检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学教育 2025年第3期27卷 283-286页

作者：杨旭东陈妍珂朱二强刘坤侯妮李冬民西安交通大学医学部人体分子与细胞教研室西安交通大学基础医学院生物化学与分子生物学系西安交通大学基础医学院细胞生物学与遗传学系北京百迈客生物科技有限公司科服事业部艾普拜生物(江苏)科技有限公司技术服务部

为了满足培养具有创新意识的复合型医工交叉人才的需要，西安交通大学人体分子与细胞教研室在人体分子与细胞整合课程的教学过程中先后邀请了北京百迈客生物科技有限公司、艾普拜生物(江苏)科技有限公司以及北京达科为生物技术有限公司... 详细信息

为了满足培养具有创新意识的复合型医工交叉人才的需要，西安交通大学人体分子与细胞教研室在人体分子与细胞整合课程的教学过程中先后邀请了北京百迈客生物科技有限公司、艾普拜生物(江苏)科技有限公司以及北京达科为生物技术有限公司，在核酸测序、PCR技术以及细胞流式技术等领域的工程师开展校企联合双师授课(简称“双师授课”)。文章以核酸测序技术的授课过程为例介绍了双师授课教学的实施过程，希望为医工交叉专业其他课程开展双师授课提供有价值的经验。

关键词：高等教育校企联合双师授课医工交叉专业复合型人才培养理论结合实践

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人白细胞介素18突变体的构建及其功能(英文)

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生物化学与生物物理学报 2003年第5期35卷 409-415页

作者：傅奕裴冬生孙兵沈万华陆梁胡书群赵惠仁扬州大学医学院生化教研室徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心苏州大学附属医院神经外科徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心扬州225001 徐州221002 苏州215001

为研究人白细胞介素 18(hIL 18)结构与功能的关系 ,用PCR定点突变技术分别构建了N末端、C末端缺失突变体(ΔNC)和IL 1特征样序列突变体S154A/Y156F/E157P/C163 T (S)。将突变体cDNA与原核表达载体 pJW 2重组并转化大肠杆菌DH5α ,经热... 详细信息

为研究人白细胞介素 18(hIL 18)结构与功能的关系 ,用PCR定点突变技术分别构建了N末端、C末端缺失突变体(ΔNC)和IL 1特征样序列突变体S154A/Y156F/E157P/C163 T (S)。将突变体cDNA与原核表达载体 pJW 2重组并转化大肠杆菌DH5α ,经热诱导表达蛋白质 ,SDS PAGE证实表达的目的蛋白质以包涵体形式存在。菌体经超声破碎后 ,包涵体以 2mol/L尿素洗涤 ,8mol/L尿素溶解 ,并经SephadexG 75柱纯化 ,纯度可达 95 %以上。突变体蛋白质经逐步稀释复性后 ,以诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生干扰素 γ(IFN γ)及对核因子 κB(NF κB)的激活能力为指标 ,检测突变体的生物学活性。结果显示ΔNC、S这 2个突变体对IFN γ的诱生能力显著低于野生型hIL 18,分别为野生型hIL 18的 13%和 4 8%。同时 ,ΔNC、S对NF κB的激活能力也低于野生型hIL 18,分别为野生型hIL 18的 6 9.7%和 89.8%。这些结果表明缺失的片段或突变的位点对hIL 18的功能有重要的作用。

关键词：白细胞介素-18 结构与功能干扰素-γ 核因子-κB 定点突变

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小鼠IL-1α多克隆抗体的制备及应用

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第9期27卷 989-992页

作者：林丹丹刘春亮包光明吴康单琳刘海燕苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫实验室江苏苏州215123 苏州大学医学部生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215123

目的:构建小鼠白细胞介素-1α原核表达载体,表达并纯化IL-1α蛋白,制备兔抗鼠IL-1α多克隆抗体,并对抗体特性进行初步的鉴定。方法:利用RT-PCR技术,从BALB/c小鼠脾脏cDNA中扩增出IL-1α的全长基因,酶切后连接至pET32a(+)原核表达载体,... 详细信息

目的:构建小鼠白细胞介素-1α原核表达载体,表达并纯化IL-1α蛋白,制备兔抗鼠IL-1α多克隆抗体,并对抗体特性进行初步的鉴定。方法:利用RT-PCR技术,从BALB/c小鼠脾脏cDNA中扩增出IL-1α的全长基因,酶切后连接至pET32a(+)原核表达载体,重组载体测序正确后转化至BL21(DE3)大肠杆菌。利用蛋白质原核表达自动诱导方案成功表达重组蛋白。重组蛋白经电洗脱纯化后用以免疫新西兰大白兔,获得了抗小鼠IL-1α的多克隆抗体,ELISA检测抗体效价。Western blot和流式细胞术(FCM)检测抗血清的特异性。结果:成功构建了重组表达载体pET32a(+)-IL-1α,表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,得到的多克隆抗体ELISA显示抗体效价可达1∶25 600。Western blot和FCM分析该抗体能特异性结合IL-1α。结论:利用重组的IL-1α蛋白成功制备了高效价、高特异性的兔抗IL-1α抗体,为进一步研究IL-1α的生物学功能奠定了基础。

