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碱性成纤维细胞生长因子对小鼠创伤性脑损伤后神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响

解剖学报 2009年第5期40卷 720-723页

作者：黄兴锐朱云霞赵爱琴刘海昌贾俊霞夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州215123

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对小鼠脑损伤后伤侧皮质和海马神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响。方法36只小鼠随机分为对照组、生理盐水组、bFGF组,每组各12只。采用自由落体打击装置建立脑损伤模型,分别于建模后3d和7d取脑... 详细信息

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对小鼠脑损伤后伤侧皮质和海马神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响。方法36只小鼠随机分为对照组、生理盐水组、bFGF组,每组各12只。采用自由落体打击装置建立脑损伤模型,分别于建模后3d和7d取脑(每时相点6只),应用免疫荧光双标和免疫印迹法检测大脑皮质、海马神经细胞凋亡因子caspase-3的变化,以及大脑皮质中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果bFGF组皮质和海马中caspase-3的表达比生理盐水组和对照组减少(P<0.05);bFGF组皮质中GFAP表达比生理盐水组和对照组增加(P<0.05);生理盐水组与对照组的caspase-3及GFAP表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论bFGF能降低小鼠脑损伤后大脑皮质和海马caspase-3表达并增高大脑皮质GFAP表达,从而促进大脑皮质星形胶质细胞活化和抑制神经细胞凋亡。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子创伤性脑损伤星形胶质细胞 Caspase-3 胶质纤维酸性蛋白小鼠

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bFGF与骨髓间充质干细胞联合移植对脑损伤后神经再生的影响

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神经解剖学杂志 2009年第2期25卷 129-134页

作者：黄兴锐朱云霞赵爱琴刘海昌夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州215123

探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合移植对脑损伤后神经再生的影响。利用血清培养技术获得小鼠BMSCs,行Hoechst33342标记。40只小鼠随机分为4组:正常组、损伤组、BMSCs移植组、bFGF+BMSCs移植组,每组各10... 详细信息

探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合移植对脑损伤后神经再生的影响。利用血清培养技术获得小鼠BMSCs,行Hoechst33342标记。40只小鼠随机分为4组:正常组、损伤组、BMSCs移植组、bFGF+BMSCs移植组,每组各10只。采用自由落体撞击脑损伤模型,然后经尾静脉注射移植液,2d后行caspase-3免疫荧光染色检测BMSCs的凋亡情况;2w后行HE染色结合形态学图像分析软件计算脑切片的缺损面积、免疫组织化学检测星形胶质细胞及神经元数目变化、Y迷宫测试检测小鼠学习记忆能力。结果显示:bFGF+BMSCs移植组骨髓间充质干细胞的caspase-3表达量是BMSCs移植组的0.5倍;BMSCs移植组和bFGF+BMSCs移植组的学习记忆能力及缺损面积较损伤组有改善(P<0.05),且bFGF+BMSCs移植组与BMSCs移植组比较有显著性差异(P<0.05);GFAP和MAP-2在损伤组表达极少,在BMSCs移植组只有少量表达,而bFGF+BMSCs移植组呈高表达,MAP-2表达水平增高更显著。以上结果提示bFGF+BMSCs移植较BMSCs移植可更好地促进脑损伤后的神经再生。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞脑损伤移植

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两型星形胶质细胞损伤后胰甘油三酯脂酶的表达

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神经解剖学杂志 2011年第5期27卷 481-486页

作者：赵俊利张晔刘凯孙艳芸贾俊霞夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州215123

目的:通过建立两型星形胶质细胞体外机械损伤模型,于损伤后不同时间点检测两型星形胶质细胞中胰甘油三酯脂酶(PTL)的表达变化。方法:采用震荡培养和差速贴壁法分离纯化新生SD大鼠的1型星形胶质细胞(T1As)和2型星形胶质细胞(T2As),以real... 详细信息

目的:通过建立两型星形胶质细胞体外机械损伤模型,于损伤后不同时间点检测两型星形胶质细胞中胰甘油三酯脂酶(PTL)的表达变化。方法:采用震荡培养和差速贴壁法分离纯化新生SD大鼠的1型星形胶质细胞(T1As)和2型星形胶质细胞(T2As),以real-time PCR和Western Blot分别检测损伤后的两型星形胶质细胞中PTL mRNA和蛋白表达变化。结果:损伤后两型星形胶质细胞中PTL表达均出现先升高后降低的趋势,而在T2As中的表达远高于在T1As中的表达水平(P<0.01)。结论:PTL在T2As中高表达提示,中枢神经系统损伤后再生与修复过程中,T2As对脂质代谢及髓鞘形成发挥作用。

