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第八届全国肿瘤生物治疗学术会议

作者：姚伟荣蔡震宇徐方云薛同春黄永红邬淑云温淦升江西医学院病理生理教研室肿瘤免疫研究室

许多实验发现脂质体的包裹能显著提高抗原激发机体主动免疫反应的能力,从而为肿瘤抗原性疫苗用作肿瘤主动免疫治疗提供了新的途径。本实验在已制得宫颈癌U14细胞正丁醇提取物脂质体瘤苗并证实其在小鼠体内能激发明显的体液免疫反应的基... 详细信息

许多实验发现脂质体的包裹能显著提高抗原激发机体主动免疫反应的能力,从而为肿瘤抗原性疫苗用作肿瘤主动免疫治疗提供了新的途径。本实验在已制得宫颈癌U14细胞正丁醇提取物脂质体瘤苗并证实其在小鼠体内能激发明显的体液免疫反应的基础上,采用阴离子脂质体包裹的U14细胞可溶性抗原(CBE)瘤苗,实验观察其体内抑瘤效应,以探讨该脂质体瘤苗用作肿瘤主动免疫治疗的可能性。

关键词： U14 正丁醇提取物抑瘤效应

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U14细胞正丁醇提取物脂质体瘤苗的制备及其体液免疫效应

U14细胞正丁醇提取物脂质体瘤苗的制备及其体液免疫效应

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第八届全国肿瘤生物治疗学术会议

作者：姚伟荣薛同春徐方云蔡震宇黄永红邬淑云温淦升江西医学院病理生理教研室肿瘤免疫研究室

肿瘤疫苗是肿瘤主动免疫治疗的重要手段,其核心问题是肿瘤抗原的免疫原性。以无毒、无免疫原性的脂质体负载抗原是增强肿瘤抗原免疫原性的有效方法之一。本课题采用阴离子脂质体制备宫颈癌U14细胞抗原性瘤苗,实验观察其体内体液免疫效应... 详细信息

肿瘤疫苗是肿瘤主动免疫治疗的重要手段,其核心问题是肿瘤抗原的免疫原性。以无毒、无免疫原性的脂质体负载抗原是增强肿瘤抗原免疫原性的有效方法之一。本课题采用阴离子脂质体制备宫颈癌U14细胞抗原性瘤苗,实验观察其体内体液免疫效应,为脂质体瘤苗用作肿瘤的免疫治疗提供实验室依据。本实验以正丁醇法提取U14细胞表面可溶性抗原(CBE),再以PC,PG,Chol按7 1 2的摩尔比溶解在有

关键词：免疫原性肿瘤抗原 U14 CBE 正丁醇提取物体液免疫

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人生长激素真核细胞瞬时表达及活性鉴定

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实用儿科临床杂志 2004年第3期19卷 210-211页

作者：宋向凤田中伟王辉石太新杨现军新乡医学院微生物免疫学教研室河南新乡453003 新乡医学院病理生理学教研室河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院河南新乡453003 新乡医学院分子生物学研究室河南新乡453003

目的　研究人生长激素真核细胞表达质粒在COS 1细胞的瞬时表达及活性鉴定。方法　将重组pcDNA3 GHcDNA用脂质体转染COS 1细胞 ,用免疫组织化学和ELISA法分别检测细胞和培养上清中生长激素(GH)的表达情况 ,用Jurkat细胞增殖法测定其生... 详细信息

目的　研究人生长激素真核细胞表达质粒在COS 1细胞的瞬时表达及活性鉴定。方法　将重组pcDNA3 GHcDNA用脂质体转染COS 1细胞 ,用免疫组织化学和ELISA法分别检测细胞和培养上清中生长激素(GH)的表达情况 ,用Jurkat细胞增殖法测定其生物活性。结果　重组真核细胞表达质粒pcDNA3 GHcDNA转染的COS 1细胞分泌高浓度GH ,且具有明显的促进Jurkat细胞增殖能力。结论　pcDNA3 GHcDNA能够高效表达有活性的GH 。

关键词：人生长激素真核细胞表达活性鉴定免疫功能基因治疗 Jurkat细胞增殖法

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MTT法检测AU_(14-1)介导LAK细胞的细胞毒效应

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江西医学院学报 2004年第6期44卷 29-30,34,F002页

