检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2010年第5期26卷 412-415页

作者：黄启超雷小英刘艳隋文君李慎张英起颜真国家肿瘤生物学重点实验室第四军医大学药学系药物基因组学教研室陕西西安710032 国家肿瘤生物学重点实验室第四军医大学药学系生物制药学教研室陕西西安710032

目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性... 详细信息

目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)、Western blot检测IFN-α2a-NGR处理前后STAT1、p-STAT1、p53、OAS与SOCS1的表达变化,合成siRNA靶向干涉SOCS1。结果:IFN-α2a-NGR刺激后,A549中,p-STAT1、p53、OAS与SOCS1表达上调;MKN-45中P53、OAS无显著变化,SOCS1显著上调。靶向干涉SOCS1后,MKN-45对IFN-α2a-NGR的敏感性增加[抑制率从(14.69±1.05)%提高到(36.97±2.05)%]。结论:IFN-α2a-NGR与IFN-α2a在细胞和分子水平的效应基本一致,p-STAT1、p53与SOCS1可影响细胞对干扰素的敏感性,通过siRNA沉默技术可提高耐药细胞株敏感性,为IFN-α2a-NGR的进一步研发奠定了基础。

关键词：干扰素 IFN-α2a-NGR 肿瘤信号转导

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丙酮酸羧化酶在胃腺癌中的表达及临床意义

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第1期29卷 85-88页

作者：康建琴汤善宏赵国宏徐光辉王飙落梁树辉丁杰第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

目的检测丙酮酸羧化酶(PC)在胃腺癌组织中的表达并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学方法及Westernblot法检测PC蛋白在胃腺癌及其对应癌旁组织的表达情况,分析其在肿瘤中表达水平与患者年龄、性别、TNM分期及病理分级等临床病理资... 详细信息

目的检测丙酮酸羧化酶(PC)在胃腺癌组织中的表达并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学方法及Westernblot法检测PC蛋白在胃腺癌及其对应癌旁组织的表达情况,分析其在肿瘤中表达水平与患者年龄、性别、TNM分期及病理分级等临床病理资料之间的关系,并用Western blot法检测PC蛋白在不同分化胃癌细胞系及永生化胃黏膜上皮细胞系的表达情况。结果免疫组化及Western blot法均显示PC在胃腺癌组织表达水平显著高于其对应癌旁组织(P<0.01)。PC高表达与患者TNM分期及病理分级显著相关(P<0.05),而与患者性别、年龄无明显相关性(P>0.05)。Western blot法显示PC在不同分化胃癌细胞系表达水平显著高于永生化胃黏膜上皮细胞(P<0.01)。结论 PC高表达与肿瘤的恶性进展密切相关,提示PC有可能作为胃癌生物治疗的潜在靶点。

关键词：丙酮酸羧化酶胃腺癌免疫组织化学 Western blot TNM分期

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骨髓间充质干细胞对巨噬细胞极化的影响

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中华肝脏病杂志 2017年第4期25卷 273-278页

作者：侯宇周霞蔡维乐郭长存韩英第四军医大学西京医院西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室西安710032 第四军医大学西京医院西京消化病医院西安710032

目的探索骨髓间充质干细胞（BM-MSC）对骨髓来源巨噬细胞极化的影响，为间充质干细胞治疗肝纤维化提供理论依据。方法分别分离小鼠BM-MSC和骨髓来源巨噬细胞，用脂多糖（LPS）和干扰素γ（IFNV）或白细胞介素4（IL-4）刺激巨噬细胞向M1... 详细信息

