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植物生理学报 2020年第4期56卷 827-836页

作者：张宸辉周俊琴卢梦琪袁军中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室长沙410004

本研究以油茶(Camellia oleifera)‘华金’扦插苗根系为材料,通过RT-PCR克隆出MYB-CC转录因子家族中2个编码磷饥饿信号关键调控因子的基因,分别命名为CoPHR1和CoPHR2,通过生物信息学手段对其序列的理化性质、结构与功能进行了预测和分... 详细信息

本研究以油茶(Camellia oleifera)‘华金’扦插苗根系为材料,通过RT-PCR克隆出MYB-CC转录因子家族中2个编码磷饥饿信号关键调控因子的基因,分别命名为CoPHR1和CoPHR2,通过生物信息学手段对其序列的理化性质、结构与功能进行了预测和分析。结果表明:2个基因编码序列(CDS)分别长879和939 bp,开放阅读框(ORF)分别为879和912bp,编码292和303个氨基酸。Blastx分析结果显示CoPHR1、CoPHR2与茶树(C. sinensis)、中国猕猴桃(Actinidia chinensis)的低磷响应转录因子(phosphate starvation response, PHR)氨基酸序列相似性最高,分别达88%和68%;其蛋白分子质量分别为31.74和33.50 kDa,理论等电点分别是6.39和6.46;两者均为不稳定的非分泌蛋白,二级结构则均以α螺旋和无规则卷曲为主。实时荧光定量PCR表明CoPHR1和CoPHR2在叶中的相对表达量均显著高于茎、根、根尖组织,且在老叶中受低磷诱导显著;亚细胞定位分析表明CoPHR1和CoPHR2所编码的蛋白质分别定位于细胞核与细胞膜。该研究结果拟为进一步了解油茶磷饥饿信号的调控途径提供重要依据。

关键词：油茶 PHR 低磷胁迫基因克隆亚细胞定位基因表达

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降香黄檀不同混交林土壤细菌多样性差异分析

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生态学报 2015年第24期35卷 8117-8127页

作者：杨菁周国英田媛媛刘倩丽刘成锋杨权周洁尘经济林培育与保护教育部重点实验室中南林业科技大学长沙410004

为探讨降香黄檀不同混交林土壤细菌的多样性及其与土壤性质的关系,应用高通量测序技术,比较降香黄檀(Dalbergia odorifera ***)分别与奥氏黄檀(Dalbergia oliveri)、大果紫檀(Pterocarpus macarocarpus)、檀香(Santalum album L.)和母生... 详细信息

为探讨降香黄檀不同混交林土壤细菌的多样性及其与土壤性质的关系,应用高通量测序技术,比较降香黄檀(Dalbergia odorifera ***)分别与奥氏黄檀(Dalbergia oliveri)、大果紫檀(Pterocarpus macarocarpus)、檀香(Santalum album L.)和母生(Homalium hainanense Gagnep.)混交的4种模式土壤细菌多样性,并结合土壤的理化、酶活进行了相关性分析。结果表明,14种混交林土壤的理化、酶活均存在差异。其中降香黄檀与檀香混交林土壤的含水量、有机质、全氮、有效钾和脲酶含量最高,分别为:5.24%、27.5 g/kg、0.85 mg/g、37.46 mg/kg和0.32 mg/kg,降香黄檀与大果紫檀混交林土壤的p H、有效磷和多酚氧化酶含量最高,分别为:4.48、6.04 mg/kg、4.19 mg/kg。2通过高通量测序表明四种混交模式土壤细菌的丰富度为:降香黄檀×檀香>降香黄檀×大果紫檀>降香黄檀×奥氏黄檀>降香黄檀×母生,土壤细菌多样性为:降香黄檀×大果紫檀>降香黄檀×奥氏黄檀>降香黄檀×檀香>降香黄檀×母生。其中,变形菌门、酸杆菌门、放线菌门、绿弯菌门和厚壁菌门为4种混交模式中的主要菌群。3经冗余分析和相关性分析表明,影响降香黄檀混交林土壤细菌群落结构和细菌多样性的主要土壤理化因子为:p H值、脲酶、多酚氧化酶和有机质。

