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中华口腔医学杂志 2002年第1期37卷 18-24,T004页

作者：陶凯毛天球陈富林杨维东顾晓明陈书军第四军医大学口腔医学院组织工程实验室西安710032

目的　观察骨髓基质成骨细胞松质骨基质复合人工骨皮下移植的成骨作用 ,探索骨髓基质成骨细胞和松质骨基质分别作为骨组织工程种子细胞和支架材料的可行性。方法　成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后 ,经混匀、接种、固化 ,形成骨... 详细信息

目的　观察骨髓基质成骨细胞松质骨基质复合人工骨皮下移植的成骨作用 ,探索骨髓基质成骨细胞和松质骨基质分别作为骨组织工程种子细胞和支架材料的可行性。方法　成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后 ,经混匀、接种、固化 ,形成骨髓基质成骨细胞藻酸盐松质骨基质复合人工骨 ,并植回取材兔背部皮下 ,对照组分别植入藻酸盐松质骨基质复合物和松质骨基质。植入 4、8周取材 ,行X线摄片、组织学检查和组织学定量分析 ,观察骨形成情况。结果　骨髓基质成骨细胞藻酸盐松质骨基质复合人工骨皮下成骨效果明显优于藻酸盐松质骨基质复合物组和松质骨基质组。复合人工骨标本兼有膜内成骨和软骨成骨 ,以膜内成骨为主 ;对照组仅见少量软骨成骨。结论　采用组织工程方法形成的复合人工骨皮下成骨作用明显 ,骨髓基质成骨细胞和松质骨基质可以分别作为种子细胞和支架材料而用于组织工程骨的构建。

关键词：骨髓细胞骨移植组织工程人工骨动物实验 MSO CBM MCCAB

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釉基质蛋白控释微球的研制及其生物学性能的初步研究

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华西口腔医学杂志 2005年第6期23卷 529-533页

作者：陈发明吴织芬金岩吴红杜岩王国芳聂鑫第四军医大学口腔医院牙周黏膜病科第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心第四军医大学基础部化学系陕西西安710032

目的探讨载釉基质蛋白(EMPs)的右旋糖酐基凝胶微球(dex_MPs)的制备工艺及其理化与生物学性能。方法采用乳化化学交联技术制备载EMPs的dex_MPs(EMPs_dex_MPs),正交设计法优化制备工艺;观察EMPs_dex_MPs形态和粒径,测定其包封率与载药量;... 详细信息

目的探讨载釉基质蛋白(EMPs)的右旋糖酐基凝胶微球(dex_MPs)的制备工艺及其理化与生物学性能。方法采用乳化化学交联技术制备载EMPs的dex_MPs(EMPs_dex_MPs),正交设计法优化制备工艺;观察EMPs_dex_MPs形态和粒径,测定其包封率与载药量;测定微球的溶胀、降解性能,动态透析法检测其体外释药特征及其影响因素;通过EMPs_dex_MPs对体外培养的人牙周膜细胞(PDLCs)增殖和分化的影响,评价其生物学性能。结果EMPs_dex_MPs形态规则,粒径25μm左右,分布较为均匀;EMPs载药量(32.8±1.2)%,包封率(78.9±1.0)%。体外释药实验表明EMPs_dex_MPs中80%的EMPs在前20 d释放,在葡聚糖酶存在下40 d左右可以完全降解。与单纯EMPs相比,EMPs_dex_MPs能持续促进PDLCs的增殖和分化达12 d左右。结论dex_MPs作为活性生长因子载体,具有确定的缓释作用,并可以通过制备工艺的改变控制其释药行为;EMPs_dex_MPs作为EMPs的一种新的给药方式,比传统给药方式可以更加有效地促进牙周组织相关细胞的增殖与分化。

关键词：釉基质蛋白类右旋糖酐微球体控制释放

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骨髓基质成骨细胞—松质骨基质复合人工骨修复颅骨缺损的实验研究

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中华整形外科杂志 2002年第4期18卷 226-228,I004页

作者：陶凯毛天球杨维东陈富林顾晓明陈书军第四军医大学口腔医学院组织工程实验室西安710032

目的　观察松质骨基质骨髓基质成骨细胞复合人工骨在骨缺损区的成骨作用 ,探索该组织工程化人工骨修复颅骨缺损的可行性。方法　成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后 ,接种于藻酸盐松质骨基质中 ,形成松质骨基质藻酸盐骨髓基... 详细信息

