检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生化药物杂志 2001年第3期22卷 121-124页

作者：陶永辉金坚王博诚张满达阮长耿江苏省原子医学研究所核医学国家重点实验室江苏无锡214063 苏州医学院血栓与止血研究室江苏苏州215007

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分蛋白C(PC)和蛋白S(PS)的分离纯化。方法采用钡盐吸附、分段盐析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化PC和PS。结果所得PC和PS的相对分子量分别为 (6 1&#... 详细信息

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分蛋白C(PC)和蛋白S(PS)的分离纯化。方法采用钡盐吸附、分段盐析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化PC和PS。结果所得PC和PS的相对分子量分别为 (6 1± 0 .9)、(83± 0 .8)kD ;等电点分别为 4.70± 0 .0 3、5 .2 0± 0 .0 3;分别富含Glu、Leu、Gly和Asp、Glu、Leu ;毛细管区带电泳分析高度均一 ;与文献报道基本一致 ;得率分别为 2 8.3%和 12 .6 %。结论该纯化路线省时、经济 ,有助于利凡诺去白蛋白人血浆的综合再利用和抗凝血成分输血制剂的研制和开发。

关键词：蛋白C 蛋白S 利凡诺白蛋白血浆纯化

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利凡诺去白蛋白人血浆再利用的实验研究Ⅱ.抗凝血酶Ⅲ和蛋白C抑制物的纯化与鉴定

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中国生化药物杂志 2001年第4期22卷 172-174页

作者：张荣军陶永辉金坚张莲芬张满达阮长耿江苏省原子医学研究所核医学国家重点实验室江苏无锡214063 苏州医学院血栓与止血研究室江苏苏州215007

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分抗凝血酶Ⅲ (AT Ⅲ )和蛋白C抑制物 (PCI)的分离纯化。方法以钡盐吸附上清为原料 ,采用铝盐吸附、有机沉淀、离子交换层析、分子筛层析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白... 详细信息

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分抗凝血酶Ⅲ (AT Ⅲ )和蛋白C抑制物 (PCI)的分离纯化。方法以钡盐吸附上清为原料 ,采用铝盐吸附、有机沉淀、离子交换层析、分子筛层析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化AT Ⅲ和PCI。结果从利凡诺去白蛋白人血浆 10L中得到了AT Ⅲ 16 0mg和PCI4.2mg ,得率分别为 12 .7%和 10 .5 % ,其相对分子量分别为 (5 7± 0 .8)和 (5 6± 0 .8)kD ;等电点分别为 4.81± 0 .0 2和 8.0 1± 0 .0 2 ;分别富含Glu、Asp、Leu和Glu、Leu、Asp ;毛细管区带电泳分析高度均一 ;与文献报道基本一致。结论该纯化路线经济、简便。

关键词：抗凝血酶Ⅲ 蛋白C抑制物利凡诺白蛋白血浆纯化

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人尿红细胞生成素和血栓调节素的纯化研究

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中国生化药物杂志 2001年第2期22卷 57-60页

作者：陶永辉金坚张荣军何扬张满达阮长耿江苏省原子医学研究所核医学国家重点实验室江苏无锡214063 苏州医学院血栓与止血研究室江苏苏州215007

目的从人尿中分离纯化红细胞生成素 (EPO)和血栓调节素 (TM )。方法用超滤浓缩、离子交换层析及亲和层析等方法从新鲜人尿中分别纯化EPO和TM。结果从 2 0 0 0kg新鲜人尿中分别纯化得到了 4.47mgEPO和 9.92mgTM ,得率分别为 31.9%和 2 5 ... 详细信息

目的从人尿中分离纯化红细胞生成素 (EPO)和血栓调节素 (TM )。方法用超滤浓缩、离子交换层析及亲和层析等方法从新鲜人尿中分别纯化EPO和TM。结果从 2 0 0 0kg新鲜人尿中分别纯化得到了 4.47mgEPO和 9.92mgTM ,得率分别为 31.9%和 2 5 .0 % ,分子量分别为 (38.6± 1.0 )kD和 (6 0± 1.4)kD ;等电点分别为3.6 0± 0 .0 2和 3 .70± 0 .0 2 ;TM富含Glu、Ala和Gly ,毛细管区带电泳分析高度均一 ,有关生化参数与文献报道基本一致。结论该工艺可获得纯度较高的EPO和TM。

