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全国第二十次银杏学术研讨会

作者：程华袁红慧李琳玲廖咏玲程水源经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室湖北黄冈438000 黄冈师范学院化学与生命科学学院湖北黄冈438000 经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室湖北黄冈438000

为更深入研究银杏MECT基因启动子的结构及功能特点,以前期获得的银杏MECT基因的cDNA序列为模板,通过设计特异性引物及采用染色体步移方法从银杏基因组中克隆到GbMECT翻译起始位点上游982bp的启动子序列.生物信息学分析表明,该启动子序... 详细信息

为更深入研究银杏MECT基因启动子的结构及功能特点,以前期获得的银杏MECT基因的cDNA序列为模板,通过设计特异性引物及采用染色体步移方法从银杏基因组中克隆到GbMECT翻译起始位点上游982bp的启动子序列.生物信息学分析表明,该启动子序列中含有多种类型的顺式作用元件,主要有典型的光响应调节元件、激素响应调控元件及抗病虫害响应元件TGTCA序列,抗损伤应答元件ERF3(TGACY)和高温胁迫应答元件HSE-motif(CCAAT)等与抗逆境胁迫相关的调节元件.此外,在该启动子片段中还含有氧胁迫和铜离子响应元件、淀粉酶响应元件等其他类型的作用元件,充分体现了启动子对基因表达调控具有转录水平上的高效性和复杂性的特点.

关键词：银杏 MECT基因启动子序列染色体步移调控元件

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板栗IFRs启动子分离及表达载体构建

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北方园艺 2017年第11期 107-114页

作者：李琳玲陈小玲袁红慧程水源程华经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室湖北黄冈438000 大别山特色资源开发湖北省协同创新中心湖北黄冈438000 武汉轻工大学生物与制药工程学院湖北武汉430023

以湖北省罗田板栗品种乌壳栗为试材,采用染色体步移的方法获得了板栗IFR启动子序列,研究了板栗黄酮代谢途径中关键基因IFR的启动子顺式作用原件及可能对雄花黄酮类物质合成的影响,并构建pCAMBIA1304融合载体。以期揭示板栗雄花黄酮代谢... 详细信息

以湖北省罗田板栗品种乌壳栗为试材,采用染色体步移的方法获得了板栗IFR启动子序列,研究了板栗黄酮代谢途径中关键基因IFR的启动子顺式作用原件及可能对雄花黄酮类物质合成的影响,并构建pCAMBIA1304融合载体。以期揭示板栗雄花黄酮代谢合成途径,IFRs启动子上游所包含的顺式元件对环境和栽培措施的响应及对板栗雄花发育的影响。结果表明:长度为1 688bp的板栗IFRs启动子序列包含多种类型的顺式作用元件,包括光响应元件GT-1motif、ASF-1motif等;与赤霉素,脱落酸、乙烯等相关的激素响应元件,如WRKY motif(赤霉素信号途径转录因子)、GCC-box(乙烯应答元件)以及Dc3(脱落酸响应元件)等;逆境胁迫相关的功能元件,如与抗损伤相关的ERF3、抗病相关的TGTCA-box等。以此推测,CmIFR基因的表达可能会受到以上光、激素、各种生物或者非生物胁迫等因素的影响。为了后期进一步研究启动子的功能,按照启动子功能区域,设计了CmIFR启动子不同长度的6个功能片段,并将这些片段替换pCAMBIA1304中的35S启动子,成功构建了由CmIFRPs启动子不同区域驱动的gus基因的植物表达载体pCAMBIA1304+CmIFRPs。

关键词：板栗黄酮 IFR 调控元件表达载体构建

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银杏组织培养的多因子正交试验研究

银杏组织培养的多因子正交试验研究

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全国第十九次银杏学术研讨会

作者：李琳玲袁红慧程华姜德志吴聪华程水源经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室湖北黄冈438000 黄冈师范学院化学与生命科学学院湖北黄冈43800 经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室湖北黄冈438000

试验以MS培养基为基本培养基,选用银杏幼胚为试验材料,采用L9(34)正交设计分析比较了2,4-D,6-BA,酸水解酪蛋白(CH)3种不同因素及其组合对银杏愈伤组织培养的影响.试验结果从银杏愈伤组织的诱导、愈伤组织的生长以及愈伤组织的褐化等几... 详细信息

试验以MS培养基为基本培养基,选用银杏幼胚为试验材料,采用L9(34)正交设计分析比较了2,4-D,6-BA,酸水解酪蛋白(CH)3种不同因素及其组合对银杏愈伤组织培养的影响.试验结果从银杏愈伤组织的诱导、愈伤组织的生长以及愈伤组织的褐化等几个方面进行了分析比较,测定指标依次为愈伤组织的诱导率、愈伤组织的增重量、愈伤组织的褐化率.依次经直观分析、方差分析和主因素效应的多重比较后进行综合评价,确定银杏愈伤组织诱导及生长的最优培养基均为MS+1.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA+500mg/L CH.

