亲和常数介于 10 5 ～ 10 7M 1 之间 ,其中所测的 5株抗体识... 详细信息

目的　测定重组人肿瘤坏死因子 α(TNF α)单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数。方法　借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果　 10株TNF α单抗的亲和常数介于 10 5 ～ 10 7M 1 之间 ,其中所测的 5株抗体识别肿瘤坏死因子上 3种不同的抗原表位。结论　生物传感器在研究抗原抗体相互作用中确为一个理想的工具 ,适合于抗原抗体结合与解离的动力学分析及预测表位的构象关系。

关键词：生物传感器单克隆抗体肿瘤坏死因子α 表位

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HTHV核蛋白诱导产生特异性CTL的实验研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2000年第1期20卷 23-25页

作者：张婷婷朱勇金伯泉刘飞孙忱陈丽华第四军医大学免疫学教研室

目的　建立稳定表达核蛋白(NP)的P815细胞株,并以此作为CTL的靶细胞,研究汉滩病毒(HTHV)诱导产生的NP抗原特异性CTL。方法　脂质体介导pEFBOS/HTHVNP和pDORneo质粒DNA共转染P815细胞株,用免疫组化染色法证实NP在胞浆中的表达。分别取HTH... 详细信息

目的　建立稳定表达核蛋白(NP)的P815细胞株,并以此作为CTL的靶细胞,研究汉滩病毒(HTHV)诱导产生的NP抗原特异性CTL。方法　脂质体介导pEFBOS/HTHVNP和pDORneo质粒DNA共转染P815细胞株,用免疫组化染色法证实NP在胞浆中的表达。分别取HTHV感染小鼠的脾细胞和pEFBOS/HTHVNP质粒DNA免疫小鼠的脾细胞,经体外抗原和IL2再刺激诱导产生CTL效应细胞,进行4h51Cr释放实验。结果　杀伤试验结果表明,无论通过病毒感染还是基因免疫获得的CTL效应细胞,均可以特异性杀伤NP基因转染的靶细胞。结论　HTHVNP可以有效诱导CTL的产生,该研究结果为进一步设计HTHV合成肽疫苗或基因疫苗提供了重要实验依据。

关键词：肾综合征出血热汉滩病毒核蛋白 CTL

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嵌合重组caspase-3诱导表达促进肿瘤细胞凋亡

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生物化学与生物物理进展 2003年第2期30卷 272-277页

作者：贾林涛张立红于翠娟纪宗玲曹云新王成济杨安钢第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室西安710032 第四军医大学基础部免疫学教研室西安710032

通过稳定转染人宫颈癌HeLa细胞,建立了野生型caspase-3(wt-casp3),大小亚基序列颠倒的重组caspase-3 (r-casp3),和N端融合绿脓杆菌外毒素(PE)转膜肽段的嵌合重组caspase-3 (cr-casp3)的诱导表达细胞系.蜕皮素诱导后细胞中检测到目的基... 详细信息

通过稳定转染人宫颈癌HeLa细胞,建立了野生型caspase-3(wt-casp3),大小亚基序列颠倒的重组caspase-3 (r-casp3),和N端融合绿脓杆菌外毒素(PE)转膜肽段的嵌合重组caspase-3 (cr-casp3)的诱导表达细胞系.蜕皮素诱导后细胞中检测到目的基因的表达,MTT检测和细胞计数结果表明,r-casp3和cr-casp3诱导表达后有效地导致HeLa细胞死亡,通过测定细胞中caspase-3活性,以及细胞周期检测、DNA梯状电泳条带检测(DNA ladder)、电镜观察等证实r-casp3和cr-casp3诱导表达后细胞发生了凋亡,且二者的促凋亡活性相当,而wt-casp3诱导表达细胞并未出现上述效应.结果表明,与野生型caspase-3活化需要上游分子的切割不同,重组caspase-3具有自发的促凋亡活性,而N端PE肽段的融合不影响这种活性,因此PE转膜结构域和重组caspase-3有望参与构建能转膜进入细胞内部,并杀伤细胞的新型肿瘤治疗分子.

