检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2008年第7期22卷 814-819页

作者：李伟范清宇马保安任民李航苟永胜钱济先第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所暨全军骨科中心西安710038 第四军医大学病理教研室

目的建立兔Perthes病模型并探讨Perthes病程中股骨头局部VEGF表达的变化及意义。方法3月龄新西兰大白兔24只,体重1.6～1.8kg。取16只兔作为实验组,手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供,建立兔Perthes病模型;剩余8只作为对照组,按照上... 详细信息

目的建立兔Perthes病模型并探讨Perthes病程中股骨头局部VEGF表达的变化及意义。方法3月龄新西兰大白兔24只,体重1.6～1.8kg。取16只兔作为实验组,手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供,建立兔Perthes病模型;剩余8只作为对照组,按照上述程序左侧股骨头进行手术,但不打开关节囊,保持股骨头正常血供。于术后1、2、4、8周分别处死动物,取出股骨头,行大体观察、X线片、组织学、VEGF免疫组织化学染色和VEGF mRNA原位杂交观察。结果实验组动物模型均制备成功,术后5d感染1例,退出实验。大体观察:对照组各时间点股骨头未见坏死改变;实验组股骨头随时间延长逐渐粗糙、失去光泽,变小,可见塌陷。X线片观察:术后1、2周,两组股骨头无明显差异;4、8周,实验组股骨头较对照组密度增高。对照组各时间点HE染色均未见股骨头坏死及修复改变;实验组术后4、8周可见血管及肉芽组织侵入,新骨形成,参与修复。免疫组织化学:对照组股骨头骺软骨中,肥大区表现出较高的VEGF免疫反应性(VEGF immunoreactivity,VEGF-IR),而增殖区VEGF-IR却表现较低水平。术后1周,实验组股骨头增殖区VEGF阳性细胞率开始高于对照组,实验组股骨头肥大区VEGF阳性细胞率明显减少。术后8周,实验组股骨头整个骺软骨区均表现VEGF-IR,增殖区VEGF阳性细胞率较对照组明显增加;坏死股骨头软骨内骨化中心修复重建,肥大区VEGF阳性细胞率较正常接近。术后1、2、4、8周,实验组骺软骨增殖区VEGF阳性细胞率与对照组比较均有统计学意义(P<0.01);术后1、2、4周,实验组骺软骨肥大区VEGF阳性细胞率与对照组比较均有统计学意义(P<0.01)。原位杂交观察结果与免疫组织化学染色观察相似。缺血性坏死后,实验组肥大区VEGF mRNA表达丧失,增殖区VEGF mRNA表达升高。软骨内骨化中心修复重建后,实验组可见新形成的肥大区重新表达VEGF mRNA。结论VEGF在坏死股骨头骺软骨促进血管发生、软骨内骨化中心的修复重建方面起关键的调节作用。

关键词： Perthes病动物模型 VEGF 兔

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microRNA-192抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP_9607增殖和凋亡的影响

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中国肿瘤临床 2010年第7期37卷 365-368页

作者：赵广义赵健李伟高杰杨彤涛裘秀春范清宇马保安第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所西安市710038

目的:探讨miR-192抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和周期。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实... 详细信息

目的:探讨miR-192抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和周期。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实验组采用miR-192抑制物(hsa-miR-192inhibitors)抑制SOSP_9607细胞内miR-192的活性。结果:与对照组相比,实验组显著抑制SOSP_9607细胞的增殖,有明显的剂量依赖性(P<0.01)。随着浓度从50nmol/L逐渐增加至200nmol/L,抑制率逐渐增高(P<0.01)。与对照组相比,实验组细胞周期G_0/G_1细胞比例显著增加,G_2/M期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著减少(P<0.01)。实验组凋亡率(13.6±2.1)%与阴性对照组凋亡率(7.1±0.5)%相比明显增高(P<0.01)。结论:miR-192抑制物通过抑制SOSP_9607细胞中miR-192的活性对SOSP_9607细胞的增殖和凋亡发挥重要作用,可能成为骨肉瘤生物治疗的新靶点。