作者：王红梅徐方云曾小平邬淑云温淦升江西医学院病理生理学教研室肿瘤免疫研究室江西南昌330006 江西医学院免疫学教研室江西南昌330006

目的　应用MTT比色法研究抗小鼠宫颈癌单克隆抗体 (McAb)AU14 1介导淋巴因子激活的杀伤细胞 (lym phokineactivatedkillercells,LAK)对靶肿瘤细胞的体外细胞毒作用。方法　通过检测不同数量小鼠宫颈癌U14 细胞与加入四甲基偶氮唑盐 { ... 详细信息

目的　应用MTT比色法研究抗小鼠宫颈癌单克隆抗体 (McAb)AU14 1介导淋巴因子激活的杀伤细胞 (lym phokineactivatedkillercells,LAK)对靶肿瘤细胞的体外细胞毒作用。方法　通过检测不同数量小鼠宫颈癌U14 细胞与加入四甲基偶氮唑盐 { [3 (4,5 dimethylthiazol 2 yl) 2 ,5 diphenylterazoliumbromide],MTT}后形成甲颗粒所产生的不同吸光度 (A)值 ,建立测定的线性关系。进而应用MTT比色法研究McAbAU14 1介导LAK细胞的体外细胞毒作用。结果　当U14 细胞在 10～ 10 5个 /孔以内时 ,活细胞数与A值呈直线相关 ;LAK细胞对于经AU14 1处理的肿瘤细胞的杀伤率显著高于未经AU14 1处理的肿瘤细胞 (P <0 .0 1)。结论　McAbAU14 1可加强LAK细胞对靶细胞的溶解作用。提示特异性宫颈癌单克隆抗体AU14 1介导的细胞毒在治疗宫颈癌中可能是一种有潜在价值的方法。

关键词： MTT比色法 LAK细胞抗体依赖细胞介导的细胞毒

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结核杆菌Ag85A/GM-CSF嵌合表达质粒的构建及表达

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免疫学杂志 2003年第2期19卷 146-149页

作者：谢勇恩鲍朗张会东陈玮川北医学院病理生理学教研室四川南充637007 四川大学华西基础医学院感染免疫研究室四川成都610041

目的　探索对结核病DNA疫苗进行基因修饰的新方法。方法　以结核杆菌H3 7Rv 株基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增获得结核杆菌Ag85A抗原蛋白基因的成熟肽编码区 ,以经PHA诱导后的小鼠脾组织总RNA为模板 ,通过RT PCR获得小鼠粒细胞巨噬细... 详细信息

目的　探索对结核病DNA疫苗进行基因修饰的新方法。方法　以结核杆菌H3 7Rv 株基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增获得结核杆菌Ag85A抗原蛋白基因的成熟肽编码区 ,以经PHA诱导后的小鼠脾组织总RNA为模板 ,通过RT PCR获得小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的cDNA ,将二者定向克隆入质粒pBK CMV中构建含嵌合目的基因的重组质粒 ,转染培养的COS7细胞后检测嵌合目的基因的表达。结果　成功构建了小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子cDNA与结核杆菌Ag85A抗原基因的真核嵌合表达质粒 ,重组质粒能在COS7细胞中进行稳定表达。结论　本研究首次将细胞因子基因与结核杆菌免疫保护性抗原基因嵌合构建嵌合DNA疫苗。

关键词：结核杆菌 Ag85A GM-CSF 嵌合表达结核病基因修饰 DNA疫苗

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微量肝素对家免DIC时血液流变性和微循环障碍的预防作用

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中国血液流变学杂志 2003年第1期13卷 4-7页

作者：李华唐显玲朱庆平泸州医学院病理生理教研室泸州医学院附属一医院麻醉科泸州646000 四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

目的观察微量肝素预防给药对家免DIC时血液流变性和微循环的影响,探讨其预防效果及量效关系,分析其作用机制,为临床使用微量肝素预防DIC提供实验依据。方法家兔36只,随机分为正常对照组、模型组和肝素预防组。用兔脑粉浸液静脉注射法... 详细信息

