检索结果-内蒙古大学图书馆

生物医学工程学杂志 2010年第1期27卷 211-214页

作者：唐新燕杨力宋国立重庆大学生物工程学院重庆400044 美国加州大学圣迭亚哥分校骨科与生物工程系

一氧化氮(nitric oxide,NO)是一个半衰期极短的自由基生物小分子,广泛存在于生物体内。20多年前NO就被发现在血管、神经和免疫方面有着重要的调节功能。随后的研究进一步证实,NO在伤口修复和愈合中也发挥着重要的生物学作用,主要体现在... 详细信息

一氧化氮(nitric oxide,NO)是一个半衰期极短的自由基生物小分子,广泛存在于生物体内。20多年前NO就被发现在血管、神经和免疫方面有着重要的调节功能。随后的研究进一步证实,NO在伤口修复和愈合中也发挥着重要的生物学作用,主要体现在伤口修复愈合的几个过程中:炎症期、细胞增殖期、细胞外基质贮存和重建期。本文综述了近年来体内、体外研究中NO在伤口修复方面的作用进展,对NO在伤口修复中的生物学作用和机制进行了概述,并提出今后NO在伤口修复中的应用前景。

关键词：一氧化氮伤口修复生物学作用

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人膝关节内侧副韧带细胞在力学牵张下的mRNA差异显示

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中华骨科杂志 2001年第7期21卷 417-420页

作者：马庆军党耕町 J Kim K-L Paul Sung 北京大学第三医院骨科 100083 美国加州大学圣迭戈分校骨科与生物工程系

目的用mRNA差异显示技术观察人膝关节内侧副韧带medialcollateralligamentMCL细胞在力学牵张下的mRNA表达变化。方法MCL细胞置于EquiBiaxial牵张装置中培养,生长达80%丰满后细胞饥饿24h,实验组给予5%的牵张力刺激2h,对照组不给予牵张... 详细信息

目的用mRNA差异显示技术观察人膝关节内侧副韧带medialcollateralligamentMCL细胞在力学牵张下的mRNA表达变化。方法MCL细胞置于EquiBiaxial牵张装置中培养,生长达80%丰满后细胞饥饿24h,实验组给予5%的牵张力刺激2h,对照组不给予牵张刺激。刺激后立即提取细胞总RNA,用mRNA差异显示技术观察实验组与对照组在mRNA表达水平上的差异,将有差异的表达带回收、扩增、克隆并行ReverseNorthern杂交,选出阳性克隆进行cDNA测序并与NCBI基因数据库进行对照分析。结果在实验组与对照组间找到6个阳性克隆基因,其中基因G2S3与Lam-bertEaton肌无力综合征抗原B基因的同源性达96%,其余5个基因的功能目前尚未得知。结论给予MCL细胞5%的牵张刺激后其mRNA表达发生变化;G2S3可能与神经肌接头处乙酰胆碱传递的基因相关。

关键词：膝关节侧副韧带细胞培养遗传学技术 mRNA差异 MCL

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ACL和MCL细胞mRNA差异显示研究初步报告

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中国运动医学杂志 2000年第3期19卷 237-240页

作者：马庆军党耕町 AdamHsich JohnKim K-LPaulSung 北京大学第三临床学院骨科 100083 美国加州大学圣迭哥分校骨科与生物工程系

目的 :研究ACL和MCL细胞在mRNA表达水平上的差别。方法 :培养人ACL和MCL细胞 ,提取总RNA ,用mRNA差异显示技术寻找ACL和MCL细胞在mRNA表达水平上的差异表达带 ,将有差异的条带回收、扩增、克隆化及ReverseNorthern杂交 ,筛选出阳性克隆... 详细信息

