检索结果-内蒙古大学图书馆

CD4^+CD25^+调节性T细胞可塑性分化的研究进展

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免疫学杂志 2014年第8期30卷 744-748页

作者：胡燕李永菊廖珍媛朱顺飞熊思东徐林遵义医学院免疫学教研室 563000 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院 215000

新近研究显示CD4+CD25+调节性T细胞的分化过程及其功能在一定条件下存在可塑性。这不仅体现了机体免疫调节机制的复杂性,而且还提示该过程与炎症、自身免疫性疾病和肿瘤等临床疾病的发生发展过程密切相关。本文就其相关研究进展做一综述。

关键词： CD4+CD25+调节性T细胞分化可塑性

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真核表达载体pEGFP-C2-miR-126-sponge的构建及其表达活性研究

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第三军医大学学报 2014年第1期36卷 33-37页

作者：胡燕廖珍媛李永菊陈超朱顺飞熊思东徐林遵义医学院免疫学教研室贵州遵义563000 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院江苏苏州215000

目的构建靶向miR-126的真核表达载体pEGFP-C2-miR-126-海绵体(sponge),并探讨其下调miR-126的表达对肝癌HepG2细胞体外生长的影响,为后续深入研究miR-126在肝癌发生中的作用提供前期实验基础。方法合成miR-126-sponge,构建pEGFP-C2-miR-... 详细信息

目的构建靶向miR-126的真核表达载体pEGFP-C2-miR-126-海绵体(sponge),并探讨其下调miR-126的表达对肝癌HepG2细胞体外生长的影响,为后续深入研究miR-126在肝癌发生中的作用提供前期实验基础。方法合成miR-126-sponge,构建pEGFP-C2-miR-126-sponge真核表达载体,体外瞬时转染肝癌细胞HepG2,荧光显微镜下观察EGFP的表达情况;Real-time PCR检测细胞中miR-126的表达水平;MTT法和克隆形成实验检测细胞的增殖变化;划痕实验观察细胞的体外迁移能力改变。结果成功构建pEGFP-C2-miR-126-sponge真核表达载体(命名为p-miR-126-sp);Real-time PCR结果显示,与对照组(p-Cont)相比,p-miR-126-sp组中miR-126表达水平显著降低(P<0.05);MTT检测发现,p-miR-126-sp组中细胞增殖数目明显减少(P<0.05);此外,p-miR-126-sp组的克隆形成数和细胞迁移数均明显减少(P<0.05)。结论 miR-126-sponge可显著下调miR-126的表达水平进而抑制肝癌细胞HepG2的体外增殖及迁移能力。

关键词： miR-126-sponge 肝癌 HepG2细胞细胞增殖

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腺病毒介导的ING4基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其分子机制

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中国肺癌杂志 2014年第2期17卷 142-147页

作者：黄锦宏杨吉成凌春华赵大国谢宇锋由振华常熟市第二人民医院呼吸内科常熟215500 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞与分子生物学教研室苏州215123 苏州大学附属第一医院呼吸内科苏州215006

背景与目的肿瘤生长抑制因子4(inhibitor of growth 4,ING4)基因是一种重要的肿瘤抑制因子,研究发现ING4基因对多种肿瘤细胞具有抑癌作用。本研究旨在探讨ING4基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其潜在的作用机制。方法采用SPC-A... 详细信息