关键词：星形胶质细胞胰甘油三酯脂酶细胞损伤神经损伤与修复大鼠

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O-2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的作用

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苏州大学学报（医学版） 2008年第6期28卷 900-904,F0002页

作者：孙茂民孙文阁王宇卉黄兴锐朱云霞夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215123

目的研究O-2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复的作用。方法从新生1～2 d SD大鼠大脑皮质中分离纯化O-2A祖细胞。80只SD成年大鼠,随机分为4组:A组为正常组,与其他3组同期饲养;其他3组均行T9脊髓左半侧离断手术,B组损伤处植... 详细信息

目的研究O-2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复的作用。方法从新生1～2 d SD大鼠大脑皮质中分离纯化O-2A祖细胞。80只SD成年大鼠,随机分为4组:A组为正常组,与其他3组同期饲养;其他3组均行T9脊髓左半侧离断手术,B组损伤处植入吸附生理盐水的明胶海绵(损伤对照组);C组损伤处移植50%O-2A祖细胞和50%1型星形胶质细胞(T1A)混悬液(O-2A+T1A组);D组损伤处植入含有纯化O-2A祖细胞的细胞悬液(O-2A移植组)。移植术后3、7、14、21、28 d分别以CBS及BBB方法进行大鼠神经功能评定。结果A组大鼠后肢CBS和BBB得分分别为100和21。O-2A祖细胞移植术后3、7、14、21、28 d,B、C、D组动物后肢神经功能均有不同程度的恢复,左后肢得分均显著低于右侧,差异均有高度统计学意义(均P<0.01),D组运动功能恢复最好。结论O-2A祖细胞移植可促进大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复。

关键词：脊髓损伤神经功能 O-2A祖细胞移植

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衰老1型星形胶质细胞的Aβ1-40及相关分子表达变化

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神经解剖学杂志 2010年第1期26卷 32-36页

作者：朱云霞赵爱琴赵俊利黄兴锐夏春林苏州大学医学部:博习临床解剖学研究所及细胞神经生物学研究室苏州215123

目的:通过体外建立1型星形胶质细胞(T1A)衰老模型,研究衰老T1A中β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)及相关蛋白的表达变化。方法:采用振荡培养与差速贴壁法分离纯化新生SD(Sprague-Dawley)大鼠的T1A,免疫细胞化学标记检测体外培养21d(21DIV)及9... 详细信息

目的:通过体外建立1型星形胶质细胞(T1A)衰老模型,研究衰老T1A中β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)及相关蛋白的表达变化。方法:采用振荡培养与差速贴壁法分离纯化新生SD(Sprague-Dawley)大鼠的T1A,免疫细胞化学标记检测体外培养21d(21DIV)及90d(90DIV)的T1A中β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)的表达;以WesternBlot检测微管相关蛋白1A/1B轻链3(LC3)、caspase-3及Bcl-2的表达水平。结果:体外长程培养的T1A中Aβ1-40蛋白表达增加,同时90DIV组细胞中LC3II及活化的caspase-3表达水平提高,Bcl-2表达水平降低。结论:研究结果提示衰老的T1A表达Aβ,细胞内自噬及凋亡活性增强,在年龄相关的神经变性过程中,T1A的衰老可促进神经元的损伤,衰老T1A表达的Aβ很可能是Alzheimer病老年斑的重要来源。

关键词：星形胶质细胞衰老自噬凋亡大鼠

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c-Fos和FosB/△FosB蛋白在精神分裂症模型小鼠脑内表达的差异

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神经解剖学杂志 2009年第4期25卷 405-411页

作者：马传响陈幽婷孙茂民王德广张静夏春林苏州大学医学部细胞神经生物学研究室暨博习临床解剖学研究所苏州215123 徐州医学院基础学院徐州221004

为了观察MK-801引发的精神分裂症模型小鼠脑内c-Fos和FosB/△FosB表达的差异,本实验选用雄性昆明小鼠,随机分为溶剂对照组、MK-801组(建立精神分裂症动物模型),采用免疫组化的方法检测模型动物脑内c-Fos和FosB/△FosB的表达,同时用免疫... 详细信息