关键词： Caspase-3 绿脓杆菌外毒素细胞凋亡肿瘤

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人gp130结合分子与TLE1分子通过同源的Q结构域相互作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第3期22卷 303-307页

作者：刘飞金伯泉刘崟李德敏朱勇欧阳为明谢鑫第四军医大学免疫学教研室西安710032

目的　确定人gp130结合分子 (GAM)与transducinlikeenhancerofsplit 1(TLE1)分子间是否存在相互作用及相互作用的结构基础 ,以深入研究这两种分子的功能。方法　扩增编码GAM与TLE1分子不同结构域的cDNA ,构建含有这些不同结构域的酵母... 详细信息

目的　确定人gp130结合分子 (GAM)与transducinlikeenhancerofsplit 1(TLE1)分子间是否存在相互作用及相互作用的结构基础 ,以深入研究这两种分子的功能。方法　扩增编码GAM与TLE1分子不同结构域的cDNA ,构建含有这些不同结构域的酵母双杂交载体 ,通过酵母双杂交系统分析和免疫共沉淀试验 ,研究这两种分子间的相互作用。结果　DNA序列测定证实成功构建了含GAM与TLE1分子不同结构域的酵母双杂交载体 ,酵母双杂交分析表明GAM与TLE1分子通过氨基端的Q结构域相互结合 ,免疫共沉淀试验证实了这一发现。

关键词： gp130结合分子信号传导 TLE1 蛋白质相互作用免疫共沉淀试验酵母双杂交系统分析

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人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达、复性及免疫反应性的鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第6期22卷 587-590页

作者：张新海欧阳为明贾卫杨琨宁双飞陈丽华李琦金伯泉第四军医大学免疫学教研室西安710032

目的　构建人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区的原核表达载体 ,并进行原核表达和复性 ,为该分子的X线结晶衍射及功能学研究提供充足的蛋白来源。方法　将人CD2 2 6分子的胞膜外区基因克隆入原核表达载体pBV2 2 0 ,测序证实后 ,转化宿主菌MC1... 详细信息

目的　构建人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区的原核表达载体 ,并进行原核表达和复性 ,为该分子的X线结晶衍射及功能学研究提供充足的蛋白来源。方法　将人CD2 2 6分子的胞膜外区基因克隆入原核表达载体pBV2 2 0 ,测序证实后 ,转化宿主菌MC10 6 1 P3并进行温度诱导表达。产物采用稀释加透析法复性 ,亲和层析柱纯化 ,并通过Westernblot和ELISA对其复性效果进行鉴定。结果　温度诱导 7h ,目的蛋白的表达量达宿主菌总蛋白量的 2 3.8% ,其相对分子质量为 30× 10 3,Westernblot及ELISA证实其重折叠和复性是成功的。结论　成功地获得了人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区的原核表达产物。

关键词： CD226 PTA1 胞膜外区原核表达免疫反应性鉴定重折叠复性

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血小板/T 细胞活化抗原1(PTA1)胞膜外区基因片段的克隆及其融合蛋白的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 1999年第5期19卷 377-381页

作者：孙凯金伯泉冯琦田芳朱勇杨琨刘雪松第四军医大学免疫学教研室西安710032

目的　克隆血小板／Ｔ细胞活化抗原１（ｐｌａｔｅｌｅｔａｎｄＴｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｔｉｇｅｎ１，ＰＴＡ１）胞膜外区基因片段，构建、表达、纯化ＰＴＡ１胞膜外区与ＩｇＧＦｃ融合蛋白，用于Ｐ... 详细信息

