检索结果-内蒙古大学图书馆

林业科学 2021年第8期57卷 94-101页

作者：李茜雅张盛培李河经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室中南林业科技大学长沙410004

【目的】研究液泡分选蛋白Vps26在油茶果生刺盘孢中的生物学功能,为阐明Vps26的作用机制和防治油茶炭疽病提供理论依据。【方法】采用Over-lap法构建CfVPS26基因敲除载体片段,利用PEG介导的转化法将该片段转入果生刺盘孢原生质体中,对... 详细信息

【目的】研究液泡分选蛋白Vps26在油茶果生刺盘孢中的生物学功能,为阐明Vps26的作用机制和防治油茶炭疽病提供理论依据。【方法】采用Over-lap法构建CfVPS26基因敲除载体片段,利用PEG介导的转化法将该片段转入果生刺盘孢原生质体中,对具有潮霉素抗性的转化子进行验证筛选;PCR扩增启动子在内的CfVPS26基因回补片段,构建回补质粒并转入突变体原生质体中,荧光筛选回补菌株;对野生型菌株、突变体和回补菌株进行营养生长、附着胞形成率、细胞壁胁迫、糖原染色及致病力等生物学表型测定。【结果】筛选验证获得CfVPS26基因缺失突变体ΔCfvps26;该突变体生长速率均显著小于野生型菌株和回补菌株,气生菌丝也明显减少;在含有细胞壁抑制剂200μg·mL^(-1)荧光增白剂和0.01%十二烷基硫酸钠的PDA培养基中,突变体ΔCfvps26生长抑制率显著高于野生型和回补菌株的抑制率;在含有内质网胁迫剂二硫苏糖醇的PDA培养基中,突变体菌株ΔCfvps26耐受性增强,抑制率显著低于野生型和回补菌株。进一步研究发现,CfVPS26基因缺失突变体分生孢子产量和附着胞形成率显著降低、糖原的代谢受阻,无法在油茶叶片上形成病斑,致病力丧失。【结论】液泡分选蛋白CfVps26参与调控油茶果生刺盘孢生长发育、产孢、附着胞形成、外界胁迫、糖原代谢和致病过程。本研究可为阐明CfVps26参与调控果生刺盘孢致病的分子机制提供参考,并为新型杀菌剂的开发提供潜在靶标位点。

关键词：油茶果生刺盘孢 CfVps26 致病力

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青霉产纤维素酶发酵培养基的优化

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中国食品学报 2014年第9期14卷 125-130页

作者：韦晓菊黎继烈张蕾朱晓媛中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室长沙410004

为优化青霉1407产纤维素酶发酵培养基,采用单因素试验法寻找青霉产纤维素酶所需培养基的碳源氮源、有机氮与无机氮的比例、诱导物浓度以及金属离子种类对产酶的影响,然后利用响应面分析法确定关键影响因子的最佳参数,结果显示:在麸皮2.9... 详细信息

为优化青霉1407产纤维素酶发酵培养基,采用单因素试验法寻找青霉产纤维素酶所需培养基的碳源氮源、有机氮与无机氮的比例、诱导物浓度以及金属离子种类对产酶的影响,然后利用响应面分析法确定关键影响因子的最佳参数,结果显示:在麸皮2.955%、药媒3.25%、微晶纤维素3.75%、硫酸铵1.50%、硫酸镁0.03%、氯化钙0.03%条件下,青霉产纤维素酶的理论酶活最大值达到6 968.02 U/mL。验证试验纤维素酶活为(6 954.32±5.23)U/mL,与预测值接近,说明建立的回归方程模型与验证试验结果相符。

关键词：纤维素酶培养基单因素试验响应面法

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油茶种间杂交F代18个优良单株核型分析

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林业科学 2022年第4期58卷 165-174页

作者：李艳民袁德义叶天文陈雅韩春霞肖诗鑫经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业和草原局重点实验室中南林业科技大学长沙410004

【目的】油茶种间杂交是油茶种质创新的重要途径,明晰亲子代染色体遗传变异规律,有助于指导杂交后代植株的筛选与回交组合的合理配置,并为后续杂交育种研究提供参考。【方法】以亲本及F代18个优良单株的扦插苗根尖为材料,利用改良去壁... 详细信息