关键词：骨肉瘤成骨肉瘤细胞系SOSP_9607 miRNA-192 细胞增殖细胞凋亡

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骨盆肿瘤的手术治疗

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中华骨科杂志 2002年第8期22卷 482-487页

作者：范清宇马保安周勇张明华沈万安李钊第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所西安710038

目的回顾性总结骨盆肿瘤的外科治疗经验,重点介绍“原位分离+高温灭活”的保肢技术。方法自1992年1月～2000年3月共治疗骨盆肿瘤133例,其中外半骨盆截除术50例,内半骨盆切除后体外灭活再植或旷置术10例,高温灭活保肢术73例。高温灭活... 详细信息

目的回顾性总结骨盆肿瘤的外科治疗经验,重点介绍“原位分离+高温灭活”的保肢技术。方法自1992年1月～2000年3月共治疗骨盆肿瘤133例,其中外半骨盆截除术50例,内半骨盆切除后体外灭活再植或旷置术10例,高温灭活保肢术73例。高温灭活保肢组中IB期肿瘤21例,ⅡB期24例,ⅢB期2例,界限性或高度侵袭性肿瘤19例,另有Ewing肉瘤2例,转移癌5例。结果外半骨盆截除组多为晚期病变而无法单独切除者,截止至2000年3月最后随访时,除7例失访外,存活1～8年者22例,死亡21例。内半骨盆切除组存活7例,但并发症高,功能差。高温灭活保肢组中IB期或骨巨细胞瘤共40例均得到局部控制,ⅡB期控制率70.8％（17/24）,2例Ewing肉瘤得到局部和全身控制,ⅢB期或转移癌7例中2例无瘤存活两年以上。与目前常用的其它类型的保肢手术相比,髋关节功能优良率明显提高。结论除晚期肿瘤病例不得已施行半骨盆截除术外,对适宜的病例应用“原位分离+高温灭活”技术是治疗骨盆肿瘤的一种新的有效手段,值得继续使用及改进。

关键词：骨盆肿瘤手术治疗高温灭活原位分离保肢手术骨肿瘤

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siRNA干扰FoxM1基因表达对人骨肉瘤MG63细胞增殖与凋亡影响研究

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中华肿瘤防治杂志 2014年第20期21卷 1575-1579页

作者：颜世举肖春靳雷王鑫韩康马保安范清宇第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所陕西西安710038

目的通过抑制骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因表达,观察对骨肉瘤细胞系增殖与凋亡的影响。方法采用蛋白质印迹法检测不同人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中FoxM1基因的表达。将骨肉瘤细胞株MG63分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组转... 详细信息

目的通过抑制骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因表达,观察对骨肉瘤细胞系增殖与凋亡的影响。方法采用蛋白质印迹法检测不同人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中FoxM1基因的表达。将骨肉瘤细胞株MG63分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组转染FoxM1特异性siRNA(FoxM1-siRNA),阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做处理。实时-聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法检测转染前后FoxM1基因在mRNA及蛋白表达水平的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖率,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中存在FoxM1基因的表达。实验组MG63细胞转染siRNA后,FoxM1的mRNA表达为0.39±0.09,低于阴性对照组的0.91±0.07,t=7.92,P<0.001;也低于空白对照组的0.96±0.08,t=8.68,P<0.001。实验组FoxM1蛋白表达为0.31±0.06,显著低于阴性对照组的0.81±0.10,t=7.20,P<0.001;也低于空白对照组的0.89±0.09,t=8.35,P<0.001。实验组MG63细胞增殖率为0.36±0.03,显著低于阴性对照组的0.61±0.02,t=12.86,P<0.001;也低于空白对照组的0.65±0.02,t=14.92,P<0.001。实验组MG63细胞凋亡率为(13.69±1.15)%,显著高于阴性对照组的(2.38±0.90)%,t=14.16,P<0.001;也高于空白对照组的(2.87±0.86)%,t=13.54,P<0.001。结论人骨肉瘤细胞株中存在FoxM1蛋白的表达;特异性siRNA可下调骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因的表达,对细胞的增殖具有负性调控作用,并能诱导细胞凋亡。