关键词：红细胞生成素血栓调节素尿分离亲和层析

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一种新型重组抗体导向溶栓剂的体外溶栓研究

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中国免疫学杂志 2000年第4期16卷 187-189,202页

作者：万海英刘征辉顾津明朱明清李佩霞阮长耿苏州医学院附属第一医院江苏省血液研究所血栓与止血研究室苏州215006 苏州医学院重点实验室苏州215007

目的 :探讨一种新型重组融合基因抗体导向溶栓剂SZ5 1Hu scuPA的体外溶栓效力。方法 :通过转瓶扩大生产获得的大量基因重组融合蛋白SZ5 1Hu scuPA ,通过抗体竞争结合实验确定融合蛋白的抗体亲和力 ;进而与尿激酶进行不同浓度血小板血浆... 详细信息

目的 :探讨一种新型重组融合基因抗体导向溶栓剂SZ5 1Hu scuPA的体外溶栓效力。方法 :通过转瓶扩大生产获得的大量基因重组融合蛋白SZ5 1Hu scuPA ,通过抗体竞争结合实验确定融合蛋白的抗体亲和力 ;进而与尿激酶进行不同浓度血小板血浆凝块体外溶栓比较。结果 :该融合蛋白体外纤溶活性为 390 0 0U mg ;其抗体亲和力是鼠源性单抗的 6 7% ;体外溶栓效力较uPA提高 4.1～ 8.4倍。结论 :体外溶栓结果证明 ,融合蛋白SZ5 1Hu scuPA既兼有与人活化血小板结合特性又有纤溶酶原激活剂特性的双功能分子。

关键词：导向溶栓单克隆抗体基因重组体外溶栓

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重组SZ51Hu-scuPA融合蛋白的体外溶栓研究

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江苏医药 2000年第10期26卷 772-774页

作者：万海英刘征辉顾津明朱明清李佩霞阮长耿苏州医学院附属第一医院江苏省血液研究所血栓与止血研究室 215006 苏州医学院核医学重点实验室

目的　获得大量人源化抗人活化血小板单抗SZ5 1Hu和尿激酶原 (scuPA)融合蛋白SZ5 1Hu scuPA并测定该基因重组抗体导向溶栓剂的导向溶栓性。方法　通过转瓶扩大培养系统获得大量SZ5 1Hu scuPA ;通过抗体竞争结合实验证明融合蛋白的抗体... 详细信息

目的　获得大量人源化抗人活化血小板单抗SZ5 1Hu和尿激酶原 (scuPA)融合蛋白SZ5 1Hu scuPA并测定该基因重组抗体导向溶栓剂的导向溶栓性。方法　通过转瓶扩大培养系统获得大量SZ5 1Hu scuPA ;通过抗体竞争结合实验证明融合蛋白的抗体亲和力 ;进而与尿激酶进行比较对不同浓度血小板血浆凝块的溶栓研究。结果　该融合蛋白在培养上清中的表达量为 5mg/ml;其纤溶活性为 390 0 0IU/mg ;抗体亲和力是鼠源性单抗的 6 7% ;体外溶栓效力较uPA提高 4 1～ 8 4倍。结论　该融合蛋白比uPA具有更高、更快的溶栓效率。

关键词：重组SZ51Hu-scuPA 融合蛋白体外溶栓

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血栓动物模型的^(99)Tc^m-重组水蛭素显像研究

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中华核医学杂志 1999年第4期19卷 201-203页