【目的】油茶种间杂交是油茶种质创新的重要途径,明晰亲子代染色体遗传变异规律,有助于指导杂交后代植株的筛选与回交组合的合理配置,并为后续杂交育种研究提供参考。【方法】以亲本及F代18个优良单株的扦插苗根尖为材料,利用改良去壁低渗染色体制片技术和核型分析软件对亲本及杂交子代的染色体核型特征进行研究,并利用核型似近系数聚类法分析亲本及杂交子代的染色体遗传与变异。【结果】1)父本‘华硕’与母本‘攸杂2’的核型类型均为2B型,以m型染色体占多数,sm型染色体占少数,母本‘攸杂2’的核型公式为2n=91=53m(4SAT)+38sm(2SAT),染色体相对长度变化范围为1.26%~2.97%,臂比值大于2的染色体比例为17.8%,染色体长度比为2.36,核型不对称系数为62.36%;父本‘华硕’核型公式为2n=90=62m(2SAT)+28sm(4SAT),染色体相对长度变化范围为1.50%~3.00%,臂比值大于2的染色体比例为4.4%,染色体长度比为2.00,核型不对称系数为59.38%。2)杂交子代的核型参数多数介于父本与母本之间,以m型和sm型染色体为主,少数有st型染色体,且在杂交子代中出现sm型染色体数目大于m型的情况(YH-14和YH-18);染色体相对长度的变异幅度较大,总体为1.05%~3.32%,以M1和M2型染色体居多;核型不对称系数变异范围为61.01%~63.38%,核型类型为2A或2B型。3)核型聚类分析结果表明,在核型似近系数为0.9660,距离系数为0.0340时,可分为两大类:其中绝大部分杂交子代均与母本‘攸杂2’聚为一类,仅有YH-11、YH-15与父本‘华硕’聚为一类。【结论】大部分杂交子代的核型参数介于父本与母本之间,少数杂交子代的核型出现较大变异。此外,杂交子代群体中绝大部分单株的染色体核型与母本‘攸杂2’更相近,仅少数核型与父本‘华硕’更相近。此结果可为油茶杂交育种工作、创制油茶新种质提供相应的理论基础。

关键词：油茶种间杂交染色体核型

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油桐叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化体系的建立

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林业科学 2018年第1期54卷 46-53页

作者：谷战英杨若楠陈昊中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004

【目的】探索油桐叶肉细胞原生质体分离的最适条件,建立油桐原生质体的遗传转化体系,使在油桐体内研究自身基因的功能成为可能。【方法】以油桐成熟叶片和组培苗幼叶为材料,通过酶解法成功分离得到油桐叶肉细胞的原生质体并确定最适分... 详细信息

【目的】探索油桐叶肉细胞原生质体分离的最适条件,建立油桐原生质体的遗传转化体系,使在油桐体内研究自身基因的功能成为可能。【方法】以油桐成熟叶片和组培苗幼叶为材料,通过酶解法成功分离得到油桐叶肉细胞的原生质体并确定最适分离条件。在此基础上,以获得的原生质体为受体系统,建立PEG介导的油桐原生质体基因转化方法。【结果】原生质体分离结果表明,酶解时间对原生质体产量和活性的影响最大,其次是纤维素酶浓度,而离析酶浓度和甘露醇浓度对原生质体产量和活性的影响较小。以成熟叶片为材料分离原生质体的最适条件为纤维素酶浓度1.5%、离析酶浓度1%、甘露醇浓度0.6 mol·L-1、酶解时间12 h,以组培苗幼叶为材料分离原生质体的最适条件为纤维素酶浓度2%、离析酶浓度1%、甘露醇浓度0.7 mol·L-1、酶解时间6 h。为了建立油桐原生质体的瞬时转化体系,通过PEG介导法将拟南芥MGT6基因导入到油桐原生质体中,结果发现MGT6蛋白定位于原生质体质膜,与之前报道的研究结果一致,这表明本研究建立的油桐原生质体转化方法可成功将外源基因导入油桐原生质体并使其表达。【结论】建立油桐成熟叶片和组培苗幼叶叶肉细胞原生质体的高效分离方法,综合考虑取材的便利性和对后续原生质体培养的影响,建议以组培苗幼叶为材料分离原生质体,分离条件为纤维素酶浓度2%、离析酶浓度1%、甘露醇浓度0.7 mol·L-1、酶解时间6 h。在分离得到油桐叶肉细胞原生质体的基础上,本研究建立的PEG介导的原生质体遗传转化方法能以油桐叶肉细胞原生质体为受体,高效地将外源基因导入其中并使外源基因表达。本研究结果不仅可促进油桐基础研究的发展,在通过细胞融合和基因工程手段进行油桐种质创新方面也具有重要意义。

