检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2008年第8期35卷 886-891页

作者：朱奇李小永蒋星红苏州大学医学部神经生物学教研室衰老与神经疾病实验室苏州215123

神经干细胞/前体细胞分化是神经生物学研究的热点.以往对神经干细胞/前体细胞分化水平的鉴定主要依赖于形态学指标,而随着膜片钳技术的应用,神经干细胞/前体细胞分化过程中膜电特性的改变、离子通道活动等功能学指标越来越受到重视.综... 详细信息

神经干细胞/前体细胞分化是神经生物学研究的热点.以往对神经干细胞/前体细胞分化水平的鉴定主要依赖于形态学指标,而随着膜片钳技术的应用,神经干细胞/前体细胞分化过程中膜电特性的改变、离子通道活动等功能学指标越来越受到重视.综述了利用膜片钳技术研究神经干细胞/前体细胞功能分化的最新进展,并对存在的问题做出思考和展望.

关键词：神经干细胞/前体细胞细胞分化膜片钳电生理

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强制运动促进成年大鼠海马齿状回神经发生并提高学习能力(英文)

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生理学报 2006年第5期58卷 415-420页

作者：徐卫平单立冬龚珊陈琳张跃进印其章 HISAMITSU Tadashi 蒋星红郭试瑜苏州大学医学院神经生物学教研室苏州215123 昭和大学医学部第一生理学教研室

为了探讨强制运动对成年大鼠海马齿状回(dentategyrus,DG)神经发生的影响,强制大鼠在马达驱动的转轮中跑步,用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记增殖细胞,巢蛋白(neuroepthelialstemcellprotein,nestin)标记神经干细胞/前体细胞,然后用免疫细胞化学技术检测大鼠DG中BrdU及nestin阳性细胞。为了解强制运动后DG增殖细胞的功能意义,采用Y-迷宫检测大鼠的学习能力。结果表明,强制运动组DG中BrdU及nestin阳性细胞数均明显多于对照组(P<0.05);强制运动对DG神经发生的效应有强度依赖性。Y-迷宫检测结果显示,强制运动能明显改善大鼠的学习能力。结果提示,在转轮中进行强制跑步能促进成年大鼠DG的神经发生,并改善学习能力。

关键词：海马神经发生齿状回跑步 5-溴-2-脱氧尿苷免疫组织化学迷宫学习大鼠

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β淀粉样蛋白1～42与D-半乳糖联合作用建立复合阿尔茨海默病样模型

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解剖学报 2011年第4期42卷 461-464页

作者：汪润赵丽娟王全英秦婷孙茂民夏春林苏州大学医学部解剖学教研室暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215213

目的探讨β淀粉样蛋白1～42(Aβ1-42)及D-半乳糖(D-gal)联合应用构建复合阿尔茨海默病(AD)样模型的可行性。方法采用44只2月龄雄性SD大鼠,共分4组,即腹腔及侧脑室注射生理盐水的假手术组,腹腔注射D-gal或侧脑室注射Aβ1-42分别建立的D-... 详细信息

目的探讨β淀粉样蛋白1～42(Aβ1-42)及D-半乳糖(D-gal)联合应用构建复合阿尔茨海默病(AD)样模型的可行性。方法采用44只2月龄雄性SD大鼠,共分4组,即腹腔及侧脑室注射生理盐水的假手术组,腹腔注射D-gal或侧脑室注射Aβ1-42分别建立的D-gal组和Aβ1-42组,腹腔注射D-gal联合侧脑室注射Aβ1-42建立的复合AD模型组。Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,尼氏染色观察神经元数量和形态变化,生物化学方法检测血浆及脑组织匀浆中总抗氧化能力(T-AOC),免疫组织化学方法检测晚期糖基化终产物受体(AGER)在脑组织中的表达。结果与假手术组、Aβ1-42组、D-gal组相比,复合模型组大鼠水迷宫实验的潜伏期延长,认知记忆能力下降;海马和大脑皮质中神经元数量减少,可见胞体缩小、胞膜皱缩、胞核固缩浓染的细胞;血浆和脑组织匀浆中T-AOC下降;大脑皮质、海马、小脑皮质和小脑核AGER阳性表达细胞增多,呈棕褐色深染。结论在应用D-gal建立记忆缺失模型的基础上,联合注射Aβ1-42可建立复合AD样模型,较全面地模拟AD行为学、组织学及生物化学特征。