目的 :研究ACL和MCL细胞在mRNA表达水平上的差别。方法 :培养人ACL和MCL细胞 ,提取总RNA ,用mRNA差异显示技术寻找ACL和MCL细胞在mRNA表达水平上的差异表达带 ,将有差异的条带回收、扩增、克隆化及ReverseNorthern杂交 ,筛选出阳性克隆进行cDNA测序并进行NCBI基因数据库分析。结果 :在ACL和MCL细胞之间找到 6个差异表达的基因 ,分别为C4M2 ,C1A1,A4M1,A1A2 ,G4A1,C7A2。结论 :ACL和MCL细胞在基因表达水平上有区别 ,已找到的基因可作为探针筛选cDNA文库进一步研究其功能。

关键词：差异显示韧带损伤 ACL MCL nRNA

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TGF-β_1刺激下损伤的前交叉韧带和内侧副韧带中BMP-1基因的表达

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第三军医大学学报 2012年第7期34卷 647-650页

作者：尹琳谢静蒋稼欢王春莉张艳君许春明 KL Paul Sung 重庆大学生物工程学院国家"111计划"基地重庆400044 美国加州大学圣迭亚哥分校骨科与生物工程系

目的观察在转化生长因子-β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)作用下,损伤的前交叉韧带(anteri-or cruciate ligament,ACL)和内侧副韧带(medial collateral ligament,MCL)中骨形态发生蛋白-1(bone morphogenetic protein-1,BMP-1)基因的表达,找出TGF-β1、BMP-1之间的关系,揭示机械损伤后ACL和MCL细胞中BMP-1的表达差异。方法采用反转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR方法检测1、5、50 ng/ml TGF-β1处理后2 h受损的ACL和MCL细胞中BMP-1的表达以及5 ng/ml TGF-β1作用2、6、12、24 h受损的ACL和MCL细胞中BMP-1的表达;Western blot检测5 ng/mlTGF-β1处理48 h后受损的ACL和MCL细胞中BMP-1的表达。结果受损的ACL和MCL细胞中BMP-1的基因表达比正常状态下偏高,并随着TGF-β1浓度的增大而增高,在MCL中的增高程度比在ACL中高出近1倍(P<0.05);与正常组相比,在5 ng/ml TGF-β1处理24 h后,ACL细胞中BMP-1的表达在24 h达到最高比例(约为6.1倍),而在MCL中12 h达到最高比例(约为9.84倍,P<0.05)。5 ng/ml TGF-β1处理48 h后BMP-1蛋白也明显上调,与无TGF-β1处理的对照组相比,ACL细胞中BMP-1上调2.32倍,MCL细胞中BMP-1上调3.84倍(P<0.05)。结论 TGF-β1刺激BMP-1的变化可能直接影响到细胞外基质中活性赖氨酰氧化酶的表达,对损伤ACL和MCL的修复有极其重要的参考价值和临床意义。

关键词：前交叉韧带内侧副韧带骨形态发生蛋白-1 TGF-β1

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ACL和MCL成纤维细胞对等双轴应变刺激反应的初步研究

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生物医学工程学杂志 2004年第Z1期21卷 87-88页

作者：李江庄逢源宋国立北京航空航天大学生物工程系北京100083 美国加州大学圣迭哥分校骨科与生物工程系

采用组织块迁移法培养Wistar大鼠膝关节前交叉韧带ACL、内侧副韧带MCL成纤维细胞,分析细胞的生物学特性和10%等双轴应变对细胞的影响.在体外培养条件下大鼠ACL和MCL细胞形态相似,原代ACL和MCL细胞增殖速率无明显差别,但传代培养的MCL较... 详细信息

采用组织块迁移法培养Wistar大鼠膝关节前交叉韧带ACL、内侧副韧带MCL成纤维细胞,分析细胞的生物学特性和10%等双轴应变对细胞的影响.在体外培养条件下大鼠ACL和MCL细胞形态相似,原代ACL和MCL细胞增殖速率无明显差别,但传代培养的MCL较ACL生长快,10%等双轴应变刺激增加了ACL和MCL成纤维细胞的活力.

