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首届长三角科技论坛：长三角生物医药发展论坛

作者：张虎杨吉成盛伟华缪竞诚李丽娥王金志白艳艳谢宇锋苏州大学医学院基础医学系细胞与分子生物学教研室江苏苏州 215007

目的：构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌。方法：人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物，以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板。应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因，用A-T克隆法与pUCm-T载体连接，pUC... 详细信息

目的：构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌。方法：人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物，以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板。应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因，用A-T克隆法与pUCm-T载体连接，pUCm-T-BDNF克隆片段再定向插入原核表达载体PB V220，构建的重组体PB V220-BDNF转化大肠杆菌DH5a经热诱导表达。结果：经DNA测序和限制性酶切确证重组入载体片段为目的基因的核苷酸序列，并成功表达蛋白。结论：本研究成功地克隆出hBDNF基因编码序列并在大肠杆菌中获得稳定表达，为今后的生物学活性和神经系统的基因治疗奠定了基础。

关键词：脑源性神经营养因子基因表达基因工程菌原核表达生物学活性基因治疗核苷酸

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大鼠松果体Clock基因和N-乙酰转移酶基因的昼夜节律性表达及光照影响

大鼠松果体Clock基因和N-乙酰转移酶基因的昼夜节律性表达及光照...

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2004全国时间生物医学学术会议

作者：王国卿童建苏州大学医学院基础医学系生理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室

目的探讨12 h光照、12 h黑暗交替(12 h-light : 12 h-dark cycle, LD)及持续黑暗(constant darkness, DD)光制下松果体钟基因Clock和N-乙酰转移酶基因(arylalkylamine N-acetyltransferase gene, NAT)是否存在昼夜节律性表达及其光反应变化。方法雄性SD大鼠在LD和DD光制下分别被饲养4周(n=36)和8周(n=36)后,在一昼夜内每隔4 h采集松果体组织,提取总RNA,用竞争性定量RT-PCR测定不同昼夜时点样品中Clock及NAT的mRNA相对表达量,通过余弦法和Clock Lab软件获取节律参数,并经振幅检验是否存在昼夜节律。结果(1) 在DD或LD光制下,松果体Clock和NAT基因mRNA的表达均呈现夜高昼低的节律性振荡(P<0.05)。(2) 与DD光制下比较,LD光制下松果体Clock和NAT的表达振幅及峰值相的mRNA水平均降低(P<0.05)。(3) 在DD或LD光制下,Clock和NAT之间显示相似的节律性表达(P>.05)。结论Clock和NAT基因在松果体中存在同步的内源性昼夜节律表达,光照作用可使其表达下调。

关键词： Clock基因 NAT基因昼夜节律光照松果体

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干扰素治疗病理性瘢痕的实验研究

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江苏大学学报（医学版） 2004年第4期14卷 282-284页

作者：孙其昌周嘉梁王秀珍周迎会吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学医学院生化工程研究所江苏苏州215007

目的 :研究体外干扰素 (INF)对瘢痕组织成纤维细胞 (FB)中转化生长因子 β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF BB)、基质金属蛋白酶 (MMP 1)以及糖基转移酶 (ppGalNAc T2 )的mRNA表达的影响 ,以求阐明干扰素对病理性瘢痕的作用机理... 详细信息

目的 :研究体外干扰素 (INF)对瘢痕组织成纤维细胞 (FB)中转化生长因子 β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF BB)、基质金属蛋白酶 (MMP 1)以及糖基转移酶 (ppGalNAc T2 )的mRNA表达的影响 ,以求阐明干扰素对病理性瘢痕的作用机理。方法 :组织块法培养瘢痕组织FB ,传代后分成 3组①对照组 :生理盐水处理 ;②低浓度组 :10 0U/mlINF α2b处理 ;③高浓度组 :10 0 0 0U/mlINF α2b处理 ;RT PCR检测TGF β1、MMP 1、PDGF BB及ppGalNAc T2表达。结果 :体外培养瘢痕FB经 10 0U/ml及 10 0 0 0U/ml干扰素α 2b处理后 ,RT PCR检测TGF β1、PDGF BB及pp GalNAc T2表达降低 ,MMP 1表达升高 ,呈显著差异 ,且具有浓度依赖性。结论 :干扰素α2b对瘢痕FB具有抑制作用 ,其机理可能与多种细胞因子有关 ,如TGF β1、PDGF BB。

关键词：增生性瘢痕干扰素α2b TGF-β1 PDGF-BB MMP-1 ppGalNAcT2 治疗病理性瘢痕实验转化生长因子β1 血小板衍生生长因子BB 糖基转移酶基质金属蛋白酶

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白细胞介素-24基因治疗肿瘤机制探讨

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临床肿瘤学杂志 2005年第5期10卷 549-551页

作者：汪小华杨吉成苏州大学附属第一医院江苏苏州215006 苏州大学医学院基础医学系细胞和分子生物学教研室 215007

白细胞介素-24(IL-24)是人白细胞介素家族的新成员,它是由人干扰素β(IFN-β)和密执毒素(MEZ)诱导黑色素肿瘤细胞产生的,能使人黑色素瘤细胞进行终末分化,从而使其失去增殖的能力,故又将其命名为mda-7(melanoma differentiation-associa... 详细信息

白细胞介素-24(IL-24)是人白细胞介素家族的新成员,它是由人干扰素β(IFN-β)和密执毒素(MEZ)诱导黑色素肿瘤细胞产生的,能使人黑色素瘤细胞进行终末分化,从而使其失去增殖的能力,故又将其命名为mda-7(melanoma differentiation-associated gene)[1].