关键词：骨肉瘤 FoxM1 RNA干扰细胞增殖细胞凋亡印迹法,蛋白质

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骶骨肿瘤的综合治疗

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中华骨科杂志 2002年第8期22卷 488-491页

作者：范清宇马保安周勇张明华沈万安李钊第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所西安710038

目的介绍骶骨肿瘤的外科手术治疗,重点阐述高位骶骨肿瘤的治疗手段。方法自1992年1月～2000年3月共治疗骶骨肿瘤64例,骨巨细胞瘤、脊索瘤、神经源性肿瘤及转移癌为主要的诊断。对于低于S2的病变可安全地施行骰骨部分切除术;而对高于S... 详细信息

目的介绍骶骨肿瘤的外科手术治疗,重点阐述高位骶骨肿瘤的治疗手段。方法自1992年1月～2000年3月共治疗骶骨肿瘤64例,骨巨细胞瘤、脊索瘤、神经源性肿瘤及转移癌为主要的诊断。对于低于S2的病变可安全地施行骰骨部分切除术;而对高于S2甚至高达腰椎的骶骨病变则采取前后联合入路、直视下刮除及局部置管持续化疗的方法,滴注时间可持续1周。研究证明高浓度的铂类药物对马尾神经无可见的不良影响。结果4例良性肿瘤者单纯行摘除术均治愈。9例部分切除者中仅1例复发;51例高位骰骨肿瘤的局部控制率为76.5％,无严重而无法控制的并发症。结论前后联合入路、直视下刮除加局部高浓度化疗是高位骶骨肿瘤的有效治疗手段,多数患者可避兔创伤很大的全骶骨切除术。

关键词：骶骨肿瘤综合治疗手术疗法化学疗法放射疗法

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绿色荧光蛋白标记基因体内示踪骨髓间充质干细胞的分化

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中国修复重建外科杂志 2007年第6期21卷 633-637页

作者：胡运生马保安李文海张勇范清宇第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所暨全军骨科中心西安710038 第四军医大学唐都医院胸外科

目的利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记技术,观察组织工程骨在体内形成过程中种子细胞的变化与转归。方法Adeno-X^TM-GFP扩增和纯化后,测定病毒滴度,感染新西兰大白兔骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,M... 详细信息

目的利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记技术,观察组织工程骨在体内形成过程中种子细胞的变化与转归。方法Adeno-X^TM-GFP扩增和纯化后,测定病毒滴度,感染新西兰大白兔骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,并在荧光显微镜下观察GFP表达情况。确认标记成功后,将其与未标记的兔MSCs共同成骨诱导培养3周后,接种于磷酸钙骨水泥（calcium phosphate cement,CPC）-纤维蛋白胶（fibrin glue,FG）复合支架材料,构建组织工程骨作为实验组,回植于供体兔皮下。单纯CPC-FG复合支架材料植入对称部位作为对照。术后1、2、3周行碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性测定;4周,激光共聚焦显微镜下对GFP进行示踪观察和型胶原、骨钙素（osteocalcin,OC）免疫组织化学检测成骨细胞功能蛋白,Masson染色观察新骨形成。结果Adeno-X^TM-GFP经扩增和纯化后,病毒噬菌斑形成,测得病毒滴度为3×108pfu/ml。Adeno-X^TM-GFP感染MSCs后96h,可见GFP表达,感染率达50%～70%,细胞分裂增殖基本正常。术后1、2、3周,实验组ALP活性分别为12.546±1.091、16.567±0.659和20.443±0.706,对照组分别为0.453±0.113、0.243±0.018和0.308±0.056,差异有统计学意义（P〈0.05）。4周,实验组大体可见组织工程新骨形成,对照组未见新骨形成;组织学显示实验组新生骨小梁围绕材料孔隙形成,CPC-FG复合支架材料部分降解;实验组型胶原、OC免疫组织化学结果阳性,对照组未见阳性染色;实验组可见新生组织内有GFP标记的细胞。结论组织工程骨组织结构与松质骨小梁类似,新生组织表达GFP,提示组织工程骨组织的形成来源于接种的细胞。

