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首届长三角科技论坛：长三角生物医药发展论坛

作者：张虎杨吉成盛伟华缪竞诚李丽娥王金志白艳艳谢宇锋苏州大学医学院基础医学系细胞与分子生物学教研室江苏苏州 215007

目的：构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌。方法：人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物，以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板。应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因，用A-T克隆法与pUCm-T载体连接，pUC... 详细信息

目的：构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌。方法：人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物，以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板。应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因，用A-T克隆法与pUCm-T载体连接，pUCm-T-BDNF克隆片段再定向插入原核表达载体PB V220，构建的重组体PB V220-BDNF转化大肠杆菌DH5a经热诱导表达。结果：经DNA测序和限制性酶切确证重组入载体片段为目的基因的核苷酸序列，并成功表达蛋白。结论：本研究成功地克隆出hBDNF基因编码序列并在大肠杆菌中获得稳定表达，为今后的生物学活性和神经系统的基因治疗奠定了基础。

关键词：脑源性神经营养因子基因表达基因工程菌原核表达生物学活性基因治疗核苷酸

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干扰素治疗病理性瘢痕的实验研究

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江苏大学学报（医学版） 2004年第4期14卷 282-284页

作者：孙其昌周嘉梁王秀珍周迎会吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学医学院生化工程研究所江苏苏州215007

目的 :研究体外干扰素 (INF)对瘢痕组织成纤维细胞 (FB)中转化生长因子 β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF BB)、基质金属蛋白酶 (MMP 1)以及糖基转移酶 (ppGalNAc T2 )的mRNA表达的影响 ,以求阐明干扰素对病理性瘢痕的作用机理... 详细信息

目的 :研究体外干扰素 (INF)对瘢痕组织成纤维细胞 (FB)中转化生长因子 β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF BB)、基质金属蛋白酶 (MMP 1)以及糖基转移酶 (ppGalNAc T2 )的mRNA表达的影响 ,以求阐明干扰素对病理性瘢痕的作用机理。方法 :组织块法培养瘢痕组织FB ,传代后分成 3组①对照组 :生理盐水处理 ;②低浓度组 :10 0U/mlINF α2b处理 ;③高浓度组 :10 0 0 0U/mlINF α2b处理 ;RT PCR检测TGF β1、MMP 1、PDGF BB及ppGalNAc T2表达。结果 :体外培养瘢痕FB经 10 0U/ml及 10 0 0 0U/ml干扰素α 2b处理后 ,RT PCR检测TGF β1、PDGF BB及pp GalNAc T2表达降低 ,MMP 1表达升高 ,呈显著差异 ,且具有浓度依赖性。结论 :干扰素α2b对瘢痕FB具有抑制作用 ,其机理可能与多种细胞因子有关 ,如TGF β1、PDGF BB。

关键词：增生性瘢痕干扰素α2b TGF-β1 PDGF-BB MMP-1 ppGalNAcT2 治疗病理性瘢痕实验转化生长因子β1 血小板衍生生长因子BB 糖基转移酶基质金属蛋白酶

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大鼠松果体Clock基因和N-乙酰转移酶基因的昼夜节律性表达及光照影响

大鼠松果体Clock基因和N-乙酰转移酶基因的昼夜节律性表达及光照...

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2004全国时间生物医学学术会议

作者：王国卿童建苏州大学医学院基础医学系生理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室

目的探讨12 h光照、12 h黑暗交替(12 h-light : 12 h-dark cycle, LD)及持续黑暗(constant darkness, DD)光制下松果体钟基因Clock和N-乙酰转移酶基因(arylalkylamine N-acetyltransferase gene, NAT)是否存在昼夜节律性表达及其光反应变化。方法雄性SD大鼠在LD和DD光制下分别被饲养4周(n=36)和8周(n=36)后,在一昼夜内每隔4 h采集松果体组织,提取总RNA,用竞争性定量RT-PCR测定不同昼夜时点样品中Clock及NAT的mRNA相对表达量,通过余弦法和Clock Lab软件获取节律参数,并经振幅检验是否存在昼夜节律。结果(1) 在DD或LD光制下,松果体Clock和NAT基因mRNA的表达均呈现夜高昼低的节律性振荡(P<0.05)。(2) 与DD光制下比较,LD光制下松果体Clock和NAT的表达振幅及峰值相的mRNA水平均降低(P<0.05)。(3) 在DD或LD光制下,Clock和NAT之间显示相似的节律性表达(P>.05)。结论Clock和NAT基因在松果体中存在同步的内源性昼夜节律表达,光照作用可使其表达下调。

