检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 1999年第4期26卷 396-398页

作者：徐平西肖华胜鞠躬第四军医大学神经科学研究所西安710032

免疫ＰＣＲ为一种高敏感度检测抗原的新技术，操作程序大多沿袭ＥＬＩＳＡ方法．用戊二醛作连接剂，将蛋白质高效率包被在普通ＰＣＲ管内壁，使免疫及ＰＣＲ反应用普通ＰＣＲ仪得以在管中连贯地进行．实验... 详细信息

免疫ＰＣＲ为一种高敏感度检测抗原的新技术，操作程序大多沿袭ＥＬＩＳＡ方法．用戊二醛作连接剂，将蛋白质高效率包被在普通ＰＣＲ管内壁，使免疫及ＰＣＲ反应用普通ＰＣＲ仪得以在管中连贯地进行．实验结果表明，标准曲线的线性关系好，与ＥＬＩＳＡ方法比较敏感度高出约１０５．这一改良法的建立，可望促进免疫ＰＣＲ

关键词：免疫PCR 包被戊二醛 PCR管

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降低差异显示PCR假阳性和提高重复性的几种策略

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生物化学与生物物理进展 1999年第5期26卷 437-438页

作者：肖华胜黄文晋第四军医大学神经科学研究所西安710032

简要介绍了几种提高ｍＲＮＡ差异显示重复性和降低假阳性的策略．ｍＲＮＡ差异显示技术从建立时起就引起了科学家的广泛兴趣，是克隆不同生理或病理过程中差异表达基因的一种高灵敏度、简单、有效的方法．但ｍＲＮＡ差异显示因其假... 详细信息

简要介绍了几种提高ｍＲＮＡ差异显示重复性和降低假阳性的策略．ｍＲＮＡ差异显示技术从建立时起就引起了科学家的广泛兴趣，是克隆不同生理或病理过程中差异表达基因的一种高灵敏度、简单、有效的方法．但ｍＲＮＡ差异显示因其假阳性率高和重复性低，

关键词： mRNA 基因表达 PCR 假阳性重复性差别显示

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COX-2的基因克隆和多克隆抗体制备

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生物化学与生物物理进展 2003年第3期30卷 478-482页

作者：李改丽王百忍费玲玲张萍杨浩鞠躬第四军医大学神经科学研究所西安710032

环氧合酶 2 (COX 2 )是一种具有多种功能的神经调节物质 ,它的许多功能细节仍不十分清楚 ,还需要进一步深入研究 .用PCR技术从大鼠脑cDNA文库中 ,扩增到正常成年大鼠COX 2的cDNA序列 ,测序结果与已发表的序列一致 .通过PCR扩增和基因重... 详细信息

环氧合酶 2 (COX 2 )是一种具有多种功能的神经调节物质 ,它的许多功能细节仍不十分清楚 ,还需要进一步深入研究 .用PCR技术从大鼠脑cDNA文库中 ,扩增到正常成年大鼠COX 2的cDNA序列 ,测序结果与已发表的序列一致 .通过PCR扩增和基因重组 ,分别构建COX 2编码基因全长和羧基端部分编码序列的表达载体 ,并导入大肠杆菌DH5α中 ,通过IPTG诱导表达重组融合蛋白 ,结果导入全长编码基因表达载体的DH5α无COX 2融合蛋白表达 ,而羧基端部分基因编码的COX 2融合蛋白在DH5α中以包涵体的形式进行表达 .经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 ,在相对分子质量 (Mr)为 44 0 0 0处有 1条特异的蛋白质条带 .对以包涵体形式表达的蛋白质进行变性、重折叠及纯化后 ,得到了高纯度融合蛋白 .以重组融合蛋白免疫新西兰种大白兔 ,制作了抗COX 2多克隆抗体 ,经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测 ,此抗体具有较高效价和特异性 .COX 2基因和多克隆抗体的获得 ,为进一步研究COX

关键词： COX-2 基因克隆多克隆抗体融合蛋白环氧合酶-2 前列腺素第二信使

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MK表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

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生物化学与生物物理进展 1998年第1期25卷 56-60页

作者：薛泳涛黄文晋石斌陈镔复鞠躬第四军医大学神经科学研究所

ＭＫ是属于肝素结合因子家族的一种多肽，仅在胚胎中期和成年期肾脏表达，在某些肿瘤细胞中也有异常表达．ＭＫ能够促进细胞特别是神经细胞的生长和分化，并抑制某些肿瘤细胞的生长．通过ＲＴＰＣＲ从胚胎肾脏中获得了ＭＫ成熟肽ＤＮ... 详细信息

ＭＫ是属于肝素结合因子家族的一种多肽，仅在胚胎中期和成年期肾脏表达，在某些肿瘤细胞中也有异常表达．ＭＫ能够促进细胞特别是神经细胞的生长和分化，并抑制某些肿瘤细胞的生长．通过ＲＴＰＣＲ从胚胎肾脏中获得了ＭＫ成熟肽ＤＮＡ编码序列，克隆入载体ｐＢＶ２２１中，并转入大肠杆菌，建立了重组ＭＫ的高表达菌株．