关键词：降香黄檀混交林土壤细菌群落高通量测序多样性

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油茶自交、异交雌蕊脯氨酸含量及相关基因克隆表达分析

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植物生理学报 2020年第3期56卷 520-528页

作者：周俊琴渠心静卢梦琪余姝姝刘懿瑶杨进谭晓风中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室长沙410004

为研究脯氨酸在油茶(Camellia oleifera)授粉受精过程中的生理作用及相关基因的表达状况,本研究以油茶‘华鑫’为材料,通过反转录PCR (RT-PCR)方法分别克隆出油茶脯氨酸合成途径相关的2个关键基因,即Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因... 详细信息

为研究脯氨酸在油茶(Camellia oleifera)授粉受精过程中的生理作用及相关基因的表达状况,本研究以油茶‘华鑫’为材料,通过反转录PCR (RT-PCR)方法分别克隆出油茶脯氨酸合成途径相关的2个关键基因,即Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因和Δ1-吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)基因,以及脯氨酸分解途径相关的2个关键基因,即脯氨酸脱氢酶(ProDH)基因和Δ1-吡咯啉-5-羧酸脱氢酶(P5CDH)基因。克隆的4个基因分别被命名为Co P5CS、Co P5CR、Co Pro DH和Co P5CDH,基因编码区长度分别为2 154、834、1 656和1 473 bp,分别编码538、277、511和490个氨基酸。进化树分析表明, 4个蛋白彼此间的同源性较低,而与茶树(C. sinensis)对应蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明:CoP5CS和CoP5CR在自异交2~96 h期间表达趋势基本一致,在授粉后36h达到最高值,自交授粉表达量明显高于异交授粉;CoP5CDH和CoProDH在授粉后0~36 h期间呈现明显下降的趋势,在36~60 h期间表达量基本没有变化,授粉后60 h有明显上升的趋势。自异交雌蕊游离脯氨酸的含量都在授粉后36 h达到最高值,自交雌蕊脯氨酸含量是异交的1.56倍,表明脯氨酸可能参与了油茶自交花粉管死亡的过程。该研究结果不仅为油茶自交不亲和机制提供新的参考材料,还拟为提高油茶坐果率提供理论支撑。

关键词：油茶自交不亲和脯氨酸雌蕊杂交

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油桐LACS4和LACS8基因克隆及其表达分析

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植物生理学报 2015年第11期51卷 1982-1990页

作者：李捷宇龙洪旭张琳王哲李泽谭晓风中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室长沙410004

以油桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐长链脂酰辅酶A合成酶基因家族的两个成员的全长cDNA序列,分别命名为VfLACS4(Gen Bank登录号:KP996689)和VfLACS8(Gen Bank登录号:KT362743),通过实... 详细信息

以油桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐长链脂酰辅酶A合成酶基因家族的两个成员的全长cDNA序列,分别命名为VfLACS4(Gen Bank登录号:KP996689)和VfLACS8(Gen Bank登录号:KT362743),通过实时定量PCR的方法检测了不同组织部位和种子不同发育时期该基因的表达水平,并采用索式提取法测定了种子发育时期的油脂含量。结果表明:VfLACS4的CDS长度为1 989 bp,编码662个氨基酸,与其他物种的LACS4氨基酸序列具有较高的相似性,其中与蓖麻的LACS4相似性最高;VfLACS8的CDS长度为2 199 bp,编码732个氨基酸,与麻疯树和蓖麻的LACS8具有较高的相似性;实时定量RT-PCR结果表明VfLACS4基因在花、茎、叶和根中均有少量表达,并在种子发育的10月10日表达量达到最大;VfLACS8基因在种子、花、茎、叶和根中均有一定量的表达,在雌蕊中的表达量最高;油桐种子发育过程中的油脂积累呈现出"S"型,Vf LACS8基因的在发育种子中的表达模式与之相一致,推测VfLACS8基因与种子发育过程中的油脂积累相关。