背景与目的肿瘤生长抑制因子4(inhibitor of growth 4,ING4)基因是一种重要的肿瘤抑制因子,研究发现ING4基因对多种肿瘤细胞具有抑癌作用。本研究旨在探讨ING4基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其潜在的作用机制。方法采用SPC-A1细胞株建立肺腺癌裸鼠移植瘤模型,15只荷瘤裸鼠随机等分为PBS组、腺病毒组(Ad-GFP组)、腺病毒介导的ING4组(Ad-ING4组),上述各组进行局部干预用药,动态测量肿瘤体积,治疗结束后摘取瘤体称重并计算瘤重抑瘤率;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测瘤体内细胞凋亡情况,免疫组织化学SP法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、环氧化酶-2(COX-2)、Fas与FasL的表达。结果 Ad-ING4组的肿瘤体积、瘤重均呈现明显下降,与Ad-GFP组抑瘤率(1.31%±0.31%)比较,差异有统计学意义(P<0.05),其抑瘤率为(33.17%±5.24%);Ad-ING4组的凋亡指数为(69.23%±6.53%),与PBS组(17.04%±1.10%)、Ad-GFP组(18.81%±1.93%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。SP法检测结果显示,Ad-ING4可明显上调Caspase-3、Fas与FasL表达,下调COX-2表达。结论 ING4具有抑制肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,该作用机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。

关键词：生长抑制因子4 肺肿瘤移植瘤

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人类多重剪接RNA结合蛋白类基因的克隆和分析

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江苏医药 2013年第6期39卷 624-628页

作者：张雅娟肖娟娟鲁德意王尉平苏州卫生职业技术学院检验药学系江苏省215009 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院生物化学与分子生物学教研室

目的通过同源筛选的方法拼接并克隆人类多重剪接RNA结合蛋白2(RBPMS2)基因。方法采用同源筛选策略,以人RBPMS2基因作为信息探针,在GeneBank数据库中进行分析,将获得的高度同源的表达序列标签(EST)用VECTOR NTI软件拼接成重叠群。通过UCS... 详细信息

目的通过同源筛选的方法拼接并克隆人类多重剪接RNA结合蛋白2(RBPMS2)基因。方法采用同源筛选策略,以人RBPMS2基因作为信息探针,在GeneBank数据库中进行分析,将获得的高度同源的表达序列标签(EST)用VECTOR NTI软件拼接成重叠群。通过UCSCGenome Blat Server分析,确定RBPMS2基因的染色体定位,SMART网上分析工具进行结构域预测,Unigene数据库进行表达谱分析。结果电子克隆到人类RBPMS2新基因cDNA序列,含完整的开放阅读框(ORF)。RBPMS2基因编码的多肽由209个氨基酸组成,分子量22.5KDa,等电点8.63。SMART分析显示RBPMS2蛋白包含1个RNA识别模体(RRM)结构域。RBPMS2基因位于第15号染色体,定位在15q22.31,由7个外显子和6个内含子组成。电子表达谱分析显示RBPMS2在卵细胞、受精卵、囊胚、不同发育阶段的胚胎、膀胱、肾脏等组织中高表达。结论分析并克隆到了一个新的人类RBPMS2基因。

关键词：多重剪接RNA结合蛋白克隆

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B7-H4实时荧光定量PCR检测方法的建立及其在人胃癌组织中的初步应用

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中国医药生物技术 2013年第2期8卷 81-87页

作者：王琦蒋敬庭魏文祥苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞与分子生物学教研室 215123 苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心常州213003

目的建立实时荧光定量PCR检测B7-H4的方法并初步应用于人胃癌组织。方法将B7-H4和内参GAPDH的PCR扩增产物经测序鉴定正确后克隆入载体pMD19－T，构建重组质粒标准品，并纯化、定量及梯度稀释，分别建立B7．H4和GAPDH的标准曲线，应用实... 详细信息

目的建立实时荧光定量PCR检测B7-H4的方法并初步应用于人胃癌组织。方法将B7-H4和内参GAPDH的PCR扩增产物经测序鉴定正确后克隆入载体pMD19－T，构建重组质粒标准品，并纯化、定量及梯度稀释，分别建立B7．H4和GAPDH的标准曲线，应用实时荧光定量PCR检测8例人胃癌组织中的B7一H4相对于GAPDH的表达情况。结果B7．H4的最低检测拷贝数为5．27拷贝，线性范围5．27×10^1～5．27×10^7拷贝，标准曲线方程Y=-3．1395X＋41．805，直线回归相关系数r=0．994904，批间变异系数范围2.39％～3．59％，扩增效率108．2％；GAPDH的最低检测拷贝数为38．6拷贝，线性范围3．86×10^2～3．86×10^7拷贝，标准曲线方程Y=-3．2436x＋41．083，直线回归相关系数r=0．998913，批间变异系数范围2．26％～3．86％，扩增效率103．4％。8例人胃癌组织的B7．H4相对于GAPDHmRNA表达水平在0．044～0．888之间。结论荧光定量PCR检测B7．H4的方法具备较高的敏感性和特异性，且系统有良好的重复性和线性范围。

