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免疫学杂志 2010年第3期26卷 232-237页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所 400016 遵义医学院寄生虫学教研室

目的研究细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31融合蛋白免疫小鼠后诱导的免疫应答。方法 56只SPF级雌性Balb/c小鼠随机均分7组,分别为重组Bb-Eg95-EgA31皮下注射组(A组)、肌肉注射组(B组)、鼻腔内接种组(C组)、口服灌胃组(D组)... 详细信息

目的研究细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31融合蛋白免疫小鼠后诱导的免疫应答。方法 56只SPF级雌性Balb/c小鼠随机均分7组,分别为重组Bb-Eg95-EgA31皮下注射组(A组)、肌肉注射组(B组)、鼻腔内接种组(C组)、口服灌胃组(D组)、空载体对照组(E组)、Bb对照组(F组)和Bb培养用液体培养基(MRS)对照组(G组)。免疫后8周各组鼠用50个Eg原头节攻击,攻击25周后,处死小鼠,分离细粒棘球蚴包囊并称重,计算囊重抑制率;ELISA检测血清IgG及其亚类和IgE和脾细胞上清液IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平;MTT法测定脾细胞增殖反应;流式细胞仪检测脾CD4+和CD8+T细胞百分比和脾细胞凋亡发生率。结果重组Bb-Eg95-EgA31免疫组小鼠的囊重抑制率分别为45.33%、41.33%、70.67%和62.67%;血清IgG、IgG2a、IgG2b和IgG1水平升高,IgG3和IgE降低;脾IFN-γ、IL-12和TNF-α水平升高,IL-10水平降低;脾T淋巴细胞明显增殖;脾CD4+和CD8+T细胞显著增加;脾细胞凋亡发生率显著降低。结论细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-E-gA31融合蛋白能诱导小鼠产生有效的保护性免疫应答。

关键词：细粒棘球绦虫重组Rh—Eg95-EgA3 1 融合蛋白免疫应答

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠免疫应答的动态观察

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第2期26卷 99-102页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 遵义医学院寄生虫学教研室贵州遵义563003

目的:观察细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后其免疫应答的动态变化。方法:将疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,分别于免疫后2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周用ELISA法测定免疫小鼠血清中Ig... 详细信息

目的:观察细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后其免疫应答的动态变化。方法:将疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,分别于免疫后2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周用ELISA法测定免疫小鼠血清中IgG及其亚类和IgE水平。用MTT法测定脾淋巴细胞的增殖,用ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清液中IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平,用流式细胞术(FCM)检测脾CD4+和CD8+T细胞百分率。结果:口服免疫小鼠血清IgG、IgG2a、IgG2b、IgG1、IgG3和IgE水平分别在免疫后8、2、6、6、8和10周达到峰值。脾淋巴细胞悬液中IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后4、2、4和6周达到峰值。脾淋巴细胞增殖在免疫后6周达到峰值;脾CD4+T细胞在免疫后6周达到峰值,脾CD8+T细胞无明显变化。鼻腔内接种免疫小鼠血清IgG、IgG2a、IgG2b、IgG1、IgG3和IgE水平分别在免疫后10、6、10、8、8和10周达到峰值。脾淋巴细胞悬液中IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2、2、4和8周达到峰值。脾淋巴细胞增殖在免疫后6周达到峰值;脾CD4+T细胞在免疫后6周达到峰值,脾CD8+T细胞无明显变化。口服免疫和鼻腔内接种是两种较好的免疫途径,且前者优于后者。结论:细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗免疫应答

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31蛋白对感染小鼠脾细胞凋亡的抑制作用

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第1期28卷 26-29页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室遵义563003

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组蛋白Bb-Eg95-EgA31免疫小鼠被Eg原头节攻击感染后小鼠体内生成的棘球蚴囊重减少率及脾细胞凋亡的变化。方法56只雌性BALB/c小鼠随机均分7组,分别为重组蛋白皮下注射组(A组)、肌肉注射组(B组)、鼻腔内接种... 详细信息

