检索结果-内蒙古大学图书馆

重组腺病毒介导的转录因子Runx3在神经胶质瘤细胞中的表达及其亚细胞定位

细胞与分子免疫学杂志 2009年第10期25卷 866-869页

作者：白文栋张瑞孟艳玲曹云新王涛赵晶杨安钢第四军医大学国家肿瘤生物重点实验室第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032

目的:制备含有融合Flag标签的Runx3基因的复制缺陷型重组腺病毒,感染神经胶质细胞瘤U251,观察外源Runx3在细胞中的表达及亚细胞定位。方法:用PCR的方法扩增Runx3基因,并将Flag标签蛋白的编码基因与RUNX3基因进行融合,构建腺病毒穿梭载体... 详细信息

目的:制备含有融合Flag标签的Runx3基因的复制缺陷型重组腺病毒,感染神经胶质细胞瘤U251,观察外源Runx3在细胞中的表达及亚细胞定位。方法:用PCR的方法扩增Runx3基因,并将Flag标签蛋白的编码基因与RUNX3基因进行融合,构建腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV-Runx3,经KpnI/XhoI双酶切鉴定并测序。利用电转化方法将经PmeI线性化的pShuttle-CMV-Runx3穿梭载体导入BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒Ad-Runx3,再将经PacI线性化的Ad-Runx3重组病毒骨架质粒转染293A包装细胞,包装并扩增病毒。利用该病毒感染神经胶质细胞瘤U251,用免疫印迹法观察外源Runx3在细胞中的表达,用间接免疫荧光法观察其在细胞内的定位。结果:构建并包装表达Runx3蛋白的重组腺病毒,用重组腺病毒感染U251细胞后,经免疫印迹和间接免疫荧光法检测,可见外源导入的Runx3蛋白在细胞核内的特异性定位。结论:成功制备了含有融合Flag标签的转录因子Runx3基因的重组腺病毒,感染U251细胞,在细胞中观察到该分子表达后定位于细胞核中,为研究Runx3在神经胶质瘤发生中的作用奠定了实验基础。

关键词： Runx3 腺病毒恶性脑胶质瘤细胞

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胃癌下调新基因GDDR表达特性及功能研究

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科学技术与工程 2009年第7期9卷 1696-1701页

作者：褚光辉杜建军杨国栋窦科峰卢兹凡第四军医大学西京消化病医院西安710032 第四军医大学第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学教研室西安710032 第四军医大学西京医院肝胆外科西安710032

明确胃癌下调新基因GDDR的亚细胞定位、分泌特性及生物学功能研究。与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达明确GD-DR表达产物亚细胞定位;GES细胞系转染上清检测分泌蛋白表达;胃癌7901细胞系稳定转染GDDR,观察其生物学作用。发现GDDR表达产物定位... 详细信息

明确胃癌下调新基因GDDR的亚细胞定位、分泌特性及生物学功能研究。与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达明确GD-DR表达产物亚细胞定位;GES细胞系转染上清检测分泌蛋白表达;胃癌7901细胞系稳定转染GDDR,观察其生物学作用。发现GDDR表达产物定位于胞浆,是一分泌蛋白。四甲基偶氮唑盐比色法(MTTassay)检测描绘生长曲线及流式细胞计数仪(FACS)细胞周期检测表明,GDDR对胃癌7901细胞增值显著抑制(96h(1.233±0.017)vs(0.618±0.015),t=2.447,P=2.63×10-9),并且可以引起细胞的周期阻滞。说明胃癌下调新基因GDDR产物为胞浆分布,具有分泌特性,能通过阻滞细胞周期显著抑制胃癌细胞生长,可能为新的候选抑癌基因。

关键词：胃肿瘤分泌蛋白细胞周期功能研究

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NDRG2在糖尿病小鼠和正常小鼠胰岛、心肌和肾中的表达

引用

中国组织化学与细胞化学杂志 2008年第5期17卷 407-411页

作者：沈岚胡晓兰刘新平第四军医大学生物化学与分子生物学教研室国家肿瘤生物学重点实验室西安710032

目的该实验通过对糖尿病小鼠和正常小鼠胰岛、心肌和肾中NDRG2表达的研究,旨在阐明NDRG2在糖尿病小鼠和正常小鼠中的表达差异,为进一步明确分化相关基因NDRG2的功能提供依据。方法分离糖尿病小鼠和正常小鼠的胰腺、心肌和肾,并制备成石... 详细信息

目的该实验通过对糖尿病小鼠和正常小鼠胰岛、心肌和肾中NDRG2表达的研究,旨在阐明NDRG2在糖尿病小鼠和正常小鼠中的表达差异,为进一步明确分化相关基因NDRG2的功能提供依据。方法分离糖尿病小鼠和正常小鼠的胰腺、心肌和肾,并制备成石蜡切片,用抗NDRG2单克隆抗体,进行免疫组织化学染色(ABC法),从蛋白质水平观察NDRG2的表达情况。统计阳性细胞数,用统计学方法,判断糖尿病小鼠和正常小鼠中NDRG2的表达有无差别。结果免疫组织化学染色显示:①胰腺中NDRG2特异表达在胰岛细胞胞浆,相对正常小鼠而言Ⅱ型糖尿病小鼠胰岛中NDRG2表达略增强,Ⅰ型糖尿病小鼠胰岛中NDRG2表达略减弱;②心脏中NDRG2特异表达在心肌细胞胞浆,Ⅱ型糖尿病小鼠心肌细胞中NDRG2分布局限,正常小鼠心肌细胞中NDRG2分布均匀;③肾脏中NDRG2特异表达在肾小管上皮细胞的细胞浆,Ⅰ型糖尿病小鼠中肾小管上皮细胞出现空泡样变性。结论NDRG2在糖尿病小鼠和正常小鼠胰腺、心肌和肾中的表达差异提示NDRG2作为分化相关基因可能参与糖尿病的致病机制。