作者：万卫星张荣军谭成蔡刚明范益军季顺东韩玉珉金坚核医学国家重点实验室江苏省原子医学研究所214063 苏州医学院血栓与止血研究室中国科学院生物物理研究所

目的　探讨以凝血酶为靶，重组水蛭素（ｒＨ）为配基进行血栓显像的潜在价值。方法　氯胺Ｔ法制备１２５ＩｒＨ，采用体外放射配体结合法分析ｒＨ对凝血酶纤维蛋白复合物的亲和、定量关系和时间反应动力学。亚氨基噻吩盐酸盐修饰... 详细信息

目的　探讨以凝血酶为靶，重组水蛭素（ｒＨ）为配基进行血栓显像的潜在价值。方法　氯胺Ｔ法制备１２５ＩｒＨ，采用体外放射配体结合法分析ｒＨ对凝血酶纤维蛋白复合物的亲和、定量关系和时间反应动力学。亚氨基噻吩盐酸盐修饰法制备９９ＴｃｍｒＨ，进行小鼠体内分布测定及犬动、静脉血栓模型显像。结果　ｒＨ不能直接与纤维蛋白原结合，当凝血酶与纤维蛋白形成复合物后才能与其形成三元复合物，且这种结合呈高亲和、特异和可逆性。９９ＴｃｍｒＨ在小鼠心、脑、肝、脾、肺摄取低，肾摄取高，１５ｍｉｎ达（６４－７２４±５－０４２）％ＩＤ／ｏｒｇａｎ，血清除迅速。犬股动脉血栓于４５ｍｉｎ可清晰显影，靶／本底（Ｔ／Ｂ）比值为１－４７。静脉血栓于注药后３０ｍｉｎ就出现浓聚，并随时间延长血栓显影更清晰，１ｈＴ／Ｂ比值为１－５３。结论　９９ＴｃｍｒＨ有望成为１

关键词：血栓栓塞放射性核素显像重组水蛭素

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^(99)Tc^m-重组水蛭素的制备及血栓动物模型显像研究

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同位素 1999年第3期12卷 164-168页

作者：万卫星张荣军季顺东谭成孙瑞辉王博诚韩玉珉金坚江苏省原子医学研究所核医学国家重点实验室无锡214063 苏州医学院血栓与止血研究室苏州215007 中国科学院生物物理研究所北京100080

采用亚氨基噻吩盐酸盐修饰法制备９９Ｔｃｍ 重组水蛭素（９９Ｔｃｍ ｒＨ），并进行小鼠体内分布及兔股动、静脉血栓模型显像分析。结果表明：９９Ｔｃｍ ｒＨ的标记率为９０８％，ＰＤ１０过柱前后放化纯度分别... 详细信息

采用亚氨基噻吩盐酸盐修饰法制备９９Ｔｃｍ 重组水蛭素（９９Ｔｃｍ ｒＨ），并进行小鼠体内分布及兔股动、静脉血栓模型显像分析。结果表明：９９Ｔｃｍ ｒＨ的标记率为９０８％，ＰＤ１０过柱前后放化纯度分别为８８８％和９３９％，比活度为３２９２ＧＢｑ／ｇ；，在小鼠心、脑、肝、脾、肺摄取低，肾浓聚高，１５ｍｉｎ达到（６４７２±５．０４）％ＩＤ，血清除迅速；兔股动、静脉血栓于１ｈ可清晰显影，Ｔ／Ｂ分别为２２４和１９５。

关键词：重组水蛭素凝血酶显像血栓锝99-rH

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蛋白C系统的放射免疫分析

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中国核科技报告 1997年 944-956页

作者：金坚阮长耿张满达无锡苏州医学院血栓与止血研究室核医学国家重点实验室苏州

蛋白C系统是机体重要的凝血反应调节系统,该文组合生化和免疫化学技术分别从人尿中提纯了血栓调节素和从利凡诺去白蛋白人血浆中纯化了蛋白C、蛋白S和蛋白C抑制物。免疫家兔产生抗血清。用氯胺T法制备了Ⅰ-蛋白C和Ⅰ-蛋白S,Iodogen法制... 详细信息

