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中国临床康复 2006年第1期10卷 185-187页

作者：何黎升金岩邓天政宋绍华刘鹏黄沙解放军第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科陕西省西安市710032 解放军第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室组织工程实验中心陕西省西安市710032

背景:皮肤缺损的常规修复方法多采用自体皮肤移植,需要健康供皮区且会遗留不同程度的瘢痕畸形。组织工程皮肤的成功构建并应用于临床,标志着皮肤缺损治疗的重大突破。目的:通过组织工程皮肤修复皮肤缺损,分析手术方法与愈合率的关系,为... 详细信息

背景:皮肤缺损的常规修复方法多采用自体皮肤移植,需要健康供皮区且会遗留不同程度的瘢痕畸形。组织工程皮肤的成功构建并应用于临床,标志着皮肤缺损治疗的重大突破。目的:通过组织工程皮肤修复皮肤缺损,分析手术方法与愈合率的关系,为组织工程皮肤的临床应用提供实验依据。设计:随机对照观察。单位:解放军第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科,组织病理学教研室,组织工程实验中心。材料:实验于2003-10/2004-03在解放军第四军医大学口腔医学院口腔组织工程实验中心完成。选用2.5～3月龄健康清洁级约克猪6只,随机分为3组:组织工程全层组、组织工程真皮+自体表皮组、自体移植组,2只/。每只猪制作8个直径50mm的圆形皮肤缺损创面,16个创组面/组,共48个创面。方法:①制备组织工程全层皮肤和组织工程真皮。②组织工程全层组:沿画线自脂肪层切除全厚皮肤,彻底止血,以湿生理盐水纱布覆盖创面备用,此时取出组织工程全层皮肤并于组织工程皮肤上均匀打引流孔以利引流,用生理盐水冲去组织工程皮肤表面的培养液,使表皮层向上平铺于创面上,注意与创面间不能产生气泡。其上分别覆盖单层油纱布,生理盐水纱布、无菌干纱布、弹性海绵垫,每层厚度约为3～5mm,常规打包包扎,最后再以弹性绷带加压包扎。③组织工程真皮+自体表皮组:以同样方法切除全厚皮肤,将取下的皮肤用取皮鼓反取厚约0.1～0.2mm的刃厚表皮泡于生理盐水中备用。以同样方法取出处理组织工程真皮后覆盖于创面上,即刻覆盖自体刃厚表皮。其余处理同组织工程全层组。④自体移植组:切除全厚皮肤并去除脂肪组织后,回植于自体创面,覆盖各层敷料,加压包扎。⑤每次换药打开创面时,移植皮肤无感染、坏死、脱落且直径不小于3mm即为成活,否则即为失败。于术后4周统计各组创面成活率。主要观察指标:术后4周各组移植皮肤成活情况。结果:术后4周时,组织工程全层组移植皮肤成活率75%,组织工程真皮+自体表皮组移植皮肤成活率87%,自体移植组移植皮肤成活率94%,3组比较基本相似(χ2=2.34,P>0.05)。结论:组织工程皮肤移植修复皮肤缺损的效果与自体表皮移植接近,证明组织工程皮肤修复皮肤缺损是可行的。

关键词：生物医学工程移植皮肤损伤皮肤缺损组织工程皮肤成功率手术方法

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转化生长因子β对周围神经缺损修复的影响

转化生长因子β对周围神经缺损修复的影响

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中国组织工程、干细胞与神经再生学术会议

作者：张勇杰金岩聂鑫国生辉刘鹏沈楠第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理教研室

目的:探讨转化生长因子β(TGF-β)在周围神经缺损修复中的作用。方法:取5～7d 的SD 仔鼠坐骨神经分离培养雪旺细胞(Schwann cells,SC),分为TGF-β组和空白组。TGF-β组加入50ng/ml TGF-β。采用MTT 和流式细胞仪以观测SC 增殖情况;ELISA... 详细信息

