检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验外科杂志 2012年第12期29卷 2541-2544页

作者：陈鹏张波张莉张连阳第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心创伤、烧伤及复合伤国家重点实验室重庆400042 第四研究室创伤、烧伤及复合伤国家重点实验室

目的利用基因敲人技术建立模拟人Apert综合征的成纤维细胞生长因子受体2（FGFR2）$252W小鼠模型，探讨FGFR2功能持续增强的小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成软骨诱导分化后表达特征。方法于出生后6周获取BMSCs增殖进行检测。取生长良好... 详细信息

目的利用基因敲人技术建立模拟人Apert综合征的成纤维细胞生长因子受体2（FGFR2）$252W小鼠模型，探讨FGFR2功能持续增强的小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成软骨诱导分化后表达特征。方法于出生后6周获取BMSCs增殖进行检测。取生长良好的第2代细胞成软骨诱导，对诱导后14d进行阿利新蓝、茜素红染色，对成软骨、成骨基因进行定量分析，并对信号通路细胞外信号调节激酶（Erk）1／2磷酸化观察。结果FGFR2功能突变小鼠BMSCs增殖速度减慢。体外成软骨诱导条件下，突变组BMSCs阿利新蓝和茜素红染色程度下降。定量分析突变组成软骨相关基因是野生组80％（Colx）、88％（ColⅡ）（P〈0．05），成骨表达基因是野生型1．23（OC）、1．38（OP）倍（P〈0．05）。FGFR2功能持续增强使BMSCsErkl／2磷酸化增强。结论FGFR2可能不仅具有调控成骨细胞株发育的功能，还具有调控软骨细胞株发育的重要功能。FGFR2功能持续增强导致小鼠BMSCs增殖减慢，成软骨发育障碍，虽对成骨分化增强，却抑制矿化过程，这其中机制可能与Erk1／2通路增强有关。

关键词：成纤维细胞生长因子受体2 骨髓间充质干细胞软骨细胞分化细胞外信号调节激酶信号通路

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大鼠Ⅰ型肺泡上皮细胞的分离、培养及生物学特性研究

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解放军医学杂志 2014年第5期39卷 374-378页

作者：李勇杜娟余静王海燕岳彩黎曾灵蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的改良细胞分离方法,得到高纯度的原代Ⅰ型肺泡上皮细胞(ATⅠ)并进行培养,初步观察其生物学特性。方法采用SPF级SD大鼠,通过酶消化法、IgG贴壁法和免疫磁珠法获得高纯度ATⅠ并进行培养,采用台盼蓝染色计算细胞活力,免疫荧光DAPI法鉴... 详细信息

目的改良细胞分离方法,得到高纯度的原代Ⅰ型肺泡上皮细胞(ATⅠ)并进行培养,初步观察其生物学特性。方法采用SPF级SD大鼠,通过酶消化法、IgG贴壁法和免疫磁珠法获得高纯度ATⅠ并进行培养,采用台盼蓝染色计算细胞活力,免疫荧光DAPI法鉴定细胞纯度和表型,倒置显微镜观察细胞生长规律,计数法绘制细胞生长曲线。结果每只体重120g左右的SD大鼠可获得(2.1±0.5)×106个ATⅠ,细胞活力为93.8%±1.6%,细胞纯度为91.0%±0.6%。培养3d后细胞完全黏附、伸展,培养7d后汇合形成单层扁平状。免疫荧光检测显示,培养的原代细胞水通道蛋白5(AQP5)和小窝蛋白1(Cav-1)呈阳性表达,表面活性蛋白C前体(pro-SPC)呈阴性表达。获取的ATⅠ可在体外增殖,生长曲线显示原代ATⅠ在对数增长期的倍增时间约为66h。结论改良细胞分离方法可以得到高纯度的ATⅠ,培养后细胞生长良好,可为研究以ATⅠ损伤为特征的肺部疾病提供可靠的体外模型。

关键词：肺泡上皮细胞,Ⅰ型细胞分离细胞培养技术

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机械牵张加重模拟缺血缺氧心肌细胞损伤的研究

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第三军医大学学报 2004年第17期26卷 1557-1560页

作者：李晓东黄跃生张东霞蒋建新粟永萍第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的验证机械牵张加重模拟缺血缺氧对心肌细胞的损伤效应.方法利用所建立的心肌细胞体外牵张模型,模拟施加缺血缺氧因素,观察心肌细胞形态、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及碘化丙啶(PI)染色阳性细胞比例的变化.结果10%牵张后,心肌细胞... 详细信息