目的　克隆血小板／Ｔ细胞活化抗原１（ｐｌａｔｅｌｅｔａｎｄＴｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｔｉｇｅｎ１，ＰＴＡ１）胞膜外区基因片段，构建、表达、纯化ＰＴＡ１胞膜外区与ＩｇＧＦｃ融合蛋白，用于ＰＴＡ１配体鉴定的研究。方法　针对人ＰＴＡ１ｃＤＮＡ设计引物，通过反转录、半套式ＰＣＲ从ＴＰＡ活化的Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增ＰＴＡ１胞膜外区基因片段，并进行序列测定，而后将其进一步克隆入融合蛋白表达载体ｐＩＧ中，构建重组表达载体ｐＰＴＡ１／Ｉｇ，经ＤＥＡＥ Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞后通过亲和层析纯化，融合蛋白经ＳＤＳ ＰＡＧＥ、夹心ＥＬＩＳＡ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定。结果　获得７９３ｂｐＰＴＡ１胞膜外区基因片段，构建成功ＰＴＡ１／Ｉｇ融合蛋白表达载体，制备了可用于纯化ＰＴＡ１／Ｉｇ的亲和层析柱，建立了检测融合蛋白的夹心ＥＬＩＳＡ方法。经ＳＤＳ ＰＡＧＥ、夹心ＥＬＩＳＡ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实融合蛋白在ＣＯＳ７细胞中获得表达，相对分子质量为８３ ×１０３，表达效率约为１．３ｍｇ／ ?

关键词：血小板 T细胞活化抗原1 融合蛋白基因表达

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人CD226(PTA1)分子胞膜外区截短体真核表达载体的构建、表达及其识别结构域的分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第1期23卷 9-13页

作者：贾卫刘雪松张新海朱勇张贇李琦杨琨欧阳为明宁双飞金伯泉第四军医大学免疫学教研室西安710032

目的　确定一套CD2 2 6单克隆抗体 (McAb)识别CD2 2 6分子胞膜外区结构域的部位。方法　应用计算机软件分析CD2 2 6分子蛋白质序列疏水性 ,确定其亲水性区域。采用PCR方法扩增CD2 2 6分子基因序列 ,分别缺失相应亲水性区域 ,构建CD2 2 ... 详细信息

目的　确定一套CD2 2 6单克隆抗体 (McAb)识别CD2 2 6分子胞膜外区结构域的部位。方法　应用计算机软件分析CD2 2 6分子蛋白质序列疏水性 ,确定其亲水性区域。采用PCR方法扩增CD2 2 6分子基因序列 ,分别缺失相应亲水性区域 ,构建CD2 2 6截短体重组真核细胞表达载体pcDNA3 PTA1T1和pcDNA3 PTA1T2。测序正确后 ,转染COS7细胞 ,抗CD2 2 6分子多克隆抗体间接免疫荧光染色 ,流式细胞术检测CD2 2 6分子截短体的表达。表达成功后 ,采用间接免疫荧光染色和流式细胞术分析 ,用一套CD2 2 6McAb检测与截短突变体的免疫反应性 ,从而确定CD2 2 6McAb识别CD2 2 6分子结构域的部位。结果　PCR扩增出CD2 2 6分子相应目的片段序列 ,定向克隆入pcDNA3真核表达载体 ,DNA序列测定正确。转染COS7细胞后 ,流式细胞术检测CD2 2 6截短体分子有较高水平的表达。CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1和FMU1～ 7均可识别CD2 2 6全长分子 ;LeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU4和FMU5与截短突变体PTA1T1和PTA1T2均无反应性 ;FMU3可结合PTA1T1分子 ,不结合PTA1T2分子 ;FMU6和FMU7均可结合PTA1T1及PTA1T2分子。结论　CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU3、FMU4和FMU5识别CD2 2 6分子胞膜外区D1结构域 ,其中FMU3识别的位点位于V1和V2环之间 ;FMU6?

关键词： CD226 PTA1 截短体基因表达亲水性区域

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