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P选择素在肾病综合征并发深静脉血栓中的作用及犬血栓模型磁共振分子成像观察

中华肾脏病杂志 2008年第12期24卷 883-889页

作者：周同李晓赵亚鹏金佩佩王学锋钟高仁汪登斌张明钧陈楠王鸿利上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏科 200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院放射科 200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院动物实验室 200025 上海血液学研究所血栓与止血研究室复旦大学放射药学研究所

目的观察P选择素在肾病综合征（NS）并发深静脉血栓形成（DVT）中作用，探讨P选择素靶向对比剂及分子磁共振成像（MRI）在DVT犬模型早期诊断应用的可行性。方法（1）选择我院2005年至2006年间住院NS患者41例，根据核素深静脉造影检查有... 详细信息

目的观察P选择素在肾病综合征（NS）并发深静脉血栓形成（DVT）中作用，探讨P选择素靶向对比剂及分子磁共振成像（MRI）在DVT犬模型早期诊断应用的可行性。方法（1）选择我院2005年至2006年间住院NS患者41例，根据核素深静脉造影检查有无伴发DVT，再分为DVT组和无DVT组，检测患者血中P选择素含量。（2）选择健康成年毕格犬，建立DVT模型，并按造模即刻、1h、3h采血并取静脉损伤节段，行血管组织和血中P选择素含量检测。（3）利用研制的抗P选择素单抗，制成P选择素靶向对比剂，结合体外犬静脉损伤节段血管MRI，进行犬活体内观察。结果（1）NS患者血P选择素水平较健康组显著增高（P〈O．01），DVT组又较无伴DVT组明显增高（P〈0．01）。（2）模型犬血P选择素水平较对照犬显著增高（P〈0．05），且于受损血管内膜及血栓形成部位明显表达。（3）制备的MRI对比剂，体外可明显增强犬离体受损血管与血栓部位显像信号。体内于犬静脉损伤局部注射对比剂30min，MRI即显示高于周围肌肉显影的血管信号；1h可见附壁血栓增强信号；至3h随血栓形成增大而持续强化，实验组对比度噪声比（CNR）值与对照组比较，差异有统计学意义（11．51±2．32比2．71±O．86，P〈0．01），且显示了与P选择素表达一致的信号强化效果。另从犬损伤部位远心端注射对比剂30rain至1h，也显示了上述成像效果；2h至4h血栓信号由明显上升渐见趋缓，延迟24h信号强度减弱，实验组CNR值与对照组间差异也有统计学意义（10．40±2．15比1．93±0．57，P〈0．01）。此外，该对比剂对实验犬的生命体征及心、肺、肝、肾等脏器均无明显影响。结论P选择素参与NS合并DVT。利用P选择素单抗MRI对比剂，可在活体内早期定位显像及反映血栓形成状态，为DVT早期诊断提供了一种可行方法。

关键词：肾病综合征静脉血栓形成早期诊断磁共振成像 P选择素

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急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子、组织因子途径抑制物、因子Ⅶ的检测及临床意义

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南方医科大学学报 2007年第12期27卷 1821-1823页

作者：熊石龙王前郑磊李俊玲文志斌贺石林南方医科大学南方医院检验医学中心广东广州510515 中南大学湘雅三医院超声科湖南长沙410013 中南大学湘雅医学院生理学系止血与血栓研究室湖南长沙410078

目的探讨急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子途径相关凝血因子的变化及其临床意义。方法观察分析69例急性心肌梗死、71例急性脑梗死患者以及50名健康老年人组织因子、组织因子途径抑制物、因子VII等指标。血浆中组织因子(TF)和组织因子... 详细信息