目的验证机械牵张加重模拟缺血缺氧对心肌细胞的损伤效应.方法利用所建立的心肌细胞体外牵张模型,模拟施加缺血缺氧因素,观察心肌细胞形态、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及碘化丙啶(PI)染色阳性细胞比例的变化.结果10%牵张后,心肌细胞形态完整,LDH及PI染色阳性细胞比例无明显变化.模拟缺血缺氧后形态明显破坏,LDH及PI染色阳性细胞比例显著增加.牵张复合模拟缺血缺氧后,细胞形态破坏加剧,LDH含量急剧上升,PI染色阳性细胞比例进步显著增加(P＜0.01).结论机械牵张加剧了模拟缺血缺氧对心肌细胞的损伤效应,提示严重烧伤早期过多过快补液导致心脏前负荷的迅速增加对心肌组织产生牵拉可能会加剧业已存在的心肌细胞损伤,从而进一步促进了心肌损害的发生.

关键词：心肌细胞机械牵张缺血/缺氧

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核因子-κB圈套寡核苷酸对核因子-κB活性及创伤炎症反应大鼠肝脏功能损害的影响

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中华创伤杂志 2004年第12期20卷 724-729页

作者：梁华平徐祥杨文军王付龙刘东擘胡承香王正国第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室重庆400042 第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第四研究室重庆400042

目的　探讨核因子 (NF) -κB圈套寡核苷酸 (ODN)对NF -κB活性及创伤炎症反应大鼠肝脏功能损害的影响。　方法　利用电泳迁移率改变实验 (EMSA) ,测定合成的环状哑铃形圈套ODN对NF -κB的DNA结合能力的竞争抑制作用 ;利用NF -κB反应性... 详细信息

目的　探讨核因子 (NF) -κB圈套寡核苷酸 (ODN)对NF -κB活性及创伤炎症反应大鼠肝脏功能损害的影响。　方法　利用电泳迁移率改变实验 (EMSA) ,测定合成的环状哑铃形圈套ODN对NF -κB的DNA结合能力的竞争抑制作用 ;利用NF -κB反应性报告细胞株HEK -不稳定增强型绿色荧光蛋白 (d2EGFP) ,观察圈套ODN瞬时转染对报告基因表达的影响。Wistar大鼠 96只 ,随机分为对照组、创伤性炎症组、圈套ODN组和无关ODN组。利用EMSA检测各组肝脏组织NF -κB的DNA结合活性 ,用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)检测大鼠肝脏组织TNF -α、白细胞介素 - 6 (IL - 6 )mRNA水平 ,酶联免疫吸附实验 (ELISA)法检测大鼠肝脏组织肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)、IL - 6的蛋白水平。　结果　设计的环状哑铃形圈套ODN对NF -κB的DNA结合能力具有竞争抑制作用 ,1 μg ml和 2 μg ml圈套ODN瞬时转染HEK -d2EGFP ,可明显抑制p6 5蛋白诱导的d2EGFP表达。大鼠创伤性炎症后 3h ,肝脏NF -κB活性开始升高 ,伤后 1 2h达高峰。肝脏组织TNF -α、IL - 6mRNA水平和蛋白水平也明显上升 ,与NF -κB的活性改变一致。圈套ODN治疗后 ,大鼠肝脏组织TNF -α、IL - 6的表达明显下降 ,肝脏功能明显好转 ,而无关ODN则没有治疗效果。　结论　设计的靶向NF

关键词： ODN NF—κB 鼠肝大鼠 TNF—α 肝脏功能 IL-6 DNA结合 EGFP 肝脏组织

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小鼠急性脑损伤后微量脑脊液谷氨酸浓度的测定

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第三军医大学学报 2006年第12期28卷 1290-1291页

作者：李玮安建宏朱佩芳熊仁平周元国第三军医大学大坪医院野战外科研究所第七室研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四室研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的建立急性脑损伤后微量脑脊液谷氨酸浓度测定方法。方法采用邻苯二甲醛柱前衍生，梯度高效液相色谱荧光检测法测定急性脑损伤小鼠脑脊液中谷氨酸（glutamate，GLu）含量。结果谷氨酸的平均加样回收率为84．26％～125．6％（n=3）... 详细信息