关键词：油桐 LACS4 LACS8 基因克隆基因表达

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油桐花序石蜡切片制作方法改良

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中南林业科技大学学报 2020年第3期40卷 53-59页

作者：付盼李文莹刘美兰李静张琳中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室

【目的】为了获得利用石蜡切片方法观察油桐花芽形成和分化的整个过程的最佳效果,探索针对油桐花序的石蜡切片方法。【方法】以横纵径1 cm左右的油桐花序为实验材料,针对材料处理、脱水、透明、浸蜡、包埋、染色等传统石蜡制片步骤进行... 详细信息

【目的】为了获得利用石蜡切片方法观察油桐花芽形成和分化的整个过程的最佳效果,探索针对油桐花序的石蜡切片方法。【方法】以横纵径1 cm左右的油桐花序为实验材料,针对材料处理、脱水、透明、浸蜡、包埋、染色等传统石蜡制片步骤进行改良。【结果】1)保持样品结构不变的情况除去多余苞片、分支以及密实缠绕在小花萼片外的绒毛,使得药液和蜡液更易进入材料内部,避免了由于油桐花序苞片紧实,绒毛极多所导致的脱水、浸蜡不充分等现象;2)改良后的乙醇脱水时间缩短了1 h,并且材料脱水充分,避免了因脱水透明时间过长引起的材料变硬变脆,保证了石蜡可以与材料形成密不可分的整体,切片时能得到完整和连续的蜡带;3)延长浸蜡时间为1 d,保证大体积材料也能浸蜡充分,包埋过程选择在恒温烘箱中进行,保证器械与材料温度一致,避免了两者产生温差导致材料中产生气泡的不良现象,保证材料的完整性。染色后的切片细胞核颜色红亮鲜艳,核质分明,细胞间轮廓清晰,不论是花序的整体形态结构,还是不同组织的细胞结构,均清晰可见。【结论】通过对传统制作石蜡切片方法进行改良有效地解决了油桐花序石蜡切片制作过程中由于其复杂的花序结构及其分泌物质而引起的不良效果以及脱水过度、浸蜡不充分而导致的材料结构不完整、切片易碎等问题,获得了完整连续的蜡带以及结构完整、染色清晰的油桐花序切片。以期望该方法为研究油桐花芽分化及雌雄花发育的细胞学特征提供良好的技术支撑,为快速高效批量制作油桐花序石蜡切片提供了质量保证,同时也为花序结构复杂、外部密披绒毛树种的石蜡切片制作提供参考。

关键词：油桐花序石蜡切片方法改良

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修剪强度对锥栗叶片生理及产量的影响

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植物生理学报 2017年第2期53卷 264-272页

作者：王刚袁德义邹锋熊欢朱周俊刘智强欧阳芬中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室长沙410004

为探究锥栗树体合理的修剪强度,以7年生‘华栗3号’锥栗为试材,通过轻修剪(15%修剪量)、中修剪(30%修剪量)、重修剪(45%修剪量)和不修剪(对照)处理,研究了不同修剪强度对锥栗叶片质量、矿质元素含量和光合作用以及产量的影响。结果表明... 详细信息