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组蛋白Bb-Eg95-EgA31免疫小鼠被Eg原头节攻击感染后小鼠体内生成的棘球蚴囊重减少率及脾细胞凋亡的变化。方法56只雌性BALB/c小鼠随机均分7组,分别为重组蛋白皮下注射组(A组)、肌肉注射组(B组)、鼻腔内接种组(C组)、灌胃组(D组)、空载体对照组(E组)、双歧杆菌对照组(F组)和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组(G组)。A、B和D组分别以5×106、5×106和5×108蛋白克隆形成单位(CFU)悬浮于100μlMRS免疫小鼠,C组以5×105蛋白克隆形成单位(CFU)悬浮于10μlMRS免疫小鼠,E和F组分别以空载体[Bb(pGEX-1λT)]和Bb5×106CFU悬浮于100μlMRS皮下注射小鼠,G组以100μlMRS皮下注射小鼠。8周后各组均用Eg原头节(50个/只)攻击感染,25周后剖杀小鼠,分离细粒棘球蚴包囊并称重,计算囊重减少率;取脾,分离脾细胞,伴刀豆球蛋白(ConA)刺激培养,流式细胞仪检测脾细胞的凋亡发生率。结果A、B、C和D组小鼠的棘球蚴囊重分别为(41.0±23.0)mg、(44.0±22.0)mg、(22.0±21.0)mg和(28.0±16.0)mg,均低于G组(75.0±33.0)mg(P<0.05,P<0.01),A、B、C组与D组间囊重差异无统计学意义(P>0.05);E组(63.0±30.0)mg、F组(69.0±22.0)mg和G组间囊重差异无统计学意义(P>0.05)。未加ConA培养的脾细胞凋亡发生率,A(0.14±0.01)、B(0.14±0.01)、C(0.13±0.01)和D组(0.14±0.01)均低于G组(0.21±0.01)(P<0.05);C组低于A、B和D组(P<0.05);E组(0.20±0.01)、F组(0.20±0.01)和G组间差异无统计学意义(P>0.05);加ConA培养后的脾细胞凋亡发生率,A(0.19±0.01)、B(0.20±0.00)、C(0.17±0.01)和D组(0.19±0.01)均显著低于G组(0.26±0.01)(P<0.01),C组低于A和B组(P<0.01),C组低于D组(P<0.05),D组低于B组(P<0.05),A组与B组、D组间差异无统计学意义(P>0.05),E组(0.25±0.01)、F组(0.25±0.01)和G组间差异无统计学意义(P>0.05)。各组小鼠加ConA培养的脾细胞凋亡率显著高于相应的未加ConA培养组(P<0.01)。结论Eg原头节感染可引起小鼠脾细胞凋亡,用Eg重组蛋白Bb-Eg95-EgA31免疫小鼠在一定程度上可抑制感染鼠脾细胞的凋亡,诱导小鼠产生一定的保护力。

关键词：细粒棘球绦虫重组蛋白脾细胞凋亡

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猪囊尾蚴病DNA疫苗研究现状

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第2期28卷 148-152页

作者：周必英陈雅棠李文桂重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室遵义563003

猪囊尾蚴病DNA疫苗是近年来出现和发展起来的一种新型疫苗,不仅可以引起体液免疫,而且还能诱导高水平的细胞免疫应答,在猪囊尾蚴病预防方面优势明显。本文就猪囊尾蚴病DNA疫苗的研究现状作一综述。

关键词：猪带绦虫猪囊尾蚴病 DNA疫苗

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的动态观察

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四川大学学报（医学版） 2010年第5期41卷 764-766页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室遵义563003

目的动态观察细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法将5×108克隆形成单位(CFU)和5×105CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16... 详细信息

目的动态观察细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法将5×108克隆形成单位(CFU)和5×105CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用流式细胞术(FCM)检测免疫小鼠脾CD4+和CD8+T细胞亚群的百分比,同时设双歧杆菌液体培养基(MRS)对照。结果口服灌胃组的脾CD4+T细胞亚群在免疫后4~10周升高,免疫后6周达最高水平,CD8+T细胞亚群无明显变化;鼻腔内接种组脾CD4+T细胞亚群在免疫后4~8周升高,免疫后6周达最高水平,CD8+T细胞亚群无明显变化。结论 CD4+T细胞亚群在细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导的小鼠免疫应答中起关键作用。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗脾细胞亚群流式细胞术

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞因子变化的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第4期28卷 268-272页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室遵义563003

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法 56只雌性BALB/c小鼠随机均分7组,A组和B组分别皮下和肌肉注射5×106蛋白克隆形成单位(CFU)疫苗悬浮于100μl双歧杆菌液... 详细信息

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法 56只雌性BALB/c小鼠随机均分7组,A组和B组分别皮下和肌肉注射5×106蛋白克隆形成单位(CFU)疫苗悬浮于100μl双歧杆菌液体培养基(MRS)、C组鼻腔内接种5×105CFU+10μlMRS、D组经口灌胃5×108CFU+100μlMRS、E组(空载体对照组)5×106CFUBb(pGEX-1λT)+100μlMRS、F组为双歧杆菌(Bb)对照组和G组为双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组。免疫后8周各组鼠攻击感染50个Eg原头节,感染后25周剖杀小鼠,取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原(EgAg)刺激培养,同时设伴刀豆球蛋白A(ConA)或脂多糖(LPS)刺激对照和非刺激组。收集脾细胞培养上清液,ELISA法检测脾细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)和IL-10水平。结果 A、B、C和D组小鼠脾细胞培养上清液中,IFN-γ水平分别为(137.5±23.2)、(162.5±23.2)、(250.0±53.5)和(215.0±37.4)pg/ml,均高于MRS对照组(50.0±10.7)pg/ml(P<0.01);IL-12水平分别为(27.5±4.6)、(32.5±4.6)、(45.0±5.4和(35.0±5.4)pg/ml,均高于MRS对照组(15.0±5.4)pg/ml(P<0.01);TNF-α水平分别为(275.0±46.3)、(325.0±46.3)、(450.0±53.5)和(350.0±53.5)pg/ml,均高于MRS对照组(150.0±53.5)pg/ml(P<0.01);IL-10水平分别为(37.5±4.6)、(35.0±5.4)、(25.0±5.4)和(32.5±4.6)pg/ml,均低于MRS对照组(45.0±5.4)pg/ml(P<0.05或P<0.01)。结论细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠产生Th1型保护性免疫应答。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗细胞因子