目的建立急性脑损伤后微量脑脊液谷氨酸浓度测定方法。方法采用邻苯二甲醛柱前衍生，梯度高效液相色谱荧光检测法测定急性脑损伤小鼠脑脊液中谷氨酸（glutamate，GLu）含量。结果谷氨酸的平均加样回收率为84．26％～125．6％（n=3），日内相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）均小于4．94％（n=3），日间相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）均小于0．78％（n=3）。急性脑损伤后6h小鼠脑脊液谷氨酸含量相对于假手术组有明显升高（P〈0．01）。结论本方法准确、快速，可用于微量脑脊液谷氨酸含量的测定。

关键词：急性脑损伤微量脑脊液谷氨酸

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大剂量糖皮质激素对下丘脑室旁核神经元促肾上腺皮质激素释放激素mRNA转录及其蛋白表达的调节作用

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中华创伤杂志 2005年第10期21卷 737-740页

作者：张岫竹熊健琼刘媛曾琳龙在云张良周继红朱佩芳王正国第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第四研究室重庆400042 第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第三研究室重庆400042

目的观察大剂量糖皮质激素(GC)对下丘脑室旁核(PVN)神经元促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)蛋白表达、CRHmRNA转录的调节作用,以了解大剂量GC与生理剂量的GC经典作用是否存有差异。方法Wistar大鼠60只,随机分为10-6mol/L DEX组、10-9mol/... 详细信息

目的观察大剂量糖皮质激素(GC)对下丘脑室旁核(PVN)神经元促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)蛋白表达、CRHmRNA转录的调节作用,以了解大剂量GC与生理剂量的GC经典作用是否存有差异。方法Wistar大鼠60只,随机分为10-6mol/L DEX组、10-9mol/L地塞米松(DEX)组、等渗盐水组以及预先予以10-4mol/LRU486,再予以10-6mol/LDEX组(以上均为终浓度),通过预先股静脉置管给入。利用免疫组织化学与激光共聚焦扫描技术,观察CRH蛋白表达的情况;利用原位杂交技术,观察PVN神经元CRH mRNA转录的变化。结果终浓度10-6mol/L DEX作用约20min后,PVN神经元胞浆内出现CRH mRNA阳性染色颗粒;作用约30min后,出现CRH蛋白阳性荧光颗粒。预先拮抗糖皮质激素受体(GR)后,上述10-6mol/L DEX的促进作用被逆转。10-9mol/L DEX、等渗盐水与空白对照均无类似表现。结论大剂量GC可使PVN神经元CRH基因表达上调,这与经典GC的作用具有较大差异,可能由于大剂量GC依赖于mGR而经典GC的作用主要经由iGR所致。

关键词：糖皮质激素类下丘脑室旁核促肾上腺皮质素释放激素基因表达促肾上腺皮质激素释放激素(CRH) 大剂量糖皮质激素 mRNA转录核神经元蛋白表达调节作

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髓样分化蛋白-2在内毒素与内皮细胞结合中的作用

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第三军医大学学报 2004年第24期26卷 2235-2238页

作者：熊建琼朱佩芳王正国蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的　探讨髓样分化蛋白 2 (myeloiddifferentiationprotein 2 ,MD 2 )在人内皮细胞中的表达及其在内毒素 (LPS)与内皮细胞结合中的作用。方法　分离、培养人脐静脉内皮细胞 ,RT PCR和Westernblot方法检测内皮细胞MD 2的表达以及LPS对... 详细信息

目的　探讨髓样分化蛋白 2 (myeloiddifferentiationprotein 2 ,MD 2 )在人内皮细胞中的表达及其在内毒素 (LPS)与内皮细胞结合中的作用。方法　分离、培养人脐静脉内皮细胞 ,RT PCR和Westernblot方法检测内皮细胞MD 2的表达以及LPS对其表达的影响 ;流式细胞仪检测在有或无血清时LPS与内皮细胞的结合以及TLR4、MD 2抗体对其结合的影响。结果　内皮细胞有MD 2mRNA及相关蛋白的表达 ,LPS能明显上调其表达水平 ,并呈一定的时间和剂量依赖性 ;血清能明显促进不同剂量LPS与HUVEC的结合 ,尤其是小剂量LPS ;TLR4、MD 2单克隆抗体分别能阻断LPS与内皮细胞的结合 ,且阻断程度与抗体剂量呈依赖关系。结论　TLR4、MD 2是内皮细胞上与LPS结合的主要受体 ,MD 2在LPS与内皮细胞的结合中起着重要的作用。