蛋白C系统是机体重要的凝血反应调节系统,该文组合生化和免疫化学技术分别从人尿中提纯了血栓调节素和从利凡诺去白蛋白人血浆中纯化了蛋白C、蛋白S和蛋白C抑制物。免疫家兔产生抗血清。用氯胺T法制备了Ⅰ-蛋白C和Ⅰ-蛋白S,Iodogen法制备了Ⅰ-蛋白C抑制物,Bolton-Hunter法制备了Ⅰ-血栓调节素。采用平衡法分别建立了上述四种化合物的放射免疫分析。蛋白C、蛋白S、蛋白C抑制物和血栓调节素的分析灵敏度分别为3.94μg/L、9.87μg/L、2.58μg/L和6.16μg/L;批内和批间CV为4.40％和9.68％、4.99％和13.14％、2.73％和8.62％、5.10％和10.94％;平均回收率为104.28％、94.30％、101.89％和105.22％;工作范围为6.25～1024μg/L、21～700μg/L、4.8～1024μg/L和8.1～560μg/L。四种方法与其检测的相似化合物均无交叉。初步应用效果满意,该方法可为血栓栓塞性疾病的诊疗提供有效手段。

关键词：蛋白 PCI 放射免疫分析放射免疫测定放射性同位素诊断分子筛层析人血浆抗血清透析平衡 PS APC 利凡诺血栓调节素凝血酶蛋白酶 PMSF 血浆样品亲和层析分离

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蛋白C系统的放射免疫分析

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中国核科技报告 1997年第S1期 44-45页

作者：金坚阮长耿张满达无锡苏州医学院核医学国家重点实验室苏州苏州医学院血栓与止血研究室

蛋白C系统是机体重要的凝血反应调节系统,该文组合生化和免疫化学技术分别从人尿中提纯了血栓调节素和从利凡诺去白蛋白人血浆中纯化了蛋白C、蛋白S和蛋白C抑制物。免疫家兔产生抗血清。用氯胺T法制备了I-蛋白C和I-蛋白S,Iodogen法制备... 详细信息

蛋白C系统是机体重要的凝血反应调节系统,该文组合生化和免疫化学技术分别从人尿中提纯了血栓调节素和从利凡诺去白蛋白人血浆中纯化了蛋白C、蛋白S和蛋白C抑制物。免疫家兔产生抗血清。用氯胺T法制备了I-蛋白C和I-蛋白S,Iodogen法制备了I-蛋白C抑制物,Bolton-Hunter法制备了I-血栓调节素。采用平衡法分别建立了上述四种化合物的放射免疫分析。蛋白C、蛋白S、蛋白C抑制物和血栓调节素的分析灵敏度分别

关键词：放射免疫分析放射免疫测定放射性同位素诊断蛋白血栓调节素

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应用流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白

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中国小儿血液 1997年第5期2卷 216-219页

作者：徐杰阮长耿王爱青耿美菊苏州医学院附属儿童医院 215003 苏州医学院血栓与止血研究室苏州医学院核医学生物技术重点实验室

为检测血小板膜糖蛋白，本文建立了用流式细胞仪检测血小板膜表面糖蛋白GPⅠ6-Ⅸ，GPⅡ6－Ⅲa及活化血小板颗粒膜蛋白（GMP－140）的方法，并用于诊断1例血小板无力症。结果表明：流式细胞仪是一种快速、简便、灵敏检测血小板膜糖蛋白... 详细信息

为检测血小板膜糖蛋白，本文建立了用流式细胞仪检测血小板膜表面糖蛋白GPⅠ6-Ⅸ，GPⅡ6－Ⅲa及活化血小板颗粒膜蛋白（GMP－140）的方法，并用于诊断1例血小板无力症。结果表明：流式细胞仪是一种快速、简便、灵敏检测血小板膜糖蛋白的方法，为临床诊断血小板功能缺陷性疾病及血小板膜糖蛋白功能的研究提供了一种新的方法。

关键词：流式细胞仪血小板膜糖蛋白血小板功能缺陷

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