检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2011年第9期27卷 989-992页

作者：林丹丹刘春亮包光明吴康单琳刘海燕苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫实验室江苏苏州215123 苏州大学医学部生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215123

目的:构建小鼠白细胞介素-1α原核表达载体,表达并纯化IL-1α蛋白,制备兔抗鼠IL-1α多克隆抗体,并对抗体特性进行初步的鉴定。方法:利用RT-PCR技术,从BALB/c小鼠脾脏cDNA中扩增出IL-1α的全长基因,酶切后连接至pET32a(+)原核表达载体,... 详细信息

目的:构建小鼠白细胞介素-1α原核表达载体,表达并纯化IL-1α蛋白,制备兔抗鼠IL-1α多克隆抗体,并对抗体特性进行初步的鉴定。方法:利用RT-PCR技术,从BALB/c小鼠脾脏cDNA中扩增出IL-1α的全长基因,酶切后连接至pET32a(+)原核表达载体,重组载体测序正确后转化至BL21(DE3)大肠杆菌。利用蛋白质原核表达自动诱导方案成功表达重组蛋白。重组蛋白经电洗脱纯化后用以免疫新西兰大白兔,获得了抗小鼠IL-1α的多克隆抗体,ELISA检测抗体效价。Western blot和流式细胞术(FCM)检测抗血清的特异性。结果:成功构建了重组表达载体pET32a(+)-IL-1α,表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,得到的多克隆抗体ELISA显示抗体效价可达1∶25 600。Western blot和FCM分析该抗体能特异性结合IL-1α。结论:利用重组的IL-1α蛋白成功制备了高效价、高特异性的兔抗IL-1α抗体,为进一步研究IL-1α的生物学功能奠定了基础。

关键词： IL-1α 基因克隆原核表达多克隆抗体

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羽扇豆醇对白血病细胞株增殖和凋亡作用的影响

引用

苏州大学学报（医学版） 2011年第3期31卷 425-427,440页

作者：单琳林丹丹张胤晟薛智谋刘海燕苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系江苏苏州215123 苏州大学生物医学研究院肿瘤细胞与分子免疫学实验室江苏苏州213123

目的研究羽扇豆醇对人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞的增殖和凋亡作用。方法以不加药物处理为对照组,设置5个羽扇豆醇浓度梯度分别处理人髓系、淋系白血病细胞,采用MTT法检测细胞活力及增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡... 详细信息

目的研究羽扇豆醇对人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞的增殖和凋亡作用。方法以不加药物处理为对照组,设置5个羽扇豆醇浓度梯度分别处理人髓系、淋系白血病细胞,采用MTT法检测细胞活力及增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随着羽扇豆醇浓度的升高,细胞增殖明显受到抑制。当浓度达到150μmol/L时,4种细胞都呈现出明显的增殖抑制作用(均P<0.05);与对照组相比,羽扇豆醇组细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论羽扇豆醇可显著抑制人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞增殖并诱导其凋亡。

关键词：羽扇豆醇髓系白血病细胞淋系白血病细胞增殖凋亡

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臭参对S_(180)荷瘤小鼠化疗增效减毒及免疫功能的影响

引用

中成药 2012年第10期34卷 1848-1851页

作者：陈子珺李云森韦群辉陈少丽陈德兴上海中医药大学中药学院方剂教研室上海201203 苏州大学医学部肿瘤细胞和分子免疫学实验室江苏苏州215123 云南中医学院中药系云南昆明650500

目的研究臭参对S180荷瘤小鼠化疗增效、减毒及免疫功能的影响。方法通过对S180荷瘤小鼠瘤质量及外周血象的检测,分别观察臭参与阿霉素及环磷酰胺合用对S180荷瘤小鼠的增效减毒作用;通过检测S180荷瘤小鼠血清溶血素及网状内皮系统吞噬功... 详细信息

目的研究臭参对S180荷瘤小鼠化疗增效、减毒及免疫功能的影响。方法通过对S180荷瘤小鼠瘤质量及外周血象的检测,分别观察臭参与阿霉素及环磷酰胺合用对S180荷瘤小鼠的增效减毒作用;通过检测S180荷瘤小鼠血清溶血素及网状内皮系统吞噬功能,观察臭参对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果臭参能在一定程度上增强阿霉素或环磷酰胺的抑瘤作用以及减轻化疗药物对血液系统的毒副作用。臭参可增强荷瘤小鼠降低的免疫功能,还具有增强网状内皮系统吞噬功能的作用。结论臭参对荷瘤小鼠具有一定的化疗增效、减毒及免疫增强作用。

关键词：臭参化疗增效减毒免疫调节 S180荷瘤小鼠

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小鼠白细胞介素15慢病毒载体的构建和表达

引用

南通大学学报（医学版） 2010年第2期30卷 79-82,85,F0002页

作者：胡博林丹丹张胤晟包光明单琳赵昀刘海燕苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫学实验室苏州215123 苏州大学第一附属医院江苏省血液研究中心

目的:克隆小鼠白细胞介素15(IL-15)基因,并构建可表达小鼠IL-15基因的重组慢病毒。方法:根据小鼠IL-15基因序列以及慢病毒穿梭载体相应的酶切位点设计合成PCR引物;提取小鼠脾脏总RNA,逆转录PCR扩增小鼠IL-15基因的编码区;克隆小鼠IL-15... 详细信息

目的:克隆小鼠白细胞介素15(IL-15)基因,并构建可表达小鼠IL-15基因的重组慢病毒。方法:根据小鼠IL-15基因序列以及慢病毒穿梭载体相应的酶切位点设计合成PCR引物;提取小鼠脾脏总RNA,逆转录PCR扩增小鼠IL-15基因的编码区;克隆小鼠IL-15基因的编码区,并进行基因测序;构建含有IL-15基因的慢病毒穿梭质粒,并与其它包装质粒一起感染293T细胞;获得病毒颗粒并感染人慢性髓系白血病细胞MEG,Western Blot检测IL-15基因在MEG细胞中的表达。结果:含有小鼠IL-15基因编码区的慢病毒穿梭质粒构建成功,基因测序结果完全正确;含有小鼠IL-15基因的慢病毒载体包装成功;所得病毒上清可成功感染MEG细胞,流式细胞术检测阳性率可达98%;Western Blot结果证明小鼠IL-15基因在MEG细胞中正常表达。结论:成功扩增、克隆了小鼠IL-15基因,并建立其慢病毒表达系统,从而为后续的基础及应用研究工作奠定了基础。

关键词：白细胞介素15 慢病毒载体小鼠

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