关键词：白细胞介素-24 肿瘤基因治疗机制

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外源性一氧化氮体外杀伤红内期间日疟原虫的实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2009年第4期27卷 318-321页

作者：方强夏惠王雪梅陆凤陶志勇曹俊孙新高琪苏州大学基础医学系寄生虫学教研室苏州215123 蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 江苏省寄生虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064

目的探讨外源性一氧化氮(NO)对红内期间日疟原虫的杀伤作用。方法采集以早期滋养体期为主,原虫密度>0.5%的患者血样,配成含2%红细胞的虫血混悬液。96孔板中每孔加100μl虫血混悬液,再加入各组试剂,亚硝基铁氰化钠(SNP,分别为0.02、0... 详细信息

目的探讨外源性一氧化氮(NO)对红内期间日疟原虫的杀伤作用。方法采集以早期滋养体期为主,原虫密度>0.5%的患者血样,配成含2%红细胞的虫血混悬液。96孔板中每孔加100μl虫血混悬液,再加入各组试剂,亚硝基铁氰化钠(SNP,分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mmol/L),SNP+血红蛋白(Hb)0.15mmol/L,SNP+硫酸亚铁(FeSO4)0.15mmol/L,SNP+L-半胱氨酸(L-cyst)1.00mmol/L,SNP+FeSO40.15mmol/L+L-cyst1.00mmol/L,后4组SNP浓度均为1.00mmol/L,设对照组,每组重复3次,置37℃5%CO2培养箱中培养。根据虫龄,估计发育至裂殖体时间,提前3h取空白对照孔涂片镜检,确定终止培养时间,培养终止后吉氏染色,镜检计数成熟裂殖体,计算NO对红内期间日疟原虫的抑制率,统计分析各组对间日疟原虫抑制率的差异。结果SNP0.02mmol/L组,间日疟原虫抑制率为(0.84±1.69)%,对培养的红内期间日疟原虫无杀伤作用(P>0.05);SNP0.05mmol/L组,间日疟原虫抑制率为(12.26±3.04)%,对培养的红内期间日疟原虫存在杀伤作用(P<0.01)。且抑制率随SNP浓度上升而升高。在含有1.00mmol/LSNP的孔中分别加入Hb、L-cyst、FeSO4和FeSO4+L-cyst与只添加SNP1.00mmol/L孔相比,红内期间日疟原虫抑制率自(85.40±2.90)%下降为(5.90±2.90)%、(25.86±4.02)%、(30.16±2.75)%和(16.71±2.30)%。结论外源性NO对体外培养的红内期间日疟原虫有杀伤作用,而Hb、L-cyst和FeSO4可以逆转这种杀伤作用。

关键词：外源性NO 间日疟原虫红内期

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胶体金标记血小板膜糖蛋白的免疫电镜研究

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中国血液流变学杂志 2008年第2期18卷 179-180,216页

作者：吴淑燕黄瑞王响英李苏安毛棣华苏州大学医学院基础医学系微生物学教研室江苏苏州215123 苏州大学分析测试中心江苏苏州215006

目的建立胶体金标记血小板膜糖蛋白的稳定的免疫电镜技术,为开展血小板功能研究奠定基础。方法采集正常人外周静脉血,分离富血小板血浆,采用微波固定、常规固定两种方法,一抗为抗血小板GPⅢa单抗SZ21,分别选用直径10nm胶体金标记的羊抗... 详细信息

目的建立胶体金标记血小板膜糖蛋白的稳定的免疫电镜技术,为开展血小板功能研究奠定基础。方法采集正常人外周静脉血,分离富血小板血浆,采用微波固定、常规固定两种方法,一抗为抗血小板GPⅢa单抗SZ21,分别选用直径10nm胶体金标记的羊抗鼠IgG(GAM-G)、直径15nm胶体金标记的葡萄球菌A蛋白(SPA-G)为探针。结果微波固定组血小板表面和开放管道系统可见到大量金颗粒的分布,而常规固定组的血小板未观察到金颗粒。结论以微波固定的方法,用大小合适的胶体金探针可特异性定位血小板表面和内部膜糖蛋白。

关键词：血小板胶体金免疫电镜微波

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鳞状细胞癌、角化棘皮瘤中环氧化酶-2的表达及其临床意义

鳞状细胞癌、角化棘皮瘤中环氧化酶-2的表达及其临床意义

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中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会