关键词：细胞培养前交叉韧带内侧副韧带力学刺激细胞活力

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共培养下后交叉韧带成纤维细胞中MMPs的基因表达

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第三军医大学学报 2012年第16期34卷 1600-1603页

作者：王春莉梅虎谢静蒋稼欢尹琳陈诚符纯锋 KL Paul Sung 重庆大学生物工程学院国家"111计划"基地 400044 美国加州大学圣迭亚哥分校骨科与生物工程系美国圣迭亚哥*** 重庆医科大学附属第一医院骨科 400016

目的研究后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)成纤维细胞与滑膜细胞共培养下,2种细胞之间的交流对PCL成纤维细胞中基质金属蛋白酶MMP-1、2、3表达及活性的影响。方法分为共培养组和单培养组:①用显微镜观察共培养24 h后细胞的... 详细信息

目的研究后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)成纤维细胞与滑膜细胞共培养下,2种细胞之间的交流对PCL成纤维细胞中基质金属蛋白酶MMP-1、2、3表达及活性的影响。方法分为共培养组和单培养组:①用显微镜观察共培养24 h后细胞的活性和迁移率。②分别培养6 h后,提取总RNA,逆转录PCR;实时荧光定量PCR对人后交叉韧带成纤维细胞MMP-1、2、3基因的表达进行半定量和定量分析。③共培养处理1、2、3 d后收集培养上清液,用明胶酶谱法检测MMP-2的活性。结果共培养使PCL细胞和滑膜细胞较单层细胞培养迁移率分别增高了(43.1±0.1)%和(76.2±0.2)%(P<0.01)。与单培养相比,共培养组明显增加了MMP-2的基因表达,但降低了MMP-1、3的基因表达。酶谱结果表明共培养增加了MMP-2活性(P<0.05)。结论共培养能够促进细胞的迁移以及调节细胞中MMP-1、2、3的表达情况。

关键词：后交叉韧带滑膜共培养基质金属蛋白酶

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mRNA差异显示方法研究进展

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中华外科杂志 2000年第2期38卷 154-155页

作者：马庆军宋国立党耕町北京医科大学第三医院骨科 100083 美国加州大学圣地亚哥分校骨科与生物工程系

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MAPK和NF-κB通路抑制剂对IL-1β诱导滑膜细胞MMP-2活性的影响

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第三军医大学学报 2012年第17期34卷 1741-1744页

作者：陈荣富黄伟谢静梁熙 KL Paul Sung 王春莉符纯锋重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016 重庆大学生物工程学院与国家"111计划"基地重庆400044 美国加州大学圣迭亚哥分校骨科与生物工程系

目的研究白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)对人膝关节滑膜细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloprotein-ase-2,MMP-2)活性的影响及MAPK和NF-κB信号通路抑制剂对该过程的影响。方法用不同浓度的IL-1β处理体外培养的滑膜细胞72 h,明... 详细信息

目的研究白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)对人膝关节滑膜细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloprotein-ase-2,MMP-2)活性的影响及MAPK和NF-κB信号通路抑制剂对该过程的影响。方法用不同浓度的IL-1β处理体外培养的滑膜细胞72 h,明胶酶谱法检测细胞培养液中MMP-2的活性;选取10 ng/ml的IL-1β单独或分别与4种信号通路抑制剂(NF-κB抑制剂Bay11-7082,MAPK抑制剂SB203580、PD98059和SP600125)处理滑膜细胞,处理后12、24、48、72 h检测MMP-2的活性。结果 IL-1β随浓度和处理时间的增加明显上调滑膜细胞MMP-2的活性(P<0.05);与IL-1β处理组比较,Bay11-7082明显抑制了IL-1β诱导MMP-2活性的上调,并使72 h时MMP-2的活性降至13%(P<0.01);其他抑制剂对IL-1β诱导MMP-2活性上调的影响无统计学差异(P>0.05)。结论 IL-1β以时间和剂量依赖方式,通过NF-κB信号通路诱导滑膜细胞MMP-2活性。

关键词：白介素-1β 滑膜细胞基质金属蛋白酶-2 NF-κB

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前列腺素E_2对滑膜细胞基质金属蛋白酶-2活性的影响及其信号通路研究