目的探讨急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子途径相关凝血因子的变化及其临床意义。方法观察分析69例急性心肌梗死、71例急性脑梗死患者以及50名健康老年人组织因子、组织因子途径抑制物、因子VII等指标。血浆中组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)活性测定采用发色底物法,抗原测定用ELISA法;凝血因子VII(FVII)促凝活性测定采用一期凝固法,FVIIa水平测定采用重组可溶性组织因子法。结果与对照组相比,急性心肌梗死患者血浆中TF活性、TF抗原、TFPI活性与TFPI抗原均显著增加(P均<0.05),而血浆中FⅦ:C无显著变化(P>0.05),但FⅦa显著增加(P<0.05);急性脑梗死患者血浆中TF活性、TF抗原均升高(P均<0.05),TFPI活性、TFPI抗原均降低(P均<0.05),而血浆中FⅦ:C、FⅦa显著增加(P均<0.05)。两病例组相比,急性心肌梗死组TF活性、抗原升高更为显著(P均<0.05);急性心肌梗死组TFPI活性、抗原增加,而急性脑梗死组均降低,差异具有显著性意义(P均<0.05);FⅦ:C在急性脑梗死组显著升高(P<0.05),而FⅦa两组差异并无显著性(P>0.05)。结论急性心肌梗死和急性脑梗死患者均存在组织因子途径的启动,血栓形成风险增加,测定上述指标对了解疾病发展趋势具有辅助作用。

关键词：急性心肌硬死急性脑梗死组织因子组织因子途径抑制物

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创伤患者纤维蛋白单体的聚合功能(英文)

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中国临床康复 2005年第47期9卷 154-155页

作者：杨锐魏文宁杨焰华中科技大学同济医学院协和医院血栓与止血研究室湖北省武汉市430022

背景创伤可以引发机体高凝血状态,并可导致显微外科手术失败。目的观察创伤患者治疗前后纤维蛋白单体聚合功能的变化,探索预测创伤后高凝状态和血栓形成的有效辅助手段。设计病例-对照观察,前后对照观察。单位华中科技大学同济医学院协... 详细信息

背景创伤可以引发机体高凝血状态,并可导致显微外科手术失败。目的观察创伤患者治疗前后纤维蛋白单体聚合功能的变化,探索预测创伤后高凝状态和血栓形成的有效辅助手段。设计病例-对照观察,前后对照观察。单位华中科技大学同济医学院协和医院血栓与止血研究室。对象创伤组受检病例为2001-05/2002-01华中科技大学同济医学院协和医院住院的创伤患者34例,男18例,女16例,年龄8～65岁;正常对照组为健康体检者96例,男50例,女46例,年龄21～68岁。所有受检者均无凝血障碍病史,无全身性与凝血相关疾病。方法血浆纤维蛋白单体聚合功能采用血浆纤维蛋白单体聚合功能测定系统进行测定。在蕲蛇毒的作用下,纤维蛋白原转变为纤维蛋白单体并发生聚合反应,伴随纤维蛋白单体聚合反应发生的浊度变化,用光度仪在340nm连续进行监测,并将电信号输入微机进行分析。创伤组分别于患者创伤后入院时和入院后经过临床清创、手术、缝合、补液及应用抗生素后第3天采集静脉血,测定纤维蛋白单体聚合功能。主要观察指标①纤维蛋白单体聚合速率(反映血浆纤维蛋白原浓度和功能的综合参数)。②最大吸光度(反映标本中凝固性血浆纤维蛋白原的量)。③纤维蛋白单体聚合速率与最大吸光度的比值(反映血浆纤维蛋白原分子的聚合功能)。结果全体受检者均完成相应检测并纳入数据统计中。①创伤组患者纤维蛋白单体聚合反应速率、纤维蛋白原含量、纤维蛋白单体聚合速率与最大吸光度的比值均显著高于正常对照组[创伤组0.87±0.31,(5.81±3.22)g/L,4.61±0.97;正常对照组0.61±0.15,(3.36±1.02)g/L,3.93±0.68,P<0.01]。②治疗3d后,尽管纤维蛋白单体聚合速率、纤维蛋白原含量有所下降,但仍高于正常组[3.93±0.68,(4.21±1.93)g/L],而纤维蛋白单体聚合速率与最大吸光度的比值无改变(4.68±1.19)。结论创伤患者纤维蛋白原水平增高功能增强。创伤患者机体处于高凝状态,有血栓形成趋势。纤维蛋白单体聚合功能测定可作为创伤后预测高凝状态和血栓形成的有效辅助手段。