作者：华海康王修珍金城胡佳尹兴平杨莉佳陶诗沁朱小红李明南京医科大学附属无锡第二医院皮肤科苏州大学医学院基础医学系病理教研室

背景:80年代以来,国外大型流行病学调查发现,长期使用非甾体抗炎药治疗的类风湿性关节炎患者,结肠癌发病率下降40%60%,亦可明显减少和预防食管癌、胃癌等发生的危险性;而家族性息肉病患者长期服用小剂量非甾体抗炎药后,结肠息肉数量和... 详细信息

背景:80年代以来,国外大型流行病学调查发现,长期使用非甾体抗炎药治疗的类风湿性关节炎患者,结肠癌发病率下降40%60%,亦可明显减少和预防食管癌、胃癌等发生的危险性;而家族性息肉病患者长期服用小剂量非甾体抗炎药后,结肠息肉数量和大小均明显降低,随后的体内体外及动物模型实验研究也证实了这一点,在此基础上,一系列的研究表明非甾体抗炎药的作用靶点是环氧化酶(COX)。

关键词：棘皮瘤环氧化酶鳞状细胞癌临床意义

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氯胺酮慢性中毒死亡法医学鉴定1例

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中国法医学杂志 2004年第5期19卷 303-304页

作者：陶陆阳陈溪萍张志湘高玉振谈荣马集民卞士中苏州大学医学院基础医学系法医学教研室江苏苏州215007 苏州市公安局刑警支队技术大队法医室江苏苏州215002

1.1简要案情某女,32岁,职员.于2003年9月11日21时30分左右,在自己家中感到头晕(之前已有类似症状多次),于当晚22时18分送到医院,终因抢救无效死亡,死者家属要求查明死因.根据法医学鉴定结论,公安部门进行立案侦察,最终破获了一起投毒杀... 详细信息

1.1简要案情某女,32岁,职员.于2003年9月11日21时30分左右,在自己家中感到头晕(之前已有类似症状多次),于当晚22时18分送到医院,终因抢救无效死亡,死者家属要求查明死因.根据法医学鉴定结论,公安部门进行立案侦察,最终破获了一起投毒杀人案,犯罪嫌疑人(为死者丈夫,外科医生、博士研究生)因婚外恋而起杀妻之念,将从手术室盗取的氯胺酮先后多次投入死者食用的饮料中,最后造成其慢性中毒死亡.

关键词：氯胺酮死亡慢性中毒头晕外科医生手术室家属死者法医学鉴定投毒杀人案

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皮肤端粒DNA推断年龄的初步研究

皮肤端粒DNA推断年龄的初步研究

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全国第七次法医学术交流会

作者：王祖峰高彩荣王英元卞士中苏州大学基础医学系法医教研室山西医科大学法医学院山西医科大学法医学院苏州大学基础医学系法医教研室

目的测定不同年龄人群皮肤的端粒DNA片断长度值(meanlength of telomere restriction fragment,TRF),探讨该值随年龄变化的规律,为司法鉴定工作中有关年龄推断的问题提供新的方法。方法采用Southern杂交法,测定不同年龄供体的TRF值,对TR... 详细信息

目的测定不同年龄人群皮肤的端粒DNA片断长度值(meanlength of telomere restriction fragment,TRF),探讨该值随年龄变化的规律,为司法鉴定工作中有关年龄推断的问题提供新的方法。方法采用Southern杂交法,测定不同年龄供体的TRF值,对TRF值与年龄的依存关系进行回归分析。

关键词： TRF 初步研究 DNA

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先天性横膈缺如合并心肺畸形1例

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中国法医学杂志 2004年第4期19卷 240-241页

作者：夏水秀高玉振卞士中孙志红李永生苏州大学医学院基础医学系法医学教研室江苏苏州215007 昆山市公安局技术中队法医室江苏昆山215300

匡某,女,25岁,因“G2P0孕39^+1周、下腹阵痛3h”,于2002年12月28日9时10分入院。产科检查:宫缩20s/8min,宫高36cm,腹围101cm,LOA,胎心140次/min,头先露,S-2,胎膜未破.宫口开1cm。B超示双顶径97cm,羊水70mm,胎盘Ⅲ级。既往B超多次提示羊... 详细信息

匡某,女,25岁,因“G2P0孕39^+1周、下腹阵痛3h”,于2002年12月28日9时10分入院。产科检查:宫缩20s/8min,宫高36cm,腹围101cm,LOA,胎心140次/min,头先露,S-2,胎膜未破.宫口开1cm。B超示双顶径97cm,羊水70mm,胎盘Ⅲ级。既往B超多次提示羊水>70mm。入院诊断:G2P0孕39^+1周临产;相对性头盆不称;羊水过多。[第一段]

关键词：先天性横膈缺如合并症心肺畸形法医病理学肝左叶

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