关键词： β淀粉样蛋白 D-半乳糖阿尔茨海默病动物模型学习记忆免疫组织化学大鼠

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Ad-IL-24对MG-63人骨肉瘤细胞抑癌效应的体内外实验

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生物工程学报 2009年第10期25卷 1538-1545页

作者：韩亚丽缪竞诚盛伟华汪小华井莹莹单云波刘铁连包婉蓉杨吉成苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室苏州215123

本研究旨在分析腺病毒携带的IL-24基因在体内外对人骨肉瘤细胞生长抑制效应及其分子机制。将Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法、流式细胞技术和Hoechst染色法检测IL-2... 详细信息

本研究旨在分析腺病毒携带的IL-24基因在体内外对人骨肉瘤细胞生长抑制效应及其分子机制。将Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法、流式细胞技术和Hoechst染色法检测IL-24基因的表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;半定量RT-PCR法检测IL-24基因的表达对MG-63细胞中的bcl-2、bax、caspase-3相关基因表达的影响。用Ad-IL-24重组腺病毒在MG-63骨肉瘤荷瘤裸鼠的瘤体内进行注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重。并通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3等与细胞凋亡相关因子的表达。结果表明Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞后,能明显抑制MG-63细胞增殖,并能通过上调细胞中bax、caspase-3和下调bcl-2基因表达,诱导细胞凋亡,呈现出典型细胞凋亡形态学变化。Ad-IL-24重组腺病毒瘤内注射MG-63裸鼠荷瘤骨肉瘤移植瘤后,能显著抑制肿瘤生长,瘤重的抑制率可达52%,免疫组化结果显示Ad-IL-24重组腺病毒能明显上调与细胞凋亡相关因子Bax和Caspase-3的表达和下调Bcl-2和CD34的表达。本研究结果显示腺病毒介导的IL-24基因在体内外均可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导其凋亡,其机制可能与下调bcl-2,上调bax、caspase-3的基因表达水平有关,由此为骨肉瘤的基因治疗提供实验依据。

关键词： IL-24基因腺病毒载体 MG-63人骨肉瘤细胞肿瘤抑制

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Ad-ING4-poly（A）-Promoter-IL-24双基因共表达载体构建及表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第8期30卷 695-703页

作者：盛伟华谢宇锋缪竞诚顾范博单云波刘铁连井莹莹胡志清杨吉成苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室 215123