关键词： IL-1α 基因克隆原核表达多克隆抗体

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自噬在神经胶质瘤放化疗中的作用及其分子调控机制研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2011年第1期25卷 106-109页

作者：李君龙林梅雷陈梁中琴苏州大学医学部药理学教研室苏州大学医学部神经科学研究所江苏苏州215123 苏州大学医学部生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215123

自噬是真核细胞中广泛存在的降解和再循环系统,近年研究发现,放疗和化疗不仅可引起神经胶质瘤细胞凋亡,还可以诱导自噬。细胞自噬可能导致细胞自噬死亡,也有可能导致自噬保护,显示双重效应,可见自噬与神经胶质瘤的发生、发展以及治疗密... 详细信息

自噬是真核细胞中广泛存在的降解和再循环系统,近年研究发现,放疗和化疗不仅可引起神经胶质瘤细胞凋亡,还可以诱导自噬。细胞自噬可能导致细胞自噬死亡,也有可能导致自噬保护,显示双重效应,可见自噬与神经胶质瘤的发生、发展以及治疗密切相关。其分子调控机制可能与雷帕霉素靶蛋白,beclin 1,磷脂酰肌醇-3-激酶,第10号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶以及微管相关蛋白1轻链3等内容有关。

关键词：自噬神经胶质瘤抗肿瘤联合化疗方案

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β3Gn-T8对胃癌AGS细胞增殖能力的影响

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中国病理生理杂志 2020年第1期36卷 152-156页

作者：刘振华沈力吴士良苏州卫生职业技术学院病理教研室江苏苏州215009 苏州大学医学部生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215123

目的:研究β1,3-N-乙酰葡萄糖胺转移酶8(β3Gn-T8)对胃癌细胞及胃癌移植瘤生物学行为的影响。方法:将β3Gn-T8正义表达载体pEGFP-C1-β3Gn-T8转染人胃腺癌AGS细胞,通过MTT法和活细胞计数检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。... 详细信息

目的:研究β1,3-N-乙酰葡萄糖胺转移酶8(β3Gn-T8)对胃癌细胞及胃癌移植瘤生物学行为的影响。方法:将β3Gn-T8正义表达载体pEGFP-C1-β3Gn-T8转染人胃腺癌AGS细胞,通过MTT法和活细胞计数检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。建立AGS细胞皮下移植瘤模型,检测移植瘤的生长情况。结果:转染pEGFP-C1-β3Gn-T8的AGS细胞活力明显增加(P<0.05),但是凋亡率无明显变化。转染pEGFP-C1-β3Gn-T8的移植瘤生长速度及最终体积均较对照组明显增加(P<0.05)。结论:β3Gn-T8可以促进胃癌AGS细胞的活力,明显促进AGS细胞移植瘤的生长。

关键词： β1,3-N-乙酰葡萄糖胺转移酶8 胃癌细胞增殖细胞凋亡

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人ppGalNAc-T2的原核表达、纯化及其蓖麻蛋白样结构域的结构预测

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第4期21卷 476-481页

作者：金美芳丁向明仇灏吴士良周嘉梁郭向红潘浩苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室

多肽∶N乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAcT)是催化O糖基化的起始酶,在O聚糖的形成中起着关键的作用.为更好地研究该家族酶的结构与功能,采用PCR技术从pDONR201T2得到ppGalNAcT2全长编码序列,亚克隆至原核表达载体pGEX4T1,转化大肠杆菌BL21... 详细信息

多肽∶N乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAcT)是催化O糖基化的起始酶,在O聚糖的形成中起着关键的作用.为更好地研究该家族酶的结构与功能,采用PCR技术从pDONR201T2得到ppGalNAcT2全长编码序列,亚克隆至原核表达载体pGEX4T1,转化大肠杆菌BL21,获得相应表达产物,用谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱进行纯化,并进行了Western印迹检测和初步的酶活测定.为进一步研究其功能还在结构研究上利用网络结构模拟SWISSMODEL服务器对ppGalNAcT2的蓖麻蛋白样结构域进行结构模拟.成功构建了原核表达载体pGEX4T1T2,获得有效表达和纯化,并初步鉴定了其活性,同时预测了其可能的三维结构和活性位点.