关键词：油桐原生质体制备遗传转化亚细胞定位

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海南省油茶及其他寄主植物果生刺盘孢菌群体遗传结构分析

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林业科学 2016年第10期52卷 80-88页

作者：李河李杨徐建平周国英森林有害生物防控湖南省重点实验室中南林业科技大学长沙410004 经济林培育与保护教育部重点实验室中南林业科技大学长沙410004

【目的】研究海南省油茶树及其他寄主植物炭疽病菌果生刺盘孢菌群体遗传结构、群体遗传多样性及单倍型地理分布,探索海南地区不同寄主植物炭疽病菌的分子遗传变异规律。【方法】利用单孢分离法对采集自海南省南圣镇、通什镇、枫木林场... 详细信息

【目的】研究海南省油茶树及其他寄主植物炭疽病菌果生刺盘孢菌群体遗传结构、群体遗传多样性及单倍型地理分布,探索海南地区不同寄主植物炭疽病菌的分子遗传变异规律。【方法】利用单孢分离法对采集自海南省南圣镇、通什镇、枫木林场和澄迈林场4个地区9种不同寄主植物的炭疽病病叶进行炭疽菌分离,并对每个菌株ITS,CAL和GAPDH 3个基因进行PCR扩增和测序,按顺序对3个基因的序列进行拼接,然后采用Gen ALEx6,Dna SP 5.0,TCS1.21和MEGA6.0软件分别对数据进行分析。【结果】分离、鉴定共获得12个病菌种群的108个果生刺盘孢菌病菌样品,可推导出18种单倍体型(haplotype),其中单倍型Haplotype11共70个菌株,为优势单倍型,在每个病菌种群中均有分布;单倍型网络结构分析表明,病原菌以单倍型Haplotype11为辐射中心,呈现出1个比较典型星状发散图,推测Haplotype11为原始单倍型;108株病菌表现出丰富的遗传多样性;AMOVA分析显示,种群间和种群内的遗传变异分别占总变异的3%和97%,变异主要存在种群内,而种群间的差异小,说明不同的寄主植物未对病菌交流造成隔离障碍;遗传分化和基因流分析发现,12个病菌种群间遗传分化小,种群间基因交流频繁;另外,油茶种群之间以及油茶与鲫鱼胆、葛根和山矾等植物种群之间的果生刺盘孢菌存在遗传重组现象;系统发育分析表明,来自同一个果生刺盘孢菌种群的单倍型未能聚在一起,而是散乱的分布在系统树中,没有显示出明显的寄主植物分布族群;核苷酸不配对分析表明病菌种群历史上并没有发生显著的种群扩张。【结论】海南省果生刺盘孢菌遗传多样性丰富,不同地区和不同寄主植物病菌种群之间存在有效基因流,揭示该病菌可以在油茶树及其他寄主植物之间迁移,这为整体考虑海南省油茶及其他寄主植物制定可持续控制油茶炭疽病策略提供重要的理论依据。

关键词：油茶寄主植物果生刺盘孢菌群体遗传结构

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油茶ETR基因鉴定及其在不同授粉处理下的表达分析

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植物生理学报 2020年第4期56卷 721-733页

作者：周俊琴卢梦琪余姝姝刘懿瑶杨进谭晓风中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室长沙410004

自交授粉后花粉管程序化死亡是植物自交不亲和的重要机制,乙烯在细胞程序化死亡过程中具有重要的调控作用。本研究以油茶(Camellia oleifera)良种‘华硕’为材料,通过逆转录PCR (RT-PCR)方法克隆出油茶乙烯受体蛋白(ETR)基因家族的3个成... 详细信息

自交授粉后花粉管程序化死亡是植物自交不亲和的重要机制,乙烯在细胞程序化死亡过程中具有重要的调控作用。本研究以油茶(Camellia oleifera)良种‘华硕’为材料,通过逆转录PCR (RT-PCR)方法克隆出油茶乙烯受体蛋白(ETR)基因家族的3个成员,分别命名CoETR1、CoETR2.1和CoETR2.2,基因编码区长度分别为2 220、2 292和2 292 bp,分别编码740、764和764个氨基酸,含有3~4个跨膜结构域。氨基酸比对和进化树分析结果表明, CoETR1与CoETR2.1、CoETR2.2同源性分别为53.4%、53.1%;三个蛋白与茶树(C. sinensis) ETR1、ETR2.1和ETR2.2的同源性分别为98.0%、98.8%和97.6%,与进化树分析结果一致。利用MEME在线工具对建树的3个蛋白进行保守基序(motif)的预测和分析,结果显示其中10个基序是ETR家族的保守基序, motif 13是ETR1的特征基序, motif 14是ETR2的特征基序。亚细胞定位分析表明三个基因均定位在内质网上。实时荧光定量PCR (qRT-PCR)结果显示自交授粉后36 h时, CoETR1、CoETR2.1和CoETR2.2在子房中表达量达到最高,且显著高于其他组合和时间段。本研究为进一步研究乙烯受体在油茶自交花粉管程序化死亡过程中的作用提供参考。