关键词：组织工程骨骨髓间充质干细胞腺病毒载体绿色荧光蛋白兔

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三种手术方法治疗兔Perthes病股骨头的VEGF表达

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中国矫形外科杂志 2010年第16期18卷 1370-1373页

作者：李伟范清宇马保安李军钱济先第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所暨全军骨科中心西安710038

[目的]采用3种不同的手术方法(髓芯减压、滑膜切除和自体松质骨移植)治疗Perthes病模型,通过观察并比较VGEF表达的变化对其治疗效果作评价。[方法]36只3个月龄新西兰大白兔随机平均分为A、B、C、D4组。手术切断左侧圆韧带和股骨头支持... 详细信息

[目的]采用3种不同的手术方法(髓芯减压、滑膜切除和自体松质骨移植)治疗Perthes病模型,通过观察并比较VGEF表达的变化对其治疗效果作评价。[方法]36只3个月龄新西兰大白兔随机平均分为A、B、C、D4组。手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供,建立兔Perthes病模型。模型制作后2周对B、C、D组分别采用髓芯减压、滑膜切除、自体松质骨移植方法加以治疗。[结果]大体观察:A、B、C三组均在8周发现股骨头较健侧变小,部分标本可见塌陷。D组8周股骨头软骨下骨未见明显塌陷。组织学观察:A、B、C三组8周才可见到部分修复。D组4周即可见纤维肉芽组织增生,部分新骨形成。免疫组织化学:B、C组各时间点VEGF免疫反应性(immu-noreactivity,VEGF-IR)与A组无明显差异。D组各时间点增殖区与肥大区VEGF阳性细胞率高于其他各组,相比有统计学意义(P<0.05,α=0.05)。[结论]自体松质骨移植手术治疗Perthes病模型中,VEGF的表达明显高于其他两组,组织病理上也发现本组股骨头骺软骨较其他两手术治疗组修复明显。

关键词： Perthes病治疗血管内皮生长因子免疫组化

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miR-194慢病毒表达质粒的构建及对人骨肉瘤细胞系U2-OS转移的相关研究

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中国肿瘤临床 2014年第12期41卷 753-757页

作者：韩康赵廷宝卞娜蔡成魁颜世举王鑫马琼沙浩董川杨彤涛周勇马保安第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所西安市710038 济南军区总医院脊髓修复科

目的:通过构建携带针对miR-194的慢病毒沉默及过表达载体,研究miR-194对骨肉瘤细胞转移的影响。方法:以miR-194前体及成熟体序列为模板,设计引物,进行PCR扩增,酶切后克隆于慢病毒载体plent-i GFP中,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒,检测滴... 详细信息

目的:通过构建携带针对miR-194的慢病毒沉默及过表达载体,研究miR-194对骨肉瘤细胞转移的影响。方法:以miR-194前体及成熟体序列为模板,设计引物,进行PCR扩增,酶切后克隆于慢病毒载体plent-i GFP中,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒,检测滴度,最终对人骨肉瘤细胞系U2-OS进行感染。获取稳定感染细胞后,进行Transwell、划痕等实验。结果:1)慢病毒表达质粒构建成功,沉默表达及过表达重组慢病毒的滴度分别为4×108TU/mL及1.5×108TU/mL;2)稳定过表达miR-194的人骨肉瘤细胞系U2-OS的转移能力较其他组有明显降低(P<0.01)。结论:成功构建了miR-194慢病毒表达载体,miR-194的表达水平对U2-OS细胞的转移能力具有显著影响,miR-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点。