目的　观察松质骨基质骨髓基质成骨细胞复合人工骨在骨缺损区的成骨作用 ,探索该组织工程化人工骨修复颅骨缺损的可行性。方法　成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后 ,接种于藻酸盐松质骨基质中 ,形成松质骨基质藻酸盐骨髓基质成骨细胞复合人工骨 ,修复自体颅骨缺损。分别植入松质骨基质和骨髓基质成骨细胞作为对照。植入 4周和 8周后行X线摄片和组织学检查 ,观察骨形成情况。结果　复合人工骨组成骨量优于单纯植入松质骨基质或骨髓基质成骨细胞组 ,并明显优于空白对照组。结论　松质骨基质骨髓基质成骨细胞复合人工骨修复颅骨缺损效果良好 ,可以作为临床大型骨缺损修复的途径之一。

关键词：组织工程骨种子细胞松质骨基质有髓基质成骨细胞颅骨缺损实验研究

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组织工程角膜生物材料载体制备的比较性研究

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中国修复重建外科杂志 2006年第2期20卷 185-188页

作者：张超金岩聂鑫刘源雷娟胡丹武警陕西总队医院西安710054 第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室组织工程实验中心第四军医大学西京医院

目的比较用不同的方法脱细胞处理异种(猪)角膜基质制备组织工程角膜支架材料,并对其生物相容性进行研究。方法成年York猪角膜基质材料,以Triton联合0.25%胰酶,处理30min～3h为材料1;Triton联合DNA-RNA酶,处理8～14h为材料2;Triton联合0.... 详细信息

目的比较用不同的方法脱细胞处理异种(猪)角膜基质制备组织工程角膜支架材料,并对其生物相容性进行研究。方法成年York猪角膜基质材料,以Triton联合0.25%胰酶,处理30min～3h为材料1;Triton联合DNA-RNA酶,处理8～14h为材料2;Triton联合0.25%胰酶、DNA-RNA酶,处理3～5h为材料3。3种材料用无水氯化钙脱水干燥保存。在材料上接种兔角膜基质成纤维细胞,观察细胞生长情况。新西兰大白兔24只,随机分为3组,每组8只。右眼为实验眼,左眼为空白对照眼。将材料植入兔眼角膜基质层中,术后每日裂隙灯检查术眼;1、4、8和12周分别随机取2只兔眼角膜作HE染色,观察材料的生物相容性。结果材料1、2细胞脱出不完全,处理最佳时间分别是2h和10～12h,角膜基质网状间隙无明显增大;接种兔角膜基质成纤维细胞后,3～4d细胞死亡;植入兔角膜基质中有明显的免疫排斥反应。材料3脱出细胞完全,其脱细胞处理的最佳时间为4h,角膜基质纤维结构无破坏,呈三维网状结构,网状间隙明显增大;接种兔角膜基质成纤维细胞后,细胞在材料上贴附生长良好;将其植入兔角膜基质中无炎性及排斥反应,可逐渐降解吸收,有良好的生物相容性。结论Triton联合0.25%胰酶、DNA-RNA酶法处理的异种(猪)角膜基质具有良好的生物相容性,可作为一种组织工程角膜的支架材料。

关键词：组织工程角膜支架材料制备比较

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复合缓释微球的胶原膜促创面愈合的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2006年第2期20卷 161-164页

作者：黄沙金岩邓天政吴红刘涛刘建明第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心西安710032 第四军医大学口腔医院颌面外科第四军医大学口腔医学院药物化学教研室

目的观察复合缓释微球的胶原膜对猪皮肤创面损伤的促愈合作用。方法将20μl的碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)溶液滴加在2mg的冻干微球上,复合于胶原膜内。取2.5～3月龄健康约克猪6只,随机分为3组,在每只猪... 详细信息

目的观察复合缓释微球的胶原膜对猪皮肤创面损伤的促愈合作用。方法将20μl的碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)溶液滴加在2mg的冻干微球上,复合于胶原膜内。取2.5～3月龄健康约克猪6只,随机分为3组,在每只猪背部制作6个4cm×4cm全层皮肤缺损创面模型。将包裹bFGF的明胶缓释微球与胶原基多孔膜复合制备,作为实验组移植创面,对照组及空白组分别给予复合bFGF的胶原膜和空白胶原膜,术后每日观察创面愈合情况,14、21、28和35d图像分析计算创面愈合率,3、7、14、21、28和35d行组织学染色,观察各组材料对猪皮肤全层缺损创面的影响。结果制备的复合微球的胶原膜内明胶微球大小均一,平均粒径为12.36±3.56μm,孔径为80～150μm。实验组、对照组及空白组创面愈合时间为27.30±1.14、29.18±1.69、31.12±1.36d,3组组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组创面愈合率在术后14、21、28和35d均高于对照组及空白组,差异有统计学意义(P<0.05);术后各时间点组织学观察实验组愈合创面的上皮化程度均优于对照组及空白组。结论复合bFGF缓释微球的胶原膜能有效促进猪皮肤全层缺损创面的愈合,可作为具有应用前景的覆盖材料进一步研究。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子缓释微球胶原膜创面愈合猪