目的:探讨转化生长因子β(TGF-β)在周围神经缺损修复中的作用。方法:取5～7d 的SD 仔鼠坐骨神经分离培养雪旺细胞(Schwann cells,SC),分为TGF-β组和空白组。TGF-β组加入50ng/ml TGF-β。采用MTT 和流式细胞仪以观测SC 增殖情况;ELISA 双夹心法测定培养液中NGF 含量。将牛去细胞基质(bovine acellular matrix,BAM)、SC、血清和培养基按一定的比例混合,注入PLGA 神经导管去修复坐骨神经15mm缺损。30只SD 大鼠分为3组,实验组:PLGA 导管+SC+TGF-β:空白组PLGA 导管+SC;和自体神经移植组。四个月后通过电生理、透射电镜、HRP 逆行示踪等方法检测神经再生及坐骨神经功能恢复情况。结果:MTT 法检测显示TGF-β组生长曲线远离空白组逐渐上升,到第8、9天与空白组差异明显(P<0.05)。流式细胞仪结果显示TGF-β组细胞增殖指数较空白组高(P<0.05)。ELISA 方法检测到TGF-β组上清NGF 含量最高(P<0.05)。动物实验结果显示各组坐骨神经均得到再生,修复效果实验组与自体神经移植组无显著性差异,均优于空白组。结论TGF-β一方面可以明显促进SC 的增殖,一方面可以增强SC分泌NGF 的功能。因此周围神经修复过程中使用外源性的TGF-β对修复周围神经缺损有较好的疗效。

关键词：转化生长因子β 雪旺细胞神经再生

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化学萃取异种组织工程化神经支架的方法及组织学研究

化学萃取异种组织工程化神经支架的方法及组织学研究

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中国组织工程、干细胞与神经再生学术会议

作者：国生辉金岩张勇杰刘鹏聂鑫董蕊第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室第四军医大学组织工程实验中心第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室

目的研究新的化学萃取方法,清除成年兔坐骨神经中的细胞和髓鞘,建立成年兔坐骨神经的化学萃取方法,获得去细胞同种异神经体移植物。方法切取健康成年兔双侧坐骨神经,以triton X—100和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化学处理。萃... 详细信息

目的研究新的化学萃取方法,清除成年兔坐骨神经中的细胞和髓鞘,建立成年兔坐骨神经的化学萃取方法,获得去细胞同种异神经体移植物。方法切取健康成年兔双侧坐骨神经,以triton X—100和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化学处理。萃取神经及新鲜神经行HE 染色、髓鞘染色及纤维素染色,以观察细胞、髓鞘及神经基底膜:免疫组织化学染色以显示雪旺细胞基底板层,并进行组织相容性的试验。结果去细胞神经的延展性及神经外膜的韧性和弹性良好,细胞和髓鞘被彻底清除,神经基底膜被保留,雪旺细胞基底板层保留完好,去细胞神经为一种没有细胞髓鞘及其碎片的空的神经基质管,其植入的临近部位无急性炎症反应,有较好的生物相容性,无脓肿形成及组织坏死发生。结论Triton X—100及脱氧胆酸钠化学处理方法,可有效清除周围神经中的细胞及髓鞘,萃取长段的去细胞神经,该神经移植物保持了网管柱状组织结构,保留了雪旺细胞基底板层及板层素,可能是制备具有仿生结构的组织工程化神经支架较为理想的方法。

关键词：神经移植异种周围神经

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制备复合生长因子的缓释微球并考察其对细胞的影响

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上海生物医学工程 2004年第4期25卷 22-25页

作者：黄沙金岩吴红刘涛第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心西安710032 第四军医大学药物化学教研室西安710032

目的:制备复合碱性成纤维细胞生长因子的可降解缓释微球,考察其生物活性保存情况,以及其对上皮细胞的作用。方法:采用改良的乳化冷凝法交联制备明胶缓释微球,将其加入上皮细胞的培养液中,用细胞计数法、四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MT... 详细信息

目的:制备复合碱性成纤维细胞生长因子的可降解缓释微球,考察其生物活性保存情况,以及其对上皮细胞的作用。方法:采用改良的乳化冷凝法交联制备明胶缓释微球,将其加入上皮细胞的培养液中,用细胞计数法、四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MTT法)测定细胞增殖情况。结果:缓释微球平均粒径12.36±3.56μm;培养1 d后各组细胞计数、吸光度(D)值差异均无显著性意义;5d后,缓释微球组细胞计数、吸光度(D)值明显高于对照组;7 d后,缓释微球组值仍高于其它组,但差异无显著性意义。结论:复合生长因子的缓释微球制备工艺简便,成球性好;能较长时间持续释放活性生长因子,明显促进细胞增殖。

关键词：制备复合生长因子缓释微球四甲基偶氮唑盐微量反应比色法细胞计数法

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HEMA-胶原SD-Ag缓释膜的研制及促进烧伤创面愈合的实验研究

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实用医药杂志 2004年第11期21卷 1000-1002,1006页

作者：黄沙金岩吴红邓天政宋绍华第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心第四军医大学药物化学教研室第四军医大学口腔医院颌面外科陕西西安710032

目的研制甲基丙烯酸羟乙酯穴HEMA雪-胶原抗菌药物缓释膜,考察其对烧伤创面的促愈合作用。方法制备包裹有磺胺嘧啶银穴SD-Ag雪的HEMA-胶原抗菌药物缓释膜,采用SD大鼠深Ⅱ度烧伤模型,观察测定其对创面愈合的影响。结果制备后得到乳白色半... 详细信息