关键词： Midkine 基因表达克隆载体表达载体

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程序性死亡配体2(PD-L2)多克隆抗体在小鼠组织中的交叉反应性研究

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中国科学：生命科学 2013年第11期43卷 304-311页

作者：赵宇卞干兰于才勇刘芳芳刘玲郭虹敏郭俊鞠躬王键第四军医大学神经科学研究所西安710032 第四军医大学唐都医院神经内科西安710038

程序性死亡分子-1(programmed death1,PD-1,由pdcd1基因编码)和它的2个配体PD-L1和PD-L2组成一条重要的抑制性免疫信号通路来防御体外微生物和维持自身免疫耐受.与B7-CD28家族的其他分子不同的是,PD-L1和PD-L2的表达并不局限于免疫系统... 详细信息

程序性死亡分子-1(programmed death1,PD-1,由pdcd1基因编码)和它的2个配体PD-L1和PD-L2组成一条重要的抑制性免疫信号通路来防御体外微生物和维持自身免疫耐受.与B7-CD28家族的其他分子不同的是,PD-L1和PD-L2的表达并不局限于免疫系统.本研究发现,一种识别小鼠PD-L2(mPD-L2)胞外段的多克隆抗体(R&D Systems,MN,USA)可以和多种小鼠组织中的相应抗原结合,这些组织包括:垂体前叶和中间叶、嗅球、嗅上皮、舌上皮、角质上皮细胞、皮肤和胡须的毛囊.这一发现不同于以前关于mPD-L2分子组织定位的报道.然而,随后应用RT-PCR和Western印迹等方法,均未在上述组织中检测到PD-L2的转录本和蛋白,结果提示小鼠的PD-L2多克隆抗体可能与组织内其他抗原存在免疫交叉反应.小鼠发育研究显示,mPD-L2样的抗原最早表达在胚胎12.5天(E12.5)的嗅上皮中;胚胎期14.5天(E14.5)时,皮肤、舌以及皮肤和胡须的毛囊均可见mPD-L2样抗原的表达;从胚胎期18.5天(E18.5)开始,mPD-L2样抗原的分布模式与成年小鼠的分布模式基本一致.生物信息学分析和其他实验结果提示,与PD-L2多克隆抗体起交叉反应的候选蛋白可能是神经细胞黏附因子(NCAM)和Hemicentin-1.结果表明,利用这种PD-L2多克隆抗体检测mPD-L2分子在中枢神经系统和上皮组织,如嗅上皮的表达时,对于染色结果的解释需要特别谨慎.此外,这种PD-L2多克隆抗体也可用于标记小鼠胚胎发育过程中的嗅上皮细胞.

关键词：交叉反应性 PD-L2 免疫反应性 NCAM hemicentin-1

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垂体腺苷酸环化酶激活肽的发现及研究进展

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生理科学进展 1997年第1期28卷 29-34页

作者：耿力鞠躬第四军医大学神经科学研究所

垂体腺苷酸环化酶激活肽（ＰＡＣＡＰ）是最初在绵羊下丘脑发现的一种新的具有多种生物活性的多肽。它广泛分布于中枢神经系统、周围神经系统以及非神经组织内。通过作用于ＰＡＣＡＰ受体，它激活腺苷酸环化酶，进而引起靶细胞内ｃＡＭ... 详细信息

垂体腺苷酸环化酶激活肽（ＰＡＣＡＰ）是最初在绵羊下丘脑发现的一种新的具有多种生物活性的多肽。它广泛分布于中枢神经系统、周围神经系统以及非神经组织内。通过作用于ＰＡＣＡＰ受体，它激活腺苷酸环化酶，进而引起靶细胞内ｃＡＭＰ水平的增高。ＰＡＣＡＰ不仅是一种新的下丘脑促垂体激素，而且还是一种新的神经递质和神经调质。此外。

关键词：神经递质神经调质垂体腺苷酸环化酶激活肽

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大鼠Notch1胞质段的克隆及其表达

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生物化学与生物物理进展 2001年第3期28卷 362-366页

作者：金卫林廖柏松鞠躬第四军医大学神经科学研究所西安710032

Notch 1信号途径参与决定细胞命运 ,其水解后产生的活性片段———胞质段 (Notch 1intracellularcytoplasmicdomain ,NICD)能被转运进核 ,激活下游靶基因的表达 .Notch 1参与细胞的增殖、分化、程序性死亡、发育过程中的形态发生和器官... 详细信息

Notch 1信号途径参与决定细胞命运 ,其水解后产生的活性片段———胞质段 (Notch 1intracellularcytoplasmicdomain ,NICD)能被转运进核 ,激活下游靶基因的表达 .Notch 1参与细胞的增殖、分化、程序性死亡、发育过程中的形态发生和器官形成等许多重要过程 .为了获得重组的NICD ,以大鼠脑cDNA文库为模板 ,用PCR方法扩增出编码NICD的基因片段 ,克隆至谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合表达载体pGEX KG中 ,并在大肠杆菌中获得较高水平的表达 .表达的融合蛋白GST NICD分子质量约为 12 0ku左右 ,以包涵体和可溶性两种形式存在 ,易于亲合层析纯化 .为制备抗体和进一步的功能研究奠定了基础 .