关键词：骨肉瘤 miR-194 慢病毒成骨肉瘤细胞系U2-OS 转移

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敲低趋化因子受体7(CCR7)抑制MG63骨肉瘤细胞的增殖和侵袭并诱导其凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第12期32卷 1585-1589页

作者：章日春张弘韬鄂震马琼颜世举张恩尉马保安第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所陕西西安710038 华山中心医院创伤外科陕西西安710043 第四军医大学唐都医院神经外科陕西西安710038

目的研究小干扰RNA(siRNA)靶向抑制趋化因子受体7(CCR7)表达对MG63人骨肉瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法设计并合成靶向抑制CCR7表达的siRNA,转入MG63细胞后,采用Western blot法检测CCR7蛋白水平,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘... 详细信息

目的研究小干扰RNA(siRNA)靶向抑制趋化因子受体7(CCR7)表达对MG63人骨肉瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法设计并合成靶向抑制CCR7表达的siRNA,转入MG63细胞后,采用Western blot法检测CCR7蛋白水平,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖,TranswellTM侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果 MG63细胞转染CCR7-siRNA后,细胞CCR7表达明显下调;同时细胞增殖明显减弱,侵袭和迁移能力明显下降,且细胞凋亡率升高。结论下调MG63骨肉瘤细胞的CCR7,可明显抑制细胞增殖、侵袭和迁移,并能诱导细胞凋亡。

关键词：骨肉瘤细胞小干扰RNA(siRNA) 趋化因子受体7(CCR7) 细胞增殖细胞侵袭细胞凋亡

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优化配方的CPC/DBM/rhBMP-2复合材料在体内的超微结构和组织学特征

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解放军医学杂志 2008年第6期33卷 652-654页

作者：任民范清宇马保安王春梅吕荣龙华吴进陈烁周勇第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所西安710038 第四军医大学电镜中心第四军医大学西京医院骨科

目的探讨磷酸钙骨水泥(CPC)/脱钙骨基质颗粒(DBM)/重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)复合材料在骨内的超微结构和组织学特征,评价该材料的成骨性能。方法预制兔DBM,按0.2的DBM质量比制作CPC/DBM/rhBMP-2复合材料。将复合材料(A组,n=12)、CPC(... 详细信息

目的探讨磷酸钙骨水泥(CPC)/脱钙骨基质颗粒(DBM)/重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)复合材料在骨内的超微结构和组织学特征,评价该材料的成骨性能。方法预制兔DBM,按0.2的DBM质量比制作CPC/DBM/rhBMP-2复合材料。将复合材料(A组,n=12)、CPC(B组,n=10)、医用骨水泥(C组,n=7)分别植入兔股骨髁部骨缺损,在植入后第6、12、24周取材进行组织学和扫描电镜观察。结果术后第6周,A组中复合材料-骨界面模糊,宿骨发出纤维连续通过界面,编织骨样结构开始向材料内部长入。第12周,A组中血管和成骨细胞在复合材料内部生长,产生新骨。第24周,A组中骨缺损已修复,形成骨性连接,材料大部分被新骨替代。B组术后第6周CPC-骨界限清晰,未见新骨向材料内部长入,第24周骨缺损部位仍为CPC填充,材料内部未见新骨出现。C组材料直至第24周尚未与宿骨形成任何连接。A组材料在成骨细胞活性、血管化程度和新骨生长速度方面均优于B组。结论将DBM质量比为0.2的复合材料植入骨缺损内可以促进细胞、血管、新骨的长入,且易降解及被自体骨替代。

关键词：磷酸钙骨水泥脱钙骨基质骨形态发生蛋白质类超微结构骨代用品

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