检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验眼科杂志 2012年第10期30卷 877-881页

作者：蔡琴华刘高勤夏春林陆培荣苏州大学附属第一医院眼科 215006 苏州大学医学部细胞神经生物学研究室暨解剖学系 215123

背景基质细胞源性细胞因子1α/趋化因子受体4（SDF-1αCXCR4）信号途径是机体内介导多种细胞趋化、黏附以及增生的关键分子，能通过促进血管内皮祖细胞向肿瘤组织的迁移而促进肿瘤新生血管的发生，同时也参与新生血管性眼病的病理过程... 详细信息

背景基质细胞源性细胞因子1α/趋化因子受体4（SDF-1αCXCR4）信号途径是机体内介导多种细胞趋化、黏附以及增生的关键分子，能通过促进血管内皮祖细胞向肿瘤组织的迁移而促进肿瘤新生血管的发生，同时也参与新生血管性眼病的病理过程。目的探讨阻断CXCR4信号通路对实验性角膜新生血管（CNV）发生发展的抑制作用及机制。方法收集8周龄BALB／c小鼠80只，将浸有1mol／LNaOH的滤纸贴附在左眼角膜中央40S以诱导小鼠CNV，按随机数字表法将动物分为透明质酸钠组（质量分数0．2％透明质酸钠点眼）及CXCR4拮抗剂组（0．2％透明质酸钠配制的CXCR4拮抗剂点眼），自碱烧伤当日分别用相应的药物点眼共14d，于第14天裂隙灯下观察两组小鼠的CNV，然后制备角膜悬液，用流式细胞技术检测角膜悬液中CD31的表达值；制备角膜组织切片，以逆转录PCR（RT—PCR）和Western blot法检测CXCR4mRNA和蛋白在小鼠角膜组织中的表达，以免疫组织化学法检测角膜组织内CD31阳性标记的血管内皮细胞。以ELISA法检测角膜组织裂解液内血管内皮生长因子（VEGF）的表达。使用CXCR4拮抗剂干预小鼠腹腔来源的巨噬细胞，检测粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM—CSF）刺激后培养上清液中VEGF的表达。结果小鼠角膜碱烧伤后2周，裂隙灯下可见CNV达高峰，与透明质酸钠组比较，CXCR4拮抗剂组CNV明显减少；角膜免疫组织化学检测显示，CXCR4拮抗剂组小鼠角膜中CD31阳性染色强度弱于透明质酸钠组，CD31阳性细胞数量明显减少；进一步流式细胞技术检测发现，CXCR4拮抗剂组CD31阳性表达率为（9．50±2．34）％，明显低于透明质酸钠组的（17．50±3．16）％，差异有统计学意义（t=-7．312，P〈0．05）；RT—PCR和Western blot法检测表明，碱烧伤后2、4、7d小鼠角膜组织中CXCR4mRNA和蛋白的表达均明显高于正常小鼠角膜组织，组间比较差异均有统计学意义（P〈0．01；P〈0．05）。ELISA检测结果显示，CXCR4拮抗剂点眼后4d、7d角膜组织内VEGF表达明显低于透明质酸钠组，差异均有统计学意义（t=10．927、5．151，P〈0．05）。体外实验发现，细胞培养后12、24和48h，GM—CSF＋CXCR4拮抗剂组上清液中VEGF的表达水平明显低于GM—CSF组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论CXCR4拮抗剂能通过下调VEGF的表达抑制实验性CNV的形成。

关键词：趋化因子受体4 拮抗剂新生血管碱烧伤趋化因子

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星形胶质细胞机械性损伤后内皮性脂酶的表达

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苏州大学学报（医学版） 2011年第3期31卷 367-370页

作者：赵爱琴朱云霞孙茂民贾俊霞夏春林苏州大学医学部解剖学系暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215123

目的研究星形胶质细胞划痕损伤后内皮性脂酶(EL)的表达情况。方法取新生大鼠脑皮质,体外分离培养、纯化星形胶质细胞,对其进行划痕损伤,取损伤后不同时间点0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h及正常对照,用Western blot和免疫组化标... 详细信息

目的研究星形胶质细胞划痕损伤后内皮性脂酶(EL)的表达情况。方法取新生大鼠脑皮质,体外分离培养、纯化星形胶质细胞,对其进行划痕损伤,取损伤后不同时间点0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h及正常对照,用Western blot和免疫组化标记检测EL的表达变化及其与凋亡促进因子caspase-3的关系。结果与正常对照组比较,胶质细胞在损伤后6 h EL的表达增高十分明显(P<0.01),在损伤后1h出现caspase-3的表达增高(P<0.01)。结论星形胶质细胞机械性损伤后1 h出现caspase-3表达增高,随后出现EL表达增高,提示星形胶质细胞于损伤后早期即出现凋亡现象,EL在中枢神经系统损伤后修复与再生过程中起重要作用。

关键词：星形胶质细胞内皮性脂酶损伤修复 caspase-3

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桩蛋白在两型星形胶质细胞及神经元中的差异表达

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神经解剖学杂志 2011年第4期27卷 360-364页

作者：张志军何江虹倪衡建夏春林苏州大学医学部人体解剖学系暨细胞神经生物学研究室苏州215123 南通大学医学院人体解剖学系江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的:观察桩蛋白在大鼠两型星形胶质细胞及神经元中的差异表达情况。方法:通过细胞培养并结合免疫荧光和RT-PCR方法,观察了桩蛋白的mRNA及蛋白在大鼠两型星形胶质细胞T1A和T2A以及神经元中的表达。结果:RT-PCR显示体外培养的T1A表达桩蛋... 详细信息