关键词：创伤学纤维蛋白原纤维蛋白

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膜型基质金属蛋白酶-1的结构、功能与调节

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生命的化学 2005年第6期25卷 468-471页

作者：蒋菊香阮长耿吴士良江苏省血液研究所血栓与止血室苏州215004 苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州215123

膜型基质金属蛋白酶(membrane-type matrix metalloproteinase,MT-MMP)是一类基质金属蛋白酶家族的新成员,MT1-MMP是第一个鉴别出的膜型基质金属蛋白酶,它直接或间接降解细胞外基质中的多种成分,并对黏附分子有调节作用,被认为是MMP家... 详细信息

膜型基质金属蛋白酶(membrane-type matrix metalloproteinase,MT-MMP)是一类基质金属蛋白酶家族的新成员,MT1-MMP是第一个鉴别出的膜型基质金属蛋白酶,它直接或间接降解细胞外基质中的多种成分,并对黏附分子有调节作用,被认为是MMP家族中与肿瘤侵袭关系最密切的酶,具有独特的结构、功能与调节机制。

关键词： MT1-MMP 肿瘤侵袭调节机制

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剪切应力作用下血小板活化反应对血栓形成的影响

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中国临床康复 2005年第9期9卷 64-66页

作者：张民花包承鑫汪及元延边大学医学院附属医院血液内科吉林省延吉市133000 中国医学科学院血液学研究所血栓与止血研究室天津市300020

目的:通过剪切应力对血小板细胞骨架和细胞内游离钙离子浓度(犤Ca2+犦i)及血栓形成的影响,探讨物理作用下血小板活化机制。方法:利用锥板式血小板聚集仪、SDS-PAGE方法及Fura-2/AM法观察剪切应力对血小板聚集、细胞支架和胞浆内犤Ca2+犦... 详细信息

目的:通过剪切应力对血小板细胞骨架和细胞内游离钙离子浓度(犤Ca2+犦i)及血栓形成的影响,探讨物理作用下血小板活化机制。方法:利用锥板式血小板聚集仪、SDS-PAGE方法及Fura-2/AM法观察剪切应力对血小板聚集、细胞支架和胞浆内犤Ca2+犦i变化。结果:剪切前肌动蛋白纤维含量为(40.16±15.03)%,细胞内犤Ca2+犦i浓度为(29.88±8.89)nmol/L,低剪切与高剪切作用1min后肌动蛋白纤维含量分别达(47.42±18.00)%与(48.62±18.04)%,而细胞内犤Ca2+犦i浓度升高达(57.32±18.32)nmol/L及(128.28±56.28)nmol/L,与剪切前相比差异均有显著性意义(P<0.05或0.01),此外,钙调蛋白抑制剂阻碍血小板肌动蛋白纤维的形成及血小板聚集。结论:剪切应力作用下血小板发生了肌动蛋白纤维含量及细胞内游离钙水平的增高,并与剪切诱导的血小板聚集存在着平行关系,物理作用对体内血栓形成的机制有助于对血栓形成和一级康复干预的进一步认识。

关键词：血栓形成应力,物理细胞支架血小板活化

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急性脑梗死发作期间组织因子途径改变的观察

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中国危重病急救医学 2003年第9期15卷 529-531页

作者：文志斌熊石龙何晓凡何美霞贺石林解勤之蹇在伏陈方平肖波杨期东中南大学湘雅医学院生理学系止血与血栓研究室湖南长沙410078 中南大学湘雅医院湖南长沙410008

目的 :观察急性脑梗死 (ACI)与组织因子途径变化以及与该途径有关的其他凝血因子的关系。方法 :71例经 CT确诊为 ACI患者和 5 0名正常人被纳入研究范围。血浆中组织因子 (TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)活性测定采用发色底物法 ;抗原测... 详细信息

