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江苏大学学报（医学版） 2006年第2期16卷 105-108页

作者：杭赛宇吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215123 苏州大学生化工程研究所江苏苏州215123

目的:探讨人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族成员间的同源性,揭示其进化规律。方法:采用生物信息学软件和网上数据库对核酸蛋白质序列进行同源比较,结构域分析和进化树绘制。结果:人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族一级结构、二... 详细信息

目的:探讨人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族成员间的同源性,揭示其进化规律。方法:采用生物信息学软件和网上数据库对核酸蛋白质序列进行同源比较,结构域分析和进化树绘制。结果:人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族一级结构、二级结构均有较高的同源性,系统进化树显示各成员来源于同一祖先并在不同时期分野。结论:各成员来自于同一祖先的同一家族,其进化方式属于趋异性进化。

关键词：多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶序列比较结构域系统进化树

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人类多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶2抗原表位分析、抗体制备及亚细胞定位

人类多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶2抗原表位分析、抗体制备及亚细...

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：杭赛宇胡鹤娟朱燕马震宇闫石吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所

为了研究人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)蛋白表达的亚细胞结构定位,制备特异性抗体。我们联合应用了多种方法对多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的二级结构和表面特性进行了细致地分析,发现其优势抗原表位均位于蓖麻样结... 详细信息

为了研究人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)蛋白表达的亚细胞结构定位,制备特异性抗体。我们联合应用了多种方法对多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的二级结构和表面特性进行了细致地分析,发现其优势抗原表位均位于蓖麻样结构域中;进一步采用了RT-PCR方法克隆到蓖麻样结构域cDNA片段,将获得的蓖麻样结构域cDNA片段定向插入到表达载体PGEX-5X-3中,且导入大肠杆菌,诱导表达,获重组融合蛋白;将得到的重组融合蛋白免疫新西兰大白兔,我们获得了兔抗人ppGalNAc-T2的多克隆抗体,并进行ELISA法检测抗体效价,抗体滴度为1:3200,并进行了有效性检测;蛋白质印迹实验证实此多克隆抗体具有较好的反应性和特异性。通过荧光免疫细胞化学进行亚细胞定位,发现ppGalNAc-T2主要表达在细胞核旁的Golgi复合体,说明它们主要分布在Golgi复合体上,证实它们是在Golgi复合体参与蛋白质的糖链修饰。本文特异性扩增和表达蓖麻样结构域并制备了抗体,有利于进一步阐明RICIN结构域的功能,为研究多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2及其家族的结构和功能打下基础。

关键词：多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T) 抗原表位抗体亚细胞定位

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多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同发育阶段的小鼠脑中的mRNA表达差异

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同发育阶段的小鼠脑中的mRN...

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：胡鹤娟杨静杭赛宇吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所

目的:为了观察三个不同发育阶段的小鼠脑中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide: N-acetylgalactosaminytransferase,ppGalNAc-T)的表达差异,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用;方法:取不同发育阶... 详细信息

目的:为了观察三个不同发育阶段的小鼠脑中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide: N-acetylgalactosaminytransferase,ppGalNAc-T)的表达差异,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用;方法:取不同发育阶段(即孕末期,新生期,4周龄)的小鼠各六只, 取脑组织后,我们采用半定量逆转录PCR方法从mRNA水平上粗略地研究了多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在三个发育阶段的表达情况,以β-actin作为内对照,计算酶家族各成员的相对表达量,从而进行半定量分析;结果:我们发现三个不同发育阶段的小鼠脑中此酶家族的表达谱是不尽相同的。 T1、T2、T3、T4、T9、T10、T13、T14稳定表达,T3、T4、T9、T10在胎鼠中表达较高,在新生鼠和4周龄鼠中表达较低,且在新生鼠和4周龄鼠中的表达基本相同,T1、T2、T14等在各发育阶段鼠脑中表达基本无变化;结论:我们初步认为在小鼠脑的发育过程中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族的表达有一定的变化,在今后的实验中,将在时间点及脑分区,即时空性表达方面,作更进一步地完善细致的研究, 进一步推动多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在神经系统发育方面的研究工作,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用

关键词： ppGalNAc-T 小鼠脑表达 RT-PCR

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人类新型β3半乳糖基转移酶基因β3GalT7的克隆和鉴定

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生物化学与生物物理进展 2005年第2期32卷 140-146页

作者：周嘉梁黄超群吴士良孙其昌雷伟金美芳姜智沈宏杰苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州215007 苏州大学生化工程研究所苏州215007