关键词：胃肿瘤实时荧光定量PCR B7-H4

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p53、p21^Gip1/WAF1和Gadd45α在乳腺癌中的表达及其意义

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中华医学杂志 2012年第34期92卷 2389-2393页

作者：高其忠费伯健齐晓薇浦勇冯一中苏州大学附属第四医院普通外科江苏省无锡市214062 苏州大学附属第四医院病理科江苏省无锡市214062 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病理教研室苏州大学附属第二医院病理科

目的探讨p53、p21^Gip1/WAF1和Gadd45α在乳腺癌中的表达情况及其与临床病理参数和预后的关系。方法采用组织芯片和免疫组化sP法检测133例乳腺癌组织及其癌旁正常组织中p53、p21^Gip1/WAF1和Gadd45α的表达，应用Spearman秩和相关分析... 详细信息

目的探讨p53、p21^Gip1/WAF1和Gadd45α在乳腺癌中的表达情况及其与临床病理参数和预后的关系。方法采用组织芯片和免疫组化sP法检测133例乳腺癌组织及其癌旁正常组织中p53、p21^Gip1/WAF1和Gadd45α的表达，应用Spearman秩和相关分析两者之间的相关性，应用***法和Cox多因素回归模型分析与预后的关系。结果p53、p21^Gip1/WAF1和Gadd45α在乳腺癌组织中的阳性表达率（58．6％和47．4％）高于正常乳腺组织（O％）（P〈0．05）；Gadd45et在乳腺癌组织中的阳性表达率（41．4％）低于正常乳腺组织（P〈0．05）。v53与淋巴结转移、临床分期相关，差异均有统计学意义（均P〈0．05），p53、p21^Gip1/WAF1与组织分化程度、局部复发、C—erbB-2状态相关，Gadd45a与组织分化程度、腋窝淋巴结转移、远处转移组、ER／PR阳性状态相关。等级相关分析结果提示p53、p21^Gip1/WAF1表达与p53表达呈正相关，Gadd45a表达与p53表达呈负相关，p53、p21^Gip1/WAF1表达与Gadd45ct表达无相关性。结合随访资料，***分析显示p53、p21^Gip1/WAF1、Gadd45a、p53、淋巴结转移、C—erbB-2、TNM分期与预后相关，Cox多因素回归分析提示p53、p21^Gip1/WAF1、C—erbB-2、TNM分期是独立的预后参数，Kaplan-Meier分析提示p53、p21^Gip1/WAF1和p53（＋）Gadd45ct（-）与乳腺癌不良预后相关。结论p53、p21^Gip1/WAF1和Gadd45α的表达与乳腺癌的病理参数及预后相关，p53（＋）Gadd45ct（-）和p53、p21^Gip1/WAF1（＋）可作为独立的预后参数。

关键词：乳腺肿瘤 p53、p21^Gip1/WAF1 Gadd45α

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Gadd45a和p53在乳腺癌中的表达及临床病理意义

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南京医科大学学报（自然科学版） 2012年第2期32卷 226-230页

作者：高其忠费伯健冯一中苏州大学附属第四医院普通外科江苏无锡214062 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病理教研室江苏苏州215123 苏州大学附属第二医院病理科江苏苏州215123