为探究锥栗树体合理的修剪强度,以7年生‘华栗3号’锥栗为试材,通过轻修剪(15%修剪量)、中修剪(30%修剪量)、重修剪(45%修剪量)和不修剪(对照)处理,研究了不同修剪强度对锥栗叶片质量、矿质元素含量和光合作用以及产量的影响。结果表明,不同修剪强度对锥栗不同冠层叶片质量影响不同,其中中修剪综合效果最好,在冠层上部,其单叶面积最大为72.92 cm^2,比对照增加了18.38%;在树冠中部和下部,叶片厚度均显著大于轻修剪和对照处理;中修剪的冠层下部叶片SPAD值分别较重修剪、轻修剪和对照增加4.27%、8.05%和8.29%。中修剪处理显著提高了叶片中N、P、K和Ca含量,但中修剪与重修剪Ca含量差异不显著,重修剪叶片Ca含量最高为35.56 mg·g-1。中修剪的冠层上部叶片的净光合速率为12.85μmol·m^(-2)·s^(-1)、蒸腾速率为3.75 mmol·m^(-2)·s^(-1)和气孔导度为0.18 mmol·m^(-2)·s^(-1),都是最高,较对照分别增加了20.3%、12.3%和20.0%;重修剪冠层上部胞间CO2浓度较对照处理降低了2.32%。锥栗不同修剪强度的光合参数差异显著,中修剪锥栗树体叶片的最大光合速率、光饱和点和羧化效率显著高于其他处理,而光补偿点和暗呼吸速率显著低于其他处理。中修剪处理锥栗单株产量最高为10.25 kg,分别较重修剪、轻修剪与对照提高了9.58%、10.96%和21.61%,而重修剪处理单果重最高为7.76 g。综上,中修剪较其他处理能显著提高锥栗叶片质量与光合能力及产量,为锥栗结果期适宜的修剪强度。

关键词：锥栗修剪叶片质量光合特性产量

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植物长链脂酰辅酶A合成酶研究进展

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植物生理学报 2017年第7期53卷 1185-1191页

作者：吕佳斌谭晓风龙洪旭李泽刘美兰中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室长沙410004

长链脂酰辅酶A合成酶[long-chain acyl-coenzyme A(CoA) synthetase,LACS]在脂肪酸合成代谢和分解代谢中具有重要的作用,可催化游离脂肪酸形成相应脂酰辅酶A,进入其代谢途径。本文对LACS的作用功能、酶学特性、底物选择性及当前相关研... 详细信息

长链脂酰辅酶A合成酶[long-chain acyl-coenzyme A(CoA) synthetase,LACS]在脂肪酸合成代谢和分解代谢中具有重要的作用,可催化游离脂肪酸形成相应脂酰辅酶A,进入其代谢途径。本文对LACS的作用功能、酶学特性、底物选择性及当前相关研究进展等方面进行了综述与总结,并对今后研究的重点和方向进行了展望。

关键词：脂肪酸代谢长链脂酰辅酶A合成酶研究进展植物

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油桐乙醛脱氢酶基因ALDH2B4和ALDH2B7的克隆与表达分析

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植物生理学报 2017年第8期53卷 1459-1467页

作者：刘美兰华园榕龙洪旭吕佳斌谭晓风中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室长沙410004

本研究运用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术,从油桐(Vernicia fordii)近成熟种子中克隆了油桐乙醛脱氢酶基因家族两个成员的全长编码序列(CDS),命名为VfALDH2B4和VfALDH2B7,NCBI登记号分别为MF179125和MF179126,CDS长度分别为1 617和1 626 bp,分别编码538和541个氨基酸。通过蛋白结构分析发现这两个蛋白均含有乙醛脱氢酶基因家族特有的保守结构域,且两个蛋白都与麻疯树(Jatropha curcas)的ALDH2B4和ALDH2B7亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析表明,这两个基因在油桐各组织器官中均有表达,其中VfALDH2B4在嫩叶的表达量最高,是其他组织的21倍左右,而f ALDH2B7在花瓣的表达量最高,是其他组织的62倍左右;在油桐种子不同发育时期,两个基因的表达也存在明显差异。此外,两个基因表达还受高盐、干旱和脱落酸调控,它们可能在油桐逆境胁迫应答和脱落酸信号途径中发挥作用。