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重庆医科大学学报 2012年第8期37卷 682-686页

作者：陈荣富黄伟梁熙谢静宋国立王春莉符纯锋重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016 重庆大学生物工程学院与国家"111计划"基地重庆400044 美国加州大学圣迭亚哥分校骨科与生物工程系圣迭亚哥ca920930412

目的:观察前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)对滑膜细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)活性的影响及其信号通路的研究,从而探讨PGE2对前交叉韧带(Anterior cruciate ligament,ACL)的损伤或修复可能的影响。方法:用不同浓度的PGE2处理体外培养的滑膜细胞,处理后12、24、48 h和72 h明胶酶谱法检测培养液中MMP-2的活性;再用合适浓度的PGE2单独或分别与7种信号通路特异性抑制剂同时处理滑膜细胞,明胶酶谱法检测MMP-2的活性,并对其进行相对定量。结果:PGE2呈浓度和时间依赖性地增高滑膜细胞MMP-2的活性。p38、ERK、PKA通路抑制剂SB203850、PD98059、KT5720对PGE2诱导滑膜细胞MMP-2活性的增高无明显抑制作用;而JNK、AP-1和核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)通路抑制剂SP600125、姜黄素(Curcumin)和Bay11-7082/7085显著抑制了PGE2诱导MMP-2活性的增高,分别使72 h时MMP-2的活性降至43%、25%和16%、11%(P<0.01)。结论:PGE2诱导滑膜细胞MMP-2活性的增加可能是ACL损伤后难以自行修复的原因之一。JNK、AP-1和NF-κB通路可能参与调控PGE2对MMP-2活性的诱导;其中以NF-κB作用最显著,可能为ACL损伤的治疗提供一种新思路。

关键词：前列腺素E2 滑膜细胞基质金属蛋白酶-2 前交叉韧带

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共培养下前交叉韧带成纤维细胞中LOXs与MMPs的基因表达情况

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生物医学工程学杂志 2013年第4期30卷 777-781页

作者：王春莉梅虎谢静蒋稼欢陈荣富尹琳符纯锋陈诚宋国立重庆大学生物工程学院重庆400044 加州大学圣迭亚哥分校骨科系及生物工程系美国加利福尼亚州92093-0412 重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016

前交叉韧带(ACL)损伤修复的研究进展表明,膝关节内覆在ACL上的滑膜组织对ACL损伤修复起到非常重要的作用。为探讨滑膜细胞对ACL成纤维细胞中影响组织修复的关键酶即赖氨酰氧化酶(LOXs)与基质金属蛋白酶(MMPs)表达及活性的影响,本文通过... 详细信息

前交叉韧带(ACL)损伤修复的研究进展表明,膝关节内覆在ACL上的滑膜组织对ACL损伤修复起到非常重要的作用。为探讨滑膜细胞对ACL成纤维细胞中影响组织修复的关键酶即赖氨酰氧化酶(LOXs)与基质金属蛋白酶(MMPs)表达及活性的影响,本文通过建立体外ACL成纤维细胞与滑膜细胞共培养体系,采用RT-PCR与明胶酶谱(zemography)技术定量分析比较单培养与共培养ACL成纤维细胞中LOXs与MMP-1、2、3基因的表达情况及MMP-2蛋白酶的活性。结果显示:(1)共培养促进ACL成纤维细胞中的LOXs与MMP-2的基因表达,但降低MMP-1、MMP-3的基因表达。(2)与单培养组相比,在不同时间点,共培养组都促进ACL成纤维细胞中MMP-2蛋白酶的表达及其活化程度。以上结果表明:ACL细胞和滑膜细胞之间存在密切的交流影响了LOXs与MMP-1、2、3的基因表达,为后续探索ACL损伤修复的机制及治疗方法提供了理论依据。

关键词：前交叉韧带滑膜共培养赖氨酰氧化酶基质金属蛋白酶

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