目的构建poly（A）-Promoter介导的携带人肿瘤生长抑制因子4（ING4）和人白细胞介素-24（IL-24）双基因的重组腺病毒共表达载体Ad-ING4-poly（A）-Promoter-IL-24（简称Ad-ING4-IL-24）,研究Ad-ING4-IL-24对HepG-2人肝癌细胞生长的影响.方法以含有poly（A）和Promoter （hEF1-eIF4g）基因片段的pORF-mbcl-2α质粒为模板,PCR扩增poly（A）-Promoter目的片段（含Sal Ⅰ,Not Ⅰ）,亚克隆至pAdTrack-CMV载体中以构建pAdTrack-CMV-poly（A）-Promoter空载体,再分别以pcDNA3.0-ING4和pcDNA3.0-IL-24重组质粒为模板,PCR扩增ING4（含BglⅡ,Sal Ⅰ）和IL-24（含XhoⅠ,XbaⅠ）目的基因片段,并依次插入pAdTrack-CMV-poly（A）-Promoter载体中构建pAdTrackCMV-ING4-Poly（A）-Promoter-IL-24双基因共表达重组转移载体,测序正确后用Pme Ⅰ酶线性化,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1构建同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-ING4-poly（A）-Promoter-IL-24,再经Pac Ⅰ酶线性化后用脂质体转染QBI-293A包装细胞,经多轮扩增后收获Ad-ING4-IL-24重组腺病毒子,其效价可达3.5×109PFU/ml,用RT-PCR和Western blot法分别鉴定ING,4和IL-24基因在HepG-2人肝癌细胞中的转录和表达,MTT法和流式细胞仪检测Ad-ING4-IL-24对HepG-2人肝癌细胞生长抑制和诱导细胞凋亡的功能及其增效作用.结果 DNA测序结果显示pAdTrack-CMV转移载体中插入的ING4、poly（A）-Promoter和IL-24序列与GenBank报道的完全一致,RT-PCR和Western blot检测结果显示Ad-ING4-IL-24能成功介导ING4和IL-24基因在HepG-2人肝癌细胞中表达并能明显抑制HepG-2人肝癌细胞的生长和诱导其凋亡,其中Ad-ING4-IL-24双基因组更优于相应各单基因组.结论成功构建了poly（A）-Promoter介导的Ad-ING4-IL-24双基因共表达重组腺病毒载体,Ad-ING4-IL-24不仅能明显抑制HepG-2人肝癌细胞生长和诱导其凋亡,而且与Ad-ING4和AdIL-24单基因组相比具有抑癌增效作用.

关键词：腺病毒生长抑制因子4 IL-24 肿瘤基因治疗

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非传统型前折叠束RPB5交互因子在肝癌HepG2细胞中的生物学功能及其分子机制

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中华肿瘤杂志 2014年第11期36卷 816-822页

作者：周围钟妍玉王洪民杨思俊魏文祥苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室 215123

目的探讨非传统型前折叠束RPB5交互因子（URI）对肝癌HepG2细胞生物学功能的影响及其分子机制.方法设计并构建URI真核表达和URI shRNA干扰载体,转染肝癌HepG2细胞并筛选稳定转染细胞株.采用CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验检测各组细... 详细信息

目的探讨非传统型前折叠束RPB5交互因子（URI）对肝癌HepG2细胞生物学功能的影响及其分子机制.方法设计并构建URI真核表达和URI shRNA干扰载体,转染肝癌HepG2细胞并筛选稳定转染细胞株.采用CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力和体外锚定非依赖性生长的能力,采用流式细胞仪检测γ射线照射后各组细胞的细胞周期和细胞凋亡,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达量.结果成功构建了URI表达质粒和干扰质粒,并获得相应的稳定转染细胞株.HepG2组、pCDNA3.1-URI-HepG2组和pGPU6-URIi-HepG2组细胞转染第7天相对于第1天的增殖促进率分别为（588.78±32.12）％、（959.33±58.80）％和（393.93±39.70）％,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.HepG2组、pCDNA3.1-URI-HepG2组和pGPU6-URIi-HepG2组的克隆数分别为（43±7）个、（85±5）个和（20±4）个,差异有统计学意义（P＜0.05）.γ射线照射后,pCDNA3.1-URI-HepG2组细胞凋亡和G2/M期阻滞较HepG2组明显降低（P＜0.05）,pGPU6-URIi-HepG2组细胞凋亡和G2/M期阻滞较HepG2组明显升高（P＜0.05）.Western blot结果显示,HepG2细胞的URI、Bax和Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.92±0.03、1.11±0.13和0.82±0.01,pCDNA3.1-URI-HepG2组细胞的URI、Bax和Bcl-2蛋白相对表达水平分别为1.79±0.12、0.48±0.01和2.20±0.30,pGPU6-URli-HepG2组细胞的URI、Bax和Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.50±0.04、1.52 ±0.20和0.38±***3.1-URI-HepG2组细胞凋亡相关蛋白Bax表达水平低于HepG2组,Bcl-2蛋白表达水平高于HepG2组;pGPU6-URIi-HepG2组细胞Bax蛋白表达水平高于HepG2组,Bcl-2蛋白表达水平低于HepG2组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 URI能够通过促进细胞增殖和抵抗细胞凋亡来促进肝癌细胞的生长.而干扰URI表达后,肝癌细胞的增殖能力被抑制,细胞抵抗γ射线照射的能力降低,URI可能成为肝癌治疗的新靶点。