从人肺cDNA文库中克隆到人类β3-半乳糖基转移酶家族中的一个新成员β3GalT7(AY277592,EC2.4.1.-),并对其进行了鉴定. 该基因定位在人类染色体19q13.2. 它包含一个1 191 bp的开放阅读框(ORF). 编码的蛋白质包括一个信号肽和一个半乳糖... 详细信息

从人肺cDNA文库中克隆到人类β3-半乳糖基转移酶家族中的一个新成员β3GalT7(AY277592,EC2.4.1.-),并对其进行了鉴定. 该基因定位在人类染色体19q13.2. 它包含一个1 191 bp的开放阅读框(ORF). 编码的蛋白质包括一个信号肽和一个半乳糖基转移酶结构域,分子质量和等电点分别为43.3 ku和8.37. 从原核表达中获得的融合蛋白的分子质量和预测相符. RNA印迹杂交显示β3GalT7在肺、喉和回肠组织中高表达,而在舌、乳房、子宫、睾丸等组织中表达较低. 此外半定量RT-PCR显示β3GalT7在人类不同的肿瘤细胞中转录水平有明显差异.

关键词： β3GalT7 克隆 RNA印迹肿瘤细胞株

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茯苓多糖对受照射白血病K562细胞N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9和自由基等的影响

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中国中西医结合杂志 2005年第S1期25卷 94-96页

作者：刘可人杨雪枫吴士良范雁徐爱华苏州大学医学院生化与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州215007

目的用化学方法提取茯苓多糖,并观察其对肿瘤细胞的作用。方法利用乙酸沉淀法、DEAE-纤维素层析法提取并分离茯苓多糖,并运用RT-PCR方法和流式细胞技术,检测其对受照射后肿瘤细胞的多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9(ppGalNAc-T9)mRNA表... 详细信息

目的用化学方法提取茯苓多糖,并观察其对肿瘤细胞的作用。方法利用乙酸沉淀法、DEAE-纤维素层析法提取并分离茯苓多糖,并运用RT-PCR方法和流式细胞技术,检测其对受照射后肿瘤细胞的多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9(ppGalNAc-T9)mRNA表达、自由基活力以及细胞周期的影响。结果茯苓多糖可使经γ射线照射后的K562细胞中的自由基增多、ppFalNAc-T9表达增高、G_1期受阻明显。结论茯苓多糖对肿瘤细胞中自由基具有一定的清除作用,同时还可以增加ppGalNAc-T9在mRNA水平的表达。

关键词：茯苓多糖肿瘤 RT-PCR 多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶自由基细胞周期

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β和γ射线放射性皮肤损伤动物模型的初步研究

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辐射防护 2005年第6期25卷 357-361,391页

作者：周迎会吴士良王秀珍徐岚彭淼苏州大学医学院生化及分子生物学教研室暨苏州大学生化工程研究所 215123

采用直线加速器发射的β射线和60Co源γ射线分别照射动物局部组织,以建立放射性皮肤损伤动物模型。观察了局部组织生化代谢指标的改变及组织形态变化,论证两类放射性皮肤损伤动物模型的可行性并用其对放射性皮肤损伤产生的分子机制进行... 详细信息

采用直线加速器发射的β射线和60Co源γ射线分别照射动物局部组织,以建立放射性皮肤损伤动物模型。观察了局部组织生化代谢指标的改变及组织形态变化,论证两类放射性皮肤损伤动物模型的可行性并用其对放射性皮肤损伤产生的分子机制进行探讨。实验结果表明:(1)γ或β射线都能引起局部皮肤损伤,并在生化代谢指标方面有诸多相似之处;(2)初步建立的两类放射性皮肤损伤动物模型有一定的可行性。

关键词： β射线 γ射线皮肤损伤动物模型

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电子射线照射大鼠胶原及自由基改变的研究

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中华放射医学与防护杂志 2004年第5期24卷 409-411页

作者：周迎会吴士良仇灏徐岚姜智贾伟彭淼苏州大学医学院生化及分子生物学教研室暨苏州大学生化工程研究所 215007

目的　探讨加速器电子射线局部照射SD大鼠致放射损伤后胶原表达的变化、自由基的改变及两者的相关性。方法　采用直线加速器局部照射制作SD大鼠的辐射损伤模型 ,观察MDA、NOS、SOD、GSH PX及Ⅰ Ⅲ型胶原mRNA表达及蛋白含量的改变。结... 详细信息