目的 :观察急性脑梗死 (ACI)与组织因子途径变化以及与该途径有关的其他凝血因子的关系。方法 :71例经 CT确诊为 ACI患者和 5 0名正常人被纳入研究范围。血浆中组织因子 (TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)活性测定采用发色底物法 ;抗原测定用酶联免疫吸附法 (ELISA) ;血浆中 F 促凝活性 (F ∶C)和F 促凝活性 (F ∶C)测定用一期凝固法 ;凝血酶原 (F )的活性测定采用 Ecarin法 ;纤维蛋白原 (Fbg)的活性测定采用凝血酶法 ;抗凝血酶 (AT )的测定用肝素辅因子法。结果 :与正常对照组比较 ,ACI患者血浆中TF活性显著增加 (P<0 .0 5 ) ,TF抗原含量显著增加 (P<0 .0 5 ) ,TFPI的活性降低 (P<0 .0 5 ) ,TFPI抗原含量明显降低 (P<0 .0 5 ) ;血浆 F ∶ C显著增加 (P<0 .0 1) ,血浆 F ∶ C明显下降 (P<0 .0 5 ) ,F 活性显著增加(P<0 .0 1) ,Fbg的活性显著增加 (P<0 .0 1) ;AT 活性显著降低 (P<0 .0 1)。结论 :ACI的发生与组织因子途径的启动有关 ,在

关键词：脑梗死,急性组织因子组织因子途径抑制物凝血酶原因子Ⅶ促凝活性因子Ⅷ促凝活性纤维蛋白原抗凝血酶Ⅲ

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纤维蛋白单体聚合功能及D-二聚体监测在脑损伤中的应用价值

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微循环学杂志 2003年第2期13卷 38-39页

作者：杨锐张方成魏文宁杨焰宋善俊华中科技大学同济医学院附属协和医院血栓与止血研究室邮政编码武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院脑外科邮政编码武汉430022

目的 :探讨脑损伤病人凝血与纤溶系统的有效监测指标。方法 :检测脑损伤后纤维蛋白单体聚合功能及D 二聚体含量的变化。结果 :①脑损伤病人纤维蛋白单体聚合反应速率 (FMPV)、纤维蛋白原含量 (Fbg)和纤维蛋白原功能指标均高于正常对照组... 详细信息

目的 :探讨脑损伤病人凝血与纤溶系统的有效监测指标。方法 :检测脑损伤后纤维蛋白单体聚合功能及D 二聚体含量的变化。结果 :①脑损伤病人纤维蛋白单体聚合反应速率 (FMPV)、纤维蛋白原含量 (Fbg)和纤维蛋白原功能指标均高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。②D 二聚体含量显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,而且随治疗进程呈现出下降趋势。结论 :检测纤维蛋白单体聚合功能及D 二聚体含量的变化为临床治疗提供了依据。

关键词：纤维蛋白单体聚合功能 D-二聚体监测脑损伤凝血功能

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补阳还五汤对凝血酶诱导血管内皮细胞释放NO,vWF,TFPI及表达组织因子的影响

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湖南医科大学学报 2002年第4期27卷 313-318页

作者：文志斌尚改萍何晓凡熊石龙汉建忠刘发益周春生肖振军李俊成贺石林中南大学湘雅医学院生理教研室止血与血栓研究室长沙410078 长治医学院生理教研室长治046000 中南大学湘雅医院老干科长沙410008

目的 :观察补阳还五汤对凝血酶诱导血管内皮细胞释放NO ,vWF ,TFPI和表达TF的影响。方法 :对传代培养的新生牛主动脉内皮细胞 (4～ 8代 )分别给予不同处理 ,取上清液测NO ,vWF ,TFPI;取细胞冻融液测定TF活性。结果 :①凝血酶促进血管内... 详细信息

目的 :观察补阳还五汤对凝血酶诱导血管内皮细胞释放NO ,vWF ,TFPI和表达TF的影响。方法 :对传代培养的新生牛主动脉内皮细胞 (4～ 8代 )分别给予不同处理 ,取上清液测NO ,vWF ,TFPI;取细胞冻融液测定TF活性。结果 :①凝血酶促进血管内皮细胞表达TF ,较对照组明显增高 (12 .86± 2 .4 3vs 4 .6 9± 0 .83,P<0 .0 1) ,呈剂量依赖性 (r =0 .985 ,P <0 .0 1,0～ 2 0U·ml- 1 ) ,并促进vWF的释放 (18.4 3± 3.2 0vs6 .4 2± 2 .84 ,P <0 .0 1) ,补阳还五汤则抑制TF表达和vWF的释放 (P <0 .0 1) ;②补阳还五汤促进血管内皮细胞释放NO ,较对照组明显升高 (5 .93± 0 .94vs 1.6 3± 0 .2 7,P <0 .0 1) ;③凝血酶能抑制血管内皮释放TFPI (0 .6 2± 0 .38vs 2 .6 4± 0 .93,P <0 .0 1) ,补阳还五汤对凝血酶的这种抑制作用没有明显的影响。结论 :补阳还五汤能抑制凝血酶诱导血管内皮细胞表达TF和释放vWF ,促进血管内皮细胞表达NO。