关键词： Clock基因 NAT基因昼夜节律光照松果体

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肺癌患者血清肿瘤标志物检测的临床意义

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中国血液流变学杂志 2004年第4期14卷 524-526页

作者：徐跃华汪家敏苏州大学附二院呼吸科江苏苏州215004 苏州大学医学院基础医学系生物化学和分子生物学教研室江苏苏州215007

目的　测定小细胞肺癌和晚期非小细胞肺癌患者化疗前后癌胚抗原 (CEA)、细胞角蛋白 19片段 (CYFRA2 1 1)、神经元特异性烯醇化酶 (NSE)的变化 ,并探讨该种变化的临床意义。方法　用放射免疫分析的方法分别测定 2 0例肺部良性疾病、2 0... 详细信息

目的　测定小细胞肺癌和晚期非小细胞肺癌患者化疗前后癌胚抗原 (CEA)、细胞角蛋白 19片段 (CYFRA2 1 1)、神经元特异性烯醇化酶 (NSE)的变化 ,并探讨该种变化的临床意义。方法　用放射免疫分析的方法分别测定 2 0例肺部良性疾病、2 0例广泛期小细胞肺癌 (SCLC)以及 4 5例初诊晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)患者化疗前后血清CEA、CYFRA2 1 1、NSE的水平 ,再分别作对比分析。结果　肺癌组CEA、CYFRA2 1 1、NSE的水平高于良性疾病组 ,但CYFRA2 1 1在良性疾病和小细胞肺癌中、NSE在良性疾病和鳞癌以及良性疾病和腺癌中均未见统计学差异 (P >0 .0 5 ) ;化疗后小细胞肺癌患者NSE显著下降 (P <0 0 1) ,鳞癌患者CYFRA2 1 1水平显著下降 (P <0 .0 1) ,但在腺癌患者只有NSE水平较化疗前下降 ,另两种标志物未见统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论　三种肿瘤标志物在非小细胞肺癌晚期均升高 ,其中CEA在腺癌、CYFRA2 1 1在鳞癌、NSE在SCLC中尤为明显 ,化疗后显著下降 ,三种指标的测定有助于肺癌的病理分型 ,并且可以分别作为判定不同病理类型肺癌化疗疗效的指标。

关键词： CYFRA21-1 NSE 患者良性疾病鳞癌肺癌临床意义水平结论差异

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激动中枢组胺能受体对应激大鼠颈动脉窦压力感受性反射重调定的影响

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生理学报 2003年第1期55卷 29-35页

作者：王国卿周希平黄伟秋苏州大学医学院基础医学系生理学教研室苏州215007

应激 1周的大鼠 ,麻醉后孤离双侧颈动脉窦区 ,将不同窦内压 (ISP)与其对应的平均动脉压 (MAP)值进行Logistic5个参数曲线拟合。根据所得ISP-MAP关系曲线及其特征参数 ,分别观察侧脑室 (i c v )注射和孤束核(NTS)内注射组胺受体拮抗剂对... 详细信息

应激 1周的大鼠 ,麻醉后孤离双侧颈动脉窦区 ,将不同窦内压 (ISP)与其对应的平均动脉压 (MAP)值进行Logistic5个参数曲线拟合。根据所得ISP-MAP关系曲线及其特征参数 ,分别观察侧脑室 (i c v )注射和孤束核(NTS)内注射组胺受体拮抗剂对颈动脉窦压力感受性反射 (CSR)的影响 ,并与相应的非应激CSR水平进行比较。结果如下 :(1)应激导致ISP-MAP关系曲线显著全面上移 ,窦内压和增益 (ISP-Gain)关系曲线中部明显下移 ,反射参数中阈压 (TP)、饱和压 (SP)、调定点 (setpoint)和最大增益时的窦内压 (ISPGmax)值增大 ,MAP反射变动范围 (MAPrange)及反射最大增益 (Gmax)减小 ;(2 )I c v H1或H2 受体拮抗剂氯苯吡胺 (CHL) 5 μg或西咪替丁 (CIM ) 15 μg ,在 2 0min内均可明显减弱应激对CSR的上述改变 ,CIM的这种减弱作用不如CHL的显著 ;(3 )NTS内注射CHL(0 5 μg)或CIM (1 5 μg) ,对应激所致CSR变化的影响与i c v CHL或CIM后的相类似 ;(4)分别i c v 和NTS内注射CHL或CIM后 ,均不能使应激的CSR水平完全恢复到相应的非应激对照水平。以上结果提示 ,应激引起CSR重调定 ,反射敏感性下降 ;其部分机制可能是激活中枢组胺能系统 ,通过中枢组胺能受体 (H1和H2 受体 )尤其是H1受体介导而发挥作用 ;下丘脑