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人表皮干细胞在不同培养基中生长状态的观察及其生物学性状的初步探讨

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中国修复重建外科杂志 2005年第4期19卷 314-317页

作者：董蕊金岩刘源聂鑫王新文赵宇第四军医大学口腔医学院口腔组织病理学教研室西安710032 第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心西安710032

目的　筛选合适的保持人表皮干细胞特性的体外培养基,并观察其生物学性状。　方法　按不同培养基分组,配制FAD培养基和FAD加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)的培养基,即FAD、FAD1、FAD2、FAD... 详细信息

目的　筛选合适的保持人表皮干细胞特性的体外培养基,并观察其生物学性状。　方法　按不同培养基分组,配制FAD培养基和FAD加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)的培养基,即FAD、FAD1、FAD2、FAD3等组,以及角质化细胞专用无血清培养基(keratinocyte- SFM,K- SFM) ,同时应用同一个体的成纤维细胞经丝裂霉素处理后作滋养层,培养人表皮干细胞。通过细胞生长曲线及MTT检测,观察细胞的生长状态。在体外培养扩增表皮干细胞后,利用透射电镜、流式细胞仪分析、Brd U检测,观察细胞的生长状态;结合流式细胞仪分析,观察细胞周期的变化。　结果　人表皮干细胞在FAD组中生长良好,加入b FGF可进一步改善细胞的生长状态。扩增后细胞检测提示,人表皮干细胞在体外培养过程中呈典型的克隆性生长,生长周期长。流式细胞仪检测表明,人表皮干细胞80 .2 %处于G0 /G1 期;透射电镜观察见其细胞器少,细胞核浆比大。　结论　加入b FGF的FAD培养基并同时利用滋养层,更适合人表皮干细胞的生长,在稳定状态下是一种处于静止期的幼稚细胞。

关键词：人表皮干细胞生物学性状生长状态初步探讨碱性成纤维细胞生长因子流式细胞仪分析流式细胞仪检测 factor 无血清培养基细胞生长曲线体外培养扩增透射电镜观察 bFGF FAD 角质化细胞 MTT检测细胞特性不同浓度丝裂霉素

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复合转化生长因子-β的组织工程化周围神经修复坐骨神经缺损

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生物医学工程学杂志 2007年第2期24卷 394-398页

作者：张勇杰金岩聂鑫王彦亮刘鹏沈楠国生辉第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心组织病理教研室西安710032 第四军医大学口腔医学院颌面外科西安710032

探讨了转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)在周围神经缺损修复中的作用。将50 ng·ml-1 TGF-β加入体外培养的雪旺细胞(Sehwann cells,SC)中,MTT和流式细胞仪观测到TGF-β能够明显促进SC增殖;ELISA方法检测到T... 详细信息

探讨了转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)在周围神经缺损修复中的作用。将50 ng·ml-1 TGF-β加入体外培养的雪旺细胞(Sehwann cells,SC)中,MTT和流式细胞仪观测到TGF-β能够明显促进SC增殖;ELISA方法检测到TGF-β组上清神经生长因子(NGF)含量高于对照组(P<0．05);将牛去细胞基质(Bovine acellular matrix,BAM)、SC、血清和培养基按一定的比例混合,注入聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)神经导管去修复15 mm坐骨神经缺损。30只SD大鼠分为3组,实验组:PLGA导管+SC+TGF-β;空白组PLGA导管+SC;和自体神经移植组。16周后通过电生理、透射电镜等检测方法显示各组坐骨神经均得到再生,修复效果实验组与自体神经移植组无显著性差异,均优于空白组。TGF-β一方面可以明显促进SC的增殖,另一方面可以增强SC分泌NGF的功能。因此周围神经修复过程中使用外源性的TGF-β对修复周围神经缺损有较好的疗效。

关键词：转化生长因子-β 组织工程神经再生

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转化生长因子β及重组人骨形成蛋白2对雪旺细胞生物学行为影响的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2005年第11期19卷 871-874页