目的:探讨Gadd45a和p53在乳腺癌中的表达情况及其与临床病理参数和预后的关系。方法:采用免疫组化法检测78例乳腺癌组织及其癌旁正常组织中Gadd45a和p53的表达。结果:Gadd45a在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.4%,明显低于正常乳腺组织,p5... 详细信息

目的:探讨Gadd45a和p53在乳腺癌中的表达情况及其与临床病理参数和预后的关系。方法:采用免疫组化法检测78例乳腺癌组织及其癌旁正常组织中Gadd45a和p53的表达。结果:Gadd45a在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.4%,明显低于正常乳腺组织,p53在乳腺癌组织中的阳性表达率为65.4%,明显高于正常乳腺组织,差异均具有统计意义(P<0.05);Gadd45a在乳腺癌组织学Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组的阳性表达率依次下降,差异均有统计学意义(P<0.05);p53在伴有淋巴结转移组中的阳性表达率高于无淋巴结转移组,差异均有统计意义(P<0.05);p53表达与Gadd45a表达呈负相关(P<0.05);Gadd45a阳性组的生存期长于阴性组,生存率高于阴性组,存在统计学差异;p53阳性组的生存期短于阴性组,生存率低于阴性组,存在统计学差异(P<0.05);p53(+)Gadd45a(-)组(即阳性组)中位生存时间短于阴性组,生存率低于阴性组。结论:Gadd45a和p53蛋白的检测可作为乳腺癌恶性程度的检测指标;p53的表达与乳腺癌的转移相关,Gadd45a的表达与乳腺癌的分化分级相关;p53高表达及Gadd45a低表达与乳腺癌的不良预后相关;p53(+)Gadd45a(-)表型与乳腺癌的不良预后相关;Gadd45a蛋白有望成为乳腺癌治疗的新的靶点。

关键词： Gadd45a p53 乳腺癌

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食管癌预后的全基因组关联研究

食管癌预后的全基因组关联研究

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：吴晨李栋贾卫华胡志斌周翊峰于典科童彤王明荣林冬梅乔燕周宇灵常江翟侃王梦菡卫丽绚谭文沈洪兵曾益新林东昕中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所病因及癌变研究室中山大学肿瘤防治中心实验研究部华南肿瘤学国家重点实验室南京医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系苏州大学医学部基础医学与生物科学学院中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病理科

全基因组关联研究（GWAS）利用高密度单核甘酸多态（Single Nucleotide Polymorphisms,SNP）芯片,对全基因组范围内几十万甚至上百万个SNP进行检测,通过多中心、独立的大样本量验证,进而发现与疾病或表型相关的遗传位点。本研究目的寻... 详细信息

全基因组关联研究（GWAS）利用高密度单核甘酸多态（Single Nucleotide Polymorphisms,SNP）芯片,对全基因组范围内几十万甚至上百万个SNP进行检测,通过多中心、独立的大样本量验证,进而发现与疾病或表型相关的遗传位点。本研究目的寻找与食管癌预后相关的SNP。第一阶段,我们共募集了1331例食管癌患者,所有患者进行长达5年以上随访。采用Cox比例风险回归模型对全基因组近66万个SNP进行生存关联分析,发现SLC39A6基因5'-UTR的rs7242481 G>A变异与患者生存相关,携带A等位基因的患者中位生存时间只有16个月,显著短于携带G等位基因患者的32个月。其死亡风险比值比为1.32(95%CI=1.1 5-1.51;P=7.43×10;第二阶段,该位点在从江苏省和广州省募集的1962例食管癌患者获得验证。在所有的3293例患者中,rs7242481 G>A变异与食管癌患者生存的死亡风险比值比为1.28(95%CI,1.18-1.40,P=2.60x 10)。为了阐明SLC39A6基因及其变异的生物学功能,我们通过一系列生物化学和分子生物学功能研究,发现rs7242481 G>A变异由于破坏子转录抑制因子与SLC39A6/启动子区的结合,导致SLC39A6基因表达上调。SLC39A6基因在食管癌组织中高表达,将促进食管癌细胞的增埴和转移,可能是食管癌患者生存时间缩短的机制之一。本研究首次发现位于SLC39A6基因5'-UTR的rs724248l G>A变异是食管癌患者的预后标志,可能是食管癌潜在的治疗靶点。