关键词：多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶融合表达谷胱甘肽S-转移酶亲和柱蛋白印迹蓖麻蛋白样结构域结构模拟

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人类新型β3半乳糖基转移酶基因β3GalT7的克隆和鉴定

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生物化学与生物物理进展 2005年第2期32卷 140-146页

作者：周嘉梁黄超群吴士良孙其昌雷伟金美芳姜智沈宏杰苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州215007 苏州大学生化工程研究所苏州215007

从人肺cDNA文库中克隆到人类β3-半乳糖基转移酶家族中的一个新成员β3GalT7(AY277592,EC2.4.1.-),并对其进行了鉴定. 该基因定位在人类染色体19q13.2. 它包含一个1 191 bp的开放阅读框(ORF). 编码的蛋白质包括一个信号肽和一个半乳糖... 详细信息

从人肺cDNA文库中克隆到人类β3-半乳糖基转移酶家族中的一个新成员β3GalT7(AY277592,EC2.4.1.-),并对其进行了鉴定. 该基因定位在人类染色体19q13.2. 它包含一个1 191 bp的开放阅读框(ORF). 编码的蛋白质包括一个信号肽和一个半乳糖基转移酶结构域,分子质量和等电点分别为43.3 ku和8.37. 从原核表达中获得的融合蛋白的分子质量和预测相符. RNA印迹杂交显示β3GalT7在肺、喉和回肠组织中高表达,而在舌、乳房、子宫、睾丸等组织中表达较低. 此外半定量RT-PCR显示β3GalT7在人类不同的肿瘤细胞中转录水平有明显差异.

关键词： β3GalT7 克隆 RNA印迹肿瘤细胞株

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人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2基因反义RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第1期22卷 43-48页

作者：仇灏金美芳周迎会孙其昌刘可人沈宏杰吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州215007

反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp... 详细信息

反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp-GalNAc-T2的人胃癌细胞株SGC7901的总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增两段不同长度pp-GalNAc-T2基因片段,构建反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901,通过G418筛选,建立一系列旨在封闭胃癌细胞SGC7901ppGalNAc-T2基因表达的亚细胞克隆.通过流式细胞术、荧光显微镜、RT-PCR及Western印迹检测反义封闭pp-GalNAc-T2基因RNA表达后胃癌细胞SGC7901增殖以及TGF-β1、MMP2表达水平的变化.反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达后,胃癌细胞SGC7901 pp-GalNAc-T2的表达水平明显降低,细胞分裂增殖减慢,表明反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达对胃癌细胞SGC7901的生长增殖有影响.结果还显示,反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达可使TGF-β1、MMP2基因在mRNA与蛋白质表达水平均增加,提示pp-GalNAc-T2基因表达可能对胃癌细胞SGC7901浸润转移产生影响.以上结果表明,pp-GalNAc-T2基因在肿瘤细胞中广泛表达,并可能与肿瘤的增殖及浸润转移相关.

关键词：多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶基质金属蛋白酶转化生长因子-β1 SGC7901细胞

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γ射线和紫外线照射对白血病K_(562)细胞株中ppGalNAcT2 mRNA表达的影响

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辐射研究与辐射工艺学报 2004年第6期22卷 361-364页

作者：范雁吴士良徐岚陈克平仇灏苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州215007

观察了γ射线、紫外线对白血病细胞株K562中多肽:N?乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mRNA表达的影响,初步探讨ppGalNAcT2与肿瘤发生、发展的相关性。以不同剂量的Coγ60射线、紫外线分别照射K562细胞,继续培养12h后... 详细信息

观察了γ射线、紫外线对白血病细胞株K562中多肽:N?乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mRNA表达的影响,初步探讨ppGalNAcT2与肿瘤发生、发展的相关性。以不同剂量的Coγ60射线、紫外线分别照射K562细胞,继续培养12h后将细胞收集,采用逆转录PCR(RT?PCR)法检测ppGalNAcT2mRNA的表达差异变化。结果显示,γ射线、紫外线照射均可抑制白血病细胞ppGalNAcT2在mRNA水平的表达,提示此两种辐照可能与肿瘤细胞受照射后的浸润和转移性能有关,ppGalNAcT2与此性状间有一定的相关性。

关键词： γ射线紫外线白血病K562细胞株多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶2

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细胞内蛋白质转运及其在医学中的应用——1999年诺贝尔生理学或医学奖介绍及其相关研究进展

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生理科学进展 2009年第4期40卷 378-382页

作者：郭改娥王文恭长治医学院生物化学与分子生物学教研室山西长治046000 北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100191

细胞表达出大量的蛋白质,分布到细胞不同的部位执行相应的功能,其中多数被转运到细胞外和细胞核,或定位于细胞内不同的细胞器。新合成的蛋白质是如何跨过膜性结构被转运到相应正确位置的呢?细胞生物学家GunterBlobel对此给出了答案。[... 详细信息

细胞表达出大量的蛋白质,分布到细胞不同的部位执行相应的功能,其中多数被转运到细胞外和细胞核,或定位于细胞内不同的细胞器。新合成的蛋白质是如何跨过膜性结构被转运到相应正确位置的呢?细胞生物学家GunterBlobel对此给出了答案。[第一段]

关键词：诺贝尔生理学或医学奖蛋白质转运细胞内应用细胞表达生物学家细胞核细胞外

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