关键词：髓样分化蛋白-2(MD-2) 内毒素类内皮

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战创伤感染的历史沿革

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中华创伤杂志 2015年第9期31卷 777-780页

作者：蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室第四研究室重庆400042

人类对感染的认识是从传染病开始的。从起初鬼怪、瘴气理论，到疾病微生物理论提出、微生物学和免疫学等学科的形成，从人们提出空气中存在能传播疾病的微粒子到最终发现一个一个致病微生物，从让创面化脓的无毒脓思想的盛行到创面清创... 详细信息

人类对感染的认识是从传染病开始的。从起初鬼怪、瘴气理论，到疾病微生物理论提出、微生物学和免疫学等学科的形成，从人们提出空气中存在能传播疾病的微粒子到最终发现一个一个致病微生物，从让创面化脓的无毒脓思想的盛行到创面清创、消毒术建立，人类经历了漫长的时间。进入19世纪，出现了“微生物”、“细菌”等名称，并逐步发现一些特定的致病微生物，在此基础上，提出了判断致病微生物的细菌学三定律，即科赫法则。20世纪40年代，

关键词：创伤感染致病微生物微生物学创面清创细菌学传染病气理论免疫学

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脂肪来源干细胞体外成骨诱导和成脂诱导分化

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第三军医大学学报 2008年第13期30卷 1219-1222页

作者：黄宏朱方强孙宏振冯帅南王正国朱佩芳张波第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨脂肪组织来源的多能干细胞(adipose tissue-derived stromal cells,ADSCs)的多向分化潜能。方法取小香猪腹部皮下脂肪组织,通过Ⅰ型胶原酶消化、离心等步骤分离培养ADSCs,经过原代培养和传代培养。分别加入成骨诱导剂和成脂诱... 详细信息

目的探讨脂肪组织来源的多能干细胞(adipose tissue-derived stromal cells,ADSCs)的多向分化潜能。方法取小香猪腹部皮下脂肪组织,通过Ⅰ型胶原酶消化、离心等步骤分离培养ADSCs,经过原代培养和传代培养。分别加入成骨诱导剂和成脂诱导培养。经过倒置显微镜观察诱导后细胞形态变化,并通过Gomori改良钙钴法、von Kossa染色和油红O染色对其成骨细胞和脂肪细胞表型进行鉴定,进一步比较细胞的转化率。结果ADSCs呈成纤维细胞样贴壁生长,其经成骨、成脂诱导培养2周后形态、体积发生明显改变。Gomori改良钙钴法染色显示其细胞质内富含碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)颗粒,诱导后15d和19d,ALP阳性细胞分别为(25.0±7.5)%和(49.7±6.9)%,von Kossa染色表明聚集的细胞团中央能形成钙化结节;倒置显微镜,成脂诱导3、7、14d后脂肪细胞转化率分别为(22.3±12.5)%、(49.6±7.1)%和(89.4±9.3)%。油红O染色可见细胞质内出现橙红色脂滴,14d油红O染色阳性率高达(92.5±9.1)%。结论ADSCs经体外诱导培养后可向成骨细胞和脂肪细胞分化,并具有明显的成骨和成脂表型,表明ADSCs具有多向分化潜能。

关键词：干细胞脂肪组织脂肪来源干细胞脂肪细胞成骨细胞细胞分化

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水下冲击波致犬肺损伤的病理学观察

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第三军医大学学报 2005年第12期27卷 1216-1219页

作者：刘大维杨志焕张波朱佩芳蒋建新王正国尹志勇周继红李晓炎宁心冯刚第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的　探讨水下冲击伤后犬肺的病理学改变。方法　成年杂种犬3 7只,布放于离爆心3 5～17 5m处,分别用2 0 0、5 0 0g和10 0 0gTNT水下3m爆炸,水中压力传感器测定冲击波物理参数,观察伤后肺的大体形态学改变以及光镜和电镜下组织结构的... 详细信息

目的　探讨水下冲击伤后犬肺的病理学改变。方法　成年杂种犬3 7只,布放于离爆心3 5～17 5m处,分别用2 0 0、5 0 0g和10 0 0gTNT水下3m爆炸,水中压力传感器测定冲击波物理参数,观察伤后肺的大体形态学改变以及光镜和电镜下组织结构的变化。结果　肺损伤的发生率达83 7% ,大体形态学改变主要为肺出血、肺水肿及少数肺撕裂;光镜下可见肺泡腔内有大量的红细胞及纤维蛋白渗出;电镜下可见肺泡壁毛细血管内皮细胞破坏严重,部分线粒体出现空泡变与髓鞘样结构,核膜不完整等特点。结论　严重的肺出血和肺水肿可能为动物水下冲击伤早期死亡的主要原因。

关键词：水下冲击波肺组织病理学改变

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