关键词：颈动脉窦压力感受性反向应激氯苯吡胺西咪替丁侧脑室注射弧束核平均动脉压

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中枢α受体在脑室注射组胺对颈动脉窦反射重调定中的作用

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中国药理学通报 2003年第9期19卷 1037-1042页

作者：王国卿周希平蒋星红沈新娥张玉英苏州大学医学院生理学教研室苏州215007 苏州大学医学院基础医学系苏州215007 苏州大学医学院神经生物学教研室苏州215007

目的　探讨中枢α1和α2 肾上腺素受体 (α1 AR ,α2 AR)在脑室注射 (icv)组胺 (HA)对颈动脉窦压力感受性反射 (CSR)重调定中的作用。方法　孤离麻醉SD大鼠的双侧颈动脉窦区 ,将不同窦内压 (ISP)与其对应的平均动脉压(MAP)值进行Logis... 详细信息

目的　探讨中枢α1和α2 肾上腺素受体 (α1 AR ,α2 AR)在脑室注射 (icv)组胺 (HA)对颈动脉窦压力感受性反射 (CSR)重调定中的作用。方法　孤离麻醉SD大鼠的双侧颈动脉窦区 ,将不同窦内压 (ISP)与其对应的平均动脉压(MAP)值进行Logistic五参数曲线拟合 ,求得ISP MAP关系曲线及其特征参数 ,观察icvHA以及预先在蓝斑 (LC)或孤束核 (NTS)微量注射α1或α2 AR拮抗剂对CSR的影响。结果　icvHA (6 0 μmol·L-1,5 μl)导致ISP MAP关系曲线后半程明显上移 (P <0 0 5 ) ,ISP和增益关系曲线中部明显下移 (P <0 0 5 ) ,反射参数MAP反射变动范围及反射最大增益减小 (P <0 0 5 ) ;预先向LC注射选择性的α1 AR拮抗剂酚苄明 (PBZ ,3μmol·L-1,5 0 0nl)或α2 AR拮抗剂育亨宾 (YOH ,2 5 μmol·L-1,5 0 0nl) ,均能明显加强HA的上述效应 ,PBZ的这种加强作用不如YOH的显著 (P <0 0 5 ) ;预先向NTS注射相同剂量、容积的PBZ或YOH ,对HA效应的影响与LC注射后的相类似 ,但NTS注射YOH后icvHA所致的阈压变化进一步明显升高 (P <0 0 5 )。结论　脑室给HA使CSR产生快速重调定 ,反射敏感性下降 ;LC与NTS处的α1、α2 AR作用可减弱icvHA对CSR的重调定 ;LC、尤为NTS处的α2

关键词：颈动脉窦反射重调定组胺脑室注射中枢α1-肾上腺素受体中枢α2-肾上腺素受体孤束核蓝斑平均动脉压

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碱性成纤维细胞生长因子对非贴壁骨髓基质前体细胞增殖及分化作用的研究

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中国药理学通报 2003年第5期19卷 578-582页

作者：邵君飞茅彩萍王旻晨董宁征苏州大学医学院基础医学系苏州215007 苏州大学医学院药理学教研室.苏州中药研究所苏州215007

目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对非贴壁骨髓前体细胞的增殖及分化作用。方法　分离骨髓前体细胞体外培养 ,用碱性磷酸酶化学染色及图像分析仪测定细胞克隆数 ;采用免疫组化 (ABC法 )检测PCNA、Ⅰ型胶原、钙及骨钙素。研究bFG... 详细信息

目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对非贴壁骨髓前体细胞的增殖及分化作用。方法　分离骨髓前体细胞体外培养 ,用碱性磷酸酶化学染色及图像分析仪测定细胞克隆数 ;采用免疫组化 (ABC法 )检测PCNA、Ⅰ型胶原、钙及骨钙素。研究bFGF对非贴壁前体细胞的促增殖及分化作用。结果　骨髓细胞中许多基质前体细胞以非贴壁前体细胞 (NASP)形式存在 ,bFGF不仅能促进其增殖 ,而且能诱导其向成骨细胞分化。结论　bFGF主要作用于非贴壁生长的基质前体细胞 :能增加骨细胞的数量 ,促进骨样组织形成 ,为临床用bFGF治疗骨折、骨不连提供理论依据。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子骨髓前体细胞非贴壁前体细胞增殖分化

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孤束核组胺能受体参与应激大鼠颈动脉窦压力感受性反射的重调定