为了观察MK-801引发的精神分裂症模型小鼠脑内c-Fos和FosB/△FosB表达的差异,本实验选用雄性昆明小鼠,随机分为溶剂对照组、MK-801组(建立精神分裂症动物模型),采用免疫组化的方法检测模型动物脑内c-Fos和FosB/△FosB的表达,同时用免疫荧光双标对c-Fos和FosB/△FosB阳性的细胞进行定性分析。结果显示:精神分裂症动物模型组c-Fos蛋白的表达明显较FosB/△FosB广泛,几乎遍布全脑,而FosB/△FosB主要集中于前脑;在丘脑中线核群、板内核群、前核群和腹侧核群及脑桥核主要为c-Fos的表达,FosB/△FosB表达极少;在伏隔核、嗅结节、尾壳核、齿状回等核团主要为FosB/△FosB的表达,c-Fos表达极少。上述结果表明,c-Fos和FosB/△FosB的表达虽有重叠之处,但显示出明显的区域和强度的差异,且FosB/△FosB高度表达的区域与已知的精神分裂症相关脑区吻合,因此FosB/△FosB可能更适用于精神分裂症发病机制的研究。

关键词： MK-801 c—Fos FosB/△FosB 精神分裂症小鼠

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bFGF和骨髓间充质干细胞联合移植对脊髓半横断损伤后神经再生的影响

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神经解剖学杂志 2015年第6期31卷 751-756页

作者：李东印张晔刘晓梅郑辉陈尚夏春林苏州卫生职业技术学院护理学院苏州215009 苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州215123

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合移植对脊髓半横断损伤后神经再生的影响。方法:利用血清培养技术获得SD大鼠BMSCs行CM-DiI标记。80只大鼠随机分为4组:正常组、损伤组、BMSCs移植组、bFGF+BMSCs移植... 详细信息

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合移植对脊髓半横断损伤后神经再生的影响。方法:利用血清培养技术获得SD大鼠BMSCs行CM-DiI标记。80只大鼠随机分为4组:正常组、损伤组、BMSCs移植组、bFGF+BMSCs移植组,每组各20只。建立脊髓半横断损伤模型,移植组采用明胶海绵和细胞悬液填充。分别于术后3、7、14、21 d用BBB评分法观察大鼠后肢运动功能的恢复情况,免疫荧光组织化学染色法检测损伤区CM-DiI、GFAP和GAP-43的表达变化,并对其进行相关性分析。结果:bFGF+BMSCs移植组和BMSCs移植组大鼠的左后肢运动功能较损伤组有明显改善(P<0.05),且bFGF+BMSCs移植组与BMSC移植组相比亦有显著性差异(P<0.05);损伤组GAP-43的表达量极少,BMSCs移植组则有少量表达,而bFGF+BMSCs移植组呈高表达;bFGF+BMSCs移植组术后早期GFAP高表达,BMSCs移植组次之,损伤组最少,但14d后,GFAP表达刚好相反。结论:bFGF+BMSCs移植较BMSCs移植能更好地促进脊髓损伤后神经的再生。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞脊髓损伤移植大鼠

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bFGF与骨髓间充质干细胞联合应用对大鼠脊髓损伤的修复作用

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中国骨伤 2019年第7期32卷 653-657页

作者：黄兴锐徐浩张晔蒋元斌夏春林方姝晨吴江区中医医院吴江区第二人民医院骨科江苏苏州215221 苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215123

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)与成纤维细胞生长因子(bFGF)联合移植对大鼠脊髓损伤的修复作用,并探讨其机制。方法:利用血清培养技术获得SD大鼠BMSCs。80只健康雄性6周龄SD大鼠(重约240 g)随机分为4组,每组20只。假手术组行单纯椎... 详细信息