关键词：肝肿瘤非传统型前折叠束RPB5交互因子 RNA干扰 γ射线细胞周期细胞凋亡

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内吗啡肽在小鼠树突状细胞的诱导表达

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中国药理学通报 2011年第1期27卷 77-81页

作者：李正红高琴叶红伟单立冬龚珊蒋星红蚌埠医学院生理学教研室安徽蚌埠233030 苏州大学医学部神经生物学教研室江苏苏州215123

目的研究内吗啡肽-1和内吗啡肽-2在小鼠树突状细胞的表达。方法从7～8周龄的C57BL/6J小鼠骨髓提取骨髓前体细胞培养,经CD11c(树突状细胞的特异性标记)免疫磁珠分选,获得纯化的树突状细胞。流式细胞仪分析表明,CD11c阳性细胞纯度达95%以... 详细信息

目的研究内吗啡肽-1和内吗啡肽-2在小鼠树突状细胞的表达。方法从7～8周龄的C57BL/6J小鼠骨髓提取骨髓前体细胞培养,经CD11c(树突状细胞的特异性标记)免疫磁珠分选,获得纯化的树突状细胞。流式细胞仪分析表明,CD11c阳性细胞纯度达95%以上。免疫荧光染色研究内吗啡肽-1和内吗啡肽-2在树突状细胞的表达;酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA)的方法,检测培养树突状细胞上清液中的内吗啡肽-1和内吗啡肽-2的含量。结果免疫荧光染色表明,活化的树突状细胞内可分泌内吗啡肽-1和内吗啡肽-2;酶免疫测定检测结果表明,不同的Toll样受体(toll like receptor,TLR)配体活化树突状细胞促使分泌不同浓度的内吗啡肽-1和内吗啡肽-2。结论活化的树突状细胞可诱导内吗啡肽的表达。

关键词：内吗啡肽-1 内吗啡肽-2 Mu阿片受体树突状细胞抗原递呈细胞 Toll样受体酶免疫测定

来源：评论

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Ad-ING4对人前列腺癌细胞PC-3体内外抑癌效应的研究

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癌症 2009年第11期28卷 1149-1157页

作者：杨慧翠盛伟华谢宇锋缪竞诚魏文祥杨吉成苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室江苏苏州215123

背景与目的:腺病毒作为载体已被广泛用于肿瘤的基因治疗。ING4是生长抑制因子家族中的一个成员,是一种潜在的抑癌基因。本研究旨在探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对人前列腺癌细胞PC-3的体内外抑癌效应及其分子机制。方法:将扩增... 详细信息

背景与目的:腺病毒作为载体已被广泛用于肿瘤的基因治疗。ING4是生长抑制因子家族中的一个成员,是一种潜在的抑癌基因。本研究旨在探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对人前列腺癌细胞PC-3的体内外抑癌效应及其分子机制。方法:将扩增的Ad-ING4重组腺病毒感染PC-3细胞,用RT-PCR法检测ING4在PC-3细胞中的转录;MTT法检测ING4基因对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡的变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因的表达对PC-3细胞中的bcl-2、bax、p53和caspase-3凋亡相关基因表达的影响。用Ad-ING4重组腺病毒在裸鼠PC-3移植瘤的瘤体内注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重;用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和CD34蛋白的表达。结果:腺病毒介导的人ING4基因在PC-3细胞中成功转录,明显抑制PC-3细胞增殖,上调p53、bax、caspase-3基因表达和下调bcl-2基因表达,并诱导细胞凋亡。Ad-ING4重组腺病毒能显著抑制裸鼠PC-3移植瘤的生长,瘤重的抑制率达37%,与空病毒载体Ad-GFP组和细胞对照PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果显示Ad-ING4重组腺病毒能明显上调Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,下调Bcl-2和CD34蛋白的表达水平。结论:腺病毒介导的ING4基因在体内外均可明显抑制人前列腺癌细胞PC-3的生长,诱导其凋亡,其机制可能是上调P53、Bax、Caspase-3蛋白和下调Bcl-2蛋白表达水平。