关键词：油桐乙醛脱氢酶系统进化表达分析非生物胁迫

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果生刺盘孢Crz1基因对DMI类杀菌剂抗性、外界胁迫应答、附着胞形成和致病力的影响

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植物保护学报 2023年第1期50卷 231-239页

作者：马梦婷李河中南林业科技大学林学院经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室长沙410004

为明确钙调磷酸酶应答锌指转录因子1(calcineurin responsive zinc finger transcription factor 1,Crz1)在果生刺盘孢Colletotrichumfructicola中的生物学功能,进而有效防控油茶炭疽病,该研究构建果生刺盘孢Crz1基因敲除突变体ΔCfcrz1和回补菌株ΔCfcrz1/Crz1,并测定突变体ΔCfcrz1、回补菌株ΔCfcrz1/Crz1和野生型菌株的生长发育、附着胞形成、外界胁迫应答、致病力以及对唑类杀菌剂的敏感性。结果显示,果生刺盘孢Crz1蛋白氨基酸序列与暹罗刺盘孢***的同源性最高,支持率高达100%;在马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)和基本培养基上,野生型菌株、回补菌株ΔCfcrz1/Crz1和突变体ΔCfcrz1的菌落直径分别为5.7、5.5、5.1 cm和5.3、5.1、2.8 cm,突变体ΔCfcrz1菌丝直径均极显著低于其他2株菌株;在含CaCl2和二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)的PDA培养基上,突变体ΔCfcrz1菌丝生长抑制率分别为100.0%和46.3%,极显著高于其他2株菌株;突变体ΔCfcrz1形成的分生孢子量和附着胞形成率分别为7.2×105个/mL和17.3%,极显著小于其他2株菌株;突变体ΔCfcrz1对油茶叶的致病力明显减弱,病斑直径仅为0.06 cm,极显著低于其他2株菌株;当抑霉唑浓度大于0.1μg/mL、苯醚甲环唑浓度大于0.5μg/mL、三唑酮浓度大于4μg/mL、戊唑醇浓度大于0.5μg/mL时,突变体ΔCfcrz1菌丝生长抑制率分别大于34%、80%、39%和22%,极显著高于野生型菌株和回补菌株ΔCfcrz1/Crz1。表明转录因子Crz 1参与调控油茶果生刺盘孢的生长、产孢、外界胁迫应答、致病力和对DMI类杀菌剂的抗性。

关键词：油茶果生刺盘孢杀菌剂致病力胁迫响应

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油桐种仁不饱和脂肪酸合成途径解析

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植物生理学报 2016年第10期52卷 1512-1518页

作者：陈昊谭晓风中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室长沙410004

油桐是我国重要的木本油料植物,过去对油桐的研究主要集中于栽培和常规育种,与油桐种仁油脂合成相关的分子机理研究还未见报道。本研究在油桐种仁油脂合成期的转录组数据基础上,通过生物信息学方法,将不饱和脂肪酸生物合成途径中的45条U... 详细信息

油桐是我国重要的木本油料植物,过去对油桐的研究主要集中于栽培和常规育种,与油桐种仁油脂合成相关的分子机理研究还未见报道。本研究在油桐种仁油脂合成期的转录组数据基础上,通过生物信息学方法,将不饱和脂肪酸生物合成途径中的45条Unigene序列在KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库中进行比对,获得了12个关键酶的同源蛋白质并对编码这些同源蛋白质的基因在油桐种仁油脂合成期的表达模式进行了分析。通过数据分析,本研究初步推导了油桐种仁不饱和脂肪酸合成途径,这将为油桐油脂合成,尤其是α-桐酸形成机理的解析奠定基础,并为进一步的理论研究和油桐的遗传改良提供潜在的基因资源。

关键词：油桐(Vernicia fordii) RNA-Seq 不饱和脂肪酸基因挖掘代谢途径

来源：评论

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