目的探索骨髓间充质干细胞（BM-MSC）对骨髓来源巨噬细胞极化的影响，为间充质干细胞治疗肝纤维化提供理论依据。方法分别分离小鼠BM-MSC和骨髓来源巨噬细胞，用脂多糖（LPS）和干扰素γ（IFNV）或白细胞介素4（IL-4）刺激巨噬细胞向M1或M2型巨噬细胞极化。利用Transwell小室建立BM-MSC和巨噬细胞非接触式共培养体系，通过流式细胞术分析共培养后，M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞比例变化情况，通过荧光定量PCR检测M1型巨噬细胞相关分子肿瘤坏死因子α（TNFα）、白细胞介素23a（IL-23a）和M2型巨噬细胞相关分子精氨酸酶1（Arg1）、CD163表达量的变化。两样本比较采用t检验，P〈0．05为差异有统计学意义。结果巨噬细胞＋LPS＋IFNγ＋BM-MSC共培养组与巨噬细胞＋LPS＋IFNγ组比较，M1型巨噬细胞比例显著降低（62．5％±4．6％对比86．6％±6．9％，t=5．034，P=0．0073），差异有统计学意义；且M1型巨噬细胞相关分子TNFα相对表达量（3．75±0．23对比6．17±0．27）和IL23a相对表达量（2．05±0．16对比4．56±0．37），均明显降低，t值分别为11．57、10．57，P值均〈0．05，差异均具有统计学意义。巨噬细胞＋BM-MSC共培养组与巨噬细胞单独培养组相比，M2型巨噬细胞比例显著增高（89．5％±5．8％对比70．1％±6．3％，t=3．924，P=0．0172），差异有统计学意义；且M2型巨噬细胞相关分子Arg1相对表达量（14．35±1．05对比1．00±0．03）和CD163相对表达量（3．04±0．27对比1．00±0．03）均显著增高，t值分别为21．96、13．14，P值均〈0．05，差异均具有统计学意义。结论BM-MSC可通过旁分泌作用抑制巨噬细胞由LPS＋IFNγ诱导的M1型极化，促进巨噬细胞向M2型极化。

关键词：肝硬化骨髓间充质干细胞巨噬细胞极化

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MDA-7/IL-24真核表达载体的构建和重组腺病毒的制备及其对肝癌细胞生长抑制作用的研究

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第12期27卷 1277-1279页

作者：张翔孟艳玲王磊赵晶闫博陈锐张瑞杨安钢第四军医大学肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032

目的:构建含有MDA-7基因的的真核表达载体并制备重组腺病毒,转染/感染肝癌细胞后,观察其对细胞增殖的影响。方法:构建MDA-7的真核表达载体,将表达质粒转染肝癌细胞,利用平板克隆形成实验观察MDA-7分子对肿瘤细胞系克隆形成能力的影响。... 详细信息

目的:构建含有MDA-7基因的的真核表达载体并制备重组腺病毒,转染/感染肝癌细胞后,观察其对细胞增殖的影响。方法:构建MDA-7的真核表达载体,将表达质粒转染肝癌细胞,利用平板克隆形成实验观察MDA-7分子对肿瘤细胞系克隆形成能力的影响。利用Adeasy-1腺病毒重组系统构建、包装并扩增含有MDA-7基因的重组腺病毒。利用MTT实验检测Ad-MDA-7对肿瘤细胞增殖的影响。结果:成功构建了MDA-7真核表达载体,利用平板克隆形成实验证实其可抑制肝癌细胞的克隆形成能力。成功地构建并包装了含有MDA-7基因的重组腺病毒,利用MTT实验证明其可抑制肝癌细胞的增殖。结论:MDA-7对肝癌细胞的增殖具有显著的抑制作用,为进一步研究其在肝癌细胞中的功能提供了重要的实验依据。

关键词：黑色素瘤分化相关抗原-7 肝癌腺病毒细胞增殖

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重组融合蛋白GX1-rmhTNFα的克隆、表达及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第3期22卷 360-362页

作者：曹珊珊吴开春颜真万一韩宇赵丽娜樊代明第四军医大学西京医院消化内科肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

目的构建胃癌新生血管导向性肽GX1与新型人肿瘤坏死因子(GX1-rmhTNF)基因的原核表达载体,表达GX1-rmhTNF蛋白。方法利用基因工程方法将胃癌血管特异性结合肽融合在新型人肿瘤坏死因子α的氨基末端,构建GX1-rmhTNF原核表达载体,在大肠杆... 详细信息