关键词：食管癌预后 GWAS SLC39A6

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腺病毒载体介导IL-24基因对肺癌细胞的化疗增敏效应

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苏州大学学报（医学版） 2012年第3期32卷 322-325页

作者：李畅赵军李印梁光辉盛伟华杨吉成苏州大学附属第一医院心胸外科江苏苏州215006 河南省肿瘤医院胸外科河南郑州450052 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞与分子生物学教研室江苏苏州215123

目的研究携带人IL-24基因腺病毒载体(Ad-IL-24)联用顺铂(DDP)对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞生长和凋亡的影响。方法取对数生长期的NCI-H460细胞,MTT比色法检测Ad-IL-24联合DDP对细胞生长的影响,流式细胞仪分析细胞周期及检测细胞凋亡率... 详细信息

目的研究携带人IL-24基因腺病毒载体(Ad-IL-24)联用顺铂(DDP)对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞生长和凋亡的影响。方法取对数生长期的NCI-H460细胞,MTT比色法检测Ad-IL-24联合DDP对细胞生长的影响,流式细胞仪分析细胞周期及检测细胞凋亡率。结果 Ad-IL-24联合DDP对NCI-H460细胞的生长抑制作用和诱导凋亡效应均明显优于单用Ad-IL-24和单用化疗药物DDP,且G2/M期细胞比例显著增加(P<0.05或<0.01)。结论 Ad-IL-24能提高NCI-H460肺癌细胞对化疗药物DDP的敏感性。

关键词：腺病毒人白细胞介素-24 肺癌基因治疗顺铂

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Ad-LIF-OSM双基因转染饲养细胞对脐血造血细胞体外增殖和分化的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第10期31卷 865-869页

作者：包婉蓉郁心盛伟华张凤娟王家融杨吉成缪竞诚苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞与分子生物学教研室 215123

目的构建表达人白血病抑制因子（LIF）和抑瘤素M（OSM）双基因的WI-38人胚肺成纤维细胞，并以此细胞作为饲养层细胞观察其对CD34造血干／祖细胞体外增殖和分化的影响。方法以双启动子转移载体pAdTrack-CMV-LIF-polyA＋promoter。为基础... 详细信息

目的构建表达人白血病抑制因子（LIF）和抑瘤素M（OSM）双基因的WI-38人胚肺成纤维细胞，并以此细胞作为饲养层细胞观察其对CD34造血干／祖细胞体外增殖和分化的影响。方法以双启动子转移载体pAdTrack-CMV-LIF-polyA＋promoter。为基础，将OSM基因片段酶切后插入，构建出转移质粒pAdTrack-CMV-LIF-polyA＋promoter。OSM。将构建正确的转移质粒与腺病毒骨架质粒共转化，获得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-LIF-polyA＋promoter。OSM，通过包装，收获重组腺病毒（Ad-LIF-OSM）。将重组腺病毒感染饲养层细胞，经***、ELISA法检测外源基因在细胞中的表达；体外与CD34造血干／祖细胞共培养后，通过Transwell法和细胞计数检测，比较各实验组干／祖细胞体外扩增与分化情况。结果测序结果显示重组载体中的LIF和OSM基因序列正确；转基因饲养层细胞中能检测到外源LIF和OSM基因的转录和表达；外源LIF和OSM基因在造血干／祖细胞体外培养中能够发挥作用。结论成功构建携带人LIF和OSM的双基因重组腺病毒载体（Ad-LIF-OSM），***在造血干／祖细胞体外培养的过程中能够有效地扩增CD34造血干／祖细胞，并延缓其分化。

关键词：腺病毒白血病抑制因子抑瘤素M 共表达载体造血干/祖细胞

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