目的观察微量肝素预防给药对家免DIC时血液流变性和微循环的影响,探讨其预防效果及量效关系,分析其作用机制,为临床使用微量肝素预防DIC提供实验依据。方法家兔36只,随机分为正常对照组、模型组和肝素预防组。用兔脑粉浸液静脉注射法复制家兔DIC模型,采用显微电视摄像自动分析系统,观察肠系膜微循环的变化和测定血液流变学指标。结果1U·kg-1·h-1和2U·kg-1·h-1肝素预防组,血液流变性指标、血流速度、纤维蛋白原含量和凝血时间等与模型组比较均有显著性差异,与正常对照组比较无明显差异,对DIC时的微循环和血液流变性障碍有明显的预防效果。0.25U·k-1·h-1及0.5U·kg-1·h-1肝素预防组,血液流变性及微动、静脉流速等指标与模型组比较均无明显差异,其预防效果不明显。结论微量肝素对DIC时的血液流变性和微循环障碍具有明显的预防作用,且其预防效果存在剂量依赖关系。

关键词：微量肝素 DIC 血液流变性微循环障碍预防作用

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微量肝素对家兔DIC时血液流变性变化和微循环障碍的治疗作用

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中国血液流变学杂志 2003年第3期13卷 203-206页

作者：李华朱庆平唐显玲张英邹平泸州医学院病理生理教研室四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041 泸州医学院附一院麻醉科泸州646000

目的观察微量肝素对家兔DIC时的血液流变性变化和微循环障碍的影响,探讨其对DIC的治疗效果及量效关系,分析其作用机制,为临床使用微量肝素治疗DIC提供实验依据。方法家兔36只,随机分为正常对照组、DIC模型组和肝素治疗组。用兔脑粉浸... 详细信息

目的观察微量肝素对家兔DIC时的血液流变性变化和微循环障碍的影响,探讨其对DIC的治疗效果及量效关系,分析其作用机制,为临床使用微量肝素治疗DIC提供实验依据。方法家兔36只,随机分为正常对照组、DIC模型组和肝素治疗组。用兔脑粉浸液静脉注射法复制家兔 DIC模型,采用OLYMPUS AX70微循环显微自动摄录像分析系统,观察肠系膜微循环变化,使用FASCO全自动血流变快测仪测定血液流变学指标,并测定纤维蛋白原含量及凝血时间。结果:应用2U·kg^(-1)·h^(-1)肝素治疗2h后,同DIC模型组比较,全血粘度和红细胞聚集性显著降低,微动、静脉血流速度增快,白微栓数量减少,微循环变化和血液流变性障碍得到显著改善,与正常对照组无明显差异,说明其治疗效果显著。0.25U·kg^(-1)·h^(-1)、0.5U·kg^(-1)·h^(-1)和1U·kg^(-1)·h^(-1)肝素治疗组血液流变性及微动、静脉血流速度等指标与DIC模型组比较均无明显差异,其治疗效果不明显。结论微量肝素对DIC时的血液流变性改变和微循环障碍具有明显的治疗作用,且治疗效果存在剂量依赖关系,2U·kg^(-1)·h`(-1)肝素对DIC时的血液流变性变化和微循环障碍的治疗效果最佳。

关键词：微量肝素家兔 DIC 血液流变性变化微循环障碍治疗

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用垂直转头密度梯度超速离心法快速分级分离多聚核糖体

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中国病理生理杂志 2002年第1期18卷 110-111页

作者：林元喜马志义尚宁宽周娟刘进军西安交通大学医学院病理生理教研室陕西西安710061 西安交通大学医学院药理学教研室陕西西安710061 西安交通大学医学院免疫病理学研究室陕西西安710061

目的 :测定多聚核糖体含量及多聚程度的分布。方法 :采用PRV - 5 0T垂直转头 40PA离心管 ,梯度为 15 % - 5 5 %连续蔗糖梯度。离心条件 :温度 10℃ ,转速 40 0 0 0r/min ,时间 9min。DGF -U型梯度仪液面跟踪法收集 ,同时与TH6 41摆平转... 详细信息

目的 :测定多聚核糖体含量及多聚程度的分布。方法 :采用PRV - 5 0T垂直转头 40PA离心管 ,梯度为 15 % - 5 5 %连续蔗糖梯度。离心条件 :温度 10℃ ,转速 40 0 0 0r/min ,时间 9min。DGF -U型梯度仪液面跟踪法收集 ,同时与TH6 41摆平转头进行对比。结果 :采用垂直转头具有分离效果好 ,重现性强 ,操作简单 ,特别是离心管体积大 ,离心过程中产生的重定向作用使梯度容量大大增加 ,分离路径大大缩短 ,时间相应减少。结论 :为快速和大量制备、分析多种多聚核糖体提供一种良好方法。