目的构建胃癌新生血管导向性肽GX1与新型人肿瘤坏死因子(GX1-rmhTNF)基因的原核表达载体,表达GX1-rmhTNF蛋白。方法利用基因工程方法将胃癌血管特异性结合肽融合在新型人肿瘤坏死因子α的氨基末端,构建GX1-rmhTNF原核表达载体,在大肠杆菌进行表达。对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Westernblot检测分析。结果成功构建了GX1-rmhTNF重组融合表达质粒,表达的蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在相对分子质量(Mr)约18000处出现了1条新生的蛋白条带,该表达蛋白具有与TNFα单克隆抗体特异性的结合能力。结论成功构建了GX1-rmhT-NF基因的原核表达载体并在原核细胞中表达了该产物,为下一步GX1-rmhTNF的纯化奠定了基础。

关键词：噬菌体肽段CGNSNPKSC/GX1 GX1-rmhTNFα 重组融合蛋白/表达温度诱导

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miR-203真核表达载体的构建和重组慢病毒的制备及其对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第6期29卷 589-592页

作者：朱华宇张翔张晓张瑞杨安钢第四军医大学肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032

目的构建含有人源microRNA-203(miR-203)的慢病毒表达载体并制备重组慢病毒,感染人脐静脉内皮细胞系(HU-VEC-12),观察其对细胞增殖和迁移的影响。方法使用PCR方法克隆miR-203前体分子的DNA片段,构建并包装过表达miR-203的重组慢病毒。... 详细信息

目的构建含有人源microRNA-203(miR-203)的慢病毒表达载体并制备重组慢病毒,感染人脐静脉内皮细胞系(HU-VEC-12),观察其对细胞增殖和迁移的影响。方法使用PCR方法克隆miR-203前体分子的DNA片段,构建并包装过表达miR-203的重组慢病毒。利用慢病毒感染系统建立稳定过表达miR-203的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC-Lv-miR-203)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外源导入miR-203的表达情况。MTT法检测miR-203对HUVEC体外生长的影响,利用划痕恢复实验检测miR-203对HUVEC迁移能力的影响。结果成功构建了过表达miR-203重组慢病毒表达系统。MTT法证实miR-203可在体外抑制HUVEC增殖,划痕恢复实验结果提示该细胞株的迁移能力受到显著抑制。结论 miR-203可以抑制体外培养的HUVEC增殖和迁移。

关键词： miR-203 人脐静脉内皮细胞细胞增殖细胞迁移

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Notch信号对激光诱导的小鼠CNV生成过程中巨噬细胞极化表型及功能的调控

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中华实验眼科杂志 2015年第3期33卷 207-215页

作者：李娜窦国睿张萍赵俊龙晏贤春燕洁静李曼红韩骅王雨生第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所西安710032 第四军医大学基础医学部遗传与发育生物学教研室肿瘤生物学国家重点实验室西安710032

背景巨噬细胞在脉络膜新生血管（CNV）中的作用尚存在争议,与其在不同微环境中的功能异质性有关,Notch信号通路参与眼内新生血管生长的调控,但其对CNV中巨噬细胞功能的调控作用尚未证实. 目的探讨巨噬细胞在CNV生成中极化表型的变化与... 详细信息