关键词：油茶自交不亲和乙烯受体亚细胞定位基因表达

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油茶低磷响应转录因子CoPHR1、CoPHR2基因的克隆与表达分析

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植物生理学报 2020年第4期56卷 827-836页

作者：张宸辉周俊琴卢梦琪袁军中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室长沙410004

本研究以油茶(Camellia oleifera)‘华金’扦插苗根系为材料,通过RT-PCR克隆出MYB-CC转录因子家族中2个编码磷饥饿信号关键调控因子的基因,分别命名为CoPHR1和CoPHR2,通过生物信息学手段对其序列的理化性质、结构与功能进行了预测和分... 详细信息

本研究以油茶(Camellia oleifera)‘华金’扦插苗根系为材料,通过RT-PCR克隆出MYB-CC转录因子家族中2个编码磷饥饿信号关键调控因子的基因,分别命名为CoPHR1和CoPHR2,通过生物信息学手段对其序列的理化性质、结构与功能进行了预测和分析。结果表明:2个基因编码序列(CDS)分别长879和939 bp,开放阅读框(ORF)分别为879和912bp,编码292和303个氨基酸。Blastx分析结果显示CoPHR1、CoPHR2与茶树(C. sinensis)、中国猕猴桃(Actinidia chinensis)的低磷响应转录因子(phosphate starvation response, PHR)氨基酸序列相似性最高,分别达88%和68%;其蛋白分子质量分别为31.74和33.50 kDa,理论等电点分别是6.39和6.46;两者均为不稳定的非分泌蛋白,二级结构则均以α螺旋和无规则卷曲为主。实时荧光定量PCR表明CoPHR1和CoPHR2在叶中的相对表达量均显著高于茎、根、根尖组织,且在老叶中受低磷诱导显著;亚细胞定位分析表明CoPHR1和CoPHR2所编码的蛋白质分别定位于细胞核与细胞膜。该研究结果拟为进一步了解油茶磷饥饿信号的调控途径提供重要依据。

关键词：油茶 PHR 低磷胁迫基因克隆亚细胞定位基因表达

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降香黄檀不同混交林土壤细菌多样性差异分析

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生态学报 2015年第24期35卷 8117-8127页

作者：杨菁周国英田媛媛刘倩丽刘成锋杨权周洁尘经济林培育与保护教育部重点实验室中南林业科技大学长沙410004

为探讨降香黄檀不同混交林土壤细菌的多样性及其与土壤性质的关系,应用高通量测序技术,比较降香黄檀(Dalbergia odorifera ***)分别与奥氏黄檀(Dalbergia oliveri)、大果紫檀(Pterocarpus macarocarpus)、檀香(Santalum album L.)和母生... 详细信息

为探讨降香黄檀不同混交林土壤细菌的多样性及其与土壤性质的关系,应用高通量测序技术,比较降香黄檀(Dalbergia odorifera ***)分别与奥氏黄檀(Dalbergia oliveri)、大果紫檀(Pterocarpus macarocarpus)、檀香(Santalum album L.)和母生(Homalium hainanense Gagnep.)混交的4种模式土壤细菌多样性,并结合土壤的理化、酶活进行了相关性分析。结果表明,14种混交林土壤的理化、酶活均存在差异。其中降香黄檀与檀香混交林土壤的含水量、有机质、全氮、有效钾和脲酶含量最高,分别为:5.24%、27.5 g/kg、0.85 mg/g、37.46 mg/kg和0.32 mg/kg,降香黄檀与大果紫檀混交林土壤的p H、有效磷和多酚氧化酶含量最高,分别为:4.48、6.04 mg/kg、4.19 mg/kg。2通过高通量测序表明四种混交模式土壤细菌的丰富度为:降香黄檀×檀香>降香黄檀×大果紫檀>降香黄檀×奥氏黄檀>降香黄檀×母生,土壤细菌多样性为:降香黄檀×大果紫檀>降香黄檀×奥氏黄檀>降香黄檀×檀香>降香黄檀×母生。其中,变形菌门、酸杆菌门、放线菌门、绿弯菌门和厚壁菌门为4种混交模式中的主要菌群。3经冗余分析和相关性分析表明,影响降香黄檀混交林土壤细菌群落结构和细菌多样性的主要土壤理化因子为:p H值、脲酶、多酚氧化酶和有机质。