作者：张勇杰金岩聂鑫孙慧生刘源赵宇刘鹏第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室第四军医大学组织工程实验中心西安710032

目的研究转化生长因子β(transformin ggrowth factorβ,TGF-β)、重组人骨形成蛋白2(recom binant humanbonemor phogenetic protein2,rhBMP-2)对雪旺细胞生物学行为的影响。方法体外培养SD乳鼠雪旺细胞,按5×103/孔接种96孔板,分为3组。A组:加入50ng/mlTGF-β;B组:加入50ng/mlrhBMP-2;C组不作任何处理,作为空白对照组。采用MTT法每天取4孔连测9d细胞数,并绘制生长曲线;流式细胞仪测定细胞周期以观察雪旺细胞增殖情况;ELISA双夹心法测定培养液中神经生长因子(nervegrowth factor,NGF)含量。结果MTT法检测显示A、B组细胞生长曲线远离C组,逐渐上升到第8、9天差异明显,A组较B组上升趋势更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪测定显示A组和B组细胞增殖指数较C组高(P<0.05)。ELISA法检测A组上清NGF含量最高,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论外源性TGF-β、rhBMP-2均能促进雪旺细胞增殖和分泌NGF的功能,而TGF-β更优于rhBMP-2。

关键词：转化生长因子β 重组人骨形成蛋白2 雪旺细胞周围神经

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组织工程皮肤修复烧伤创面的初步实验

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中国生物工程杂志 2005年第B4期25卷 253-256页

作者：邓天政金岩何黎升黄沙宋绍华第四军医大学口腔医院颌面外科西安710032 第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心西安710032

目的:探讨组织工程全层皮肤移植于皮肤深度烫伤的术后治疗效果。方法:于猪背部皮肤制备Ⅲ°烫伤创面36个随机分为3组,每组12例。空白对照组(A)、自体全厚皮片移植组(B)、组织工程全层皮肤移植组(C),观察组间收缩率并进行镜下观察... 详细信息

目的:探讨组织工程全层皮肤移植于皮肤深度烫伤的术后治疗效果。方法:于猪背部皮肤制备Ⅲ°烫伤创面36个随机分为3组,每组12例。空白对照组(A)、自体全厚皮片移植组(B)、组织工程全层皮肤移植组(C),观察组间收缩率并进行镜下观察。结果:术后12周时B、C组收缩率无显著差异,且两组镜下观非常相似,但C组未见皮肤附件结构。结论:组织工程全层皮肤具有与正常皮肤相似的真表皮结构,可以用于皮肤深度烧伤的治疗,是一种非常有前景的皮肤替代物。

关键词：组织工程皮肤烧伤移植

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缓释骨形态发生蛋白-2的壳聚糖温敏凝胶促进牙周组织再生的实验研究

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华西口腔医学杂志 2008年第1期26卷 23-26页

作者：马志伟张勇杰吴织芬王荣朱浩李媛许杰刘青第四军医大学口腔医院牙周黏膜病科陕西西安710032 第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心陕西西安710032 第四军医大学口腔医院药剂科陕西西安710032

目的观察自制的加载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的壳聚糖温敏凝胶修复牙周组织缺损的效果。方法选取3只健康雄性杂种犬制备前磨牙区人工Ⅱ度根分叉区组织缺损模型,随机分为空白对照组、空白凝胶组及载药凝胶组,术中先严密缝合组织... 详细信息

目的观察自制的加载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的壳聚糖温敏凝胶修复牙周组织缺损的效果。方法选取3只健康雄性杂种犬制备前磨牙区人工Ⅱ度根分叉区组织缺损模型,随机分为空白对照组、空白凝胶组及载药凝胶组,术中先严密缝合组织瓣,然后对空白凝胶组及载药凝胶组区域分别注射先期配制并消毒好的空白凝胶和载药凝胶,术后8周取材行大体及组织学观察。结果载药凝胶组出现明显的牙周组织再生,而空白对照组和空白凝胶组仅有少量的牙周组织再生。载药凝胶组与空白对照组及空白凝胶组均有统计学差异(P<0.05),空白对照组和空白凝胶组相比,没有统计学差异。结论载rhBMP-2的壳聚糖温敏凝胶可有效促进牙周组织再生,同时简化手术操作,是一项有潜力的牙周组织再生手段。

关键词：牙周组织再生温敏凝胶壳聚糖骨形态发生蛋白-2

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