背景巨噬细胞在脉络膜新生血管（CNV）中的作用尚存在争议,与其在不同微环境中的功能异质性有关,Notch信号通路参与眼内新生血管生长的调控,但其对CNV中巨噬细胞功能的调控作用尚未证实. 目的探讨巨噬细胞在CNV生成中极化表型的变化与Notch信号通路对巨噬细胞极化表型的调控.方法在体实验选择58只成年雄性C57BL小鼠,以随机数字表法按照造模后取材时间的不同随机分为光凝后3d组和7d组.每组选23只小鼠用视网膜光凝法诱导小鼠CNV模型,分别于光凝后3d和7d制备脉络膜铺片,采用免疫荧光染色法观察CNV面积和巨噬细胞阳性染色面积,血管内皮生长因子（VEGF）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的分泌情况;光凝后3d和7d对眼杯冰冻切片行免疫荧光染色,观察CNV中巨噬细胞的极化表型及其分泌VEGF、TNF-α的情况,评估巨噬细胞上Notch信号胞内段（NICD）相应分子标志物的表达情况.每组设定6只小鼠的左眼为正常对照眼,其右眼以激光光凝法建立CNV模型,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测眼杯组织中VEGF、TNF-α和巨噬细胞极化相关因子的表达情况.体外分离和培养C57BL小鼠的骨髓单核前体细胞,用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）诱导其分化为巨噬细胞,加入Notch信号通路抑制剂γ-分泌酶抑制剂（GSI）和极化诱导因子,24 h后收集细胞及培养液上清,通过qRT-PCR及ELISA法检测M1型、M2型巨噬细胞分子表面标志物的表达水平. 结果与光凝后第3天比较,光凝后第7天CNV面积明显增大,但巨噬细胞浸润面积缩小,差异均有统计学意义（t=8.138、5.272,均P=0.000）.光凝后第3天,巨噬细胞在CNV周边和中央均有分布,第7天时局限于CNV中央部.光凝后第3天,色素上皮-脉络膜-巩膜复合体中精氨酸合酶1（Arg1）、甘露糖受体（MR）及白细胞介素-6（IL-6）mRNA的相对表达量明显高于第7天,而诱导型一氧化氮合酶（iNOS） mRNA的相对表达量无明显改变.免疫荧光结果显示,光凝后第3天F4/80＋ Arg1＋细胞（M2型巨噬细胞）数量明显多于F4/80＋ iNOS＋细胞（M1型巨噬细胞）,光凝后第7天F4/80＋ Arg1＋细胞数量明显减少,差异均有统计学意义（t=7.348,P=0.000;t5.562,P＜0.001）,但仍多于F4/80＋ iNOS＋细胞,二者间差异有统计学意义（t=4.568,P＜0.01）.在光凝后3d时巨噬细胞分泌的VEGF和TNF-α明显多于光凝后7d,差异均有统计学意义（t=5.143、4.519,均P＜0.01）.巨噬细胞中Notch信号下游分子在光凝后3d时未见表达,7d时表达量明显增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.体外实验表明,阻断Notch信号后,M1型巨噬细胞分子标志物表达量明显下降,而M2型巨噬细胞分子标志物的表达量明显增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论巨噬细胞的极化表型在CNV模型的不同阶段发生变化,而巨噬细胞中Notch信号的激活状态调控巨噬细胞的极化表型改变和功能.

关键词：脉络膜新生血管巨噬细胞/功能细胞间肽类和蛋白类/代谢 Notch信号近交系C57BL小鼠

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CIAPIN1在人肺癌组织中的表达及其对人小细胞肺癌NCI-H446细胞生长的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第5期24卷 434-437页

作者：王洋戚好文李晓华陈旭昕刘杰第四军医大学西京医院呼吸内科陕西西安710032 第四军医大学西京医院消化疾病中心国家肿瘤生物学重点实验室陕西西安710032

目的:探讨新基因CIAPIN1在人肺癌和癌旁正常组织中的表达差异及该基因导入对人小细胞肺癌NCI-H446细胞生长的调控作用。方法:采用免疫组化方法检测51例石蜡包埋的肺癌及癌旁正常肺组织中CIAPIN1蛋白的表达;构建腺病毒载体介导CIAPIN1基... 详细信息