关键词： ING4基因腺病毒载体 PC-3细胞前列腺癌肿瘤抑制

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自噬在神经胶质瘤放化疗中的作用及其分子调控机制研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2011年第1期25卷 106-109页

作者：李君龙林梅雷陈梁中琴苏州大学医学部药理学教研室苏州大学医学部神经科学研究所江苏苏州215123 苏州大学医学部生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215123

自噬是真核细胞中广泛存在的降解和再循环系统,近年研究发现,放疗和化疗不仅可引起神经胶质瘤细胞凋亡,还可以诱导自噬。细胞自噬可能导致细胞自噬死亡,也有可能导致自噬保护,显示双重效应,可见自噬与神经胶质瘤的发生、发展以及治疗密... 详细信息

自噬是真核细胞中广泛存在的降解和再循环系统,近年研究发现,放疗和化疗不仅可引起神经胶质瘤细胞凋亡,还可以诱导自噬。细胞自噬可能导致细胞自噬死亡,也有可能导致自噬保护,显示双重效应,可见自噬与神经胶质瘤的发生、发展以及治疗密切相关。其分子调控机制可能与雷帕霉素靶蛋白,beclin 1,磷脂酰肌醇-3-激酶,第10号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶以及微管相关蛋白1轻链3等内容有关。

关键词：自噬神经胶质瘤抗肿瘤联合化疗方案

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眼镜蛇长链神经毒素Cobratoxin对丘脑束旁核神经元痛诱发放电的影响

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苏州大学学报（医学版） 2008年第3期28卷 375-378,420页

作者：程勃超蒋星红朱奇龚珊秦正红周希平苏州大学医学部神经生物学教研室江苏苏州215123 苏州大学医学部药理学教研室江苏苏州215123 苏州大学医学部生理学教研室

目的以大鼠丘脑束旁核(Pf)神经元痛诱发放电为指标,来验证眼镜蛇长链神经毒素(Cobratoxin)的镇痛作用。方法用玻璃微电极细胞外记录Pf神经元的单位放电,用电脉冲刺激坐骨神经作为伤害性刺激,诱发伤害性反应,观察侧脑室注射不同剂量Cobra... 详细信息

目的以大鼠丘脑束旁核(Pf)神经元痛诱发放电为指标,来验证眼镜蛇长链神经毒素(Cobratoxin)的镇痛作用。方法用玻璃微电极细胞外记录Pf神经元的单位放电,用电脉冲刺激坐骨神经作为伤害性刺激,诱发伤害性反应,观察侧脑室注射不同剂量Cobratoxin后痛诱发放电的变化。用侧脑室注射生理盐水作为阴性对照,侧脑室注射吗啡作为阳性对照。结果(1)侧脑室注射大剂量Cobratoxin(4.5μg/kg)后,Pf神经元的痛放电频率明显降低;(2)侧脑室注射中剂量(1.12μg/kg)和小剂量(0.56μg/kg)Cobratoxin后,Pf神经元的痛放电频率也降低,但降低的幅度依次递减。(3)侧脑室注射3种剂量Cobratoxin对Pf神经元痛放电频率的抑制时间比吗啡的长。结论Cobratoxin对丘脑Pf神经元的痛诱发放电有明显的抑制作用,提示Cobratoxin有镇痛作用,这种镇痛作用有一定的剂量依赖性。

关键词：眼镜蛇长链神经毒素束旁核单位放电镇痛

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