关键词： NDRG2 糖尿病小鼠胰腺心脏肾免疫组织化学

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p53对restin基因转录表达的调控作用

引用

中国科学（C辑） 2006年第3期36卷 267-272页

作者：王瑞华路凡傅海燕杨国栋吴有盛卢兹凡赵文明赵忠良第四军医大学国家肿瘤生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室西安710032 西安交通大学生命与科学技术学院西安710048

restin基因是Zhu等人从全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导肿瘤细胞分化时克隆得到的一种黑色素瘤抗原相关基因．前期研究表明,该基因与细胞周期阻滞有关．由于p53在细胞增殖调控中占据重要地位,并且与维甲酸具有诱导关系... 详细信息

restin基因是Zhu等人从全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导肿瘤细胞分化时克隆得到的一种黑色素瘤抗原相关基因．前期研究表明,该基因与细胞周期阻滞有关．由于p53在细胞增殖调控中占据重要地位,并且与维甲酸具有诱导关系,因此本研究试图揭示维甲酸诱导restin基因表达是否与p53有关．将p53转染真核细胞,研究restin与p53的表达关系．结果表明p53能诱导restin基因转录增加．进一步分析发现,restin基因5′端上游约2 kb基因组序列中存在p53蛋白结合位点．扩增该序列构建荧光报告系统,检测到该报告系统可以接受维甲酸的诱导调控．在此基础上,研究p53对缺失p53结合位点的截短体报告质粒和p53结合位点突变后的报告质粒的作用,结果显示p53调控restin基因的表达与该基因上游序列区中的p53结合位点无关,推测p53对restin基因的表达调控可能还存在其他分子的相互作用．

关键词：启动子报告系统 restin p53 全反式维甲酸

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血管生长抑素在小鼠胚泡中的调节作用

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生物化学与生物物理进展 2003年第5期30卷 778-783页

作者：赵田夫张键李晶曹宇静李素敏周家喜李福洋药立波段恩奎中国科学院动物研究所生殖生物学国家重点实验室第四军医大学生物化学与分子生物学教研室西安710031

血管生长抑素(angiostatin,AS)是一种新血管生成的抑制蛋白,它可以有效抑制内皮细胞的增殖、迁移和管状形态的产生,是肿瘤转移的有效抑制剂.肿瘤转移和胚胎植入具有惊人的相似性,AS对小鼠胚胎植入是否有作用迄今尚无报道.采用体外培养、... 详细信息

血管生长抑素(angiostatin,AS)是一种新血管生成的抑制蛋白,它可以有效抑制内皮细胞的增殖、迁移和管状形态的产生,是肿瘤转移的有效抑制剂.肿瘤转移和胚胎植入具有惊人的相似性,AS对小鼠胚胎植入是否有作用迄今尚无报道.采用体外培养、RT PCR和蛋白质印迹等多种方法研究了AS对小鼠胚泡中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体KDR、基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMPs)的影响.研究显示,AS下调了VEGF及其受体KDR、MMP 2和MMP 9的表达,而上调了TIMP 1和TIMP 2的表达.应用整合素αVβ3的特异性抑制剂Echistatin与AS共同处理胚泡,结果显示,Echistatin减弱了AS对MMP 2的下调作用及对TIMP 2的上调作用.以上结果提示:AS可能通过与整合素αVβ3相互作用调节胚泡中VEGF、MMPs和TIMPs的表达。

关键词：血管生长抑素小鼠胚泡调节作用血管生成肿瘤转移

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动物细胞系的染色体组型与遗传变异率分析

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Acta Genetica Sinica 2001年第4期28卷 327-344,T001,T002页

作者：张德礼李六金夏耕田何旭玉高步先白晓鸿黄高升刘尚高阎隆飞方福德胡春雷王黎军姜焕宏冯阿曼张广民安社刚任远强郭建民胡淑贤樊军喜牛永利宋占军李迎樊胜军北京大学医学部免疫学系北京100083 北京军区联勤部卫生防疫队西安710032 第四军医大学动物保健品研制中心毒理学研究室西安710032 第四军医大学基础部病理学教研室西京医院病理科中国癌症研究基金会肿瘤研究所北京100094 中国农业大学动物医学院传染病微生物学教研室生物学院生物化学与分子生物学系农业生物技术国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院实验动物研究所

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、... 详细信息

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、结构畸变率分析，了解７种细胞系传代培养不同代次的染色体变异情况。以相应的细胞株皮下接种裸鼠形成肿瘤实验、软琼脂细胞克隆形成率与植物凝集素作用下细胞凝集实验为对照，筛选出无致癌／致瘤性、符合细胞遗传学要求、无传染因子污染的细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２）或极低致癌性的ＭＤＣＫ细胞系用于制苗，发现肿瘤细胞系高变异率株可在裸鼠体内快速选育成功。细胞系染色体遗传特征决定致瘤性质并具有种属特异性，得到一些１００％成瘤和１００％不成瘤的细胞株并探讨了与染色体组型的关系。对于肿瘤的发病机理及实验治疗，都是非常好的模型。一些细胞系不仅成瘤而且还可转移（致恶性横纹肌样瘤的ＢＨＫ－２１和Ｖｅｒｏ细胞株），其他致瘤细胞株只成瘤不转移或不明显转移。

关键词：动物肾细胞系人类子宫颈癌细胞系猪肾原代细胞染色体核型 G带核型遗传变异率数目变异结构畸变

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