目的:探讨新基因CIAPIN1在人肺癌和癌旁正常组织中的表达差异及该基因导入对人小细胞肺癌NCI-H446细胞生长的调控作用。方法:采用免疫组化方法检测51例石蜡包埋的肺癌及癌旁正常肺组织中CIAPIN1蛋白的表达;构建腺病毒载体介导CIAPIN1基因(Ad-CIAPIN1),转染到自身CIAPIN1低表达的人小细胞肺癌细胞系NCI-H446,Westernblot检测目的蛋白的表达;台盼蓝染色计数活细胞数,绘制细胞生长曲线;流式细胞术(FCM)分析细胞周期及细胞凋亡的变化。结果:癌旁正常肺组织中CIAPIN1基因蛋白阳性表达率(100%)明显高于肺癌组织中表达率(39.2%,P<0.05);与对照组相比,腺病毒介导的CIAPIN1实验组能迅速抑制NCI-H446细胞的生长(P<0.01),诱导细胞发生凋亡,并出现明显的G1/S期阻滞现象。结论:肺癌组织中CIAPIN1基因表达下调可能与肺癌发生密切相关,Ad-CIAPIN1转染NCI-H446细胞能明显抑制肿瘤细胞的生长,提示CIAPIN1基因可能是一个新的抑癌相关基因。

关键词： CIAPIN1基因腺病毒肺癌细胞凋亡抑制

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EZH2和RUNX3在肾细胞癌中的表达及其临床意义

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第1期29卷 82-84,88页

作者：王国栋秦卫军郑甲魏铭周幸春王禾温伟红第四军医大学西京医院泌尿外科陕西西安710032 第四军医大学基础部免疫学教研室陕西西安710032 第四军医大学肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

目的检测EZH2和RUNX3蛋白在肾细胞癌中的表达,探讨它们与肾细胞癌临床病理特征间的关系,并分析它们的表达相关性。方法利用免疫组织化学法分别检测肾细胞癌标本及对应的癌旁正常肾组织(各56例)中EZH2和RUNX3的表达情况,并利用统计学软... 详细信息

目的检测EZH2和RUNX3蛋白在肾细胞癌中的表达,探讨它们与肾细胞癌临床病理特征间的关系,并分析它们的表达相关性。方法利用免疫组织化学法分别检测肾细胞癌标本及对应的癌旁正常肾组织(各56例)中EZH2和RUNX3的表达情况,并利用统计学软件进行统计分析。结果 EZH2和RUNX3蛋白在肾癌组织中的阳性表达率分别为67.9%和37.5%,在癌旁正常肾组织的阳性表达率分别为28.6%和67.3%;EZH2和RUNX3在肾癌组织和癌旁正常组织中的表达差异均有统计学意义(P<0.05),肾细胞癌中EZH2的高表达和RUNX3的低表达均与临床分期相关(P<0.05),与病理分化程度、性别、年龄等的关系无统计学差异(P>0.05)。Spearman相关分析显示二者在肾癌中的表达没有明显的负相关关系。结论 EZH2和RUNX3可能共同参与了肾癌的发生发展过程,可成为肾癌的早期诊断及判断预后的指标。

关键词：肾细胞癌 EZH2 RUNX3 免疫组织化学

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肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第4期29卷 426-429页

作者：贾小飞闫博张熠杰蒋帅赵晶杨安钢第四军医大学国家肿瘤生物学重点实验室陕西西安710032 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 第四军医大学口腔医学系陕西西安710032 第四军医大学航空与航天医学系陕西西安710032 第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032

目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧... 详细信息

目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧光信号阳性裸鼠观察肿瘤组织生长情况。免疫荧光检测肿瘤组织中HBsAg表达。结果对裸鼠肝原位移植瘤应用活体荧光系统成像,在肿瘤细胞注射部位检测到荧光信号,解剖动物后可在肝脏组织中观察到异质细胞团块。免疫荧光证实移植瘤中有HBsAg表达。结论肝脏原位移植瘤裸鼠模型建立成功,为抗肝癌药物的研发提供了工具。

关键词：肝原位移植瘤裸鼠模型活体荧光成像荧光素酶 PLC PRF 5细胞株

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