关键词： Notch1 胞质段克隆表达神经元重组蛋白

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肌腱蛋白R(Tenascin-R)研究进展

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生物化学与生物物理进展 1998年第1期25卷 45-48页

作者：肖华胜陈镔复第四军医大学全军神经科学研究所

肌腱蛋白Ｒ（ｔｅｎａｓｃｉｎＲ，ＴＮＲ）是一种重要的细胞外基质糖蛋白（ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ）．分布于中枢神经系统，主要在髓鞘形成早期的少突胶质细胞中表达，成熟的胶质细胞及某些神经元（如脊髓... 详细信息

肌腱蛋白Ｒ（ｔｅｎａｓｃｉｎＲ，ＴＮＲ）是一种重要的细胞外基质糖蛋白（ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ）．分布于中枢神经系统，主要在髓鞘形成早期的少突胶质细胞中表达，成熟的胶质细胞及某些神经元（如脊髓，视网膜，小脑和海马的中间神经元）也有表达．ＴＮＲ具有复杂的结构，由三种不同的结构域组成，从氨基端到羧基端依次为：类似于表皮生长因子的重复片段，类似于Ⅲ型纤连蛋白重复片段，类似（血）纤维蛋白原片段组成．ＴＮＲ具有多种复杂的功能，对神经元具有排斥作用，促进或抑制神经元突起的生长，诱导神经元形态的极性化，并和髓鞘的形成有关，ＴＮＲ结构的复杂性和功能的多样性提示，ＴＮＲ有多个受体存在，已经发现的受体有Ｆ３／Ｆ１１，ＭＡＧ，ＸＬ１，Ｘｐｒｏｃａｎ等．

关键词：肌腱蛋白R 结构功能受体

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神经递质转运体的研究进展

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生理科学进展 1997年第3期28卷 203-208页

作者：高文饶志仁第四军医大学全军神经科学研究所

近年来，一种位于突触前膜、囊泡膜及神经胶质细胞膜上的糖蛋白——神经递质转运体，逐渐成为神经科学界研究的热点。它们能高选择性地与突触间的递质相结合，将递质运回细胞内，从而终止递质在细胞间的传递，并进而参与突触间信息的调... 详细信息

近年来，一种位于突触前膜、囊泡膜及神经胶质细胞膜上的糖蛋白——神经递质转运体，逐渐成为神经科学界研究的热点。它们能高选择性地与突触间的递质相结合，将递质运回细胞内，从而终止递质在细胞间的传递，并进而参与突触间信息的调控。有关神经递质转运体的研究国内尚未见报道。本文仅就近年来国外有关方面的研究概况，从分子结构、分型、研究方法、分布、功能、调节因素、基因调控、以及研究焦点和尚待解决的问题等诸方面做一综述。

关键词：神经递质转运体生理学病理学

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藜芦碱和乌头碱在受损背根节神经元诱发不同的放电模式(英文)

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生理学报 2005年第2期57卷 169-174页

作者：段建红邢俊玲杨晶胡三觉第四军医大学神经科学研究所西安710032

为了研究钠通道失活门阻断后受损背根节神经元放电模式的变化特征,在大鼠背根节慢性压迫模型上采用单纤维技术记录A类神经元的自发放电。藜芦碱和乌头碱是钠通道失活门的抑制剂,但二者作用于不同的位点,前者结合于D2-S6,后者结合于D3-S... 详细信息

为了研究钠通道失活门阻断后受损背根节神经元放电模式的变化特征,在大鼠背根节慢性压迫模型上采用单纤维技术记录A类神经元的自发放电。藜芦碱和乌头碱是钠通道失活门的抑制剂,但二者作用于不同的位点,前者结合于D2-S6,后者结合于D3-S6。我们比较了这两种试剂引发的放电模式。结果发现,在同一神经元,藜芦碱(1.5-5.0μmol/L)可以引起放电峰峰间期的慢波振荡,即峰峰间期由大逐渐减小,然后又逐渐增大,形成重复的振荡波形,每个振荡持续约数十秒至数分钟;而乌头碱(10-200μmol/L)则引起强直性放电,即峰峰间期逐渐减小,然后维持在一个稳定的水平。这两种不同的放电模式不因背景放电或试剂浓度的不同而发生明显的改变。实验结果表明,藜芦碱和乌头碱在受损的背根节神经元可以引发不同的放电模式,这可能与它们结合于钠通道上不同位点的抑制作用有关。

关键词：背根节放电模式藜芦碱乌头碱钠通道

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