目的研制甲基丙烯酸羟乙酯穴HEMA雪-胶原抗菌药物缓释膜,考察其对烧伤创面的促愈合作用。方法制备包裹有磺胺嘧啶银穴SD-Ag雪的HEMA-胶原抗菌药物缓释膜,采用SD大鼠深Ⅱ度烧伤模型,观察测定其对创面愈合的影响。结果制备后得到乳白色半透明状、均匀有弹性的凝胶膜状物。实验组大鼠不同时间点的创面愈合率均高于对照组穴P<0.05雪,愈合时间明显缩短穴P<0.05雪。组织学观察可见实验组愈合创面上皮化程度好于对照组。结论本方法制备缓释膜简单快速,成膜性好。HEMA-胶原抗菌药物缓释膜可有效促进大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合,有望应用于临床。

关键词：甲基丙烯酸羟乙酯胶原缓释磺胺嘧啶银烧伤创面

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复合bFGF缓释微球的制备及其对成纤维细胞增殖作用的实验研究

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生物医学工程研究 2004年第2期23卷 108-110,117页

作者：黄沙金岩吴红刘勇刚第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心陕西西安710032 第四军医大学药物化学教研室陕西西安710032

制备复合碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)可降解缓释微球 ,考察其生物活性的保存情况 ,以及它对成纤维细胞的作用。采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bFGF的明胶缓释微球 ,将它加入成纤维细胞的培养液中 ,用细胞计数法、四甲基偶氮唑盐... 详细信息

制备复合碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)可降解缓释微球 ,考察其生物活性的保存情况 ,以及它对成纤维细胞的作用。采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bFGF的明胶缓释微球 ,将它加入成纤维细胞的培养液中 ,用细胞计数法、四甲基偶氮唑盐微量反应比色法 (MTT法 )测定细胞增殖情况。结果表明 ,复合bFGF的缓释微球平均粒径 12 .36± 3.5 6 μm ;培养 1d后各组细胞计数、吸光度 (A)值差异均无显著性 ;5d后 ,缓释微球组细胞计数、吸光度 (A)值明显高于对照组 ;7d后 ,缓释微球组值仍高于其它组 ,但差异无显著性。复合bFGF的缓释微球制备工艺简便 ,成球性好 ;能较长时间地持续释放活性bFGF ,明显促进成纤维细胞的增殖。

关键词：缓释微球 FGF 成纤维细胞增殖细胞计数法对照组四甲基偶氮唑盐 MTT法吸光度培养液生物活性

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右旋糖酐基骨形态发生蛋白2微凝胶缓释系统的理化性能

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口腔医学 2005年第3期25卷 176-178页

作者：陈发明吴织芬金岩吴红姜玲王国芳杜岩第四军医大学口腔医学院牙周科西安710032 第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心西安710032 第四军医大学化学教研室药物制剂中心西安710032 西安组织工程技术研究中心西安710032

目的观察载骨形态发生蛋白2(BMP2)的右旋糖酐基微凝胶(BMP2-DEX-MP)冻干剂的理化性能和释药特征。方法采用改良的乳化溶液聚合法制备含BMP2的右旋糖酐基微凝胶(BMP2-DEX-MP),并制得冻干品。观察其形态、粒径、包封率、体外释放度及稳定... 详细信息

目的观察载骨形态发生蛋白2(BMP2)的右旋糖酐基微凝胶(BMP2-DEX-MP)冻干剂的理化性能和释药特征。方法采用改良的乳化溶液聚合法制备含BMP2的右旋糖酐基微凝胶(BMP2-DEX-MP),并制得冻干品。观察其形态、粒径、包封率、体外释放度及稳定性。结果所制备的BMP2-DEX-MP在光镜下显示圆整均匀,圆度(1.14±0.08)μm,80.0%微球粒径在(35±10)μm范围之内;BMP2包封率为78.0%,溶涨率为85.9%;冷冻干燥后4℃下可稳定放置6个月以上;体外释药符合双项动力学规律。结论所合成的BMP2-DEX-MP理化性能稳定,具有确定的BMP2缓释作用,表明右旋糖酐基微凝胶可以作为生长因子缓释载体。

关键词：骨形态发生蛋白质类载体右旋糖酐微球

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HEMA-胶原抗菌药物缓释膜促SD大鼠烧伤创面愈合的实验研究

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生物医学工程研究 2004年第3期23卷 160-163页