关键词：银杏愈伤组织植物生长调节物质培养体系

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栎掌舟蛾成虫内生殖系统的形态结构

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蚕业科学 2014年第6期40卷 1122-1125页

作者：郭宁肖云丽钟玉林徐艳霞晏绍良杨勤跃经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室大别山特色资源开发湖北省协同创新中心黄冈师范学院生命科学学院湖北黄冈438000 湖北省罗田县林业局湖北罗田436600

栎掌舟蛾Phalera assimilis是栎属植物的主要食叶害虫之一。明确栎掌舟蛾成虫内生殖系统的组成结构对丰富其形态学分类特征及生殖生理和防控策略研究均具有重要意义。解剖观察栎掌舟蛾成虫的内生殖系统组成结构如下：雄性内生殖系统包括... 详细信息

栎掌舟蛾Phalera assimilis是栎属植物的主要食叶害虫之一。明确栎掌舟蛾成虫内生殖系统的组成结构对丰富其形态学分类特征及生殖生理和防控策略研究均具有重要意义。解剖观察栎掌舟蛾成虫的内生殖系统组成结构如下：雄性内生殖系统包括1对精巢（睾丸）,2个贮精囊,2根输精管,2根复射精管,1对附腺和单射精管;雌性内生殖系统由1对卵巢、2根侧输卵管、中输卵管、受精囊、附腺、外生殖腔及产卵孔组成,每个卵巢具4个卵巢管,内含可辨卵粒120~360粒。另观察到羽化第1天的雌成虫卵巢管内充满发育成熟的卵粒,雄成虫精巢、储精囊和复射精管膨胀充满白色内容物,使成虫羽化后可迅速交尾和产卵,并且雌成虫的产卵量高,这也是栎掌舟蛾易暴发危害的直接因素之一。

关键词：柞树害虫栎掌舟蛾内生殖系统解剖结构

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罗田栗实致腐真菌的分离鉴定及拮抗菌筛选

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中国农学通报 2013年第25期29卷 102-107页

作者：华娟李淋玲程华程水源经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室湖北黄冈438000 武汉工程大学化工与制药学院武汉430074

为了探索生物防治板栗腐烂病的方法,采用组织分离法从罗田栗实中分离纯化致腐真菌并对其进行形态学观察,通过rDNA ITS序列同源性比对及聚类分析对病原菌进行分子鉴定,并利用平板对峙法筛选抗板栗腐烂病的拮抗菌。结果表明:分离的真菌经... 详细信息

为了探索生物防治板栗腐烂病的方法,采用组织分离法从罗田栗实中分离纯化致腐真菌并对其进行形态学观察,通过rDNA ITS序列同源性比对及聚类分析对病原菌进行分子鉴定,并利用平板对峙法筛选抗板栗腐烂病的拮抗菌。结果表明:分离的真菌经鉴定分属11个种,其中4种菌在霉变栗实上占优势,分别是匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)、栗疫菌(Cryphonectria parasitica)、扩展青霉(Penicillium expansum)、黑曲霉(Aspergillus niger),且栗疫菌(Cryphonectria parasitica)和扩展青霉(Penicillium expansum)的分离率最高,供筛的拮抗细菌中有3株对板栗优势致腐真菌有抑制作用,其中荧光假单孢杆菌对板栗优势致腐真菌中的栗疫菌和青霉菌的抑制圈直径超过10 mm。

关键词：罗田板栗致腐真菌分离鉴定 ITS区

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拟点洛瘤蛾幼虫和蛹的形态及取食为害

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环境昆虫学报 2018年第5期40卷 1197-1200页

作者：肖云丽韩辉林汪玉平钟玉林经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室大别山特色资源开发湖北省协同创新中心黄冈师范学院湖北黄冈438000 东北林业大学林学院哈尔滨150040

首次记述了拟点洛瘤蛾Meganola suffusata (Wileman&West,1929)幼虫和蛹的形态特征,拍摄了幼虫和蛹的形态与生活特征图,并初步记述了幼虫在寄主植物板栗树上的取食为害。

关键词：拟点洛瘤蛾幼虫蛹为害习性板栗

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板栗MADS-box基因的分离及RNAi表达载体构建

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北方园艺 2014年第24期 92-98页

作者：李琳玲廖志琴陈小玲程水源程华经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室湖北黄冈438000 黄冈师范学院生命科学学院湖北黄冈438000 武汉轻工大学生物与制药工程学院湖北武汉430023