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江苏医药 2003年第10期29卷 738-740页

作者：王国卿沈新娥孙万平周希平邹容苏州大学医学院基础医学系生理学教研室 215007

目的　探讨孤束核 (NTS)组胺 (HA)能受体是否影响应激对颈动脉窦压力感受性反射(CSR)的重调定。方法　应激一周的大鼠 ,麻醉后孤离双侧颈动脉窦区 ,将不同窦内压 (ISP)与其对应的平均动脉压 (MAP)值进行Logistic五参数曲线拟合 ,求得ISP... 详细信息

目的　探讨孤束核 (NTS)组胺 (HA)能受体是否影响应激对颈动脉窦压力感受性反射(CSR)的重调定。方法　应激一周的大鼠 ,麻醉后孤离双侧颈动脉窦区 ,将不同窦内压 (ISP)与其对应的平均动脉压 (MAP)值进行Logistic五参数曲线拟合 ,求得ISP MAP关系曲线及特征参数 ,观察NTS注射不同HA受体拮抗剂对CSR的影响。结果　应激导致ISP MAP关系曲线显著全面上移 ,反射参数中阈压、饱和压、调定点和最大增益时ISP值增大 ,MAP反射变动范围及最大增益减小 ;NTS内注射H1或H2 受体拮抗剂 (氯苯吡胺 ,CHL ,0 5 μg或西咪替丁 ,CIM ,1 5 μg) 2 0min内均可明显减弱应激对CSR的上述改变 ,CIM减弱作用不如CHL ;NTS内注射CHL或CIM后 ,均不能使应激的CSR水平完全恢复到相应的非应激对照水平。结论　应激引起CSR重调定 ,反射敏感性下降 ;部分机制可能是激活中枢HA能系统 ,NTS的H1和H2 尤其H1受体在应激引起CSR重调定的机制中发挥重要作用 ;下丘脑

关键词：应激颈动脉窦 HA NTS 孤束核组胺压力感受性反射 CSR 氯苯 MAP

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表皮生长因子受体和P53在宫颈鳞癌中的表达

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中国航天医药杂志 2003年第4期5卷 13-15页

作者：王修珍顾永平邓海珍苏州大学医学院基础医学系病理教研室 215000

目的研究表皮生长因子受体(EGFR)和P53在宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化S-法对53例不同分化的宫颈鳞癌组织及10例慢性宫颈炎组织进行EGFR和P53检测。结果10例慢性宫颈炎组织中未发现P53和EGFR阳性表达,53例宫颈鳞癌中EGF... 详细信息

目的研究表皮生长因子受体(EGFR)和P53在宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化S-法对53例不同分化的宫颈鳞癌组织及10例慢性宫颈炎组织进行EGFR和P53检测。结果10例慢性宫颈炎组织中未发现P53和EGFR阳性表达,53例宫颈鳞癌中EGFR和P53阳性表达率分别为49.0%(26/53)和47.2%(25/53),阳性表达的EGFR定位于肿瘤组织的细胞膜或细胞浆,P53定位于细胞核内。结论EGFR和P53蛋白阳性表达率与宫颈癌的分化程度有关,提示P53蛋白和EGFR参与宫颈癌的发生和发展过程。

关键词：表皮生长因子受体宫颈鳞癌免疫组织化学 P53蛋白

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刺激兔坐骨神经中枢端对呼吸、血压、心率变化的影响

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中国血液流变学杂志 2003年第4期13卷 334-335,347页

作者：邹容李金华王国卿周希平苏州大学医学院基础医学系生理学教研室苏州215007

目的　观察以连续单相方波刺激兔坐骨神经中枢端所引起的呼吸、动脉血压和心率的变化。方法　用Medlab生物信号采集处理系统对兔坐骨神经中枢端刺激 (波宽 :2ms ,频率 :10Hz,强度 :6v ,时程 :6s) ,并将采集的呼吸、动脉血压和心率数据... 详细信息

目的　观察以连续单相方波刺激兔坐骨神经中枢端所引起的呼吸、动脉血压和心率的变化。方法　用Medlab生物信号采集处理系统对兔坐骨神经中枢端刺激 (波宽 :2ms ,频率 :10Hz,强度 :6v ,时程 :6s) ,并将采集的呼吸、动脉血压和心率数据进行绘图、处理。结果　刺激兔坐骨神经中枢端 ,可引起呼吸加深加快 (P <0 .0 0 1) ,血压升高 (P <0 .0 5) ,但心率变化不显著 (P >0 .0 5)。结论　对呼吸和心血管机能的调节 ,除了与最基本的延髓呼吸和心血管中枢、大脑皮层、脑干和小脑等的神经元参与有关外 ,还与脊髓的低级反射中枢有关。

关键词：刺激坐骨神经呼吸血压心率变化

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