目的　探讨加速器电子射线局部照射SD大鼠致放射损伤后胶原表达的变化、自由基的改变及两者的相关性。方法　采用直线加速器局部照射制作SD大鼠的辐射损伤模型 ,观察MDA、NOS、SOD、GSH PX及Ⅰ Ⅲ型胶原mRNA表达及蛋白含量的改变。结果　照射后在一定剂量范围内MDA、NOS上升 ;SOD、GSH PX则下降 ,血清中指标变化显著而皮肤中变化无明显规律性。受照射局部皮肤Ⅰ Ⅲ型胶原mRNA表达及蛋白含量有明显改变 ,但其自由基的变化与胶原的变化无明显相关性。结论　辐射损伤后能在全身产生自由基 ,其对受照射局部皮肤组织中胶原表达改变的作用不大。

关键词：改变自由基胶原表达局部照射 mRNA表达 Ⅲ型胶原 NOS 电子射线 PX 研究

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中药多糖辐射防护分子机制

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江苏大学学报（医学版） 2004年第1期14卷 83-85,87页

作者：季修庆吴士良苏州大学医学院生化及分子生物学教研室、苏州大学生化工程研究所，江苏苏州215007

多糖是植物类中药中一类重要的有效成分.已公认具有免疫双向调节作用,并应用于抗肿瘤、延缓衰老、降低血脂等方面.除此之外,实验证明很多中药多糖对各种电离射线照射后的动物有明显的保护作用.由于随着核电事业发展和辐照技术广泛应用,... 详细信息

多糖是植物类中药中一类重要的有效成分.已公认具有免疫双向调节作用,并应用于抗肿瘤、延缓衰老、降低血脂等方面.除此之外,实验证明很多中药多糖对各种电离射线照射后的动物有明显的保护作用.由于随着核电事业发展和辐照技术广泛应用,特别是肿瘤放疗技术的普及,放射操作事故也时有发生,辐射防护机理及药物防护研究也越来越受关注.中药多糖毒性小、对机体几乎无不良反应、而且它的有效剂量范围广;另外,中草药具有资源广、提取过程简单、作用广泛等特点,越来越受到人们的重视.可见,应用中药多糖作为临床辐射防护的有效成分之一,应具有很大的应用前景和开发价值.现将中药多糖辐射防护作用及机制研究情况综述如下:

关键词：中药多糖辐射防护作用分子机制防护机理自由基免疫调节作用

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多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同白血病细胞中的表达及不同分化诱导剂的影响

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同白血病细胞中的表达及不...

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第八届全国复合糖生物化学与分子生物学学术会议

作者：范雁莫建华吴士良仇灏周迎会苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所

目的:糖类是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的生物分子,尤其是一类重要的信息分子。糖复合物中最重要的一类是糖蛋白,O-型糖苷键在一些糖蛋白中稳定性较高,而在另一些糖蛋白中则表现出较强的流动性,肽链上既可以糖基化又可以... 详细信息

目的:糖类是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的生物分子,尤其是一类重要的信息分子。糖复合物中最重要的一类是糖蛋白,O-型糖苷键在一些糖蛋白中稳定性较高,而在另一些糖蛋白中则表现出较强的流动性,肽链上既可以糖基化又可以去糖基化,与蛋白质磷酸化方式十分相似。在癌细胞表面可有类似粘蛋白的糖蛋白,也含有丰富的O-糖基化结构域,

关键词：分化诱导剂中药多糖半乳糖转移酶白血病细胞乙酰氨基

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多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2原核与真核表达及其蓖麻蛋白样结构域同源建模

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2原核与真核表达及其蓖麻蛋白样结构...

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第八届全国复合糖生物化学与分子生物学学术会议

作者：金美芳丁向明仇灏吴士良周迎会苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所

目的:多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)是粘蛋白O-糖基化的起始酶,转移GalNAc至粘蛋白,结构上可分为3个独立的结构域:GT1结构域,Gal/GalNAc-T结构域和C末端的蓖麻蛋白样结构域。前两结构域是催化结构域,近两年的研究表明:在O... 详细信息

目的:多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)是粘蛋白O-糖基化的起始酶,转移GalNAc至粘蛋白,结构上可分为3个独立的结构域:GT1结构域,Gal/GalNAc-T结构域和C末端的蓖麻蛋白样结构域。前两结构域是催化结构域,近两年的研究表明:在O-糖基化过程中

关键词：结构域真核表达同源建模半乳糖转移酶乙酰氨基

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