关键词：补阳还五汤凝血酶血管内皮细胞 NO vWF TFPI

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川芎嗪对炎症细胞因子刺激血管内皮细胞表达组织因子的影响

川芎嗪对炎症细胞因子刺激血管内皮细胞表达组织因子的影响

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湖南省生理科学会新世纪学术年会

作者：熊石龙文志斌何晓凡贺石林中南大学湘雅医学院生理学系止血与血栓生理研究室中南大学湘雅医学院生理学系止血与血栓生理研究室中南大学湘雅医学院生理学系止血与血栓生理研究室中南大学湘雅医学院生理学系止血与血栓生理研究室

目的:观察炎症细胞因子肿瘤坏死因子和白细胞介素-6对人脐静脉内皮细胞株ECV304组织因子表达及川芎嗪的干预作用。方法:TF活性采用一期凝固法测总的细胞促凝活性,TF mRNA采用半定量RT-PCR。结果:TNF(0-1000 U·ml)和IL-6(0-500 U... 详细信息

目的:观察炎症细胞因子肿瘤坏死因子和白细胞介素-6对人脐静脉内皮细胞株ECV304组织因子表达及川芎嗪的干预作用。方法:TF活性采用一期凝固法测总的细胞促凝活性,TF mRNA采用半定量RT-PCR。结果:TNF(0-1000 U·ml)和IL-6(0-500 U·ml)刺激ECV304 TF活性表达呈剂量依赖效应,分别在1000 U·ml和500 U·ml达到峰值;用1000 ug·ml 芎嗪预处理ECV304,则可使TF的活性下降70%;川芎嗪在0-1000 ug·ml范围内以剂量依赖方式抑制TNF(1000 U·ml)和IL-6(500 U·ml)的刺激作用（P<0.01）;TNF(1000 U·ml)和IL-6(500 U·ml)刺激ECV304 TF活性、TFmRNA表达呈时间依赖效应（0-8h）,其活性和mRNA分别在6h和2h达到峰值;川芎嗪也

关键词：组织因子川芎嗪内皮细胞炎症细胞因子

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利凡诺去白蛋白人血浆再利用的实验研究Ⅰ.蛋白C和蛋白S的纯化与鉴定

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中国生化药物杂志 2001年第3期22卷 121-124页

作者：陶永辉金坚王博诚张满达阮长耿江苏省原子医学研究所核医学国家重点实验室江苏无锡214063 苏州医学院血栓与止血研究室江苏苏州215007

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分蛋白C(PC)和蛋白S(PS)的分离纯化。方法采用钡盐吸附、分段盐析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化PC和PS。结果所得PC和PS的相对分子量分别为 (6 1&#... 详细信息

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分蛋白C(PC)和蛋白S(PS)的分离纯化。方法采用钡盐吸附、分段盐析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化PC和PS。结果所得PC和PS的相对分子量分别为 (6 1± 0 .9)、(83± 0 .8)kD ;等电点分别为 4.70± 0 .0 3、5 .2 0± 0 .0 3;分别富含Glu、Leu、Gly和Asp、Glu、Leu ;毛细管区带电泳分析高度均一 ;与文献报道基本一致 ;得率分别为 2 8.3%和 12 .6 %。结论该纯化路线省时、经济 ,有助于利凡诺去白蛋白人血浆的综合再利用和抗凝血成分输血制剂的研制和开发。

关键词：蛋白C 蛋白S 利凡诺白蛋白血浆纯化

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