检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2010年第1期26卷 47-48页

作者：赵锦荣颜真第四军医大学肿瘤生物学国家重点实验室药学系药物基因组学教研室陕西西安710032

目的:以HEK293细胞为研究模型,筛选介导可溶性MHCⅠ产生的去整合素金属蛋白酶。方法:将ADAM8、ADAM10、ADAM15和ADAM17cDNA分别克隆入pcDNA3.1/V5载体,并用TransIT-LT1转染试剂将构建好的载体转染入HEK293细胞,用潮霉素B筛选ADAMs蛋白... 详细信息

目的:以HEK293细胞为研究模型,筛选介导可溶性MHCⅠ产生的去整合素金属蛋白酶。方法:将ADAM8、ADAM10、ADAM15和ADAM17cDNA分别克隆入pcDNA3.1/V5载体,并用TransIT-LT1转染试剂将构建好的载体转染入HEK293细胞,用潮霉素B筛选ADAMs蛋白稳定表达克隆;用SDS-PAGE、免疫印迹结合化学发光法检测ADAMs在HEK293细胞中的表达;用细胞表面生物素标记、免疫沉淀、SDS-PAGE、免疫印迹结合化学发光检测ADAMs过表达对可溶性MHCⅠ产生的影响。结果:成功获得稳定表达ADAMs的HEK293细胞;过表达ADAM10和ADAM17可增强HEK293细胞产生可溶性MHCⅠ。结论:ADAM10和AD-AM17具介导可溶性MHCⅠ产生的潜能。

关键词：主要组织相容性复合体去整合素金属蛋白酶

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NDRG2基因启动子甲基化与肺腺癌细胞中mRNA表达相关性的实验研究

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生物技术通讯 2010年第5期21卷 614-618页

作者：李慎梁平刘永兰黄启超汪钦包晗赵锦荣雷小英郭晏海颜真肿瘤生物学国家重点实验室第四军医大学药学系药物基因组学教研室陕西西安710032

目的:探讨肺腺癌细胞中NDRG2基因启动子甲基化状态及其与基因表达的关系。方法:甲基化焦磷酸测序技术检测启动子区域甲基化状态,荧光定量PCR技术检测不同药物浓度下培养细胞中NDRG2基因mRNA的表达水平,分析启动子区域甲基化与基因表达... 详细信息

目的:探讨肺腺癌细胞中NDRG2基因启动子甲基化状态及其与基因表达的关系。方法:甲基化焦磷酸测序技术检测启动子区域甲基化状态,荧光定量PCR技术检测不同药物浓度下培养细胞中NDRG2基因mRNA的表达水平,分析启动子区域甲基化与基因表达之间的关系。结果:在体外培养细胞中检测到NDRG2基因启动子区域呈现不同程度的甲基化,甲基化频率分别为肺癌A549细胞71.8%、GLC-82细胞86.1%、人脐静脉内皮ECV-304细胞36.8%、胃上皮GES-1细胞42.9%。NDRG2基因mRNA表达与其启动子甲基化程度成反比,甲基转移酶抑制剂5-杂氮-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)作用于细胞后,A549和GLC-82细胞中NDRG2基因的mRNA转录明显上调,至72 h差异显著(P<0.05)。结论:肺腺癌细胞中NDRG2基因启动子CpG岛存在高甲基化,甲基化程度与该基因的表达具有负相关性,5-Aza-CdR能在一定程度上提高NDRG2的转录水平。

关键词： NDRG2基因启动子甲基化焦磷酸测序 5-杂氮-2-脱氧胞苷基因表达

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胸腺素α1二聚体蛋白的克隆、表达、纯化及其生物学活性检测

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第四军医大学学报 2009年第8期30卷 676-678页

作者：李维娜吴守振张露韩苇颜真张英起第四军医大学药学系生物制药教研室肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710033 第四军医大学药学系药物基因组学教研室陕西西安710033

目的:获得具有生物学活性的重组人胸腺素α1二聚体蛋白.方法:人工合成胸腺素α1二聚体基因,并将该基因克隆入原核表达载体pET-22b(+)中.转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组Tα1②蛋白.对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Weste... 详细信息

目的:获得具有生物学活性的重组人胸腺素α1二聚体蛋白.方法:人工合成胸腺素α1二聚体基因,并将该基因克隆入原核表达载体pET-22b(+)中.转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组Tα1②蛋白.对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western Blot检测分析以及生物学活性检测.结果:Tα1②Mr约为6.3×103,与理论值一致.成功纯化了Tα1②蛋白,该蛋白具有与T1抗体特异性的结合能力并能刺激小鼠T淋巴细胞增殖.结论:成功地克隆、表达和纯化Tα1②蛋白;重组Tα1②具有与化学合成Tα1相同的功能并有更高的生物学活性.

关键词：胸腺素α1 串联体蛋白表达纯化活性检测

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几类实体肿瘤对IFN-α 2a治疗敏感性与其细胞表面受体表达的关系

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第四军医大学学报 2008年第10期29卷 865-868页

作者：刘艳韩苇颜真张英起第四军医大学药学系生物制药学教研室肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710033 第四军医大学药学系药物基因组学教研室陕西西安710033

目的:探讨肿瘤细胞表面干扰素α受体的表达与其肿瘤对IFN-α 2a治疗敏感性之间的关系.为建立干扰素α敏感肿瘤的快速评价方法奠定基础.方法:MTT法体外筛选IFN-α 2a敏感与抗性肿瘤细胞株,选取人肺腺癌细胞A549,SPC-A-1,GLC-82和人低分... 详细信息

目的:探讨肿瘤细胞表面干扰素α受体的表达与其肿瘤对IFN-α 2a治疗敏感性之间的关系.为建立干扰素α敏感肿瘤的快速评价方法奠定基础.方法:MTT法体外筛选IFN-α 2a敏感与抗性肿瘤细胞株,选取人肺腺癌细胞A549,SPC-A-1,GLC-82和人低分化胃腺癌细胞MKN-45共4株细胞;通过构建荷瘤裸鼠模型,证实不同肿瘤对干扰素治疗的敏感性存在差异.流式细胞术、免疫组织化学、Western Blot检测肿瘤细胞表面IFN-α受体的表达差异.结果:体内、体外实验结果表明:A549,SPC-A-1为IFN-α 2a敏感性细胞株,MKN-45,GLC-82为IFN-α 2a抗性细胞株.细胞和组织水平检测的结果表明:表达量由高到低依次为A549,SPC-A-1,MKN-45,GLC-82.结论:IFN-α受体表达的高低与肿瘤细胞对干扰素的敏感性具有密切的相关性,对实现有针对性的个体化治疗具有一定的指导意义.

关键词：干扰素α 受体,干扰素α 敏感性与特异性

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