目的:观察桩蛋白在大鼠两型星形胶质细胞及神经元中的差异表达情况。方法:通过细胞培养并结合免疫荧光和RT-PCR方法,观察了桩蛋白的mRNA及蛋白在大鼠两型星形胶质细胞T1A和T2A以及神经元中的表达。结果:RT-PCR显示体外培养的T1A表达桩蛋白mRNA,而T2A和神经元未表达桩蛋白mRNA;免疫荧光染色显示桩蛋白主要分布于T1A的胞浆及突起中。结论:桩蛋白在T1A中表达,但未表达于T2A和神经元中;本实验结果为进一步研究桩蛋白在T1A中的生物学作用奠定了基础。

关键词：桩蛋白 1型星形胶质细胞 2型星形胶质细胞神经元大鼠

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短发夹状干扰RNA沉默信号传导和转录激活子3基因表达对大肠癌细胞的影响

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苏州大学学报（医学版） 2010年第2期30卷 252-256页

作者：钱伟峰管文贤高源乔志明黄兴锐夏春林苏州市立医院本部普外科江苏苏州215002 苏州大学医学部解剖学系暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215123

目的构建携带信号传导和转录激活子3(STAT3)基因短发夹状干扰RNA(shRNA)的真核表达载体,观察干扰STAT3表达对大肠癌细胞HT-29细胞增殖的影响。方法从GenBank STAT3mRNA上寻找到3条符合特征的靶序列,合成靶序列的DNA寡核苷酸链,合成双链D... 详细信息

目的构建携带信号传导和转录激活子3(STAT3)基因短发夹状干扰RNA(shRNA)的真核表达载体,观察干扰STAT3表达对大肠癌细胞HT-29细胞增殖的影响。方法从GenBank STAT3mRNA上寻找到3条符合特征的靶序列,合成靶序列的DNA寡核苷酸链,合成双链DNA,并和BamHⅠ和HindⅢ酶切后的pRNAT-U6.1/Neo载体质粒连接产生重组质粒,行PCR和测序鉴定。重组质粒瞬时转染大肠癌HT-29细胞,实时定量PCR、Western blot检测STAT3的表达。筛选出最佳重组质粒,转染大肠癌细胞后,MTT检测细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果成功构建了携带有STAT3基因的shRNA的重组质粒,PCR和测序证实重组质粒构建正确。3种重组质粒对大肠癌HT-29细胞STAT3的表达有明显的抑制作用。筛选出的最佳重组质粒转染大肠癌细胞后,细胞增殖能力明显减弱;细胞周期分析显示,G0/G1期细胞占(74.80±1.85)%,S期细胞占(15.72±2.26)%,与对照组差异显著(P<0.01)。结论干扰STAT3基因的表达可以有效抑制大肠癌HT-29细胞的生长。

关键词： RNA干扰 shRNA STAT3 大肠癌

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STAT3基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定

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江苏医药 2009年第8期35卷 923-925页

作者：钱伟峰管文贤高源乔志明黄兴锐夏春林苏州大学医学部解剖学系暨细胞神经生物学研究室 215002 苏州市立医院普通外科苏州市立医院本部普通外科

目的构建携带信号传导和转录激活子3(STAT3)基因短发夹状干扰RNA(shRNA)的真核表达载体。方法从GenBank STAT3mRNA上寻找到3条符合特征的靶序列,合成靶序列的DNA寡核苷酸链,合成双链DNA,并和BamHⅠ和HindⅢ酶切后的pRNAT-U6.1/Neo载体... 详细信息

目的构建携带信号传导和转录激活子3(STAT3)基因短发夹状干扰RNA(shRNA)的真核表达载体。方法从GenBank STAT3mRNA上寻找到3条符合特征的靶序列,合成靶序列的DNA寡核苷酸链,合成双链DNA,并和BamHⅠ和HindⅢ酶切后的pRNAT-U6.1/Neo载体质粒连接产生重组质粒,PCR筛选阳性克隆,并行测序鉴定。重组质粒转染大肠癌LoVo细胞,RT-PCR检测STAT3的表达。结果PCR和测序证实重组质粒构建正确。3种重组质粒对大肠癌LoVo细胞STAT3的表达有较强的抑制作用。结论成功构建了携带有STAT3基因的短发夹状干扰RNA的重组质粒。

关键词：核糖核酸干扰信号传导和转录激活子3

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一种获取大量高纯度O-2A祖细胞的培养方法

一种获取大量高纯度O-2A祖细胞的培养方法

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中国解剖学会2013年年会

作者：姚扬明刘天云夏春林苏州大学医学部解剖学系暨细胞神经生物学研究室

本实验利用促红细胞生成素EPO（erythropoetin,10 U/ml）,可获取大量高纯度的O-2A祖细胞（oligodendrocyte-type-2-astrocyte progenitor cells）。原代培养新生24 h内的SD大鼠脑皮质来源的混合胶质细胞,第9天采用摇床振荡法（170 r/min,1 h）去除小胶质细胞。在37℃、5%CO的细胞培养箱中孵育2 h,放入摇床上过夜（200 r/min,18 h）,收集O-2A祖细胞。剩下的未摇净的少量O-2A祖细胞和

关键词：祖细胞培养方法

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复合型阿尔茨海默病大鼠模型的建立及其神经细胞凋亡的线粒体通路的研究

复合型阿尔茨海默病大鼠模型的建立及其神经细胞凋亡的线粒体通路...

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中国解剖学会2010年年会

作者：赵丽娟汪润孙茂民苏州大学医学部解剖学系暨细胞神经生物学研究室苏州215123

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