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)与成纤维细胞生长因子(bFGF)联合移植对大鼠脊髓损伤的修复作用,并探讨其机制。方法:利用血清培养技术获得SD大鼠BMSCs。80只健康雄性6周龄SD大鼠(重约240 g)随机分为4组,每组20只。假手术组行单纯椎板切除,不损伤脊髓,与其余3组同条件饲养。其余3组均采用左侧T9脊髓半切,建立脊髓损伤模型。制模9 d后进行损伤局部移植治疗,对照组损伤处植入吸附有生理盐水的明胶海绵;BMSCs移植组损伤处植入吸附有BMSCs的明胶海绵;bFGF+BMSCs移植组损伤处植入吸附有bFGF+BMSCs的明胶海绵。术后4、8周后Western blotting分析受损脊髓组织中NF-200、GFAP表达水平,Basso Beattie Bresnahan (BBB)运动功能评分量表评价大鼠的后肢功能恢复情况。结果:术后4、8周后BMSCs移植组和bFGF+BMSCs移植组的(BBB)评分较对照组改善(P<0.05),且bFGF+BMSCs移植组与BMSCs移植组比较差异有统计学意义(P<0.05);术后4、8周后NF200在对照组表达极少,在BMSCs移植组只有少量表达,而bFGF+BMSCs移植组呈高表达(P<0.05)。GFAP在对照组表达高,BMSCs移植组少量表达,bFGF+BMSCs移植组呈现低表达(P<0.05)。bFGF+BMSCs移植组与BMSCs移植组、对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:BMSCs与bFGF联合移植对大鼠脊髓损伤有修复作用,机制可能与其降低GFAP表达及升高NF-200表达有关。

关键词：骨髓间充质干细胞成纤维细胞生长因子脊髓损伤神经丝蛋白-200 胶质纤维酸性蛋白

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bFGF对小鼠创伤性脑损伤后神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响

bFGF对小鼠创伤性脑损伤后神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：黄兴锐朱云霞赵爱琴刘海昌贾俊霞夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州 215123

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)对小鼠脑损伤后伤侧皮质及海马神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响。方法：36只小鼠随机分为3组：对照组、生理盐水组、bFGF组,每组各12只。采用自由落体打击装... 详细信息

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)对小鼠脑损伤后伤侧皮质及海马神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响。方法：36只小鼠随机分为3组：对照组、生理盐水组、bFGF组,每组各12只。采用自由落体打击装置建立脑损伤模型,3、7天后各组取3只动物分别应用免疫荧光双标和蛋白质免疫印迹检测大脑皮质、海马中神经细胞凋亡因子caspase—3的变化,以及大脑皮质中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达。结果：bFGF组的皮质和海马中caspase—3的表达比生理盐水组和对照组减少(P＜0.05);bFGF组的皮质中GFAP表达比生理盐水组和对照组增加(P＜0.05)：生理盐水组与对照组的caspase—3及GFAP表达差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：bFGF能降低小鼠脑损伤后大脑皮质和海马caspase—3的表达、增高大脑皮质GFAP的表达,抑制神经元凋亡,促进大脑皮质星形胶质细胞活化。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子创伤性脑损伤神经元凋亡星形胶质细胞活化

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EPO激活的星形胶质细胞条件培养液对神经干细胞促分化作用及对分化后细胞的保护作用

EPO激活的星形胶质细胞条件培养液对神经干细胞促分化作用及对分...

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：张静沈慧夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州 215123

目的：观察红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液(EACM)对神经干细胞促分化作用及对分化后细胞的保护作用。方法：原代培养神经干细胞和1型星形胶质细胞,收集红细胞生成素刺激的星形胶质细胞上清液,用于神经干细胞分化试验的研究... 详细信息

目的：观察红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液(EACM)对神经干细胞促分化作用及对分化后细胞的保护作用。方法：原代培养神经干细胞和1型星形胶质细胞,收集红细胞生成素刺激的星形胶质细胞上清液,用于神经干细胞分化试验的研究。对分化后的细胞进行免疫细胞化学染色,计算其分化为神经元的比率;同时利用FeSO4和H2O2制造细胞损伤模型,用EACM继续培养48h,然后检测细胞活性和存活细胞数。结果：EACM组神经干细胞分化明显,神经元比率较星形胶质细胞上清组和对照组均有明显增加。当分化后的细胞中加入H2O2后,继续用EACM培养的实验组0D值和细胞存活百分比均较对照组高。结论：红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液对神经干细胞有促其向神经元分化的作用,并对分化后的细胞有保护作用。

关键词：星形胶质细胞条件培养液神经干细胞促红细胞生成素细胞分化免疫细胞化学神经系统损伤

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