以中国罗田板栗品种"玫瑰红"的幼叶和花为试材,采用EST数据库分析,结合RACE技术从板栗中分离到MADS基因的cDNA全长序列并构建了其RNA干扰载体,研究开花关键基因对板栗花芽分化的影响。结果表明:CmMADS基因全长为922bp的CmMADS... 详细信息

以中国罗田板栗品种"玫瑰红"的幼叶和花为试材,采用EST数据库分析,结合RACE技术从板栗中分离到MADS基因的cDNA全长序列并构建了其RNA干扰载体,研究开花关键基因对板栗花芽分化的影响。结果表明:CmMADS基因全长为922bp的CmMADS的cDNA序列,该序列含有1个681bp的可读框,编码227个氨基酸序列。生物信息学预测CmMADS蛋白的分子质量为25.87kDa,理论等电点为6.27,N端具有M盒保守序列,其二级结构主要由α?螺旋和无规则卷曲组成。蛋白质同源分析表明,CmMADS含有M盒和K盒2个特征性序列区域。同源建模分析显示CmMADS序列与苹果MADS蛋白的三维结构及活性位点高度相似。系统进化分析表明,板栗MADS蛋白归属植物进化分支,且与太行花的MADS蛋白归为一支。将CmMADS基因2段相同长度(283bp)的反向互补片段RMADS和FMADS连入载体pBluescript SK plus,构成中间载体pBluescript SK plus-FR。用BanHI和KpnI同时酶切中间载体pBluescript SK plus-FR和植物表达载体pCl301-ubi,回收pBluescript SK plus-FR的酶切小片段,连入pC1301-ubi大片段中,构成植物表达载体pC1301-ubi-CmMADS-RNAi。下一步拟用构建好的RNA干扰载体转化农杆菌并由其介导将重组质粒转入烟草,为深入研究该干扰载体的功能及CmMADS基因的功能提供参考。

关键词：板栗 MADS-box基因开花成熟期

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正交试验优选反枝苋总黄酮的提取工艺

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湖北农业科学 2013年第19期52卷 4748-4750页

作者：何先元李金梅项俊刘春梅经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室/黄冈师范学院化学与生命科学学院湖北黄冈438000 重庆医科大学中医药学院重庆401331

为优选反枝苋(Amaranthus retroflexus L.)中总黄酮的最佳提取工艺,试验以芦丁为标准品计算反枝苋中总黄酮的含量,通过正交试验考察不同因素和水平对提取工艺的影响。结果表明,反枝苋中总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度50%,料液比1∶15,... 详细信息

为优选反枝苋(Amaranthus retroflexus L.)中总黄酮的最佳提取工艺,试验以芦丁为标准品计算反枝苋中总黄酮的含量,通过正交试验考察不同因素和水平对提取工艺的影响。结果表明,反枝苋中总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度50%,料液比1∶15,水溶回流法提取3次,每次提取1.5 h。该工艺合理、简单,适用于反枝苋总黄酮的提取,可为该资源的利用提供参考。

关键词：反枝苋(Amaranthus retroflexus L ) 总黄酮正交试验提取工艺

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新形势下的林木平衡施肥技术研究

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湖北林业科技 2016年第3期45卷 1-4页

作者：李金柱湖北省林业科学研究院武汉430075 经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室武汉430075

本文简要介绍了林木平衡施肥的概念,对林木平衡施肥日期、施肥种类、肥料配比、施肥量进行了综述分析,结合当前肥料应用现状,提出了新形势下林木平衡施肥的三项措施。

关键词：林木平衡施肥研究进展

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银杏GbMYBF2启动子克隆及序列分析

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贵州农业科学 2014年第4期42卷 16-20页

作者：许锋孙楠楠张威威程水源李先兵徐卫长江大学园艺园林学院湖北荆州434025 黄冈师范学院经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室湖北黄冈438000 荆州市土肥站湖北荆州434020 荆州市农业局湖北荆州434020

为研究MYB转录因子在银杏(Ginkgo biloba)类黄酮代谢中的功能,根据银杏GbMYBF2转录因子基因的mRNA序列,通过染色体步移技术(Genome Walking)从银杏基因组DNA中克隆GbMYBF2启动子并进行序列分析。结果表明:成功克隆长度为773bp的GbMYBF2... 详细信息

为研究MYB转录因子在银杏(Ginkgo biloba)类黄酮代谢中的功能,根据银杏GbMYBF2转录因子基因的mRNA序列,通过染色体步移技术(Genome Walking)从银杏基因组DNA中克隆GbMYBF2启动子并进行序列分析。结果表明:成功克隆长度为773bp的GbMYBF2基因的5′调控区片段,该序列元件包含植物启动子必需的核心元件CAAT-box和TATA box,还具有赤霉素响应元件以及大量光顺式作用元件和逆境胁迫相关的顺式调控元件。

关键词：银杏转录因子 GbMYBF2启动子顺式作用元件

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