关键词：降香黄檀混交林土壤细菌群落高通量测序多样性

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油茶自交、异交雌蕊脯氨酸含量及相关基因克隆表达分析

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植物生理学报 2020年第3期56卷 520-528页

作者：周俊琴渠心静卢梦琪余姝姝刘懿瑶杨进谭晓风中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室长沙410004

为研究脯氨酸在油茶(Camellia oleifera)授粉受精过程中的生理作用及相关基因的表达状况,本研究以油茶‘华鑫’为材料,通过反转录PCR (RT-PCR)方法分别克隆出油茶脯氨酸合成途径相关的2个关键基因,即Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因... 详细信息

为研究脯氨酸在油茶(Camellia oleifera)授粉受精过程中的生理作用及相关基因的表达状况,本研究以油茶‘华鑫’为材料,通过反转录PCR (RT-PCR)方法分别克隆出油茶脯氨酸合成途径相关的2个关键基因,即Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因和Δ1-吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)基因,以及脯氨酸分解途径相关的2个关键基因,即脯氨酸脱氢酶(ProDH)基因和Δ1-吡咯啉-5-羧酸脱氢酶(P5CDH)基因。克隆的4个基因分别被命名为Co P5CS、Co P5CR、Co Pro DH和Co P5CDH,基因编码区长度分别为2 154、834、1 656和1 473 bp,分别编码538、277、511和490个氨基酸。进化树分析表明, 4个蛋白彼此间的同源性较低,而与茶树(C. sinensis)对应蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明:CoP5CS和CoP5CR在自异交2~96 h期间表达趋势基本一致,在授粉后36h达到最高值,自交授粉表达量明显高于异交授粉;CoP5CDH和CoProDH在授粉后0~36 h期间呈现明显下降的趋势,在36~60 h期间表达量基本没有变化,授粉后60 h有明显上升的趋势。自异交雌蕊游离脯氨酸的含量都在授粉后36 h达到最高值,自交雌蕊脯氨酸含量是异交的1.56倍,表明脯氨酸可能参与了油茶自交花粉管死亡的过程。该研究结果不仅为油茶自交不亲和机制提供新的参考材料,还拟为提高油茶坐果率提供理论支撑。

关键词：油茶自交不亲和脯氨酸雌蕊杂交

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“三华油茶”的选育与推广应用

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林业科学 2024年第11期60卷 199-202页

作者：谭晓风袁军李泽李建安经济林培育与保护教育部重点实验室、经济林育种与栽培国家林业和草原局重点实验室、中南林业科技大学油茶研究院、中南林业科技大学长沙410004

【目的】选育出高产、稳产、抗逆性强、适宜机械化栽培的大果油茶品种,为油茶产业高质量发展提供新一代良种。【方法】20世纪80年代初中期,从油茶中心产区湖南省茶陵县选择14个油茶优良单株,与来自全国初步筛选出的70个参试油茶优良无... 详细信息

【目的】选育出高产、稳产、抗逆性强、适宜机械化栽培的大果油茶品种,为油茶产业高质量发展提供新一代良种。【方法】20世纪80年代初中期,从油茶中心产区湖南省茶陵县选择14个油茶优良单株,与来自全国初步筛选出的70个参试油茶优良无性系共建立84个无性系品比试验林,试验设计为每小区10株、3次重复。2006年后对各无性系进行连续3年的测产、经济性状分析和评价。【结果】2008年从84个优良无性系中筛选出原产地均为茶陵县的3个大果油茶品种‘华鑫’‘华金’和‘华硕’,与其他无性系相比果实大、产量高、产量稳、适应性强、易识别、生产成本低、适合机械化作业和采收、品种配置简单高效。【结论】‘华鑫’‘华金’和‘华硕’3个无性系2009年通过国家级林木品种审定。2021年再次通过国家级林木品种扩大范围审定,同年被国家林业和草原局列为全国16个油茶主推品种。现已在湖南、江西、广西、广东、湖北、河南、四川等省(区、市)广泛推广应用,有力促进了我国油茶良种的更新换代和油茶产业的高质量发展。

关键词：油茶华鑫华金华硕良种选育推广应用

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