关键词：多核糖体梯密度离心法 PRV50T垂直转头

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用垂直转头密度梯度超速离心法快速分级分离多聚核糖体

用垂直转头密度梯度超速离心法快速分级分离多聚核糖体

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会第七届学术会议暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十届学术会议

作者：林元喜马志义尚宁宽周娟刘进军西安交通大学医学院病理生理教研室西安交通大学医学院药理学教研室西安交通大学医学院免疫病理学研究室西安交通大学医学院病理生理教研室西安交通大学医学院病理生理教研室

目的:多聚核糖体在细胞中的含量和聚集程度直接反映蛋白质的合成能力和活性,测定它的分布在研究生物组织的生理生化现象和代谢过程有重要意义。离心法常规使用角转头、摆平吊兰转头,但分离样品量少,单次离心时间长。本文旨在采用PRV50T... 详细信息

目的:多聚核糖体在细胞中的含量和聚集程度直接反映蛋白质的合成能力和活性,测定它的分布在研究生物组织的生理生化现象和代谢过程有重要意义。离心法常规使用角转头、摆平吊兰转头,但分离样品量少,单次离心时间长。本文旨在采用PRV50T垂直转头,通过变更密度梯度配比,离心速度和离心时间3个参量,对多聚核糖体的分离时程、样品容量及重现性进行对比研究。方法:大鼠断头处死,取肝,迅速置于冰冷的0.9%NaCl中冲洗,滤纸拭干,称重,剪碎,加两倍体积的STKM液（0.25mmol/L蔗糖,50mmol/L Tis-HCl,25mmol/L KCl,5mmol/L MgCl）,1700r/min匀浆10-15次（上下移动）,4层纱布过滤,滤液17000g离心10min。弃沉淀,上清液加0.1倍体积的11%DOC（11%脱氧胆酸,Deoxycholic acid）,使终浓度达1%,混匀,0℃放置10min。再将上述溶液加于2.0mol/L和0.5mol/L的蔗糖梯度上,用TFT45.6转头,4℃,40 000 r/min离心4h。沉淀悬浮于0.2

关键词：多聚核糖体垂直转头密度梯度超速离心法分级分离

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99mTc-Au_(14-1)在荷人宫颈癌裸鼠体内的放射性分布与显像

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江西医学院学报 2002年第3期42卷 11-12页

作者：徐方云蔡震宇邬淑云张青王红梅熊立跃温淦升江西医学院病理生理教研室肿瘤免疫研究室江西南昌330006 江西医学院第一附属医院核医学科江西南昌330006

为探讨应用抗宫颈癌单克隆抗体Ａｕ14 1作临床宫颈癌导向诊断、治疗的可能性 ,本文采用99ｍＴｃ直接法标记Ａｕ14 1,对荷人宫颈癌 (ＨｅＬａ细胞 )裸鼠进行体内分布和放射免疫显像 (ＲＩＩ)的实验观察 ,获得理想结果 ,报告如下。1　材... 详细信息

为探讨应用抗宫颈癌单克隆抗体Ａｕ14 1作临床宫颈癌导向诊断、治疗的可能性 ,本文采用99ｍＴｃ直接法标记Ａｕ14 1,对荷人宫颈癌 (ＨｅＬａ细胞 )裸鼠进行体内分布和放射免疫显像 (ＲＩＩ)的实验观察 ,获得理想结果 ,报告如下。1　材料与方法1)　裸鼠人宫颈癌模型的复制 :5～ 6周龄Ｂａｌｂ/ｃ处女裸小鼠 ,体重 17～ 2 0 ｇ。用套针管将ＨｅＬａ细胞成瘤组织块种植于裸小鼠右前肢背侧皮下 ,清洁级动物标准条件下饲养 4周 ,肿瘤直径达0 .6～ 1.0ｃｍ。2 )　抗体制备与标记 :Ａｕ14 1由本室制备 ,对照抗体Ｍ 5为抗血吸虫单抗 (小鼠ＩｇＧ)。采用99ｍＴｃ直接法标

关键词：单克隆抗体宫颈癌放射免疫显像动物模型 99mTc-Au14-1

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