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞亚群变化的研究

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中国人兽共患病学报 2010年第3期26卷 211-214页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室贵州563003

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率及脾细胞亚群的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/c小... 详细信息

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率及脾细胞亚群的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/c小鼠,免疫后8周每鼠用50个Eg原头节攻击感染,感染后25周剖杀小鼠,分离细粒棘球蚴包囊并称重,计算囊重抑制率;取脾,分离脾细胞,流式细胞仪检测脾CD4+和CD8+T细胞亚群的百分比,同时设有空载体、Bb和MRS对照。结果以上4种疫苗接种组小鼠的囊重抑制率分别为45.33%、41.33%、70.67%和62.67%;疫苗接种组的脾CD4+和CD8+T细胞亚群显著增加,鼻腔内接种和口服免疫组的的CD4+T细胞亚群和CD4+/CD8+比值显著高于皮下和肌肉注射组。结论CD4+和CD8+T细胞亚群在疫苗诱导的保护力中起重要作用。疫苗鼻腔内接种和口服免疫是两种较好的免疫途径。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb—Eg95-EgA31疫苗脾细胞亚群

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乙型肝炎流行病学的研究新进展

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广州医药 2010年第4期41卷 1-2页

作者：朱科伦朱郇悯曾文铤梁建新广州医学院第一附属医院传染病学与流行学病教研室广州510120 广州医学院广州510182

携带乙肝病毒的人逐年减少,输血传播乙肝已下降到1%以下,携带乙肝病毒的妇女超过95%可以成功阻断母婴传播,新近研究提示日常接触传播乙肝机会相对较少,乙肝疫苗应用后,乙肝的易感者逐年减少。乙型肝炎流行病学的新特点,可为新的乙肝防... 详细信息

携带乙肝病毒的人逐年减少,输血传播乙肝已下降到1%以下,携带乙肝病毒的妇女超过95%可以成功阻断母婴传播,新近研究提示日常接触传播乙肝机会相对较少,乙肝疫苗应用后,乙肝的易感者逐年减少。乙型肝炎流行病学的新特点,可为新的乙肝防疫措施的实施提供有利的可行条件。

关键词：乙型肝炎乙肝疫苗流行病学

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人兽共患病对传染病学的新挑战

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广州医药 2010年第3期41卷 1-2页

作者：朱科伦朱郇悯曾文铤梁建新广州医学院第一附属医院传染病学与流行病学教研室广州510120 广州医学院 510182

近代人兽共患疾病不断增加,80%新发现的传染病属于人兽共患。人兽共患传染病对经济繁荣和社会安定有较大的威胁。防范人兽共患传染病的措施是加强人兽共患传染病的教育、研究和宣传,建立健全的国家兽医体系。

关键词：传染病学人兽共患病

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钩端螺旋体病预警指标体系研究

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中国人兽共患病学报 2010年第10期26卷 891-894页

作者：马芬卢亮平王丽曾宪嘉阳波潘利万康林李辉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病学教研室北京100005 传染病预防控制国家重点实验室传染病预防控制所中国疾病预防控制中心北京102206 清华大学第一附属医院北京100016

目的建立钩端螺旋体病预警指标体系。方法首先采用文献调研和专家会议法拟订钩体病预警指标体系初始框架和指标,然后应用德尔菲法确定预警指标和指标权重,权重法比较各指标间作用的大小。结果共筛选出7个一级预警指标、27个二级预警指标... 详细信息

目的建立钩端螺旋体病预警指标体系。方法首先采用文献调研和专家会议法拟订钩体病预警指标体系初始框架和指标,然后应用德尔菲法确定预警指标和指标权重,权重法比较各指标间作用的大小。结果共筛选出7个一级预警指标、27个二级预警指标,并针对钩体病流行区及暴发流行潜在风险地区分别建立预警指标体系,同时从理论上探讨了用于征兆预警、早期预警和发布预警三级预警的指标组合模式。结论初步建立了钩端螺旋体病暴发流行预警指标体系,可对该病的预测、预警提供参考。

关键词：钩端螺旋体病预警德尔菲法

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