作者：黄沙金岩吴红邓天政宋绍华第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心陕西西安710032 第四军医大学药物化学教研室陕西西安710032 第四军医大学口腔医院颌面外科陕西西安710032

观察甲基丙烯酸羟乙酯 (HEMA) -胶原抗菌药物缓释膜对烧伤创面的促愈合作用。制备包裹有磺胺嘧啶银 (SD -Ag)的HEMA -胶原抗菌药物缓释膜 ,观察测定其对SD大鼠深Ⅱ度烧伤模型的作用。结果表明 ,实验组大鼠不同时间点的创面愈合率均高于... 详细信息

观察甲基丙烯酸羟乙酯 (HEMA) -胶原抗菌药物缓释膜对烧伤创面的促愈合作用。制备包裹有磺胺嘧啶银 (SD -Ag)的HEMA -胶原抗菌药物缓释膜 ,观察测定其对SD大鼠深Ⅱ度烧伤模型的作用。结果表明 ,实验组大鼠不同时间点的创面愈合率均高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,愈合时间明显缩短 (P <0 .0 5 )。组织学观察表明实验组愈合创面上皮化程度好于对照组。HEMA -胶原抗菌药物缓释膜可有效地促进大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合 ,具有应用前景。

关键词：甲基丙烯酸羟乙酯-胶原抗菌药物缓释膜大鼠烧伤创面促愈合作用动物模型敷料磺胺嘧啶银

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甲基丙烯酸羟乙酯-胶原抗菌药物缓释膜促SD大鼠烧伤创面愈合的实验研究

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生物医学工程与临床 2005年第1期9卷 4-6,F002页

目的考察甲基丙烯酸羟乙酯穴HEMA雪-胶原抗菌药物缓释膜对烧伤创面的促愈合作用。方法制备包裹有磺胺嘧啶银穴SD-Ag雪的HEMA-胶原抗菌药物缓释膜,观察其对SD大鼠深Ⅱ°烧伤模型的作用。63只SD烧伤模型大鼠随机分为3组,A组(21只)以H... 详细信息

目的考察甲基丙烯酸羟乙酯穴HEMA雪-胶原抗菌药物缓释膜对烧伤创面的促愈合作用。方法制备包裹有磺胺嘧啶银穴SD-Ag雪的HEMA-胶原抗菌药物缓释膜,观察其对SD大鼠深Ⅱ°烧伤模型的作用。63只SD烧伤模型大鼠随机分为3组,A组(21只)以HEMA抗菌药缓释膜治疗,B组(21只)以磺胺嘧啶糊剂治疗,C组(对照组,21只)无治疗。结果实验组大鼠不同时间点的创面愈合率均高于对照组穴P<0.05雪,愈合时间明显缩短穴P<0.05雪。组织学观察可见实验组愈合创面上皮化程度好于对照组。结论HEMA-胶原抗菌药物缓释膜可有效促进大鼠深Ⅱ°烧伤创面愈合,具有一定应用前景。

关键词：治疗愈合胶原抗菌药物烧伤创面缓释对照组结论实验目的

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含黑素细胞表皮重建和对UVA照射的反应

含黑素细胞表皮重建和对UVA照射的反应

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中国科协第五届青年学术年会——陕西卫星会议

作者：卢涛刘源金岩高天文刘仲荣刘媛解放军第四军医大学西京医院口腔医学院口腔组织病理学教研室组织工程实验中心西安710032

体外重建不同颜色的含黑素细胞表皮,为研究色素形成和光防护提供新的方法.把角质形成细胞和黑素细胞混合培养,和胶原凝胶复合,2天后移王气液面培养,现察所制表皮的颜色.切片特染检查.用UVA照射所制表皮,现察颜色改变.含黑色素细胞的组... 详细信息

体外重建不同颜色的含黑素细胞表皮,为研究色素形成和光防护提供新的方法.把角质形成细胞和黑素细胞混合培养,和胶原凝胶复合,2天后移王气液面培养,现察所制表皮的颜色.切片特染检查.用UVA照射所制表皮,现察颜色改变.含黑色素细胞的组织工程表皮在气液面上培养到1周左右,明显呈棕黑或黄褐色,随细胞浓度高低颜色深浅有相应变化.重建的表皮特染呈类似正常表皮,在基底层处可见散在分布的黑色素细胞,多巴染色阳性,有的角质形成细胞核上方有黑素帽结构.重建的表皮经UVA照射后可出现色素沉着.重建含黑素细胞的表皮已经成功. 黑素细胞功能正常,可以观察到色素形成过程.重建的表皮可以用来研究色素形成和光防护.

关键词：组织工程黑素细胞紫外线表皮重建色素形成光防护

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